细胞治疗细胞冻存考试试卷与答案

细胞治疗细胞冻存考试试卷与答案一、单项选择题（每题2分，共20分）1.细胞冻存常用的保护剂是（）A.乙醇B.DMSOC.甘油D.丙酮2.细胞冻存时，一般冻存管内细胞悬液体积为（）A.1mlB.2mlC.3mlD.4ml3.细胞冻存的最佳温度是（）A.-20℃B.-80℃C.-196℃D.4℃4.复苏细胞时，快速解冻的温度是（）A.25℃B.37℃C.42℃D.50℃5.细胞冻存液中血清的比例一般是（）A.10%B.20%C.50%D.80%6.冻存细胞时，以下操作正确的是（）A.直接放入-80℃冰箱B.先在4℃冰箱放置1hC.梯度降温D.先在37℃孵育10min7.细胞复苏后，首先要进行的操作是（）A.换液B.传代C.计数D.观察形态8.冻存细胞复苏后，活率一般要求达到（）A.50%以上B.60%以上C.70%以上D.80%以上9.细胞冻存管的标记不包括（）A.细胞名称B.冻存日期C.操作人员D.细胞来源10.以下哪种细胞不适合长时间冻存（）A.干细胞B.肿瘤细胞C.红细胞D.成纤维细胞二、多项选择题（每题2分，共20分）1.细胞冻存的目的包括（）A.长期保存细胞B.减少细胞污染C.便于运输D.降低细胞成本2.细胞冻存液的成分通常有（）A.血清B.保护剂C.培养基D.抗生素3.细胞冻存过程中可能出现的问题有（）A.细胞死亡B.冰晶形成C.污染D.冻存管破裂4.复苏细胞时需要注意（）A.快速解冻B.无菌操作C.及时换液D.观察细胞状态5.影响细胞冻存效果的因素有（）A.细胞密度B.冻存保护剂浓度C.降温速度D.复苏方法6.常用的细胞冻存设备有（）A.液氮罐B.-80℃冰箱C.超净工作台D.离心机7.细胞冻存记录应包含（）A.细胞名称B.冻存日期C.冻存条件D.复苏情况8.以下哪些细胞适合冻存（）A.原代细胞B.细胞系C.胚胎干细胞D.造血干细胞9.细胞冻存和复苏过程中，正确的操作有（）A.冻存前对细胞进行计数和活力检测B.复苏时轻轻吹打细胞C.冻存管密封良好D.复苏后直接传代10.细胞冻存的质量控制指标包括（）A.细胞活率B.细胞形态C.细胞功能D.细胞数量三、判断题（每题2分，共20分）1.细胞冻存时，冻存液可以直接加入细胞悬液中。（）2.复苏细胞时，温度越高解冻越快越好。（）3.冻存细胞的活力不受冻存时间影响。（）4.细胞冻存管可以重复使用。（）5.细胞冻存过程中，降温速度越快越好。（）6.复苏后的细胞不需要进行质量检测。（）7.细胞冻存液中保护剂浓度越高对细胞保护越好。（）8.液氮罐中的液氮不需要定期补充。（）9.标记冻存管时，可以用普通记号笔。（）10.不同类型的细胞冻存条件相同。（）四、简答题（每题5分，共20分）1.简述细胞冻存的基本步骤。2.细胞复苏时为何要快速解冻？3.简述选择细胞冻存保护剂的原则。4.冻存细胞复苏后活率低可能的原因有哪些？五、讨论题（每题5分，共20分）1.如何优化细胞冻存方案以提高细胞复苏后的活力？2.探讨细胞冻存过程中污染问题的来源及预防措施。3.比较不同细胞冻存设备的优缺点。4.谈谈细胞冻存在细胞治疗领域的重要性及面临的挑战。答案一、单项选择题1.B2.B3.C4.B5.B6.C7.A8.D9.D10.C二、多项选择题1.ABC2.ABC3.ABCD4.ABCD5.ABCD6.AB7.ABCD8.ABCD9.ABC10.ABC三、判断题1.×2.×3.×4.×5.×6.×7.×8.×9.×10.×四、简答题1.制备细胞悬液，计数调整细胞密度；将冻存液与细胞悬液按比例混合；将细胞悬液分装入冻存管；梯度降温，先4℃1h，-20℃2h，再-80℃过夜，最后放入液氮保存。2.快速解冻可防止缓慢解冻过程中形成大冰晶，大冰晶会损伤细胞结构，快速解冻能减少对细胞的物理损伤，提高细胞复苏活力。3.对细胞无毒性，能有效降低冰点，在低温下保持良好的化学稳定性，容易去除且不影响细胞后续生长和功能。4.冻存过程中降温速度不当、冻存保护剂浓度不合适、复苏操作不规范、冻存时间过长、细胞冻存前状态不佳等。五、讨论题1.优化包括调整冻存液配方、改进降温程序、选择合适的冻存设备、控制细胞冻存密度等，通过实验对比不同条件下细胞复苏活力找到最佳方案。2.污染来源可能是操作环境不洁净、冻存液污染、细胞本身带菌等。预防措施有严格无菌操作、对冻存液等耗材灭菌处理、冻存前检测细胞是否污染等。3.液氮罐储存温度低且稳定，适合长期保存，但需定期补充液氮，使用不便；-80℃冰