2023-2025全国高考生物试题汇编：动物细胞工程

2023-2025全国高考真题生物汇编

动物细胞工程

一、单选题

1.（2025甘肃高考真题）肿瘤坏死因子a（TNF-a）是一种细胞因子，高浓度时可以引发疾病。研究者利

用细胞工程技术制备了TNF-a的单克隆抗体，用于治疗由TNF-a引发的疾病，制备流程如下图。下列叙

述正确的是（）

A.①是从小鼠的血液中获得的骨髓瘤细胞

B.②含未融合细胞、同种核及异种核融合细胞

C.③需用特定培养基筛选得到大量的杂交瘤细胞

D.④需在体外或小鼠腹腔进行克隆化培养和抗体检测

2.（2025广东高考真题）将人眼睑成纤维细胞传代培养后，再培养形成支架，在该支架上接种人口腔黏膜

上皮细胞，培养一段时间后分离获得上皮细胞片层，可用于人工角膜的研究。上述过程不涉及（）

A.制备细胞悬液

B.置于5%CC>2等适宜条件下培养

C.离心收集细胞

D.用胰蛋白酶消化支架后分离片层

3.（2025湖北高考真题）利用犬肾细胞MDCK扩增流感病毒，生产流感疫苗，具有标准化、产量高等优

点。但MDCK细胞贴壁生长的特性不利于生产规模的扩大，严重制约疫苗的生产效率。研究人员通过筛

选，成功获得一种无成瘤性的（多代培养不会癌变）、可悬浮培养的MDCK细胞——XF06.下列叙述错误

的是（）

A.XF06悬浮培养可提高细胞密度，进而提升生产效率

B.细胞贴壁生长特性的改变是由于流感病毒感染所导致

C.可采用离心技术从感染病毒的细胞裂解液中分离出流感病毒

D.采用无成瘤性细胞生产疫苗，是为了避免疫苗中有致瘤DNA的污染

4.（2025北京高考真题）动物细胞培养基一般呈淡红色。某次实验时，调控pH的CO2耗尽，培养基转为

黄色。由此推断使培养基呈淡红色的是（）

A.必需氨基酸B.抗生素

C.酸碱指示剂D.血清

5.（2024福建高考真题）我国科研团队研制出全球首个以尿液中的抗原为靶标的戊肝诊断试剂盒，该成果

属于单克隆抗体在临床上的应用。下列叙述错误的是（）

A.该试剂盒的研制过程应用了动物细胞融合技术

B.该试剂盒的检测原理为抗原抗体的特异性结合

C.该试剂盒检测前的采样不会对受检者造成创伤

D.该试剂盒还可用于其他类型病毒性肝炎的检测

6.（2024海南高考真题）海南龙血树具有药用和观赏价值，可利用植物组织培养技术产生愈伤组织，进而

获得该种植株。动物细胞融合技术可将骨髓瘤细胞和产生特定抗体的B淋巴细胞融合形成杂交瘤细胞，进

而制备单克隆抗体。下列有关这两种技术的叙述，正确的是（）

A.利用的原理均是细胞的全能性

B.使用的培养基均需添加葡萄糖和血清

C.培养时的温度和pH均相同

D.产生的愈伤组织细胞或杂交瘤细胞均具有增殖能力

7.（2024江苏高考真题）我国科学家利用人的体细胞制备多能干细胞，再用小分子TH34成功诱导衍生成

胰岛B细胞。下列相关叙述埼误的是（）

A.基因选择性表达被诱导改变后，可使体细胞去分化成多能干细胞

B.在小分子TH34诱导下，多能干细胞发生基因突变，获得胰岛素基因

C.衍生的胰岛B细胞在葡萄糖的诱导下能表达胰岛素，才可用于移植治疗糖尿病

D.若衍生的胰岛B细胞中凋亡基因能正常表达，细胞会发生程序性死亡

8.（2024重庆高考真题）自然条件下，甲、乙两种鱼均通过体外受精繁殖后代，甲属于国家保护的稀有物

种，乙的种群数量多且繁殖速度较甲快。我国科学家通过下图所示流程进行相关研究，以期用于濒危鱼类

的保护。下列叙述正确的是（）

A.诱导后的iPGCs具有胚胎干细胞的特性

B.移植的iPGCs最终产生的配子具有相同的遗传信息

C.该实验中，子一代的遗传物质来源于物种甲

D.通过该实验可以获得甲的克隆

9.（2024湖北高考真题）糖尿病是危害人类健康的主要疾病之一。恢复功能性胰岛B细胞总量是治疗糖尿

病的重要策略。我国学者研究发现，向患有糖尿病的小鼠注射胰高血糖素受体单克隆抗体（mAb）,可以

促进胰岛A细胞增殖，诱导少数胰岛A细胞向胰岛B细胞转化，促进功能性胰岛B细胞再生。根据上述

实验结果，下列叙述错误的是（）

A.mAb的制备可能涉及细胞融合技术

B.注射mAb可降低胰腺分泌胰高血糖素的量

C.mAb和胰高血糖素均能与胰高血糖素受体特异性结合

D.胰高血糖素主要通过促进肝糖原分解和非糖物质转化为糖，升高血糖水平

10.（2024吉林高考真题）从小鼠胚胎中分离获取胚胎成纤维细胞进行贴壁培养，在传代后的不同时间点

检测细胞数目，结果如图。下列叙述正确的是（）

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A.传代培养时，培养皿需密封防止污染

B.选取①的细胞进行传代培养比②更合理

C.直接用离心法收集细胞进行传代培养

D.细胞增长进入平台期可能与细胞密度过大有关

11.（2024浙江高考真题）某动物细胞培养过程中，细胞贴壁生长至接触抑制时，需分装培养，实验操作

过程如图。

下列叙述错误的是（）

A.①加消化液的目的是使细胞与瓶壁分离B.②加培养液的目的是促进细胞增殖

C.③分装时需调整到合适的细胞密度D.整个过程需要在无菌、无毒条件下进行

12.（2023辽宁高考真题）大量悬浮培养产流感病毒的单克隆细胞，可用于流感疫苗的生产。下列叙述错

误的是（）

A.悬浮培养单克隆细胞可有效避免接触抑制

B.用于培养单克隆细胞的培养基通常需加血清

C.当病毒达到一定数量时会影响细胞的增殖

D.培养基pH不会影响单克隆细胞的病毒产量

13.（2023海南高考真题）某团队通过多代细胞培养，将小鼠胚胎干细胞的Y染色体去除，获得XO胚胎

干细胞，再经过一系列处理，使之转变为有功能的卵母细胞。下列有关叙述错误的是（）

A.营养供应充足时，传代培养的胚胎干细胞不会发生接触抑制

B.获得XO胚胎干细胞的过程发生了染色体数目变异

C.XO胚胎干细胞转变为有功能的卵母细胞的过程发生了细胞分化

D.若某濒危哺乳动物仅存雄性个体，可用该法获得有功能的卵母细胞用于繁育

14.（2023北京高考真题）甲状旁腺激素（PTH）水平是人类多种疾病的重要诊断指标。研究者制备单克

隆抗体用于快速检测PTH,有关制备过程的叙述不正确的是（）

A.需要使用动物细胞培养技术

B.需要制备用PTH免疫的小鼠

C.利用抗原-抗体结合的原理筛选杂交瘤细胞

D.筛选能分泌多种抗体的单个杂交瘤细胞

二、多选题

15.（2024江苏高考真题）从牛卵巢采集卵母细胞进行体外成熟培养，探究高温对卵母细胞成熟的影响，

结果如图所示。下列相关叙述第氓啊有（）

A.选取发育状态一致的卵母细胞进行培养

B.体外培养卵母细胞时通常加入湿热灭菌后的血清

C.对采集的卵母细胞传代培养以产生大量卵细胞

D.体外培养时高温提高了卵母细胞发育的成熟率

16.（2024江西高考真题）某病毒颗粒表面有一特征性的大分子结构蛋白S（含有多个不同的抗原决定

基，每一个抗原决定基能够刺激机体产生一种抗体）。为了建立一种灵敏、高效检测S蛋白的方法，研究

人员采用杂交瘤技术制备了抗-S单克隆抗体（如图）。下列说法正确的是（）

筛选单一

类型杂交

』一心\瘤细胞

注射抗原B淋68单克隆

加体A

免疫小鼠细胞

-.融合细胞筛选单一

类型杂交单克隆

培养骨髓分散骨髓瘤细胞抗体B

瘤细胞瘤细胞

A.利用胶原蛋白酶处理，可分散贴壁生长的骨髓瘤细胞

B.制备的单克隆抗体A和单克隆抗体B是相同的单克隆抗体

C.用于生产单克隆抗体的杂交瘤细胞可传代培养，但不能冻存

D.单克隆抗体A和单克隆抗体B都能够特异性识别S蛋白

三、解答题

17.(2024广东高考真题)某些肿瘤细胞表面的PD-L1与细胞毒性T细胞(CTL)表面的PD-1结合能抑

制CTL的免疫活性，导致肿瘤免疫逃逸。免疫检查点疗法使用单克隆抗体阻断PD-L1和PD-1的结合，可

恢复CTL的活性，用于肿瘤治疗。为进一步提高疗效，研究者以黑色素瘤模型小鼠为材料，开展该疗法与

化疗的联合治疗研究。部分结果见图。

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回答下列问题：

(1)据图分析，疗法的治疗效果最佳，推测其原因是。

(2)黑色素瘤细胞能分泌吸引某类细胞靠近的细胞因子CXCL1.为使CTL响应此信号，可在CTL中导入—

基因后再将其回输小鼠体内，从而进一步提高治疗效果。该基因的表达产物应定位于CTL的(答

位置)且基因导入后不影响CTL的能力。

(3)某兴趣小组基于现有抗体一药物偶联物的思路提出了两种药物设计方案。方案一：将化疗药物与PD-L1

单克隆抗体结合在一起。方案二：将化疗药物与PD-1单克隆抗体结合在一起。你认为方案(填“一”

或“二”)可行，理由是0

四、实验题

18.(2024全国甲卷高考真题)某种病原体的蛋白质A可被吞噬细胞摄入和处理，诱导特异性免疫。回答

下列问题。

(1)病原体感染诱导产生浆细胞的特异性免疫方式属于。

(2)溶酶体中的蛋白酶可将蛋白质A的一条肽链水解成多个片段，蛋白酶切断的化学键是o

(3)不采用荧光素标记蛋白质A,设计实验验证蛋白质A的片段可出现在吞噬细胞的溶酶体中，简要写出实

验思路和预期结果0

19.(2023湖南高考真题)某些植物根际促生菌具有生物固氮、分解淀粉和抑制病原菌等作用。回答下列

问题：

(1)若从植物根际土壤中筛选分解淀粉的固氮细菌，培养基的主要营养物质包括水和—o

(2)现从植物根际土壤中筛选出一株解淀粉芽抱杆菌H,其产生的抗菌肽抑菌效果见表。据表推测该抗菌肽

对的抑制效果较好，若要确定其有抑菌效果的最低浓度，需在_______NgnL-i浓度区间进

一步实验。

抗菌肽浓度/(gg-mL-1)

测试菌

55.2027.6013.806.903.451.730.86

金黄色葡萄球菌-----++

枯草芽抱杆菌-----++

禾谷镰抱菌-++++++

假丝酵母-++++++

注：“+”表示长菌，表示未长菌。

(3)研究人员利用解淀粉芽抱杆菌H的淀粉酶编码基因M构建高效表达质粒载体，转入大肠杆菌成功构建

基因工程菌A。在利用A菌株发酵生产淀粉酶M过程中，传代多次后，生产条件未变，但某子代菌株不

再产生淀粉酶M。分析可能的原因是(答出两点即可)。

(4)研究人员通过肺上皮干细胞诱导生成肺类器官，可自组装或与成熟细胞组装成肺类装配体，如图所示。

肺类装配体培养需要满足适宜的营养、温度、渗透压、pH以及—(答出两点)等基本条件。肺类装配

体形成过程中是否运用了动物细胞融合技术—(填“是‘'或"否”)。

肺卜.皮r细胞体细胞

1---------」-------1I箱选

1增加分化11

1♦类器tTAVQ

1共蝌;II共培:1

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*类装配体1帅类装配体2

(5)耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)是一种耐药菌，严重危害人类健康。科研人员拟用MRSA感染肺

类装配体建立感染模型，来探究解淀粉芽抱杆菌H抗菌肽是否对MRSA引起的肺炎有治疗潜力。以下实

验材料中必备的是o

①金黄色葡萄球菌感染的肺类装配体②MRSA感染的肺类装配体③解淀粉芽抱杆菌H抗菌肽④生理

盐水⑤青霉素（抗金黄色葡萄球菌的药物）⑥万古霉素（抗MRSA的药物）

参考答案

1.B

【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免

疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛

选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培

养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

【详解】A、骨髓瘤细胞应该从骨髓中获取，A错误；

B、B细胞和骨髓瘤细胞的融合是随机的，可能有些细胞不发生融合，有些两两融合，有些多个融合，有

同种核融合细胞，也有异种核融合细胞，B正确；

C、诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，但不能得到大量的，C错误；

D、进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养，抗体检测不是在小鼠腹腔内进行，D错

误。

故选B。

2.D

【分析】动物细胞培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌②添加一定量的抗生素③定期更换培

养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血

清、血浆等天然物质。（3）温度和pH：哺乳动物多以36.5℃为宜，最适pH为727.4。（4）气体环境：

95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH。）

【详解】A、动物细胞培养时，为增大细胞与培养液的接触面积，需要制备细胞悬液，A正确；

B、置于5%CC）2等适宜条件下培养，其中5%的CO2可维持培养液的pH,B正确；

C、在成纤维细胞传代培养过程中需要通过离心收集细胞，C正确；

D、不用胰蛋白酶消化支架，避免将上皮细胞片层分离成单独细胞，D错误。

故选D。

3.B

【分析】动物细胞培养是指从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适当的培养条件

下，让这些细胞生长和增殖的技术。动物细胞培养需满足基本的营养条件，培养液中需有氨基酸、无机

盐、糖类和维生素等，同时需要适宜的温度、pH和渗透压，还需在无菌无毒的环境下去培养。无菌：对

培养液和所有的培养用具进行灭菌处理，在无菌的环境下进行操作；无毒：定期更换培养液，以便清除代

谢产物。

【详解】A、悬浮培养的XF06细胞无需贴壁，可在培养液中自由增殖，从而提高细胞密度，扩大病毒产

量，提升生产效率，A正确；

B、XF06细胞的贴壁特性改变是通过筛选获得的遗传特性，而非流感病毒感染所致（病毒感染仅用于扩增

病毒，不改变宿主细胞生长方式），B错误；

C、流感病毒释放到细胞裂解液后，离心可分离细胞碎片（沉淀）与病毒（上清液），C正确；

D、无成瘤性细胞不含癌基因，可避免疫苗中混入致瘤性DNA片段，确保疫苗安全性，D正确；

故选B。

4.C

【分析】适宜大多数细胞生长的培养基pH在7.0-7.4之间，pH7.4的环境适合大多数的哺乳动物细胞系。

酚红在培养基中被用来作为pH值的指示剂，用以持续监测培养液的酸碱度，在低pH值时酚红使培养液

呈黄色，而较高的pH值时使培养液呈紫色，pH值727.4时为红色，最适合细胞培养。

【详解】A、必需氨基酸是细胞生长的营养成分，不参与指示pH变化，A错误；

B、抗生素用于抑制微生物污染，与培养基颜色无关，B错误；

C、酸碱指示剂（如酚红）在培养基中用于显示pH变化，在低pH值时酚红使培养液呈黄色，而较高的

pH值时使培养液呈紫色，pH值7.2-74时为红色，C正确；

D、血清提供生长因子，不直接导致颜色变化，D错误。

故选C。

5.D

【分析】单克隆抗体的制备利用了动物细胞培养、动物细胞融合等技术。

【详解】A、依据题干信息，戊肝诊断试剂盒属于单克隆抗体的研究成果，单克隆抗体制备过程需要已免

疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合，所以动物细胞融合技术，A正确；

B、该试剂盒的检测原理为抗原抗体的特异性结合，B正确；

C、依据题干信息，该试剂盒以尿液中的抗原为靶标，所以该试剂盒检测前的采样不会对受检者造成创

伤，C正确；

D、抗体具有特异性，所以戊肝诊断试剂盒只能用于戊肝的检测，不能用于其他类型病毒性肝炎的检测，

D错误。

故选D。

6.D

【分析】（1）植物组织培养利用了植物细胞具有全能性的原理，其流程是：外植体（离体的植物器官、组织

或细胞）经脱分化形成愈伤组织，经再分化形成胚状体，长出芽和根，进而形成完整植株。（2）制备单克隆

抗体的流程为：①向小鼠体内注射特定的抗原，使其发生免疫，然后从小鼠脾内获得能产生特定抗体的B

淋巴细胞。②将小鼠的骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞。③克隆化

培养和抗体检测，从而筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞。④将最终筛选出的杂交瘤细胞在体外培养或

注射到小鼠腹腔内增殖，从细胞培养液或小鼠的腹水中提取单克隆抗体。

【详解】A、利用植物组织培养技术获得海南龙血树，利用的原理是细胞的全能性；制备单克隆抗体使用

了动物细胞培养技术和细胞融合技术，这两种技术利用的原理分别是细胞的增殖和细胞膜的流动性，A错

误；

B、利用植物组织培养技术获得海南龙血树，使用的培养基中添加的是蔗糖，不需添加葡萄糖和血清，B

错误；

C、由于植物细胞和动物细胞生长所需的适宜温度和pH存在差异，所以培养时的温度和pH均不相同，C

错误；

D、愈伤组织是外植体（离体的植物器官、组织或细胞）经脱分化形成的，杂交瘤细胞是由骨髓瘤细胞和

产生特定抗体的B淋巴细胞融合后形成的，因此产生的愈伤组织细胞或杂交瘤细胞均具有增殖能力，D正

确。

故选D。

7.B

【分析】诱导多能干细胞（iPS细胞）：通过特定的因子导入和培养条件，可以从人的皮肤等体细胞出发，

诱导其成为具有无限增殖能力并可分化为人体各种组织脏器的多能干细胞。

在正常情况下，胰岛B细胞对血糖水平的变化非常敏感，能够根据血糖水平的高低调节胰岛素的分泌。当

血糖水平升高时，胰岛B细胞会增加胰岛素的分泌，帮助降低血糖水平；反之，当血糖水平降低时，则减

少胰岛素的分泌，以避免低血糖。

细胞凋亡指为维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序的死亡。细胞凋亡与细胞坏死不同，细胞凋

亡不是一件被动的过程，而是主动过程，它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等的作用，它并不是病

理条件下，自体损伤的一种现象，而是为更好地适应生存环境而主动争取的一种死亡过程。

【详解】A、被诱导改变后，可使体细胞去分化成多能干细胞这个说法是正确的。体细胞可以通过特定的

因子导入和培养条件，基因的调控和表达模式的改变，使得原本专一功能的体细胞去分化成为多能干细

胞，A正确；

B、小分子药物通常是通过调节现有的生物通路和基因表达来实现其功能，而胰岛素基因在人体所有细胞

中都存在，但只有在胰岛细胞中才会表达，所以多能干细胞在诱导分化的过程中不会突然发生基因突变获

得胰岛素基因，B错误；

C、胰岛B细胞在较高的血糖浓度下分泌胰岛素，降低血糖，所以衍生的胰岛B细胞需在葡萄糖的诱导下

成功表达胰岛素，以确保衍生的胰岛B细胞能够正常发挥功能，才可用于移植治疗糖尿病，C正确；

D、凋亡基因的正常表达会导致衍生的胰岛B细胞发生程序性死亡，也就是发生细胞凋亡，D正确。

故选B。

8.C

【分析】胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理。②配种或人工授精。③对胚胎的收

集、检查、培养或保存。④对胚胎进行移植。⑤移植后的检查。

体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精。

【详解】A、胚胎干细胞具有发育的全能性，iPGCs是诱导型原始生殖细胞，具有成为卵原细胞或精原细

胞的潜能，诱导后的iPGCs不具有胚胎干细胞的特性，A错误；

B、移植的iPGCs分化形成卵原细胞或精原细胞后，通过减数分裂形成配子，在减数分裂过程中基因会发

生重组，最终产生的配子的遗传信息不一定相同，B错误；

C、由图可知，将物种甲的囊胚期的iPGCs移植到阻止PGCs形成的乙鱼的胚胎中，培育出的乙鱼的生殖

腺中的细胞由甲鱼的iPGCs增值分化而来，该乙鱼再与物种甲杂交，配子均是由物种甲的生殖腺细胞产

生，故子一代的遗传物质来源于物种甲，C正确；

D、克隆属于无性繁殖，该实验过程中涉及到有性生殖，D错误。

故选C。

9.B

【分析】血糖调节是神经调节和体液调节共同作用的结果。胰岛素是唯一降血糖的激素，胰高血糖素和肾

上腺素是升血糖的激素。血糖平衡调节：由胰岛A细胞分泌胰高血糖素（分布在胰岛外围）提高血糖浓

度，促进血糖来源；由胰岛B细胞分泌胰岛素（分布在胰岛内）降低血糖浓度，促进血糖去路，减少血糖

来源。

【详解】A、单克隆抗体的制备涉及细胞融合技术和动物细胞培养技术，mAb属于单克隆抗体，其制备可

能涉及细胞融合技术，A正确；

B、单克隆抗体（mAb）,可以促进胰岛A细胞增殖；而胰岛A细胞可分泌胰高血糖素，可见注射mAb可

提高胰岛A细胞分泌胰高血糖素的量，B错误；

C、题干信息，mAb是胰高血糖素受体单克隆抗体，可见Ab和胰高血糖素均能与胰高血糖素受体特异性

结合，C正确；

D、胰高血糖素主要作用于肝，促进肝糖原分解成葡萄糖进入血液，促进非糖物质转变成糖，使血糖浓度

回升到正常水平，D正确。

故选B。

10.D

【分析】动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）-剪碎—用胰蛋白酶

处理分散成单个细胞一制成细胞悬液一转入培养瓶中进行原代培养一贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶处理

分散成单个细胞继续传代培养。动物细胞培养需要的条件有：①无菌、无毒的环境；②营养；③温度和

pH；④气体环境：95%空气+5%CO2；动物细胞培养技术主要应用在：制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、

检测有毒物质等。

【详解】A、传代培养时培养器皿容许内部气体和培养箱中的气体进行交换，A错误；

B、选取②的细胞进行传代培养比①更合理，②时细胞增长开始变得缓慢，B错误；

C、对于贴壁生长的细胞进行传代培养时，先需要用胰蛋白酶等处理，使之分散为单个细胞，然后再用离

心法收集，C错误；

D、细胞增长进入平台期可能与细胞密度过大、细胞间产生接触抑制有关，D正确。

故选D。

11.B

【分析】动物细胞培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更

换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入

血清、血浆等天然物质。（3）温度和PH：36.5℃+0.5℃；适宜的pH：7.2〜7.4。（4）气体环境：95%空气

（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的PH）。

【详解】A、①加消化液的目的是使细胞与瓶壁分离，A正确；

B、②加培养液，多次加培养液先洗去残留的消化酶，然后终止消化液的消化作用，并对细胞加以稀释，B

错误；

C、③分装时需调整到合适的细胞密度，因为若密度过大细胞直接仍存在接触抑制，C正确；

D、动物细胞培养需要无菌无毒环境，因此整个过程需要在无菌、无毒条件下进行，D正确。

故选B。

12.D

【分析】培养动物细胞使用合成培养基时需要加入血清等一些天然成分，必须保证环境是无菌、无毒的，

培养液还需要定期更换。02是细胞代谢所必需的，CO2主要作用是维持培养液的pH。细胞贴附在培养瓶

的瓶壁上称为细胞贴壁，贴壁细胞在生长增殖时会发生接触抑制的现象。

【详解】A、悬浮培养单克隆细胞，可以保证足够的气体交换，通过振荡或转动装置使细胞始终处于分散

悬浮于培养液内，可有效避免接触抑制，A正确；

B、由于细胞的生长是比较复杂的过程，血清中含有一些必须的因子，用于培养单克隆细胞的培养基通常

需加血清，B正确；

C、病毒借助于细胞进行繁殖，利用了活细胞的物质、能量、酶等，当病毒达到一定数量时细胞的生命活

动受到影响，会影响细胞的增殖，C正确；

D、细胞的正常生命活动需要适宜的pH,培养基pH会影响细胞代谢，进而影响单克隆细胞的病毒产量，

D错误。

故选D。

13.A

【分析】动物细胞培养需要满足以下条件：

（1）充足的营养供给一微量元素、无机盐、糖类、氨基酸、促生长因子、血清等。

（2）适宜的温度：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2〜7.4。

（3）无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养

过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。

（4）气体环境：95%空气+5%CCh.O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。

【详解】A、营养供应充足时，传代培养的胚胎干细胞也会发生接触抑制，A错误；

B、XO胚胎干细胞中丢失了Y染色体，因而该细胞的获得过程发生了染色体数目变异，B正确；

C、X0胚胎干细胞转变为有功能的卵母细胞的过程发生了细胞分化，即细胞的功能发生了特化，因而发生

了细胞分化，C正确；

D、若某濒危哺乳动物仅存雄性个体，可用该法，即获得有功能的卵母细胞，进而用于繁育，实现濒危物

种的保护，D正确。

故选Ao

14.D

【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免

疫的B淋巴细胞，诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛

选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培

养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

【详解】A、单克隆抗体制备过程中需要对骨髓瘤细胞等进行培养，即需要使用动物细胞培养技术，A正

确；

B、该操作的目的是制备单克隆抗体用于快速检测PTH,故应用PTH刺激小鼠，使其产生相应的B细胞，

B正确；

C、抗原与抗体的结合具有特异性，可利用抗原-抗体结合的原理筛选杂交瘤细胞，C正确；

D、由于一种B细胞经分化形成浆细胞后通常只能产生一种抗体，故筛选出的单个杂交瘤细胞无法分泌多

种抗体，D错误。

故选D。

15.BCD

【分析】在探究高温对卵母细胞成熟的影响实验中，需要控制变量，选取发育状态一致的卵母细胞进行培

养，以确保实验结果的准确性。血清可以为卵母细胞的培养提供营养物质。

【详解】A、选取发育状态一致的卵母细胞进行培养，这样可以排除其他因素的干扰，保证实验结果是由

温度这一变量引起的，A正确；

B、体外培养卵母细胞时通常加入血清，但是动物血清并不能进行湿热灭菌，否则会使其中部分有效成分

失活，B错误；

C、卵母细胞不能进行传代培养，因为卵母细胞是生殖细胞，不具有连续分裂的能力，C错误；

D、由图可知，高温降低了卵母细胞发育的成熟率，而不是提高，D错误。

故选BCD。

16.AD

【分析】单克隆抗体的制备：用特定的抗原对小鼠进行免疫，并从该小鼠的脾中得到能产生特定抗体的B

淋巴细胞，将多种B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合，利用特定的选择培养基进行筛选：在该培养基上，

未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长。对上述经选择

培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细

胞。将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖。从细胞培养液

或小鼠腹水中获取大量的单克隆抗体。

【详解】A、胶原蛋白酶可以催化分解细胞外的胶原蛋白，因此利用胶原蛋白酶处理，可分散贴壁生长的

骨髓瘤细胞，A正确；

B、由于蛋白S含有多个不同的抗原决定基，每一个抗原决定基能够刺激机体产生一种抗体，单克隆抗体

A和单克隆抗体B来自不同的杂交瘤细胞，因此制备的单克隆抗体A和单克隆抗体B不是相同的单克隆

抗体，B错误；

C、用于生产单克隆抗体的杂交瘤细胞可传代培养，也可以冷冻保存，C错误；

D、单克隆抗体A和单克隆抗体B都来自筛选出的杂交瘤细胞，因此都能够特异性识别S蛋白上的抗原决

定簇，D正确。

故选ADo

17.(1)联合该疗法既发挥了化疗药物的作用，也增加了活化的CTL数量

(2)CXCL1受体(细胞膜)表面杀伤肿瘤细胞

(3)一方案一的偶联物既可阻断PD-1与PD-L1结合，恢复CTL的活性，又使化疗药物靶向肿

瘤细胞

【分析】根据题图可知，肿瘤细胞表面的PD-L1通过与T细胞表面的PD-1蛋白特异性结合，抑制T细胞

增殖分化，从而逃避免疫系统的攻击。

【详解】(1)由图a可知，联合疗法肿瘤体积最小，再根据图b可知，采用联合疗法时活化的CTL的数目

明显高于免疫检查点疗法和化疗等，原因是该疗法既发挥了化疗药物的作用，也增加了活化的CTL数量。

(2)由于黑色素瘤细胞能分泌吸引某类细胞靠近的细胞因子CXCL1,故要进一步提高治疗效果，可以在

CTL中导入细胞因子CXCL1受体基因，使CTL表达出细胞因子CXCL1受体，达到治疗的效果。由于细

胞因子是一类肽类化合物，故该基因的表达产物应定位于CTL的细胞膜上，且基因导入后不影