2026届新高考生物热点复习基因工程专题

2026届新高考生物热点复习基因工程专题困惑1困惑2困惑3生物题为什么越来越难？时间短，如何高效复习？新增模块，难度的掌控？面对新高考，老师们的困惑：teacher新高考参加完2025年四川省高考的考生真呼，新高考题太难!现任高三教师在一轮复习时，深感新高考题太难!1.高考改革的目的

(1)保障公平选拔人才(2)构建人才培养的基础体系(3)服务国家发展的战略需求2.高考命题原则(1)“核心价值”贯穿高考命题的始终(2)“能力素养”成为高考命题的重心(3)“无价值不入题；无思维不命题；无情境不成题”新高考必须保持一定的难度！一、生物新高考的“难”与“易”一、生物新高考的“难”与“易”3.觉得新高考“难”的原因

(1)高考的功能定位是“立德树人、服务选才、引导教学”，关键是服务选才，而不是服务教学，是引导教学，而不是适应教学。教师没适应新高考命题理念的变革，导致老师“所教”、学生“所学”、考试“所考”脱节。(2)高考选拔的是具有独立思考、发现问题、分析问题和解决问题等能力的学生，而不是单纯的“刷题机器”。想靠题海战术突围，就像用算盘挑战量子计算机!(3)生物的赋分制决定了试题的难度。新高考隐藏着高考改革与原教育生态的博弈；新高考映照出基础教育的痛点与方向；教育改革的终极目标是培养“会思考、能创新、懂应用”的人；新高考改革难的不是知识，而是打破惯性的勇气。指向生物学科核心素养的复习效果，取决于教师的：

理念：决定复习的高度

专业功底：决定复习的深度

情感与投入：决定复习的温度达州市“四川省XX中学”：2022届600+分226人，2025届600+分318人。一、生物新高考的“难”与“易”二、生物高三复习时间的分配1.整体规划，精准落实目的时间第一轮抓基础2025.6中旬----2026.2底(8个月)第二轮抓提高2026.3月----4月底(2个月)第三轮抓实战2026.5月----6月(1个月)(1)全面回归教材，吃透教材、吃透学生。(2)充分利用好教材的基础作用和示范作用。(3)每堂课做到“有的放矢”；容量和效果两不误。(4)守正创新守正：课标研究、教材使用、课堂教学!

正道：紧盯高考方向!

创新：高考不变的就是创新，高三复习更需创新!学好生物千万条，熟读教材第一条!二、高三复习时间的分配2.一轮复习的基本任务让“做高考题”成为教师的常规课标很空洞，高考原题很直观!1.爱考基因工程的原因(1)重要的学科地位：基因工程是现代生物技术的核心内容。(2)广泛的应用价值：①医学领域：基因诊断、基因治疗以及新药物研发。

②农业领域：培育具有优良性状的转基因作物③工业领域：生产特定的酶、蛋白质等工业产品(3)知识的综合性强：①涵盖多学科知识：涉及分子生物学、遗传学、细胞工程学等②融合理论与实践：既要求掌握基因工程的理论知识，又注重解决实际问题(4)考查能力与素养：①实验探究能力：基因工程的相关实验是培养和考查学生实验探究能力的重要素材②创新思维能力：鼓励学生突破传统思维，培养创新意识和创新能力。三、基因工程2023年基因工程高考原题……2024年基因工程高考原题…………2025年基因工程高考原题2023年各省(市)基因工程的考点77672024年各省(市)基因工程的考点112020271514122024年各省(市)基因工程的考点2025年各省(市)基因工程的考点9812102.基因工程的高考特点(1)从偶尔考到必考(2)占总分的比例明显增大2025年省(市)选择题数目简答题数目四川、湖北、甘肃、黑吉辽蒙1陕晋青宁、重庆、安徽、广东、浙江、江苏11湖南、北京、河南、山东2云南12河北22(4)与基因表达、性状改变、遗传规律、基因鉴定或定位、细胞工程、免疫等结合起考查。(3)涉及基因工程的题目数增多Ⅰ.基因结构非编码区编码区非编码区增强子增强子启动子终止子CAATboxTATAbox5’3’3’5’RNA聚合酶识别并结合位点ATAAA回文序列(控制转录频率)转录起始位点转录终止位点5’3’外显子内含子preRNA5’加帽位点5’3’mRNA5’UTR3’UTR翻译起点翻译终点3’增加A位点肽链☆目的基因一般只有编码区，需要插入到运载体的启动子和终止子之间。有些生物的启动子具有物种特异性。转录方向：模板链的3’→

5’。复制原点启动子抗生素筛选标记基因可选标记基因终止子限制酶酶切位点1限制酶酶切位点2(1)常规基因表达载体的构建Ⅱ.构建重组运载体①首先判断出质粒和目的基因表达方向②质粒和目的基因尽量均用两种限制酶酶切

(防止质粒和目的基因自身环化或反向连接)③目的基因的3‘端与质粒启动子相连，5’端与质粒终止端相连(保证正向连接)④质粒的2个标记基因，破坏1个，保留1个(便于筛选目的基因是否导入)⑤若为Ti质粒，目的基因应插入T-DNA中(便于目的基因整合到宿主细胞DNA中)抗生素抗性基因启动子终止子启动子终止子EcoRⅠKpnⅠHindⅢHindⅢKpnⅠW基因MfeⅠEcoRⅠBamHⅠEcoRⅠMfeⅠBamHⅠEcoRⅠ5’-G↓AATTC-3’BamHⅠ5’-G↓GATCC-3’KpnⅠ5’-GGTAC↓C-3’MfeⅠ5‘-C↓AATTG-3’HindⅢ5‘-A↓AGCTT-3’5‘5‘3‘3‘转录方向(2)多启动子的基因表达载体的构建、转录方向的判断真核启动子原核启动子T-DNA终止子潮霉素抗性基因外源基因插入区HindⅢAarⅠ终止子EcoRⅠEcoRⅠXbaⅠXbaⅠ卡那霉素抗性基因注:真核启动子可启动下游基因在真核细胞内的表达。原核启动子可启动下游基因在原核细胞内的表达。5’编码链3’模板链3’5’引物R引物F导入油菜的目的基因Ⅱ.构建重组运载体目的基因两端不具有限制酶切割位点，为保证目的基因正确连接在质粒上，应在目的基因左、右两端分别添加限制酶__AarⅠ、HindⅢ__的识别序列，具体操作是在扩增目的基因时，__在引物R的5'端添加限制酶AarⅠ的识别序列，在引物F的5'端添加限制酶HindⅢ的识别序列__(3)反义基因表达载体的构建、基因沉默质粒反义运载体ABAB目的基因目的基因SmaⅠSmaⅠSmaⅠNotⅠNotⅠLBRBLBRB抗生素抗性基因抗生素抗性基因E6启动子E6启动子HindⅢHindⅢBamHⅠBamHⅠBamHⅠ反义运载体转录出的mRNA1，与受体细胞中基因正常转录出的mRNA2，互补结合，使受体细胞中的正常基因无法翻译。Ⅱ.构建重组运载体Ⅲ.PCR最终，获得DNA中，数量最多的是两引物之间的DNA12345H特殊化学键PαPβPγT(1)以dNTP为原料(2)DNA聚合酶需要Mg2+激活。(3)子链延伸方向5’3’(模板链3’5’)(4)PCR中的数量关系(复制N次)DNA分子数=__________含引物的DNA分子数=__________含引物■的DNA分子数=__________含两种引物的DNA分子数=__________共消耗引物的对数=__________等长DNA分子数=__________2N2N2N-12N-22N-12N–2NⅢ.PCR每扩增一条DNA，就形成一个荧光分子。PCR次数越多，荧光信号累积的越多，荧光强度越大。①热变性②引物复性，探针与模板杂交③延伸引物荧光基因淬灭荧光基因探针探针杂交Taq酶发荧光无荧光(5)PCR次数的确定Ⅲ.PCRⅣ.引物的选择(1)构建融合基因A基因B基因引物P1引物P3引物P2引物P4PCR①PCR①目的链L+-+-5’3’3’5’5’3’5’3’目的链M-+②PCR③A-B融合基因5’5’3’3’5’3’3’5’-+(2)反向PCR扩增DNA未知序列L(已知序列)M(未知序列)N(未知序列)5’5’3’3’引物1引物2引物4引物35’3’引物1引物23’5’引物4引物3酶切环化引物1引物2引物3引物4PCR碱基测序Ⅳ.引物的选择(3)判断目的基因正向连接？还是反向连接？A基因启动子F2F1R1R2B基因启动子a链b链A基因启动子F2F1R1R2B基因启动子a链b链AATTGGCC若正向连接A基因启动子F2R1F1R2B基因启动子a链b链AATTGGCC若反向连接F2和R1或F1与R2Ⅳ.引物的选择(4)隐含引物：制备荧光标记的DNA探针时，需要模板、引物、DNA聚合酶等。在只含大肠杆菌DNA聚合酶、扩增缓冲液、H2O和4种脱氧核苷酸(dCTP、dTTP、dGTP和碱基被荧光标记的dATP)的反应管①～④中，分别加入如表所示的适量单链DNA。已知形成的双链DNA区遵循碱基互补配对原则，且在本实验的温度条件下不能产生小于9个连续碱基对的双链DNA区。能得到带有荧光标记的DNA探针的反应管有A.①②B.②③C.①④D.③④反应管加入的单链DNA①5'-GCCGATCTTTATA-3'3'-GACCGGCTAGAAA-5'②5'-AGAGCCAATTGGC-3'③5'-ATTTCCCGATCCG-3'3'-AGGGCTAGGCATA-5'④5'-TTCACTGGCCAGT-3'5'-GCCGATCTTTATA-3'3'-GACCGGCTAGAAA-5'子链不能延伸5'-ATTTCCCGATCCG-3'3'-AGGGCTAGGCATA-5'5'-AGAGCCAATTGGC-3‘3‘-CGGTTAACCGAGA-5’TCTTCTTATATT5'-TTCACTGGCCAGT-3‘3‘-TGACCGGTCACTT-5’GAAAAGEcoRⅠMboⅠPPOHHONotⅠ转录方向R1R2F1F2NotⅠMboⅠXhoⅠEcoRⅠHindⅢ启动子2启动子1终止子终止子AmpRE2基因E0基因EcoRⅠ5’G↓AATTC-3’XhoⅠ5’-C↓TCGAG-3’MboⅠ5’GA↓TC-3’HindⅢ5’A↓AGCTT-3’NotⅠ5’GC↓GGCCGC-3’E2基因非模板链的起始序列为5’-CACTTGGA-3’。为保证融合基因E2-E0正确连接到质粒上，F1引物的序列应为_______________________________5’-AAGCTTCACTTGGA-3’(5)设计引物：Ⅴ.电泳加样孔＋－取出凝胶置于__紫外灯__下观察Marker30次0次12次根据条带的__分布__及__粗细__来评价结果估计DNA大小估计DNA数量

现将扩增的含目的基因的外源DNA片段与pUC18质粒都用PstⅠ进行酶切，然后用DNA连接酶进行连接，构建重组质粒。为筛选非重组子和重组子，分别用不同的限制酶进行酶切，经琼脂糖凝胶电泳结果如图1(1kb=1000对碱基)。HindⅢEcoRⅠKpnⅠ图1图2pUC18重组子非重组子pUC18重组子重组子(1)与pUC18质粒重组的目的基因大小为__2.7__kb。EcoRⅠ2.7kb4kb2.7kbpUC18重组质粒HindⅢEcoRⅠ(2)用kpnⅠ酶切pUC18质粒，产生了1条2.7kb的带；用kpnⅠ酶切重组质粒，产生了2条带，但有3.0kb+3.7kb或1.0kb+5.7kb两组数据(图2)。在pUC18和重组质粒上标出kpnⅠ的酶切位点。kpnⅠ2.7kb1kb2.7kbpUC18重组质粒3kb2.7kb重组质粒kpnⅠ3kbkpnⅠkpnⅠ1kbkpnⅠ(2025湖南)21.非洲猪瘟病毒是一种双链DNA病毒，可引起急性猪传染病。基因A编码该病毒的主要结构蛋白A，其在病毒侵入宿主细胞和诱导机体免疫应答过程中发挥重要作用。(1)制备特定抗原①获取基因A，构建重组质粒(该质粒的部分结构如图所示)。重组质粒的必备元件包括目的基因、限制酶切割位点、标记基因、启动子和__终止子、复制原点__等；为确定基因A已连接到质粒中且插入方向正确，应选用图中的一对引物__P1和P3__对待测质粒进行PCR扩增，预期扩增产物的片段大小为__782__bp。…Ⅵ.基因工程试题赏析(2025四川)19.(11分)杆菌M2合成的短肽拉索西丁能有效杀死多种临床耐药细菌。拉索西丁能与细菌的核糖体结合，阻止携带的tRNA进入核糖体位点2。有人将合成拉索西丁的相关基因(lrcA～lrcF)导入链霉菌，基因克隆流程及拉索西丁的作用机制如下图。(2)采用EcoRⅠ和BamHⅠ完全酶切构建的重组质粒，产物通过琼脂糖凝胶电泳检测应产生__2__条电泳条带，电泳检测酶切产物的目的是___验证重组质粒是否构建成功__。(3)由图可知，拉索西丁与核糖体结合后，会阻止携带__苯丙氨酸__(填氨基酸名称)的tRNA进入结合位点，导致__翻译受阻__，最终引起细菌死亡。(4)重组链霉菌的目的基因产物经验证有杀菌活性，但重组菌在实验室多次培养后，提取的目的基因产物杀菌活性丧失，可能的原因是__目的基因发生突变__。若运用发酵工程来生产拉索西丁工程药物，除产物活性外还需进一步研究的问题有(答出1点即可)__发酵条件优化__。(1)用PCR技术从杆菌M2基因组中扩增lrcA～IrcF目的基因时，应选用引物__F2和F4__。本研究载体使用了链霉菌的复制原点，其目的是__保证载体在链霉菌中能正常复制__。(2025达州二诊)20(13分).为了提升猪瘟病毒疫苗的效果，科研人员构建了猪瘟病毒p30蛋白基因(p30)与白喉毒素无毒突变基因(CRM197A)的融合基因表达质粒，以生产融合蛋白疫苗。图1为质粒构建、疫苗生产以及效果测试示意图。

(1)完成图1的过程②需要向反应体系中加入__耐高温的DNA聚合__酶。利用PCR技术扩增p30-CRM197A融合基因时，需要向反应体系中添加的引物是__F1、F4__(选填图中的F1～F4)