DB54T 0565-2026 牛羊住肉孢子虫病防控技术规程

ICS11.22054CCSB4154西 藏 自 治 区 地 方 标 准DB54/T0565—2026牛羊住肉孢子虫病防控技术规程2026-1-4发布 2026-2-5实施西藏自治区市场监督管理局  发布DB54/T0565DB54/T0565—2026PAGE\*ROMANPAGE\*ROMANII目 次前 言 II范围 1规范性引用文件 1术语和定义 1流行特点 1样品的采集、保存和运输 1诊断 2预防 2检疫监督 3附录A（规范性）压片镜检法4附录B（资料性）住肉孢子虫形态5附录C（规范性）PCR6前 言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由西藏自治区农业农村标准化技术委员会提出并归口。本文件起草单位：西藏自治区农牧科学院畜牧兽医研究所、中国农业科学院上海兽医研究所。本文件主要起草人：单曲拉姆、米荣升、扎西央宗、索朗曲吉、赵霞玲、王冬经、马弘财、任越。DB54/T0565DB54/T0565—2026PAGEPAGE1牛羊住肉孢子虫病防控技术规程本文件适用于牛羊住肉孢子虫病的防控工作。规范性引用文件（包括所有的修改单适用于本文件。GB16567 种畜禽调运检疫技术规范GB7959 粪便无害化卫生要求GB/T36195 畜禽粪便无害化处理技术规范NY/T3961 畜禽屠宰加工人员防护技术规范术语和定义下列术语和定义适用于本文件。住肉孢子虫病住肉孢子虫侵入中间宿主的肌肉和终末宿主肠道引起的一种危害严重的人兽共患食源性寄生虫病。流行特点宿主特异性牛羊是住肉孢子虫的中间宿主，犬、猫、狐狸等肉食动物以及人类是终末宿主。传播途径中间宿主食入被终末宿主粪便污染的饲料或水，终末宿主通过捕食感染的中间宿主而感染。流行季节发病多为秋、冬季。样品的采集、保存和运输样品的采集采集50g～80g新鲜牛羊肌肉，记录样品采集地点、日期、牲畜种类、年龄、采集部位及病史等内容。样品的保存和运输样品低温保存送回实验室，短期在2℃～8℃保存，长期在-20℃及以下保存或浸泡于福尔马林溶液中。诊断临床诊断临床症状通常表现为食欲减退、贫血、水肿、尾端脱毛并坏死，严重时出现流产、四肢伸直、肌肉僵硬等症状。病理变化临床结果判定实验室诊断压片镜检法肌肉样品压片镜检法具体操作见附录A，牛羊住肉孢子虫形态见附录B。PCRPCR诊断具体方法见附录C。血清检测法可采用ELISA试剂盒方法按说明书检测血清中住肉孢子虫特异性抗体，适用于群体筛查和流行病学调查。预防粪便无害化处理加强对住肉孢子虫终末宿主粪便的管理，按GB7959规定进行无害化处理。切断传播途径圈舍内严禁犬猫，加强对鼠的控制；严防犬、猫等动物粪便接触牛羊饲料及饮水。环境消毒定期用25%来苏尔、含氯消毒剂或过氧化物消毒剂交替使用对圈舍进行消毒。发生过本病的区域，消毒后空舍时间不低于30d。饲养管理肉品安全处理屠宰发现有白色包囊的肉品应无害化处理。人员防护3961进行无害化处理。检疫监督产地检疫牛羊出售或流动之前，养殖场/户应向当地动物卫生监督机构申报检疫，按畜禽产地检疫取得动物检疫合格证明。屠宰检疫动物卫生监督机构的检疫人员对待宰牛羊进行查证验物，合格后方可入厂/场屠宰。引种检疫GB1656715d～30d,合格后方可进场/户饲养。监督管理GB/T36195规定进行无害化处理。附 录 A（规范性）压片镜检法主要仪器设备外科手术剪、不锈钢镊子、不锈钢、铝合金或塑料肉样盘,载玻片及生物显微镜。试剂甘油。操作方法剔除脂肪、结缔组织及肌膜，暴露出肌肉，在光线下观察肌纤维间是否含灰白/乳白色纺锤形、圆柱形等包囊。压片镜检4条～6结果判定附 录 B（资料性）图B.1巨型住肉孢子虫图B.2 显微镜下住肉孢子虫A：羊柔嫩住肉孢子虫（VP呈指状突起）；B：白羊犬住肉孢子虫（VP呈毛状突起）;C：牦牛犬住肉孢子虫（VP呈现长毛状突起）；D：海氏住肉孢子虫（VP呈现短毛状突起）；E：诺氏住肉孢子虫（VP呈长指状突起）；F：似人住肉孢子虫（VP呈短指状突起）图B.3不同种类住肉孢子虫（镜检４００Ｘ）附 录 C（规范性）住肉孢子虫PCR实验方法主要仪器高速离心机、PCR基因扩增仪、微量可调移液器、核酸电泳仪及凝胶成像分析系统。主要试剂2×PCRMix、DL2000DNAMarker、Ts-GelRed、核酸染料及琼脂糖。操作方法PCR扩增采用PCR采用50μL反应体系:DNAMix25μL，上下游引物各2μL，加ddH2O50.0μL。PCR循环参数：95℃预变性5min;94℃变性15s,Tm退火15s,721kb/s,35;7210min。引物序列信息见表C.1。琼脂糖凝胶电泳用1XTAE1.0100mL凝胶中加入10μLPCR5μL,1.0%琼脂糖凝胶中以150V凝胶的电压下进行电泳,采用凝胶成像分析系统观察电泳结果并拍照。结果判定结果判定阳性:被检样品扩增产物泳道出现目的条带时,判为阳性。阴性:被检样品扩增产物泳道没有出现任何条带,经重复３次PCR检测仍未出现扩增条带时,判为阴性。表C.1住肉孢子虫常用PCR引物序列特性引物名序列（5’-3’）长度（bp）Tm备注较为通用unF1CGGCTGGACTATGTATC58050unR1CGTGCCCGTAGGTATunF2TCGGATGTGGTTCGC86252unR2TCGTGCCCGTAGGT对单一种灵敏性较高ST-COX1FATGCCAGTCCTGTTCTCCG80055S.tenellaST-COX1RCTGCCCAATAATCCGCTGTSC-COX1FGAGGCTCTTTGCCGTAG80055S.capracanisSC-COX1RTGGCTGCCCAGTAATCCSH-C