5年（2021-2025）山东高考生物真题分类汇编：专题15 发酵工程（原卷版）

专题15发酵工程

五年考情考情分析

发酵工程2025年山东卷第15题近五年山东高考生物试卷中，发酵工程考点考查频繁。常

2025年山东卷第20题考传统发酵技术，如2023年考泡菜制作、果酒和啤酒发酵原

2024年山东卷第14题理；微生物培养技术，像2023年考平板接种、2021年考解脂

2024年山东卷第15题菌相关实验。考查结合生活生产，注重知识理解运用。

2023年山东卷第12题

2023年山东卷第15题

2023年山东卷第20题

2022年山东卷第14题

2022年山东卷第20题

2021年山东卷第12题

2021年山东卷第14题

2021年山东卷第20题

一、单选题

1．（2025·山东·高考真题）深海淤泥中含有某种能降解纤维素的细菌。探究不同压强下，该细菌在以纤维素

或淀粉为唯一碳源的培养基上的生长情况。其他条件相同且适宜，实验处理及结果如表所示。下列说法正

确的是（）

组别压强纤维素淀粉菌落

①常压-+-

②常压+--

③高压-+-

④高压+-+

注：“+”表示有；“一”表示无

A．可用平板划线法对该菌计数

B．制备培养基的过程中，应先倒平板再进行高压蒸汽灭菌

C．由②④组可知，在以纤维素为唯一碳源的培养基上，该菌可在常压下生长

D．由③④组可知，高压下该菌不能在以淀粉为唯一碳源的培养基上生长

2．（2023·山东·高考真题）以下是以泡菜坛为容器制作泡菜时的4个处理：①沸盐水冷却后再倒入坛中；

②盐水需要浸没全部菜料；③盖好坛盖后，向坛盖边沿的水槽中注满水；④检测泡菜中亚硝酸盐的含量。

下列说法正确的是（）

A．①主要是为了防止菜料表面的醋酸杆菌被杀死

B．②的主要目的是用盐水杀死菜料表面的杂菌

C．③是为了使气体只能从泡菜坛排出而不能进入

D．④可检测到完整发酵过程中亚硝酸盐含量逐渐降低

3．（2024·山东·高考真题）在发酵过程中，多个黑曲霉菌体常聚集成团形成菌球体，菌球体大小仅由菌体数

量决定。黑曲霉利用糖类发酵产生柠檬酸时需要充足的氧。菌体内铵离子浓度升高时，可解除柠檬酸对其

合成途径的反馈抑制。下列说法错误的是（）

A．相同菌体密度下，菌球体越大柠檬酸产生速率越慢

B．发酵中期添加一定量的硫酸铵可提高柠檬酸产量

C．发酵过程中pH下降可抑制大部分细菌的生长

D．发酵结束后，将过滤所得的固体物质进行干燥即可获得柠檬酸产品

4．（2021·山东·高考真题）含硫蛋白质在某些微生物的作用下产生硫化氢导致生活污水发臭。硫化氢可以与

硫酸亚铁铵结合形成黑色沉淀。为探究发臭水体中甲、乙菌是否产生硫化氢及两种菌的运动能力，用穿刺

接种的方法，分别将两种菌接种在含有硫酸亚铁铵的培养基上进行培养，如图所示。若两种菌繁殖速度相

等，下列说法错误的是（）

A．乙菌的运动能力比甲菌强

B．为不影响菌的运动需选用液体培养基

C．该实验不能比较出两种菌产生硫化氢的量

D．穿刺接种等接种技术的核心是防止杂菌的污染

5．（2022·山东·高考真题）青霉菌处在葡萄糖浓度不足的环境中时，会通过分泌青霉素杀死细菌，以保证自

身生存所需的能量供应。目前已实现青霉素的工业化生产，关于该生产过程，下列说法错误的是（）

A．发酵液中的碳源不宜使用葡萄糖

B．可用深层通气液体发酵技术提高产量

C．选育出的高产菌株经扩大培养后才可接种到发酵罐中

D．青霉素具有杀菌作用，因此发酵罐不需严格灭菌

26．（2023·山东·高考真题）平板接种常用在微生物培养中。下列说法正确的是（）

A．不含氮源的平板不能用于微生物培养

B．平板涂布时涂布器使用前必须进行消毒

C．接种后未长出菌落的培养基可以直接丢弃

D．利用以尿素为唯一氮源的平板能分离出合成脲酶的微生物

7．（2024·山东·高考真题）酵母菌在合成色氨酸时需要3种酶X、Y和Z，trpX、trpY和trpZ分别为相应酶的

编码基因突变的色氨酸依赖型突变体。已知3种酶均不能进出细胞，而色氨酸合成途径的中间产物积累到

一定程度时可分泌到胞外。将这3种突变体均匀划线接种到含有少量色氨酸的培养基上，生长情况如图。

据图分析，3种酶在该合成途径中的作用顺序为（）

A．X→Y→ZB．Z→Y→XC．Y→X→ZD．Z→X→Y

8．（2021·山东·高考真题）解脂菌能利用分泌的脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。脂肪酸会使

醇溶青琼脂平板变为深蓝色。将不能直接吸收脂肪的甲，乙两种菌分别等量接种在醇溶青琼脂平板上培养。

甲菌菌落周围呈现深蓝色，乙菌菌落周围不变色，下列说法错误的是（）

A．甲菌属于解脂菌

B．实验中所用培养基以脂肪为唯一碳源

C．可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进行对比

D．该平板可用来比较解脂菌分泌脂肪酶的能力

9．（2021·山东·高考真题）葡萄酒的制作离不开酵母菌。下列说法错误的是（）

A．无氧条件下酵母菌能存活但不能大量繁殖

B．自然发酵制作葡萄酒时起主要作用的菌是野生型酵母菌

C．葡萄酒的颜色是葡萄皮中的色素进入发酵液形成的

D．制作过程中随着发酵的进行发酵液中糖含量增加

二、多选题

10．（2025·山东·高考真题）酿造某大曲白酒的过程中，微生物的主要来源有大曲和窖泥。大曲主要提供白

酒酿造过程中糖化所需的微生物，制曲过程需经堆积培养，培养时温度可达60℃左右；将大曲和酿酒原料

混合，初步发酵后放入窖池；窖池发酵是白酒酿造过程中微生物发酵的最后阶段。下列说法正确的是（）

A．堆积培养过程中的高温有利于筛选酿酒酵母

B．大曲中存在能分泌淀粉酶的微生物

C．窖池发酵过程中，酵母菌以无氧呼吸为主

D．窖池密封不严使酒变酸是因为乳酸含量增加

11．（2023·山东·高考真题）果酒的家庭制作与啤酒的工业化生产相比，共同点有（）

A．都利用了酵母菌无氧呼吸产生酒精的原理B．都需要一定的有氧环境供发酵菌种繁殖

C．发酵前都需要对原料进行灭菌D．发酵结束后都必须进行消毒以延长保存期

12．（2022·山东·高考真题）啤酒的工业化生产中，大麦经发芽、焙烤、碾磨、糖化、蒸煮、发酵、消毒等

工序后，最终过滤、调节、分装。下列说法正确的是（）

A．用赤霉素处理大麦，可使大麦种子无须发芽就能产生α-淀粉酶

B．焙烤是为了利用高温杀死大麦种子胚并进行灭菌

C．糖浆经蒸煮、冷却后需接种酵母菌进行发酵

D．通过转基因技术可减少啤酒酵母双乙酰的生成，缩短啤酒的发酵周期

一、单选题

1．（2025·山东泰安·三模）啤酒是以麦芽、水为主要原料，加啤酒花（使啤酒具有独特的苦味和香气，并有

防腐和澄清麦芽汁的能力）,经酵母发酵酿制而成的、含有二氧化碳并可形成泡沫的发酵酒。鲜啤是指不经

过巴氏消毒法处理的啤酒，这种啤酒保留了一定的活性酵母，在生产出来后，需要尽快饮用。由于没有经

过高温杀菌，它的口感相对比较新鲜、清爽，同时也保留了更多啤酒原始的风味。如图为啤酒的工业化生

产流程。下列有关说法正确的是（）

A．发芽是必要的，大麦种子只有发芽，才能释放淀粉酶

B．发酵液在低温、密闭的环境下储存一段时间也属于发酵过程

C．啤酒花是在消毒过程结束之后加入的

D．啤酒工业化生产与家庭酿酒的菌种均来源于原材料

2．（2025·山东潍坊·三模）科研人员诱导A、B两种动物细胞融合并进行培养。A、B两种细胞各自的生活环

境如表，目标融合细胞只能在选择培养基Ⅱ上生长。下列说法正确的是（）

A细胞只能在选择培养基Ⅰ上生长，生长环境的pH为4~6

B细胞只能在选择培养基Ⅱ上生长，生长环境的pH为7~8

A．动物细胞培养使用的培养基都是天然培养基

B．PEG融合法和高Ca2+-高pH融合法均可诱导两种细胞融合

C．将融合后的细胞置于CO2培养箱以维持培养液的pH在4~6

D．选择培养基Ⅱ上存活下来并生长的细胞不一定是目标融合细胞

3．（2025·山东日照·二模）用“麦汁酸化”法酿造的酸啤酒既有麦芽清香又酸甜适口。它是通过微生物发酵将

麦汁中的麦芽糖等糖类转化为醋酸和乳酸，再结合酒精发酵制作而成。下列说法正确的是（）

A．前期需在同一容器中同时进行醋酸和乳酸发酵

B．麦汁酸化后需经熬煮、冷却后才可接种酵母菌

C．酒精发酵时，发酵罐中温度应控制在30~35℃

D．可通过对啤酒进行高压蒸汽灭菌来延长保存期

4．（2025·山东济南·二模）毕赤酵母是一种能直接利用甲醇的微生物，其含有的醇氧化酶基因(AOX1)强效启

动子在甲醇存在时被激活，可以驱动外源基因的高效表达。人体蛋白MT1-MMP定位在细胞膜上，并在多种

肿瘤中被高表达出，MT1-MMP能促进肿瘤转移。为进一步研究肿瘤转移机制，科研人员将MT1-MMP基因

转化至毕赤酵母，先将转基因个体进行低密度发酵，然后再进行高密度发酵，最终获得目标蛋白。下列相

关说法正确的是（）

A．转基因毕赤酵母和大肠杆菌作为发酵菌种都具有发酵周期短的优点

B．目标蛋白的产量受发酵培养基成分、甲醇、温度、pH的影响

C．可将MT1-MMP基因插入AOX1中以便通过甲醇调控基因表达

D．甲醇的作用是作为碳源和氮源以及诱导目标蛋白的表达

5．（2025·山东菏泽·二模）可根据微生物发酵时对氧气的需求不同，将微生物发酵分为好氧发酵和厌氧发酵。

下列相关说法正确的是（）

A．果酒发酵时，应利用葡萄皮上的野生酵母菌直接进行厌氧发酵

B．果醋发酵时，当氧气和糖源都缺少时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸

C．泡菜制作时，应将泡菜盐水注满泡菜坛以利于乳酸菌进行厌氧发酵

D．生产单细胞蛋白时，酵母菌可利用纤维素水解液进行好氧发酵

6．（2025·山东潍坊·三模）安莎霉素由一种赖氨酸缺陷型放线菌产生。为筛选出能生产安莎霉素的菌种，科

研人员用紫外线对放线菌进行诱变与选育，实验的部分流程如图（注：原位影印可确保在一系列平板培养

基的相同位置上接种并培养出相同的菌落）。下列说法错误的是（）

A．①中使用的培养基不添加琼脂，需进行湿热灭菌

B．②和④中使用的是完全培养基，③中使用的是选择培养基

C．过程B的接种方法可用于微生物的分离和计数

D．D菌落不能产生安莎霉素，E菌落能产生安莎霉素

7．（2025·山东日照·二模）有些细菌具有溶菌特性，能够破坏其他细菌的结构使细胞内容物释出。研究人员

试图从某湖泊水样中分离出有溶菌特性的细菌。先将含有一定浓度α菌的少量培养基倾倒在固体培养平板上，

凝固形成薄层。一段时间后，将1mL湖泊水样加入9mL无菌水中、继续重复该操作3次，取0.1mL涂布于

薄层上，稳定后获得56个菌落，其中15个菌落周围出现溶菌圈。下列说法正确的是（）

A．应选用由水、碳源、氮源和无机盐组成的培养基分离细菌

B．应使用灼烧灭菌后的涂布器将α菌均匀地接种到培养基上

C．溶菌细菌的接种需在含α菌的培养基变浑浊后才能进行

D．每毫升的湖泊水样中约有1.5×105个具溶菌特性的细菌

8．（2025·山东潍坊·二模）山葡萄酿酒发酵的工艺流程为：设备消毒和灭菌→原材料准备→酵母菌扩大培养

→发酵罐发酵→压榨分离→贮酒陈酿等。贮酒陈酿时酒罐上层覆薄层95%的酒精。下列说法正确的是（）

A．该酿造发酵技术与传统发酵酿酒均需要消毒和灭菌

B．去除山葡萄果梗应在冲洗前进行

C．酵母菌扩大培养要严格控制无氧条件

D．陈酿时覆薄层酒精可减少杂菌的污染

9．（2025·山东泰安·二模）柠檬酸广泛应用于食品、医疗和化工领域，具有重要的商业价值。以玉米粉为原

料，利用黑曲霉有氧发酵生产柠檬酸的基本流程如图所示。下列分析正确的是（）

A．黑曲霉与生产果醋和泡菜所用主要微生物的代谢类型相同

B．发酵前将黑曲霉孢子接种到种子培养基进行扩大培养

C．种子培养基加入到发酵罐内时需经过严格灭菌

D．分离提纯获得产物是发酵工程的中心环节

10．（2025·山东枣庄·一模）如图表示果酒和果醋制作过程中的物质变化，下列有关叙述正确的是（）

A．酿酒和制醋所用微生物都是能在有氧条件下存活的真核生物

B．过程①和③分别发生在酵母菌细胞的线粒体基质和线粒体内膜上

C．产生乙醇后进行过程④会产生一层菌膜是由醋酸菌大量繁殖所致

D．④过程是生产果醋的唯一途径

11．（2025·山东枣庄·二模）溶磷菌能够把磷酸钙等难溶态的磷转化成可被植物直接利用的可溶性磷。将适

量溶磷菌接入已灭菌的含难溶磷的液体培养基中培养，每天取样测定溶磷量和pH变化情况，结果见下表。

下列选项错误的是（）

时间（d）

12345678

项目

溶磷量（mg/L）210508700800701690680550

pH5.14.24.24.34.54.74.95.1

A．磷是植物生长发育的必需元素，可组成DNA、ATP、脂肪等化合物

B．表中结果说明溶磷菌分解难溶磷的能力呈现先增强后减弱的趋势

C．根据pH变化，推测溶磷菌通过产生酸性代谢产物分解难溶性磷

D．将溶磷菌制成微生物肥料施入大田，能提高土壤的肥力

12．（2025·山东潍坊·一模）为检测不同温度和养殖模式下鸡蛋表面的细菌污染情况，用等量无菌生理盐水

清洗鸡蛋表面，再用稀释涂布平板法计数清洗液中细菌数目（均取0.1mL稀释液涂布），结果如表。下列说

法错误的是（）

细菌数（个/mL）

温度

开放式封闭式

30℃4.01×1048.32×103

10℃8.40×1041.15×104

A．涂布前应对涂布器进行灼烧灭菌

B．由表中数据可知涂布时清洗液稀释倍数为100倍

C．用该方法得到的细菌数量比实际数量要少

D．30℃封闭式养殖对鸡蛋表面污染相对较少

13．（2025·山东济南·一模）科研人员先在12个固体培养基上各涂以数目相等（约5×104个）的对T1噬菌体

敏感的大肠杆菌，经5h培养后，平板上长出大量的微菌落（约5100个细胞/菌落）。取其中6个（A组）直

接喷上T1噬菌体，另6个（B组）则先用灭菌后的涂布器把平板上的微菌落重新均匀涂布一遍，然后喷上

等量T1噬菌体。培养后计算这两组平板上形成的抗T1噬菌体的菌落数。结果发现，A组长出28个菌落，B

组长出353个菌落。下列说法正确的是（）

A．该实验使用了稀释涂布平板法对微菌落进行计数

B．B组中所使用的培养基为选择培养基

C．B组的涂布使单个抗T1噬菌体自发突变大肠杆菌形成一个菌落的概率增加

D．该实验证明重新涂布后再喷T1噬菌体导致了抗性突变的大量发生

14．（2024·河北邯郸·三模）微生物在生物技术中被广泛应用，下列有关说法正确的是（）

A．天然微生物能用于传统发酵但不能用于发酵工程

B．灭菌能杀死微生物的芽孢，而消毒不能杀死芽孢

C．有的微生物灭活后能使细胞膜上的物质重新排布

D．微生物能为重组DNA技术提供两种“分子工具”

二、多选题

15．（2025·山东菏泽·二模）金黄色葡萄球菌对青霉素的敏感度高且高度耐盐化。菌株可在血琼脂平板（完

全培养基中添加适量血液）上生长，并能产生溶血毒素（可使红细胞及组成物质完全溶解）。下列说法错误

的是（）

A．在金黄色葡萄球菌分离培养过程中，需在选择培养基中加入10%—15%的NaCl、青霉素

B．培养在血琼脂平板上的金黄色葡萄球菌菌落周围会出现透明的溶血圈

C．可利用平板划线法在固体培养基表面获得均匀分布的金黄色葡萄球菌的单个菌落

D．用一定浓度的青霉素会诱导金黄色葡萄球菌产生耐药性的变异

16．（2025·山东潍坊·三模）番茄红素在食品业应用广泛。某兴趣小组尝试利用植物细胞悬浮技术培养胡萝

卜细胞来获取，实验流程和培养装置如图。下列说法正确的是（）

A．过程②用纤维素酶或果胶酶处理愈伤组织

B．通过加料口来保证培养液中营养物质处于较高浓度

C．充气口增设无菌过滤器，加料口加入原料要灭菌处理

D．增设温度监测和控制设备以维持装置适宜温度

17．（2025·山东潍坊·二模）细菌P在与其他细菌的竞争中常常占据优势，推测与其产生的A蛋白和B蛋白

有关，A蛋白为胞外蛋白。为探究其作用机理，科研人员以野生型菌和基因敲除菌为材料进行了相关实验：

在固体培养基表面放置一张能隔离并吸附细菌的滤膜，将一种菌（下层菌）滴加在滤膜上后再放置第二张

滤膜，滴加等量的另一种菌（上层菌），共同培养48h后，将两张滤膜上菌体刮下计数，上层菌与下层菌数

量的比值为竞争指数，结果如表。下列说法错误的是（）

甲组乙组丙组丁组

上层菌野生型菌野生型菌野生型菌A基因敲除菌

下层菌野生型菌A-B双基因敲除菌A基因敲除菌A-