《药学基础化学实验（第2版）》分析化学课件 混合醇含量测定

归一化法测混合醇含量（气相色谱基本操作实验）gaschromatographyGC实验目的掌握常用色谱定性参数的测定方法和定性方法。熟悉用归一化法进行定量分析的方法。了解气相色谱仪的基本组成部件。实验原理利用混合物中各组份在不同的两相中溶解、分配、吸附等化学作用性能的差异。当两相作相对运动时，使各组分在两相中反复多次受到上述各作用力而达到相互分离。分离的基础：两相及两相的相对运动色谱法分离混合物的必要条件：有相对运动的两相固定相—固定不动的相流动相—推动混合物流动的液体组分在两相中分配系数或吸附能力有差异

流出曲线（洗脱曲线）：分离组分的检测信号随时间分布的图象。样品流经色谱柱和检测器，所得到的信号-时间曲线。流出曲线（洗脱曲线）保留时间(retentiontime,tR)：组分流出时间，即由进样到色谱峰顶的时间峰1——组分1峰2——组分2峰面积大小或峰高低—组分浓度大小流出曲线的作用判断分离效果定性—tR（与手册对比定性）定量—峰面积或峰高应用——可用于测定哪些样品？样品的物理状态：气态？液态？应用——食品安全案例酒类的掺伪检测：

用甲醇含量超标的工业酒精勾兑的白酒，对人体中枢神经系统、视神经系统有较大毒性，严重时危及生命。

国内外制售假酒案例层出不穷。应用——食品安全案例2009年湖北省五峰土家族自治县接连发生了多起饮用散装白酒引发的中毒事件，先后导致4人死亡，19人入院救治。相关监督部门采用气相色谱进行检测，结果显示，所饮用散装白酒甲醇含量都严重超标。运用科学的检测手段，将政府对食品安全卫生监督的政策落到实处定量方法1、归一化法当试样中所有组分全部出峰，组分数与色谱峰数相符时，可以采用归一化法。定量方法2、外标法3、内标法实验试剂及仪器仪器：气相色谱仪，微量注射器等。药品：混合醇类溶液（乙醇与正丁醇）实验内容试样溶液配制

准确吸取无水乙醇和正丁醇样品适量，置100ml容量瓶中，使成加水稀释至刻度，摇匀，配制成浓度约为10μg/mL（已配好）。2．实验条件

色谱柱：毛细管柱；

柱温：？、气化室温度：？、检测器：FID；检测器温度：？。3．进样

将试样溶液进样

？

μl。4．结果处理

将色谱图上有关数据记录后，按面积归一化法进行含量测定。实验数据记录混合醇含量测定（乙醇与正丁醇）色谱图拍照，完整记录实验条件记录保留时间与峰面积，对每个峰进行定性计算乙醇的百分含量相对质量校正因子：乙醇为2.43；正丁醇为1.69。思考题设计外标法对混合醇中的乙醇进行含量测定？气相色谱仪气相色谱结构流程1-载气钢瓶；2-减压阀；3-净化干燥管；4-针形阀（稳压阀）；5-流量计；6-压力表；7-进样口与汽化室；8-分离柱；9-热导检测器；10-放大器；11-温度控制器；12-记录仪载气系统进样系统色谱柱检测系统温控系统气相色谱结构流程(1)载气系统

包括气源、净化干燥管和载气流速控制。

常用的载气有：氢气、氮气、氦气。净化干燥管：去除载气中的水、有机物等杂质（依次通过分子筛、活性炭等）。载气流速控制：压力表、流量计、针形稳压阀，控制载气流速恒定。气相色谱结构流程

进样装置：进样器+汽化室。气体进样器（六通阀）：推拉式和旋转式两种。试样首先充满定量管，切入后，载气携带定量管中的试样气体进入分离柱。气相色谱结构流程液体进样器：不同规格的微量进样器，填充柱色谱常用10μL；毛细管色谱常用1μL；新型仪器带有全自动液体进样器，清洗、润冲、取样、进样、换样等过程自动完成，一次可放置数十个试样。汽化室：将液体试样瞬间汽化的装置。无催化作用。气相色谱结构流程(3)色谱柱（分离柱）

色谱仪的核心部件。柱材质：不锈钢管或玻璃管、弹性石英毛细管，内径0.1～6mm。长度可根据需要确定。柱填料：粒度为60～80目或80～100目的色谱固定相。气-固色谱：固体吸附剂气-液色谱：担体（为固定液提供一个惰性表面，使其能铺展成薄而均匀的液膜）+固定液（操作温度下为液态）

气相色谱结构流程固定相

气－固色谱固定相气－液色谱固定相如：硅胶、氧化铝、活性碳、分子筛、高分子多孔微球等固定液+担体小颗粒表面涂渍上一薄层固定液。气相色谱结构流程(4)检测系统

通常由检测元件、放大器、显示记录三部分组成；被色谱柱分离后的组分依次进入检测器，按其浓度或质量随时间的变化，转化成相应电信号，经放大后记录和显示，给出色谱图。

检测器：广普型——对所有物质均有响应；

专属型——对特定物质有高灵敏响应。

常用的检测器：热导检测器、氢火焰离子化检测器。气相色谱结构流程4.1检测器类型浓度型检测器：测量的是载气中通过检测器组分浓度瞬间的变化：当进样量一定时，峰面积与载气流速成反比，峰高受流速影响较少。热导检测器TCD。质量型检测器：测量的是载气中某组分进入检测器的速度变化，当进样量一定时，峰高与载气流速成正比，峰面积受流速影响较少。氢火焰检测器FID。气相色谱结构流程4.2

FID检测器(1)原理：利用有机物在氢火焰的作用下化学电离而形成离子流，借测定离子强度进行检测。

(2)氢焰检测器需要用到三种气体：

N2：载气携带试样组分；

H2

：燃气；空气：助燃气。使用时需要调整三者的比例关系，检测器灵敏度达到最佳。气相色谱结构流程FID特点典型的质量型检测器。对有机化合物具有很高的灵敏度。无机气体、水、四氯化碳等含氢少或不含氢的物质灵敏度低或不响应氢火焰离子化检测器具有结构简单，稳定性好，灵敏度高，响应迅速等特点。比热导检测器的灵敏度高出近3个数量级。气相色谱结构流程4.3温度控制系统

温度是色谱分离条件的