2021-2025年广东高考生物试题分类汇编：生物技术与工程（原卷版）

专题09生物技术与工程

〔五年考情•探规律）c

考点5年考情（202L2025）命题趋势

2023•广东“0

考点1发酵工程2022•广东-选考21

2021.广东-选考21

2025•广东-7从近五年广东省高考试题来

2025•广东-21看，发醉工程主要考察微生物的接

2024•广东-4种方法、培养基的配置和微生物的

2022•广东-12筛选等。细胞工程主要考察植物体

考点2基因工程

2024•广东-21细胞杂交技术、植物组织的培养及

2023•广东-20基本过程、动物细胞培养技术等。

2022•广东-选考22基因工程相关知识是高考的必考

2021•广东-选考22内容，也是高考难点，基因表达载

体的构建、PCR扩增的原理与过程

2025•广东-5

考点3细胞工程这些考点常在非选择题中出现。

2023•广东-5

考点4胚胎工程2023•广东3

（五年真题•分点精准练）

考点01发酵工程

1、（2023•广东-10）研究者拟从堆肥中取样并筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌。根据

堆肥温度变化曲线（如图）和选择培养基筛选原理来判断，下列最可能筛选到目标菌的条件组合是（）

Q

0123456

堆肥时间（天）

A.a点时取样、尿素氮源培养基

B.b点时取样、角蛋白氮源培养基

C.b点时取样、蛋白冻氮源培养基

D.c点时取样、角蛋白氮源培养基

2、（2022•广东-选考21）研究深海独特的生态环境对于开发海洋资源具有重要意义。近期在“科学号”考察

船对中国南海科考中，中国科学家采集了某海域1146米深海冷泉附近沉积物样品，分离、鉴定得到新的微

生物菌株并进一步研究J'其生物学特性。

(

-。纤维素

K、

U

-*■木聚糖

<O-

一♦果胶

)

菰

理♦甘露聚箱

思♦淀粉

回答下列问题:

（1）研究者先制备富集培养基，然后采用法灭菌，冷却后再接入沉积物样品，28c厌氧

培养一段时间后，获得了含拟杆菌的混合培养物，为了获得纯种培养物，除了稀释涂布平板法，还可采用

法。据图分析，拟杆菌新菌株在以为碳源时生长状况最好。

（2）研究发现，将采集的样品置于各种培养基中培养，仍有很多微生物不能被分离筛选出来，推测其原因

可能是o（答一点即可）

（3）藻类细胞解体后的难降解多糖物质，通常会聚集形成碎屑沉降到深海底部。从生态系统组成成分的角

度考虑，拟杆菌对深海生态系统碳循环的作用可能是，

（4）深海冷泉环境特殊，推测此环境下生存的拟杆菌所分泌的各种多糖降解酶，除具有酶的一般共性外,

其特性可能还有。

3、（2021•广东-选考21）中国科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌H,以糖蜜（甘蔗榨糖后的

废弃液，含较多蔗糖）为原料，在实验室发酵生产PHA等新型高附加值可降解材料，期望提高甘蔗的整体

利用价值。工艺流程如图。

回答下列问题:

（1）为提高菌株H对蔗糖的耐受能力和利用效率，可在液体培养基中将蔗糖作为,并不断提

高其浓度，经多次传代培养（指培养一段时间后，将部分培养物转入新配的培养基中继续培养）以获得目

标菌株。培养过程中定期取样并用的方法进行菌落计数，评估菌株增殖状况。此外，选育优良

菌株的方法还有等。（答出两种方法即可）

（2）基于菌株H嗜盐、酸碱耐受能力强等特性，研究人员设计了一种不需要灭菌的发酵系统，其培养基盐

浓度设为60g/L,pH为10,菌株H可正常持续发酵60d以上。该系统不需要灭菌的原因是0（答

出两点即可）

（3）研究人员在工厂进行扩大培养，在适宜的营养物浓度、温度、pH条件卜.发酵，结果发现发酵液中菌株

H细胞增殖和PHA产量均未达到预期，并产生了少量乙醇等物质，说明发酵条件中可能是高密

度培养的限制因素。

（4）菌株H还能通过分解餐厨垃圾（主要含蛋白质、淀粉、油脂等）来生产PHA,说明其能分泌。

考点02基因工程

1、（2025"东・7）Solexa测序是一种将PCR与荧光检测相结合的高通量测序技术。为了确保该PCR过程中，

DNA聚合酶催化一个脱氧核甘酸单位完成聚合反应后，DNA链不继续延伸，应保护底物中脱氧核糖结构上

的（）

A.碱基B.2：氢C.3：羟基D.5'-磷酸基团

2、（2024・广东-4）关于技术进步与科学发现之间的促进关系，下列叙述正确的是（）

A.电子显微镜的发明促进细胞学说的提出

B.差速离心法的应用促进对细胞器的认识

C.光合作用的解析促进花期控制技术的成熟

D.RNA聚合酶的发现促进PCR技术的发明

3、（2022•广东・12）X噬菌体的线性双链DNA两端各有一段单链序列。这种噬菌体在侵染大肠杆菌后其

DNA会自连环化（如图），该线性分子两端能够相连的主要原因是（）

TCCAGCGGCGGG

y_CCCGCCGCTGGA%，环化,AGGTCGCCGCCC、

gGGGCGGCGACCT5<）

A.单链序列脱氧核甘酸数量相等

B.分子骨架同为脱氧核糖与磷酸

C.单链序列的碱基能够G补配对

D.自连环化后两条单链方向相同

4、（2025•广东・21）大肠杆菌是重要工业菌株之一，其培养过程可分为快速生长期和生长稳定期两个阶段。

为了通过调节蛋白质合成与降解速率来动态调控代谢途径关键酶的蛋白量，使细胞适配不同阶段的生产需

求，研究者设计了两种质粒，并以稳定性好的红色荧光蛋白mKate2为模式蛋白。测试质粒功能。回答下列

问题：

（1）研究者首先构建质粒①（图a）用于在细胞内表达C-末端带SsrA短肽的mKate2,将质粒导入感受态

细胞后，在添加抗生素的选择培养基上培养。根据培养基上菌落的生长状况，结合PCR及检测，筛

选获得重组菌株W1。

质粒①才口画SsMH终止弄抗性基斯卜

质粒②3MlX|SsM商同抗性基因2卜

注：PG,。为大肠杆菌内源启动子，在细胞快速生K期开启基

因转录，但进入生长稳定期后即停止基因转录；SsM基因

编码SsrA短肽；C•末端带有SsrA短肽的蛋白质可被大肠

杆菌内源蛋白酶系统特异性识别并以一定速率降解。

图a

（2）将WI在适宜条件下进行摇瓶培养，定时取样检测培养液口细胞密度，方法有（答一种）。接种

前需检测液体培养基的荧光强度，其作用是,培养结果（图b）表明，进入生长稳定期后荧光强度

快速下降，原因是O

:一细胞量

!-一荧光强度

快速生长期生长稳定期

图b

（3）研究者选用启动子Px、X基因（编码阻遏蛋白X,阻遏Px开启转录），重新构建质粒②（图a）,导入

野生型大肠杆菌中获得重组菌株W2。在适宜条件下摇瓶培养，W2的生长趋势不变，培养期间荧光强度的

变化趋势为。

（4）莽草酸是一种重要工业化学品，其胞内合成代谢途径见图c。由于野生型大肠杆菌胞内酶A活性弱，

且莽草酸会被快速转化为细胞生长必需物，因此细胞中无法大量积累莽草酸。为了保证细胞正常生长，并

在生长稳定期实现莽草酸的大量积累，利用上述两种质粒的调控功能，结合野生型菌株遗传物质的改造，

提出重组生产菌株构建思路：O

碳源f前体皿……―莽草酸些……—细胞生长必需物

图C

5、（2024•广东-21）驹形杆菌可合成细菌纤维素（BC）并将其分泌到胞外组装成膜。作为一种性能优异的

生物材料，BC腴应用广泛。研究者设计了酪氨酸酶（可催化酪氨酸形成黑色素）的光控表达载体，将其转

入驹形杆菌后构建出一株能合成BC膜并可实现光控染色的工程菌株，为新型纺织原料的绿色制造及印染工

艺升级提供了新思路（图一）。

蝴K蓝光处Y理3天

3静

膜

酒

置

染

培

至

BC转

续

继

养..M洗涤，去

池

色

养

培

10天除菌体等

二染色液

培养液培养液培养液（含酪氨

酸等）已染色的BC膜

图一

回答下列问题：

（1）研究者优化了培养基（答两点）等营养条件，并控制环境条件，大规模培养工程菌株后可

在气液界面处获得BC菌膜（菌体和BC膜的复合物）。

（2）研究者利用T7噬菌体来源的RNA聚合酹（T7RNAP）及蓝光光敏蛋白标签，构建了一种可被蓝光调

控的基因表达载体（光控原理见图二a,载体的部分结构见图二b）。构建载体时，选用了通用型启动子PBAD

（被工程菌RNA聚合酶以别）和特异型启动子PT7（仅被T7RNAP识别）。为实现蓝光控制染色，启动子

①②及③依次为,理由是。

蓝光光敏蛋白标签

无活性的T7RNAP

a

/］启动子①HKETH启动子姨动子渊

注：基因1编码酪氨酸酶，基因2编码T7RNAPN端-nMag,基因3编码

pMag-T7RNAPC端。

b

图二

（3）光控表达载体携带大观霉素（抗生素）抗性基因。长时间培养时在培养液中加入大观霉素，其作用为

_________________________（答两点）。

（4）根据预设的图案用蓝光照射已长出的BC菌膜并继续培养一段时间，随后将其转至染色池处理，发现

只有经蓝光照射的区域被染成黑色，其原因是o

（5）有企业希望生产其他颜色图案的BC膜。按照上述菌株的构建模式提出一个简单思路o

6、（2023•广东-20）种子大小是作物重要的产量性状。研究者对野生型拟南芥（2n=10）进行诱变筛选到一

株种子增大的突变体。通过遗传分析和测序，发现野生型DV基因发生一个碱基G到A的替换，突变后的

基因为隐性基因，据此推测突变体的表型与其有关，开展相关实验。

回答下列问题：

（1）拟采用农杆菌转化法将野生型DAI基因转入突变体植株，若突变体表型确由该突变造成，则转基因植

株的种子大小应与植株的种子大小相近。

（2）用PCR反应扩增04/基因，用限制性核酸内切酣对PCR产物和进行切割，用DNA连接酶

将两者连接。为确保插入的DAI基因可以正常表达，其上下游序列需具备。

（3）转化后，T-DNA（其内部基因在减数分裂时不发生交换）可在基因组单一位点插入也可以同时插入多

个位点。在插入片段均遵循基因分离及自由组合定律的前提下，选出单一位点插入的植株，并进•步获得

bl的基因稳定遗传的植株（如图），用于后续验证突变基因与表型的关系。

［o］农杆菌TDNA携带at理因和卡那霉素抗性基因）

/花序浸没于农杆函函液进行转化

?四一二

卡那零素选择培＜=§§＞卞那莲类选择培隹＞卞鳖筐会差茸培镁＞

养基筛选种子养基筛选种子养基筛选种子

T】代T2代13代

①农杆菌转化To代植株并自交，将「代种了•播种在选择培养基I-.,能够萌发并生长的阳性个体即表示其基

因组中插入了。

②［代阳性植株自交所得的T2代种子按单株收种并播种于选择培养基，选择阳性率约%的培养基

中幼苗继续培养。

③将②中选出的T2代阳性植株（填“自交”、“与野生型杂交”或“与突变体杂交”）所得的

T3代种子按单株收种并播种于选择培养基，阳性率达到%的培养基中的幼苗即为目标转基因植株。

为便于在后续研究中检测该突变，研究者利用PCR扩增野生型和突变型基因片段，再使用限制性核酸内切

酶X切割产物，通过核酸电泳即可进行突变检测，相关信息见下，在电泳图中将酶切结果对应位置的条带

涂黑O

5rCCTTTTCATT……⑹AGGACTCTGCCTT。TTACAAGTTA3'

野生型,GGAAAAGTAA……CTCCTGAGACGGAA,(150bp)

3A.ATGTTCAAT5

5'CCTTTTCAFTEAGGACTCTGCCTT.......TTACAAGTTA3'

突变型f(150bp)

3GGAAAAGTAA-•TTCCTGAGACGGAA.......AATGTTCAAT5，'"

10-50…………(150bp)

限制性内切酶XAAGG;NNNNNNCCTT

识另及切割序列TTCCNNNNNNIGGAA（N代表任意核甘酸）

I

罹电泳图标准参照物野生型突变型

150bp

100bp

50bp（bpi旨核甘酸时）

7、（2022・广・东-选考22）“绿水逶迤去，青山相向开”大力发展低碳经济已成为全社会共识c基于某些梭

菌的特殊代谢能力，有研究者以某些工业废气（含CO2等一碳温室气体，多来自高污染排放企业）为原料，

通过厌氧发酵生产丙酮，构建•种生产高附加值化工产品的新技术。

；辅酶A乙酰乙酸

硫解酶转移酶脱瘦酶

ThlACtfAB,Adc

CO"H+2x乙酰dCoA---------►乙酰da乙酰a*a丙

!乙酰CoA乙酸酮

梭菌细胞

回答下列问题：

（1）研究者针对每个需要扩增的酶基因（如图）设计一对,利用PCR技术，在优化反应

条件后扩增得到目标酶基因。

（2）研究者构建了一种表达载体pMTL8（）k,用于在梭菌中建立多基因组合表达库，经筛选后提高丙酮的合

成量。该载体包括了启动子、终止子及抗生素抗性基因等，其中抗生素抗性基因的作用是,

终止子的作用是O

（3）培养过程中发现重组梭菌大量表达上述酶蛋白时，出现了生长迟缓的现象，推测其原因可能是

，此外丙酮的积累会伤害细胞，需要进一步优化菌株和工艺才能扩大应用规模。

（4）这种生产高附加值化工产品的新技术，实现了,体现了循环经济特点。从“碳中和”

的角度看，该技术的优势在于，具有广泛的应用前景和良好的社会效益。

8、（2021•广东-选考22）非细胞合成技术是一种运用合成生物学方法，在细胞外构建多酶催化体系，获得目

标产物的新技术，其核心是各种醉基因的挖掘、表达等。中国科学家设计了4步酶促反应的非细胞介成路

线（如图），可直接用淀粉生产肌醇（重要的医药食品原料），以期解决高温强酸水解方法造成的严重污染

问题，并可以提高产率v

薇

磷

丁

磷酸

屣

哈

醇

肌

水

解

酶

成

空

一W

回答下列问题：

（1）研究人员采用PCR技术从土壤微生物基因组中扩增得到目标酶基因。此外，获得酶基因的方法还有

°（答出两种即可）

（2）高质量的DNA模板是成功扩增出目的基因的前提条件之一.在制备高质量DNA模板时必须除去蛋白，

方法有o（答出两种艮］可）

（3）研究人员使用大肠杆菌BL21作为受体细胞、pET20b为表达载体分别进行4种筋的表达,表达载体转

化大肠杆菌时，首先应制备细胞。为了检测目的基因是否成功表达出酶蛋白，需要采用的方法

有o

（4）依图所示流程，在一定温度、pH等条件下，将4种酶与可溶性淀粉溶液混合组成一个反应体系。若

这些酶最适反应条件不问，可能导致的结果是。在分子水平上，可以通过改变，

从而改变蛋白质的结构，实现对酹特性的改造和优化。

考点03细胞工程

1、（2025・广东-5）将人眼睑成纤绥细胞传代培养后，再培养形成支架，在该支架上接种人口腔黏膜上皮细

胞，培养一段时间后分离获得上皮细胞片层，可用于人工角膜的研究。上述过程不涉及（）

A.制备细胞悬液

B.置于5%CC>2等适宜条件下培养

C.离心收集细胞

D.用胰蛋白能消化支架后分离片层

2、（2023・广东-5）人参皂昔是人参的主要活性成分。科研人员分别诱导人参根与胡萝卜根产生愈伤组织并

进行细胞融合，以提高人参皂甘的产率。下列叙述错误的是（）

A.细胞融合前应去除细胞壁

B.高Ca2+—高pH溶液可促进细胞融合

C.融合的细胞即为杂交细胞

D.杂交细胞可能具有生长快速的无势

考点04胚胎工程

1、（2023•广东3）科学家采用体外受精技术获得紫羚羊胚胎，并将其移植到长角羚羊体内，使后者成功妊

娠并产仔，该工作有助于恢复濒危紫羚羊的种群数量。此过程不涉及的操作是（）

A.超数排卵B.精子获能处理

C.细胞核移植D.胚胎培养

1年模拟•精选模考题

一、单选题

1.（2025・广东广州•三模）生产L-谷氨酸主要依赖有氧发酵，常用菌种谷氨酸棒状杆菌大多为生物素合成缺

陷型。在各组发酵罐中分别添加不同浓度的生物素,检测结果如下图。下列叙述错误的是（)

2.0ug/L

1.0ug/L

0.5ug/L

0.25pg/L

A.发酵前用平板划线法进行谷氨酸棒状杆菌的纯培养

B.发酵过程将空气直接通入发酵罐以保证有氧条件

C.可在添加0.5|ig/L生物素发酵32h的条件下大规模生产

D.乙~丁组L・谷氨酸产量不与菌体细胞密度呈正比

2.（2025•广东•模拟预测）某同学用马铃薯琼脂培养基进行酵母菌纯培养，获得甲、乙两个长满菌落的平板。

下列叙述正确的是（）

A.用接种环在培养基表面划线时需要转动培养皿

B.甲组平板分2个区划线，而乙组分3个区划线

C.从甲、乙两组平板都能分离出酵母菌的单菌落

D.只根据单菌落的大小可反映出酵母菌种类的差异

3.（2025•广东广州•二模）研究人员以YMA培养基（10g甘露醇（H）、0.4酵母粉、0.5gK2H2Po4、O.lgNaCk

0.2gMgSO47H2O,定容至IL）为基础，探究某种大豆根瘤菌的碳源利用情况，实验结果如图。下列叙述错误的

是（）

0.6

64

2

O.

对照组葡萄糖蔗糖麦芽糖

A.添加酵母粉作为氮源，原因可能是根瘤菌在体外培养时固氮能力有所下降

B.实验组需将甘露醉替换为等量的其他碳源，其他条件保持一致

C.测定根瘤菌的数量可以使用显微镜直接计数法

D.实验结果直接证明大豆通过蔗糖的形式向根瘤菌供有机营养

4.（2025•广东佛山•二模）为提高厨余垃圾分解效率，研究人员以厨余垃圾浸出液为培养基（CY）,对目标

菌株Al、A2、A7和A8进行驯化（通过人工措施使微生物逐步适应某一条件的方法），以制备高活性微生物

菌剂。相关实验结果如图所示。卜列分析错误的是（）

□LB

■CY

化后

驯化前驯

注：I.R培养基是实验室常用的细菌培养基■

A.CY碳源、氮源丰富，比LB更适合大多数菌株生长

B.可利用稀择涂布平板法对四种菌株进行筛选和计数

C.CY驯化培养可使四种菌株的基因频率发生定向改变

D.从活菌数上评价，A2菌株的驯化效果最显著

5.（2025・广东清远•二模）下列相关实验操作正确的是（）

A."酵母菌的纯培养〃实验中，可采用煮沸消毒法对培养基进行灭菌

B."DNA的粗提取与鉴定”实验中，可用预冷的95%酒精溶解DNA

C.“植物组织培养〃实验中，外植体接种后光照培养以形成愈伤组织

D.“PCR扩增目的基因〃实验中，加入的dNTP可以提供能量加原料

6.（2025•广东•二模）酿酒主要借助醉母菌的发酵作用，可以在家庭进行，也可以实现工业化生产。科研人

员进行了关于杂种酵母菌在不同基质中的发酵测试，结果见图，下列叙述错误的是（）

4

5%蔗糖溶液+蒸煮过的糯米（甲组）

2

0

8

蒸煮过的糯米（乙组）

6

45%蔗糖溶液两组）

2

024681012时间/h

A.实验结果表明，酹母菌对蔗糖和淀粉的利用效率相近

B.为提高酒精产量，实验过程应该保持严格的无氟条件

C.家庭酿酒可在糯米中加入运量白砂糖以提高发酵效率

D.家庭酿酒难以严格灭菌，需要通过消毒抑制杂菌生长

7.（2025•广东深圳•一模）根据现代生物技术原理，为解决以下四个问题，采用的相应技术手段是（）

①快速培养名贵花卉②克服远缘植物有性杂交不亲和的障碍③提高农作物的抗病能力④干扰素的工业化

生产。

技术组织培养基因工程发酵工程体细胞杂交

A①②③④

B②①④③

C①③④②

D④②③①

A.AB.BC.CD.D

8.（2025・广东•一模）下列关于培养技术及应用的叙述，错误的是（）

A.采用茎尖组织培养技术培育脱毒草莓

B.可用无机盐、琼脂和石油配制的培养基筛选石油降解菌

C.可用基因组编辑技术进行“设计完美婴儿〃生殖性克隆人研究

D.可用PEG诱导骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合成杂交瘤细胞

9.（2025•广东广州•一模）陈醋中的川苜嗪是治疗血栓等疾病的新型药物，能活血化瘀并对己聚集的血小板

有解离作用。研究人员为提高陈醋药用价值，分别探究了传统、机械生产工艺对川茸嗪含量的影响，结果

如下。下列叙述错误的是（）

川茸嗪含量/（mg］」）

生产工艺

发酵后进行传统熏酷发酵后进行机械熏酷

发酵后熏酷前

（8O-9O04-5d）（110-120团12-24h）

传统醋酸发酵0.383.1511.18

机械醋酸发酵1.334.7317.63

A.陈醋发酵过程中需要提供碳源、氮源并通入空气

B.传统熏酷时提高熏酷的温度可以提高川茸嗪的产量

C.受皮外伤的患者在伤口愈合期间建议减少对陈醋的食用

D.选用机械醋酸发酵和机械熏酷方式酿造的食醋药用价值更高

10.（2025•广东珠海•模拟预测）一粒小麦（2N=14）和斯氏山羊草（2N=14）是近缘物种，是进行细胞生物

学研究的良好材料，下图是科研人员在实验室中进行相关研究的流程图，A和B分别表示一个染色体组。下

列相关叙述错误的是（）

JLJL原生质体融合

G原生质体（BB）原生质体

植株3

秋水仙素一田加八

X种子----------►植株2

一粒小麦斯氏山羊草种植~~►植株1

A.经有性杂交所得植株1为不育异源二倍体

B.种子发育为植株1能体现细胞的全能性

C.图示两途径获得的植株2和3基因型相同

D.植物原生质体融合说明细胞膜具有流动性

11.（2025•广东湛江•模拟预测）杂交技术在生物学上应用广泛，包括个体水平、细胞水平和分子水平都可

以运用杂交。下列叙述正确的是（）

A.生产中培育香蕉脱毒苗常用植物体细胞杂交技术

B.构建特定疾病模型的动物可用动物细胞杂交瘤技术

C.抗原一抗体杂交可检测目的基因是否转录出了mRNA

D.DNA分子杂交技术可以用来比较不同种生物DNA分子的差异

12.（2025•广东惠州•一模）竹子与水稻同为禾本科不同亚科植物，染色体都是2N=24,但亲和性非常差。

我省梅州市农艺师钟章美历经40多年，成功将竹子与水稻进行超远缘有性杂交，培育出了高产、优质的新

品种竹稻F,其培育过程如下图所示。下列叙述正确的是（）

釉稻A

国稻C望一其稻丁”.稻E缶竹稻F

X

粳稻

青皮竹秋水仙素

A.①过程得到中间材料稻C的原理为染色体变异

B.理论上可以用植物体细胞杂交技术获得竹稻F

C.竹稻F自交能获得后代，说明竹子和水稻无生殖隔离

D.通过③过程得到竹稻F可稳定遗传，属于二倍体

13.（2025・广东清远•二模）科学家为解决马铃薯因感染茄科霍尔氏菌导致产量下降问题，利用植物体细胞

杂交技术成功获得了茄子融合亲本的青枯病抗性杂种植株。下列相关说法谓误的是（）

融合

杂

愈

的

原

种

伤青枯病

混合酶©

生

质

细

I组

|液处短］、抗性杂

胞

织

体种植株

A.混合附液处理过程需要用纤维素陶和果胶前混合去除细胞壁

B.过程①可利用聚乙二醇、Ca2♦载体等方法诱导原生质体融合

C.过程②成功的标志是融合的原生质体长出新的细胞壁

D.过程③需对获得的杂种植株进行筛选

14.（2025•广东湛江•模拟预测）Rag2基因缺陷导致大鼠无法产生B、T淋巴细胞。科研人员将正常大鼠的胚

胎干细胞（ES细胞）注射到Rag2基因缺陷大鼠的桑直胚中，使其产生具有正常ES细胞来源的淋巴细胞群

的体细胞嵌合体，从而补充其缺失的淋巴细胞，其过程如图所示。下列分析正确的是（）

A.嵌合体大鼠产生的B、T细胞直接由ES细胞分化而来

B.获得的嵌合体大鼠的大部分细胞的Rag2基因没有缺陷

C.注入桑其胚的ES细胞在囊胚期主要存在于内细胞团

D.该实验最终获得了嵌合体大鼠证明ES细胞具有全能性

15.（2025•广东深圳•二模）胞质雄性不育（CMS）是线粒体基因引起的胞质功能混乱现象,表现为花粉不育八

经V射线处理的芜普细胞（AA,A表示染色体组）和甘蓝细胞（BB,B表示染色体组）融合，可获得CMS

甘蓝植株（BB）。下列分析埼误的是（）

A.芜菁细胞和甘蓝细胞融合前需要去除两者的细胞壁

B.Y射线照射的作用是促进芜普细胞与甘蓝细胞融合

C.融合后的CMS甘蓝获得了芜菁细胞的细胞质基因

D.植物体细胞杂交技术为培育CMS甘蓝提供一种路径

16.（2025•广东广州,二模）研究发现，将牛的重构胚的染色体组蛋白上特定位点的甲基化去除，可提高重

构胚的发育率和牛体细胞核移植的成功率。下列说法错误的是（）

A.可将供体细胞注入去核卵母细胞中形成牛的重构胚

B.向重构胚注入去甲基化酹的mRNA可能有助于胚胎正常发育

C.应将重构胚培养至囊胚或原肠胚后移植入受体母牛子宫

D.推测表观遗传现象是制约体细胞核移植成功的原因之•

17.（2025•广东广州•模拟预测）研究发现，哺乳动物胎儿发育早期，造血干细胞会大量迁移至胎儿肝脏并

增殖分化。肝细胞中Fetua基因控制合成胎球蛋白A,该蛋白能架护造血干细胞基因组稳定性，降低突变概

率。下列叙述错误的是（）

A.胎儿发育早期，肝脏可产生多种血细胞

B.胎儿早期胚胎细胞与造血干细胞分化程度相同

C.哺乳动物肝细胞和造血干细胞都含Fetua基因

D.Fetua基因表达受阻会增大胎儿免疫功能失调的风险

18.（2025•广东广州•模拟预测）为拯救濒危野化单峰骆驼，科研人员利用现代生物技术尝试进行人工培育,

流程如图。下列叙述正确的是（）

A野化单峰骆驼（6）B野化单峰骆驼（?）C野化单峰骆驼（?）

12:

精子⑨卵母细胞……，去核卵母细胞不体细胞

]四I____________IIJ⑶।

受精卵重构胚

；

早期胚胎，④，D受体（？）早期％胎

i---------1I.........V

E后代F后代（?）

A.过程①中常用促性腺激素处理雌性的驯养单峰骆驼

B.过程②中卵细胞膜和透明带先后发生生理反应阻止多精入卵

C.过程③应选用M团期的卵母细胞，过程④移植的应为原肠胚

D.E后代和F后代的核遗传物质均有部分来自于B

19.（2025•广东洪江•模拟预测）生物学中重要的发现都离不开技术的创新。卜列属于我国首先突破的科技

成果的是（）

①首次人工创建单条染色体的真成细胞

②首次在体外进行DNA改造成功构建体外重组DNA分子

③首台用于全肢体中风康复的脑控人工神经机器人系统

④首次获得世界上第一只体细胞克隆羊

A.①④B.②③C.②④D.①③

20.（2025•广东佛山•二模）生物工程技术发展常常受到自然发生的生物学过程启示。下列对应关系错误的

是（）

选项自然发生的生物学过程受启示而发展的生物工程技术

A肺炎链球菌的转化基因工程

B细胞中DNA的复制PCR技术

C同卵双胞胎的形成过程胚胎分割

D亲缘关系近的植物可杂交植物体细胞杂交技术

A.AB.BC.CD.D

21.（2025•广东广州•二模）紫外线主要通过诱导DNA/链中相邻的胸腺喀咤形成嗑口定二聚体而损伤DNA。DNA

复制时，嗒咤二聚体无法作模板，子链在此处随机引入碱基后再进行延伸，导致发生突变，严重时会导致

细胞死亡。生物进化过程中形成了多种修复机制，图示大肠杆菌两种常见的修复喀混二聚体机制，其中光

解的需可见光提供能量。在某DNA损伤只形成一个喀咤二聚体的前提下，下列叙述错误的是（）

------------TT-------------------------TT------------

-------------AA---------------------------AA-----------

A.若该损伤的DNA分子未发生修复，复制时无法形成碱基序列正常的DNA

B.DNA修复机制的存在使大扬杆菌发生基因突变的频率下降

C.依赖内切酶、外切酶的DNA修复过程还需DNA连接酶笔的参与

D.用紫外线进行消毒后保持黑暗一段时间，有利于提高消毒效果

二、实验题

22.（2025•广东惠州•一模）科学家们正在开发一种混有枯草芽胞杆菌泡子的新型复合塑料，该胞子能耐受

塑料生产工艺中的高温热熔条件。废弃复合塑料内的泡子在特定条件下能萌发产生大量枯草芽抱杆菌，从

而有效分解塑料。回答下列问题：

⑴在实验室中培养枯草芽胞杆菌时，可根据菌落的将它与其他微生物初步区分开，再将接种有枯

草芽抱杆菌的培养基置于条件下培养来筛选所需的菌株。

⑵适应性实验室进化（ALE）是指通过模拟自然选择过程，在实验室中对微生物进行长期培养和筛选，使其

逐渐适应特定环境条件。与其相匕,利用基因工程直接改造微生物的优点是。

⑶科学家对经过ALE处理的狗子进行了全基因组测序，发现fusA突变和abrB突变均能够显著提高胞子的耐

热性。为了进•步探究这两种突变对提高抱子耐热性是否存在协同效应，请写出相关实验设计思

路：O

⑷科学家将表面蛋白基因cotB与绿色荧光蛋白基因gfp构建成基因表达载体，导入耐热胞子形成的菌株中

表达出融合蛋白，从而使绿色荧光能锚定在细胞表面显示材料中电子的萌发状态。下图中最适合的表达载

体是,判断理由是___________。

甲乙

注：/%，为氨茉青霉素抗性基因，一表示转录方向，

UAG、UAA、UGA是终止密码子，AUG是起始密码子。

⑸未来若将该技术应用于生产实践中，还需考虑哪些具体问题：（回答1点即可）。

23.（2025•广东湛江•二模）研究人员利用基因工程的方法将油料作物紫苏的二酰甘油酰基转移酹（DGAT1）

基因导入四尾栅藻（操作过程如图），获得转基因的高产油脂四尾栅藻。利用地热废水培养该藻，在生产生

物柴油的同时，还能治理地热废水。请回答下列问题:

复制原点

pMD19LacZ复制原点

氨茶青•霉素克降或粒

抗性基因PMD19-B转化小

筛选大肠杆菌

莪郎f总RNA->cDNAf（zzz2

织细胞DGAT1基因提取质粒

启动子、，用限制酶酶切

卡那霉素Ba源I

pBH21

抗性基因Xba\、

复制原点终止子

转化

检测、鉴定等*

四尾栅藻

注：lacZ基因编码产物在X-gal和IPTG存在下，可以产生蓝色沉淀，使菌落呈现蓝色，否则菌落呈现白色。

⑴为保证从紫苏细胞中获得的DGAT1基因与pMD19克隆质粒相连，可在设计PCR所用引物时，在引物的一

端加上特定限制酶的识别序列。第一次转化的受体细胞是大肠杆菌，结合该细胞的特点说明这样做的目的

是。

⑵经转化的大肠杆菌可通过________（方法）接种到培养基上继续培养。为筛选目标菌株，培养基应加入

的成分有。在该培养基中，目标菌株的菌落呈________色。

⑶启动子往往具有物种特异性，在载体PBI121质粒中插入紫苏DCAT1基因，其上游启动子应选择

（填〃紫苏DGAT1基因〃、“大肠杆菌〃或“四尾栅藻〃）的启动子。

⑷为检测转基因四尾栅藻对地热废水的治理能力，研究人员设计实验并得到相应实验结果如下表。该实验

不能说明转DGAT1基因显著提高了四尾栅藻的去污能力。请进一步完善实验设计：0

表培养转基因四尾栅蕴的地热废水培养基各项指标测定结果

各项指标总氮〃（mg・L」）总磷〃（mg-L」）氟化物/（mgl】）

初始23.24.324.56

培养转基因四尾栅藻11天

1.90.450.84

后

24.（2025•广东•模拟预测）高粱是重要的粮食和经济作物。为加速其遗传改良进程，科研人员进行了一系

列研究。

⑴目的基因进入受体细胞，并在受体细胞内的过程称为转化。已有研究发现，过表

达植物发育调节因子（WUS、BBM、GRF、GIF等）可有效提高转化效率。

⑵科研人员欲利用上述四种调节因子加速高粱的遗传改良，构足了如图所示的三种基因表达载体，其中LB

和RB分别是T-DNA的左右边界，DsRed和NPTH作为用于筛选转化成功的受体细胞。GIF是

GRF的辅助因子