CN107360958B 一种大麻快速扩繁的方法 （中国农业科学院麻类研究所）

(10)授权公告号CN107360958B(21)申请号20171078948(22)申请日2017.09.05(65)同一申请的已公布的文献号(43)申请公布日2017.11.21(73)专利权人中国农业科学院麻类研究所地址410205湖南省长沙市咸嘉湖西路348号(72)发明人程超华粟建光唐蜻戴志刚方冬兵文海兵许英杨泽茂高红刘婵(74)专利代理机构长沙星耀专利事务所(普通合伙)43205代理人张慧赵静华A01G31/00(2018.01)(56)对比文件CN1887043A,2007.01.03,说明书第1页第2段至第6页第2段.CN105052528A,2015.11.18,说明书第2-27段.CN104604502A,2015.05CN105746120A,2016.07.13,全文.CN102919044A,2013.02.13,全文.CN105961175A,2016.09.28,全文.CN103069949A,2013.05CN101828527A,2010.09审查员覃超(54)发明名称一种大麻快速扩繁的方法(57)摘要一种大麻快速扩繁的方法，包括以下实施步骤：(1)种子的消毒；(2)水培培养；(3)大麻苗转入栽培基质；(4)大麻苗打顶处理；(5)侧芽生根等优点。采用本方法对大麻种子进行组织培养扩繁，按100天为一周期计算，每株基质苗取腋芽8个，则每粒种子苗可产生扩繁苗约500株，可有效解决优良或珍稀大麻品种在短期内的快速繁殖问题，在保证遗传一致性的情况下，使得优良大麻材料得以保存或繁殖，同时也为工厂化育苗奠21.一种大麻快速扩繁的方法，其特征在于，包括以下实施步骤：(1)种子的消毒：选取大麻种子，进行消毒灭菌处理后，接种于MS培养基上；大麻种子萌芽，长成为无菌苗；(2)水培培养：大麻种子接种于MS培养基上培养4-7天后，无菌苗生长至6-10厘米，将无菌苗取出，根系在流水下冲洗干净，再放入水培箱中进行水培，时间为7-11天；培养液成份为：1升A液：硝酸钾45-50克，硝酸钙164-168克，螯合铁6-7克，余为水；1升B液：硫酸镁40-45克，磷酸二氢钾26—30克，余为水；使用时将A液和B液分别稀释80-120倍后混合，即为培养液；(3)大麻苗转入栽培基质：将经步骤(2)水培的大麻苗转入栽培基质，栽培基质的质量比为：泥炭土：蛭石：珍珠岩=2～3:1～1.2:1;(4)大麻苗打顶处理：栽培基质内大麻苗生长至高15-20厘米时，进行打顶处理；(5)侧芽生根培养：将经步骤(4)打顶处理后的大麻苗继续培养7-11天，腋芽伸长至10-15厘米时，斜切剪下腋芽，将腋芽放入步骤(2)的水培箱中进行水培，水培条件与步骤(2)中(6)增殖培养：将步骤(5)所得的生根腋芽又重复步骤(3)和步骤(4)、步骤(5)处理，获得更多大麻植株；(7)炼苗：得到要求数量的大麻植株后，将栽培基质中的大麻植株，置于凉爽通风处7天以上，即可移入大田或其它栽培环境。2.根据权利要求1所述的大麻快速扩繁的方法，其特征在于，步骤(1)中，消毒灭菌处理采用以下处理方法：①用质量浓度98%的工业硫酸浸泡20min后，于自来水下冲洗30min;②用体积浓度75%的酒精浸洗2min;③用质量浓度为3%的次氯酸钠溶液浸泡20min后，用无菌水冲洗，于干净滤纸上吸干水分，用手术刀和镊子剥去种皮。3.根据权利要求1或2所述的大麻快速扩繁的方法，其特征在于，步骤(2)中，水培光照周期为：光照16-18小时，无光照6-8小时；光照强度为8000-100001x。4.根据权利要求1或2所述的大麻快速扩繁的方法，其特征在于，步骤(3)中，光照周期为：光照16-18小时，无光照6-8小时；光照强度为8000-100001x。5.根据权利要求1或2所述的大麻快速扩繁的方法，其特征在于，步骤(5)中，光照周期为：光照16-18小时，无光照6-8小时；光照强度为8000-100001x。3一种大麻快速扩繁的方法技术领域[0001]本发明涉及植物繁殖技术领域，具体涉及一种大麻高效快速扩繁的方法。技术背景[0002]大麻(CannabisSativaL.)是大麻科(Cannabinaceace)大麻属(Cannabis)一年生草本植物，在我国有数千年的种植利用历史。大麻浑身是宝，既能生产优质的纺织纤维，在食品、药用和建材工业等方面也有巨大应用价值。根据其四氢大麻酚(THC)含量分为毒品大麻、中间型大麻和纤用大麻三种，我国是纤用大麻种植大国，种植面积占世界的30%左右。而药用大麻近年来也成为业界关注的焦点，其药用成份CBD(大麻二酚)是大麻中的非成瘾性成分，可以有效地消除四氢大麻酚(THC)对人体产生的致幻作用，同时具有抗痉挛、抗焦麻品种成为产业发展的关键。而从现有大麻种质资源中筛选符合要求的材料并加以利用，是推动药用大麻产业发展的关键。[0003]从生产实践的角度来说，传统的大麻种植方法中，用100粒种子，按出苗成活率90%计算，在2-3个月内，仅能长成90个植株。其繁殖植株数量和速度有限，不能满足需要。[0004]从种资源的保存和利用角度来说，目前国家种质资源库中存有大麻资源近千份，但因大麻种子不耐储存，发芽率逐年降低，部分珍稀资源不仅发芽率低，数量也极为有限，限制了其应用。[0005]这就需要高效且繁殖系数高的扩繁技术，而这种技术不仅能使优良大麻材料得以保存和繁殖，同时也可为工厂化育苗奠定基础。发明内容[0006]本发明要解决的技术问题是，克服现有技术的不足，提供一种需要时间短的大麻快速扩繁的方法。[0007]本发明解决其技术问题采用的技术方案是，一种大麻快速扩繁的方法，包括以下[0009]消毒灭菌处理为现有技术，可参照以下文献：程超华，李育君，赵立宁，等.三重处理法获得大麻种子无菌苗研究[J].中国麻业科学，2011,33(1):24-26.[0010]优选以下处理方法：[0011]①用质量浓度98%的工业硫酸浸泡20min后，于自来水下冲洗30min;[0012]②用体积浓度75%的酒精浸洗2min;[0013]③用质量浓度为3%的次氯酸钠溶液浸泡20min后，用无菌水冲洗，于干净滤纸上吸干水分，用手术刀和镊子剥去种皮。[0014](2)水培培养：大麻种子接种于MS培养基上培养4-7天后，无菌苗生长至6-10厘米，4将无菌苗取出，根系在流水下冲洗干净，再放入水培箱中进行水培，时间为7-11天；培养液后混合，即为培养液；水培光照周期为：光照16-18小时，无光照6-8小时；光照强度为8000-[0015](3)大麻苗转入栽培基质：将经步骤(2)水培的大麻苗转入栽培基质，栽培基质的[0016](4)大麻苗打顶处理：栽培基质内大麻苗生长至高15-20厘米时(大约需要一周),进行打顶处理；以促进腋芽增殖和伸长；[0017](5)侧芽生根培养：将经步骤(4)打顶处理后的大麻苗继续培养7-11天，腋芽伸长至10-15厘米时，斜切剪下腋芽，将腋芽放入步骤(2)的水培箱中进行水培，水培条件与步骤[0018](6)增殖培养：将步骤(5)所得得生根腋芽又重复步骤(3)和步骤(4)、步骤(5)处[0019](7)炼苗：得到要求大小的大麻植株后，将栽培基质中的大麻植株，置于凉爽通风处7天以上，即可移入大田或其它栽培环境。为8000-100001x。[0021]进一步，步骤(3)中，光照周期为：光照16-18小时，无光照6-8小时；光照强度为[0022]进一步，步骤(5)中，光照周期为：光照16-18小时，无光照6-8小时；光照强度为[0023]本发明具有扩繁周期短、增殖系数高、培养过程简单、遗传一致性高等优点。采用本方法对大麻种子进行组织培养扩繁，按100天为一周期计算，每株基质苗取腋芽8个，则每粒种子苗可产生扩繁苗约500株，可有效解决优良或珍稀大麻品种在短期内的快速繁殖问题，在保证遗传一致性的情况下，使得优良大麻材料得以保存或繁殖，同时也为工厂化育苗奠定基础。本方法尤其适用于发芽率低下或数量稀少的珍稀种子。附图说明[0024]图1为实施例1中打顶后的基质苗；[0025]图2为实施例1中可用于切取腋芽的基质苗；[0026]图3为实施例1中可用于第二次切取腋芽的基质苗。具体实施方式[0027]以下结合附图和具体实施例对本发明作进一步详细说明。[0029]本实施例之大麻快速扩繁的方法，包括以下实施步骤：5[0032]①用质量浓度98%的工业硫酸浸泡20min后，于自来水下冲洗30min;[0033]②用体积浓度75%的酒精浸洗2min;[0034]③用质量浓度为3%的次氯酸钠溶液浸泡20min后，用无菌水冲洗，于干净滤纸上吸干水分，用手术刀和镊子剥去种皮。[0035](2)水培培养：大麻种子接种于MS培养基上培养4天后，无菌苗生长至6厘米，将无1升A液：硝酸钾45克，硝酸钙164克，螯合铁(DPTA铁)6克，余为水；1升B液磷酸二氢钾26克，余为水；使用时将A液和B液分别稀释80倍后混合，即为培养液；水培[0036](3)大麻苗转入栽培基质：将经步骤(2)水培的大麻苗转入栽培基质，栽培基质的为80001x;[0037](4)大麻苗打顶处理：栽培基质内大麻苗生长至高20厘米时(一周后),进行打顶处[0038](5)侧芽生根培养：将经步骤(4)打顶处理后的大麻苗继续培养11天，腋芽伸长至15厘米时，斜切剪下腋芽，将腋芽放入步骤(2)的水培箱中进行水培，水培条件与步骤(2)中[0039](6)增殖培养：将步骤(5)所得得生根腋芽又重复步骤(3)和步骤(4)、步骤(5)处[0040](7)炼苗：得到要求大小的大麻植株后，将栽培基质中的大麻植株，置于凉爽通风处7天以上，即可移入大田或其它栽培环境。[0041]本实施例按100天为一周期计算，每株基质苗取腋芽8个，则每粒种子苗可产生扩繁苗约500株。[0043]本实施例之大麻快速扩繁的方法，包括以下实施步骤：[0046]①用质量浓度98%的工业硫酸浸泡20min后，于自来水下冲洗30min;[0047]②用体积浓度75%的酒精浸洗2min;[0048]③用质量浓度为3%的次氯酸钠溶液浸泡20min后，用无菌水冲洗，于干净滤纸上吸干水分，用手术刀和镊子剥去种皮。1升A液：硝酸钾50克，硝酸钙168克，螯合铁(DPTA铁)7克，余为水；1升B液[0050](3)大麻苗转入栽培基质：将经步骤(2)水培的大麻苗转入栽培基质，栽培基质的6质量比为：泥炭土：蛭石：珍珠岩=3:1.2:1;光照周期为：光照18小时，无光照6小时；光照强度为100001x。[0051](4)大麻苗打顶处理：栽培基质内大麻苗生长至高20厘米时(一周后),进行打顶处[0052](5)侧芽生根培养：将经步骤(4)打顶处理后的大麻苗继续培养11天，腋芽伸长至15厘米时，斜切剪下腋芽，将腋芽放入步骤(2)的水培箱中进行水培，水培条件与步骤(2)中相同，直至生根，得生根腋芽；光照周期为：光照18小时，无光照6小时；光照强度为100001x。[0053](6)增殖培养：将步骤(5)所得得生根腋芽又重复步骤(3)和步骤(4)、步骤(5)处理，获得更多大麻植株。[0054](7)炼苗：得到要求大小的大麻植株后，将栽培基质中的大麻植株，置于凉爽通风处7天以上，即可