水生物检疫检验员安全培训成果考核试卷及答案

水生物检疫检验员安全培训成果考核试卷及答案一、单项选择题（每题1分，共30分。每题只有一个正确答案，请将正确选项字母填入括号内）1.进境水生动物在隔离检疫期间，出现群体性异常死亡，现场首要安全措施是（）。A.立即采样送实验室确诊B.封锁隔离池并停止一切操作C.通知货主到场确认损失D.拍照取证后放行答案：B2.对疑似含有白斑综合征病毒（WSSV）的凡纳滨对虾进行现场采样，应优先采集的器官是（）。A.心脏B.鳃丝C.胃D.肌肉答案：B3.使用次氯酸钠对运输活鱼水体进行消毒时，有效氯浓度应控制在（）。A.0.01～0.05mg/LB.0.1～0.2mg/LC.1～2mg/LD.10～20mg/L答案：C4.水生动物检疫实验室产生的含病毒组织匀浆液，其最安全的初处理方式为（）。A.121℃高压灭菌30minB.紫外线照射1hC.0.5%高锰酸钾浸泡2hD.直接倒入下水道答案：A5.在口岸现场对进境活鲍鱼进行临床检查时，发现壳面有大量红色脓疱，最可能的病原是（）。A.鲍鱼疱疹病毒（AbHV）B.溶藻弧菌C.派琴虫D.牡蛎疱疹病毒（OsHV1）答案：A6.对进口锦鲤实施KHV（锦鲤疱疹病毒）监测，最适宜的采样水温条件是（）。A.10℃以下B.15～20℃C.23～28℃D.30℃以上答案：C7.水生动物检疫人员进入负压隔离区前，必须佩戴的呼吸防护装备等级至少为（）。A.N95B.KN90C.医用外科口罩D.纱布口罩答案：A8.对进境活水生动物实施氯霉素项目检测时，实验室应采用的质控方式是（）。A.空白加标回收B.平行双样C.试剂空白D.以上全部答案：D9.运输高致病性病原微生物菌（毒）种，其包装系统应达到的国际标准是（）。A.P650B.IATA650C.UN2814D.ADR1.4答案：C10.对进境活水生动物实施电子监管时，关键控制点（CCP）不包括（）。A.运输温度B.溶解氧C.盐度D.货主信用等级答案：D11.现场查验发现进境活蟹附带有“棉花虾”症状，应首先排查的病原是（）。A.螺原体B.肝胰腺细小病毒（HPV）C.急性肝胰腺坏死病（AHPND）D.黄头病毒（YHV）答案：C12.对进境冷冻三文鱼实施寄生虫检验，应优先检测的寄生虫是（）。A.异尖线虫B.九江头槽绦虫C.鱼虱D.三代虫答案：A13.水生动物检疫人员脱卸个人防护装备的正确顺序是（）。A.手套→护目镜→口罩→防护服B.护目镜→手套→防护服→口罩C.手套→防护服→护目镜→口罩D.口罩→手套→护目镜→防护服答案：C14.对进境活牡蛎实施OsHV1检测，采样后组织样品运输温度应保持在（）。A.0℃以下B.4℃C.10℃D.室温答案：B15.实验室进行RTPCR检测时，防止气溶胶污染的最有效措施是（）。A.增加循环数B.分区分阶段操作C.提高退火温度D.使用高保真酶答案：B16.对进境活水生动物实施甲醛检疫处理时，水体甲醛终浓度不得超过（）。A.10mg/LB.25mg/LC.50mg/LD.100mg/L答案：B17.现场查验人员手部被鲍鱼壳划伤，应立即采取的第一步措施是（）。A.报告领导B.挤压伤口至出血后用流水冲洗C.贴创可贴D.涂抹碘伏后包扎答案：B18.对进境活鲟鱼实施IHNV（传染性造血器官坏死病毒）检测，最适宜的采样组织是（）。A.脑B.肾脏C.肝脏D.脾脏答案：B19.水生动物检疫实验室生物安全二级（BSL2）核心区域气压要求为（）。A.正压B.负压C.常压D.交替压答案：B20.对进境活水生动物实施硝基呋喃类代谢物检测时，前处理水解温度通常设置为（）。A.25℃B.37℃C.50℃D.100℃答案：B21.现场查验发现运输水体氨氮浓度超过2mg/L，应首先采取的措施是（）。A.加冰降温B.立即大量换水C.增加曝气D.投放沸石粉答案：C22.对进境活水生动物实施病毒分离，细胞培养出现CPE的时间通常为接种后（）。A.1hB.6hC.24～72hD.7d答案：C23.实验室废弃的含EB（溴化乙锭）电泳胶应置于何种容器收集（）。A.利器盒B.生物危害垃圾袋C.专用有机污染物收集桶D.普通垃圾桶答案：C24.对进境活罗非鱼实施无乳链球菌检测，采样部位首选（）。A.体表黏液B.脑C.肾脏D.眼球答案：C25.口岸现场快速检测氯霉素残留，应优先采用（）。A.酶联免疫法B.气相色谱法C.液相色谱串联质谱法D.分光光度法答案：A26.对进境活水生动物实施检疫处理时，必须提前告知货主的事项不包括（）。A.处理原因B.处理药剂毒性C.处理费用及后果D.检疫人员家庭住址答案：D27.水生动物检疫实验室质量管理体系文件层次中，位于最顶层的是（）。A.质量手册B.程序文件C.作业指导书D.记录表格答案：A28.对进境活虹鳟实施BKD（细菌性肾病）检测，最佳染色方法是（）。A.革兰氏染色B.抗酸染色C.瑞氏染色D.姬姆萨染色答案：B29.现场查验人员进入低温冷藏集装箱前，应佩戴的防护用品不包括（）。A.保温服B.防滑鞋C.正压呼吸器D.低温手套答案：C30.对进境活水生动物实施检疫证书电子核销时，发现证书编号被重复使用，应（）。A.先放行后调查B.立即扣留货物并移交缉私C.要求货主写保证书D.现场销毁证书答案：B二、多项选择题（每题2分，共20分。每题有两个或两个以上正确答案，多选、少选、错选均不得分）31.以下哪些属于水生动物检疫现场必须配备的应急物资（）。A.氧气瓶B.肾上腺素注射液C.5%葡萄糖D.漂白粉E.防刺手套答案：A、B、D、E32.关于锦鲤疱疹病毒（KHV）的生物学特性，正确的有（）。A.属疱疹病毒科B.基因组为双链DNAC.最适复制温度为30℃D.对乙醚敏感E.可感染普通鲤鱼答案：A、B、D、E33.以下哪些药物属于硝基呋喃类（）。A.呋喃唑酮B.呋喃它酮C.呋喃妥因D.呋喃西林E.呋喃苯烯酸钠答案：A、B、C、D、E34.对进境活水生动物实施检疫处理时，必须记录的信息包括（）。A.处理药剂批号B.处理水温C.处理时间D.操作人员签名E.货主血型答案：A、B、C、D35.以下哪些情况必须启动水生动物疫情Ⅰ级响应（）。A.首次检出KHVB.首次检出WSSVC.首次检出AHPNDD.同一口岸30d内连续3批检出OsHV1E.实验室人员感染IHNV答案：A、D、E36.关于个人防护装备（PPE）使用，正确的有（）。A.防护面屏可替代护目镜B.乳胶手套破损应立即更换C.N95口罩可水洗后重复使用D.防护服脱卸时应内卷外表面E.防护鞋可穿出污染区答案：B、D37.以下哪些属于水生动物检疫实验室生物安全柜年检项目（）。A.下降气流速度B.流入气流速度C.HEPA完整性D.噪声E.照度答案：A、B、C、D、E38.对进境活水生动物实施病毒核酸检测，防止假阴性的措施有（）。A.内参基因同步扩增B.增设阳性对照C.提取空白对照D.提高模板稀释倍数E.使用UNG酶防污染答案：A、B、C、E39.以下哪些属于水生动物检疫现场快速检测技术（）。A.LAMPB.RPAC.胶体金试纸条D.实时荧光PCRE.生物传感器答案：A、B、C、E40.对进境活水生动物实施检疫处理时，可采用的物理方法有（）。A.紫外线照射B.臭氧处理C.60℃热浴D.冷冻致死E.高压电场答案：A、B、C、D三、判断题（每题1分，共10分。正确打“√”，错误打“×”）41.对进境活水生动物实施检疫时，货主可拒绝采样。（）答案：×42.实验室进行PCR实验时，可在同一超净台内完成产物电泳。（）答案：×43.对进境活水生动物实施甲醛处理时，可不加缓冲液直接投药。（）答案：×44.水生动物检疫人员完成现场查验后，可用75%乙醇消毒防护眼镜。（）答案：√45.对进境活虹鳟实施IHNV检测，肾脏组织可替代脾脏作为样品。（）答案：√46.现场查验发现活鱼体表出血，可初步判定为细菌感染，无需病毒检测。（）答案：×47.对进境活水生动物实施检疫处理时，必须有两名以上检疫人员在场。（）答案：√48.实验室废弃的PCR产物可直接倒入下水道，用大量水冲洗即可。（）答案：×49.对进境活水生动物实施检疫证书核查时，证书涂改处需加盖官方印章方为有效。（）答案：√50.水生动物检疫实验室生物安全柜前窗开启高度不得超过标定红线。（）答案：√四、填空题（每空1分，共20分）51.对进境活水生动物实施白斑综合征病毒（WSSV）检测，国家标准规定PCR扩增片段大小为________bp。答案：144752.水生动物检疫实验室生物安全标志中，生物危害符号颜色为________，背景为________。答案：黑色，荧光橙53.对进境活锦鲤实施KHV检测，采样后组织样品若24h内不能检测，应置于________℃保存，超过7d需转入________℃冻存。答案：−20，−8054.现场快速检测氯霉素残留，胶体金试纸条检出限通常为________μg/kg。答案：0.155.对进境活水生动物实施检疫处理，使用二氧化氯的休药期应不少于________d。答案：756.水生动物检疫人员进入高风险区域前，应进行________风险评估，并填写________表。答案：生物安全，个人健康监测57.对进境活鲍实施AbHV检测，采样部位为________和________。答案：外套膜，鳃58.实验室进行RTPCR时，逆转录反应温度通常设置为________℃，时间________min。答案：42，3059.对进境活水生动物实施无乳链球菌检测，选择培养基为________琼脂。答案：TSA+5%羊血60.口岸现场发现进境活鱼溶解氧低于________mg/L，应立即采取增氧措施。答案：3五、简答题（每题6分，共30分）61.简述进境活水生动物现场查验发现大量死亡时的应急处置流程。答案：（1）立即封锁现场，禁止移动；（2）报告上级并启动应急预案；（3）拍照、录像固定证据，记录水温、盐度、溶解氧；（4）无菌采集代表性样品（鳃、肾、脾等），分三份：一份现场快速检测、一份送实验室、一份备份−80℃保存；（5）对存活个体实施隔离观察，必要时进行整批销毁；（6）填写《突发事件记录表》，24h内书面报告直属海关。62.概述水生动物检疫实验室生物安全三级（BSL3）核心区的进出流程。答案：（1）人员先在清洁区更换个人内衣→佩戴N95口罩→穿内层手术衣→穿正压防护服→连接呼吸管→进入淋浴间；（2）淋浴间关闭门后自动启动风淋，气压检测合格后方可进入核心区；（3）实验完毕，在核心区脱除外层手套→喷雾消毒→进入化学淋浴区，自动喷淋2%过氧乙酸3min；（4）淋浴后进入外更衣室，脱正压服→风淋→脱内层手术衣→淋浴→换洁净服→刷卡离开；（5）全程视频监控，门禁系统记录时间、人员、压力曲线。63.说明对进境活凡纳滨对虾实施AHPND病原taqman实时荧光PCR检测的关键质量控制点。答案：（1）引物探针：靶向pirA、pirB基因，探针5’FAM、3’BHQ1，内参探针5’VIC；（2）标准品：重组质粒浓度10^1–10^7拷贝/μL，R²≥0.998；（3）提取对照：阳性组织、阴性组织、提取空白；（4）扩增对照：阳性模板、无模板对照、内参基因；（5）判定：Ct≤35且曲线呈指数增长为阳性；35<Ct<38复检；Ct≥38阴性；（6）防污染：使用UNG酶、分区分阶段操作、负压层流、定期紫外照射。64.列举并解释水生动物检疫现场常用的三种物理增氧方式及其适用场景。答案：（1）液氧瓶+微孔曝气盘：适用于高密度活鱼车厢，溶解氧提升快，噪音低，需防火；（2）便携式涡轮增氧机：适用于口岸临时水池，电源220V，流量≥60L/min，适合长时间查验；（3）过氧化钙缓释颗粒：适用于无电源的集装箱角落，每千克可释氧≥120L，兼具消毒杀菌作用，但pH升高，需监测。65.说明进境活水生动物检疫证书电子核销系统的数据链路安全机制。答案：（1）证书数据由出口国官方通过WTOeCert接口加密推送至海关总署数据中心，采用RSA2048+AES256混合加密；（2）口岸海关通过VPN专网访问数据中心，双向SSL证书校验；（3）核销时比对证书UUID、HS编码、重量、数量，任何字段哈希值不一致自动报警；（4）系统日志实时写入区块链，防篡改；（5）异常证书自动锁定并推送至风险布控系统，触发人工复核。六、案例分析题（每题10分，共20分）66.某口岸现场查验一批进境活锦鲤600尾，运输水温22℃，溶解氧6mg/L