制药行业生物制药研发专员岗位招聘考试试卷及答案

制药行业生物制药研发专员岗位招聘考试试卷及答案一、填空题（每题1分，共10分）1.生物制药中常用的原核表达系统是______。答案：大肠杆菌（E.coli）2.单克隆抗体制备的关键技术是______。答案：细胞融合（或杂交瘤技术）3.生物制品稳定性试验中，长期试验的温度条件通常为______。答案：2-8℃4.基因治疗中，常用的非病毒载体是______（举例一种）。答案：脂质体（或纳米颗粒）5.上游工艺中，细胞培养的主要目的是______。答案：获得目标蛋白（或目的产物）6.生物药质量控制中，宿主细胞蛋白（HCP）检测常用方法是______。答案：ELISA（酶联免疫吸附试验）7.质粒DNA提取时，常用______试剂裂解细菌。答案：SDS（十二烷基硫酸钠）8.生物反应器中，用于控制溶氧的参数是______。答案：通气量（或搅拌转速）9.ICH指导原则中，与生物制品质量相关的是______系列。答案：Q（如Q6B）10.疫苗生产中，灭活病毒常用的化学试剂是______。答案：甲醛（或β-丙内酯）二、单项选择题（每题2分，共20分）1.以下哪项是生物制药下游工艺的核心步骤？A.细胞株构建B.发酵培养C.亲和层析D.细胞转染答案：C2.单克隆抗体制备中，细胞融合的目的是获得：A.无限增殖能力的B细胞B.分泌特异性抗体的骨髓瘤细胞C.既能无限增殖又能分泌抗体的杂交瘤细胞D.原代B淋巴细胞答案：C3.生物药申报IND（临床研究申请）时，核心文件不包括：A.工艺开发报告B.非临床毒理数据C.市场调研报告D.质量研究资料答案：C4.实时荧光定量PCR（qPCR）的原理是通过检测：A.双链DNA的解链温度B.荧光信号的累积量C.引物二聚体的形成D.RNA的逆转录效率答案：B5.以下哪种细胞系常用于治疗性抗体生产？A.293T（人胚肾细胞）B.CHO（中国仓鼠卵巢细胞）C.HeLa（宫颈癌细胞）D.3T3（小鼠成纤维细胞）答案：B6.生物制品的“批签发”制度主要针对：A.研发阶段的实验样品B.上市后的商业化产品C.临床前研究的中间产物D.实验室自制的科研试剂答案：B7.蛋白质纯化中，离子交换层析的分离依据是：A.分子大小B.电荷差异C.疏水性D.亲和力答案：B8.细胞培养中，胎牛血清（FBS）的主要作用是：A.调节pHB.提供生长因子C.抑制细菌污染D.控制渗透压答案：B9.以下哪项不属于生物药的关键质量属性（CQA）？A.糖型分布B.分子量C.生产设备型号D.聚合体含量答案：C10.基因工程疫苗中，重组亚单位疫苗的关键成分是：A.病毒全颗粒B.病毒表面抗原蛋白C.减毒活病毒D.灭活病毒答案：B三、多项选择题（每题2分，共20分。至少2个正确选项，多选、错选不得分）1.以下属于生物制药上游工艺的是：A.细胞株构建B.发酵培养C.超滤浓缩D.病毒灭活答案：AB2.生物药稳定性研究需考察的指标包括：A.效价B.外观C.宿主细胞DNA残留D.包装材料相容性答案：ABCD3.单克隆抗体的质量属性包括：A.重链/轻链比例B.电荷异质性C.内毒素含量D.微生物限度答案：AB4.以下可用于蛋白质浓度测定的方法有：A.Bradford法B.Lowry法C.HPLC-UVD.荧光定量PCR答案：ABC5.生物反应器的控制参数包括：A.pHB.溶氧（DO）C.温度D.光照强度答案：ABC6.基因治疗载体的特点包括：A.病毒载体转染效率高B.非病毒载体免疫原性低C.病毒载体可能整合至宿主基因组D.非病毒载体靶向性强答案：ABC7.疫苗的分类包括：A.灭活疫苗B.重组蛋白疫苗C.核酸疫苗D.化学合成小分子疫苗答案：ABC8.生物制药中常用的除菌方法有：A.高压蒸汽灭菌B.0.22μm滤膜过滤C.γ射线辐照D.紫外线照射答案：BC9.以下属于ICH指导原则的有：A.ICHQ1（稳定性试验）B.ICHM7（遗传毒性杂质）C.ICHS6（生物技术药物毒理）D.GMP（药品生产质量管理规范）答案：ABC10.细胞培养中，无血清培养基的优势包括：A.降低成本B.减少批间差异C.便于下游纯化D.提高细胞活性答案：BC四、判断题（每题2分，共20分。正确填“√”，错误填“×”）1.生物制药中，上游工艺主要关注产物的分离纯化。（）答案：×2.单克隆抗体是由单一B淋巴细胞克隆分泌的抗体。（）答案：√3.基因治疗中，腺相关病毒（AAV）载体属于非病毒载体。（）答案：×4.生物制品的效期确定需基于加速稳定性试验数据。（）答案：×（需长期试验数据）5.蛋白质纯化中，凝胶过滤层析（分子筛）按电荷差异分离蛋白。（）答案：×（按分子大小）6.细胞冻存时，常用DMSO作为冷冻保护剂。（）答案：√7.疫苗生产中，减毒活疫苗的安全性高于灭活疫苗。（）答案：×（灭活疫苗更安全）8.实时荧光定量PCR可用于基因表达量的相对定量分析。（）答案：√9.生物药的“三批验证”是指工艺验证的三批商业化生产。（）答案：√10.宿主细胞蛋白（HCP）残留是生物药的关键质量属性之一。（）答案：√五、简答题（每题5分，共20分）1.简述单克隆抗体生产中CHO细胞株开发的关键步骤。答案：主要步骤包括：①目的基因（抗体轻/重链基因）的克隆与载体构建；②载体转染CHO宿主细胞（如电转、脂质体转染）；③通过抗生素筛选（如G418、潮霉素）获得阳性克隆；④有限稀释法单克隆化，确保细胞来源于单个克隆；⑤克隆筛选（基于产量、表达稳定性、质量属性）；⑥细胞库建立（主细胞库、工作细胞库）及稳定性验证（传代后的表达量、质量一致性）。2.生物药工艺开发中，上游与下游工艺的主要目标分别是什么？答案：上游工艺目标：通过优化细胞培养条件（如培养基、pH、溶氧）、细胞株改造（如基因工程提高表达量），实现目标蛋白的高产量、高活性表达，并控制关键质量属性（如糖型、聚合体）；下游工艺目标：通过纯化步骤（如亲和层析、离子交换）去除宿主细胞蛋白、DNA、病毒等杂质，获得高纯度（通常＞95%）、高均一性的目标产物，同时保持其生物活性和稳定性。3.简述生物制品稳定性试验的基本要求（至少3点）。答案：①试验条件：长期试验（2-8℃，持续至效期末）、加速试验（25℃/60%RH或30℃/65%RH，6个月）；②考察指标：外观、效价、纯度、有关物质（如聚合体）、宿主细胞蛋白/DNA残留等；③样品要求：使用与商业化生产一致的包装材料，至少3批代表性批次；④数据判定：以长期试验数据为主，加速试验用于预测可能的降解趋势。4.基因治疗中，病毒载体（如AAV）与非病毒载体（如脂质体）的主要优缺点对比。答案：病毒载体（如AAV）优点：转染效率高、靶向性强（可改造衣壳蛋白）、长期表达；缺点：免疫原性较高（可能引发抗体反应）、载药容量有限（AAV约4.7kb）、潜在整合风险（部分病毒）。非病毒载体（如脂质体）优点：免疫原性低、载药容量大、制备简单；缺点：转染效率低、表达时间短（易被降解）、靶向性差（需额外修饰）。六、讨论题（每题5分，共10分）1.讨论在生物药工艺放大（从实验室规模到中试/商业化生产）过程中，需重点关注的问题及应对策略。答案：工艺放大需关注：①参数一致性：实验室小体积（如摇瓶）与反应器（如500L）的传质（溶氧、CO₂）、传热（温度）差异，需通过计算体积比功率（P/V）、雷诺数等保持关键参数（如kLa）一致；②细胞性能：放大后剪切力增加可能影响细胞活性，可通过优化搅拌桨类型（如斜叶桨）、降低转速缓解；③质量一致性：放大可能导致糖型、聚合体等质量属性变化，需在放大前后对比关键质量属性（CQA），必要时调整培养基（如添加糖基化前体）或培养条件；④工艺稳健性：通过DOE（实验设计）评估关键工艺参数（CPP）的波动范围，制定工艺控制策略（如pH控制范围）。2.结合当前生物制药行业趋势，讨论研发专员需具备的核心能力（至少3点）。答案：核心能力包括：①技术扎实：掌握分子克隆、细胞培养、蛋白质纯化等基础技术，熟悉qPCR、HPLC、ELISA等检测方法，能解决实验中常见问题（如细胞死亡、纯化收率低）；②法