《药品生物检定技术》课件-第七章 异常毒性检查

第七章异常毒性检查第一节

概述第二节

药品异常毒性检查的方法目录第七章

异常毒性检查学习目标第七章异常毒性检查掌握

异常毒性检查的概念。

熟悉

异常毒性检查的原理。了解

异常毒性检查的方法。概述第一节第七章异常毒性检查第一节概述概念异常毒性有别于药物本身所具有的毒性特征，是指由生产过程中引入或其他原因所致的毒性。异常毒性检查内容

①检查药品的非特异性毒性的通用安全试验；②检查制品中是否污染外源性毒性物质；⑤是否存在意外的不安全因素的试验。一、

异常毒性检查的概念原理本法系使用静脉注射给药方式，给予动物一定剂量的供试品溶液，在规定时间内观察动物出现的异常反应或死亡情况，检查供试品中是否污染外源性毒性物质以及是否存在意外的不安全因素。二、异常毒性检查原理异常毒性试验实际上是一个限度试验,是指通过药品对实验动物的作用来测定出药品中测试物的最低含量或浓度的方法。该测试物并不一定要定量测出其准确值，只是确定其是否超过限度。第一节概述小鼠尾部静脉注射药品异常毒性检查的方法第二节第七章异常毒性检查第二节药品异常毒性检查的方法（一）异常毒性检查法的检查材料1.试剂：一、试验前准备75%乙醇灭菌注射用水氯化钠注射液75%乙醇氯化钠注射液灭菌注射用水第二节药品异常毒性检查的方法（一）异常毒性检查法的检查材料实验动物要求一、试验前准备动物应同一来源同品系健康无伤，毛色光滑，眼睛红亮，活泼，雌雄并用来源、饲养条件、品种均应相同应符合国家对动物饲养条件做过本实验的动物不得重复使用实验动物在称重前自然饱腹试验用小鼠（二）异常毒性检查法的检查器材1.器材

注射器（1ml以下，精度0.01ml）、注射针头、秒表、棉球、大称量瓶、吸管、移液管、小烧杯、试管等。2.设备

高压蒸汽灭菌器（与供试液接触的所有器具均应高压灭菌，115℃30分钟）、天平（精度0.01mg或0.5mg用于供试品、试剂称量，精度0.1g用于实验动物称重）、小鼠固定器和支架、消毒设备等。一、试验前准备试验用玻璃容器、注射器、针头等与供试品及动物接触的用具，只要能承受干热灭菌，都宜采用干热灭菌的方式，因为干热灭菌还能消除内毒素。试验器材与设备第二节药品异常毒性检查的方法（三）异常毒性检查法的检查环境药品异常毒性检查须在洁净室内进行，洁净室应保持清洁整齐，定期进行消毒、洁净度检查，发现不符合要求时，应立即彻底消毒灭菌。操作前应开启紫外杀菌装置和空气过滤装置至少30分钟。一、试验前准备洁净室与生物安全柜第二节药品异常毒性检查的方法（一）供试液的配制

二、操作过程第二节药品异常毒性检查的方法原料药精密称取适量，置适宜容器中，按规定浓度加精密量取的一定量的溶剂，搅拌使溶解。注射液用75%乙醇棉球消毒安瓿颈部或瓶塞，精密量取一定量药液，按规定浓度，加精密量取的一定量溶剂，混匀。粉针剂用75%乙醇棉球消毒安瓿颈部或瓶塞，加入一定量规定的溶媒配成所需浓度，混匀。除另有规定外，一般用氯化钠注射液作为溶剂按各品种项下规定的浓度制成供试品溶液，供试液制备后应立即使用，最长不得超过24小时。（二）异常毒性检查法

二、操作过程第二节药品异常毒性检查的方法除另有规定外，生物制品异常毒性试验可采用小鼠试验法或豚鼠试验法。

试验中应设同批动物空白对照，观察期内，动物全部健存，且无异常反应，到期时每只动物体重应增加，则判定试验成立。按照规定的给药途径缓慢注入动物体内。《中国药典》（2015年版）四部规定，非生物制品异常毒性试验采用小鼠试验法。除另有规定外，取小鼠5只，体重18~22g每只小鼠分别静脉给予供试品溶液0.5ml4~5秒内匀速注射完毕，规定缓慢注射的品种可延长至30秒除另有规定外，取小鼠5只/豚鼠2只，注射前每只称体重，应为18～22g/250～350g。每只小鼠/豚鼠腹腔注射供试品溶液0.5ml/5.0ml，观察7天，并记录观察期内动物的反应，具体见下表。程度反应无未见任何毒性反应轻轻度症状，但无运动减少、呼吸困难或腹部刺激中腹部刺激、呼吸困难、运动减少、眼睑下垂、腹泻重衰竭、发绀、震颤、严重腹部刺激、眼睑下垂、呼吸困难死亡注射后死亡异常毒性试验动物反应观察指标第二节药品异常毒性检查的方法二、操作过程（一）《中国药典》（2015年版）第四部通则1141规定：除另有规定外，全部小鼠在给药后48小时内不得有死亡；如有死亡时，应另取体重19～21g的小鼠10只复试、全部小鼠在48小时内不得死亡。三、结果判断第二节药品异常毒性检查的方法给药后，在规定时间内不引起可能死亡的任何反应不属于异常毒性检查范围，不作为判断结果的依据。（二）对于《中国药典》（2015年版）收载的生物制品，第四部通则1141规定：除另有规定外，观察期内，小鼠（豚鼠）应全部健存，且无异常反应，到期时每只小鼠体重应增加，判定供试品符合规定。如不符合上述要求，应另取体重19～21g的小鼠10只（豚鼠4只）复试1次，判定标准同前。

（一）异常毒性检查的应用及意义

异常毒性检查对保障成分复杂的抗生素、中草药注射液和生物制品等药品的安全用药有一定意义，尤其对有未知剧毒杂质混入可能的药品而言更有意义。

如灯盏细辛注射液、清开灵注射液、右旋糖酐注射液、硫酸鱼精蛋白注射液、抗银环蛇毒血清、重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)等。四、异常毒性检查的相关要求第二节药品异常毒性检查的方法

（二）异常毒性检查法注意事项1.动物的质量是试验成功的重要因素之一，质量包括级别、来源、体重、饲养条件等。在选取实验动物时，要使用同一批次，体重和饲养条件须保持相近。2.供试品的注射速度是试验成功的另一重要因素，注射速度过快、过慢和速度不均匀都可能影响检查结果。因此，在试验时要保持匀速注射给药，且一次实验中每只小白鼠的注射时间要尽量一致。3.有些药物本身的药理和毒理作用以及酸度和渗透压均可能干扰检查结果，检查时须加以分析排除。4.试验时的室温应保持在20～30℃，过高或过低均可影响试验结果。5.检查剂量限值确定，制订异常毒性检查项限值前，须参考文献数据并经单次静脉注射给药确定该注射剂的急性毒性数据（LD50或LD1及其可信限）。四、异常毒性检查的相关要求第二节药品异常毒性检查的方法检品名称生产厂家检品规格生产批号检品数量包装和外观检品生产单位有效期检验项目异常毒性检查检验依据《中国药典》（2015年版）（）部，通则（）检验方法检验结果：实验动物（数量、来源、性别、体重）供试品组：小鼠

（）只，死亡（）只检验结论：检验人：

复核人：室温：

湿度：

检验日期：第二节药品异常毒性检查的方法

检验报告应当完整、简洁、结论明确。除无操作步骤外，其他内容应同原始记录。①原始记录应完整，无缺页损坏。②原始记录内容真实，准确。③原始记录如