CN110668923A 一种高纯度大麻二酚的提取分离方法 （贵州航天乌江机电设备有限责任公司）

(10)申请公布号CN110668923A(21)申请号201911106880.X(71)申请人贵州航天乌江机电设备有限责任公司地址563003贵州省遵义市大连路航汽厂(72)发明人朱成业葛发欢宋大为滕春娟(74)专利代理机构贵阳中新专利商标事务所代理人刘楠李余江(54)发明名称一种高纯度大麻二酚的提取分离方法(57)摘要本发明公开了一种高纯度大麻二酚的提取分离方法，包括以下步骤：(1)超临界CO₂萃取；(2)分子蒸馏富集；(3)工业色谱分离。本发明将工业大麻原料粉经超临界CO₂萃取装置萃取后，萃取物通过分子蒸馏装置富集大麻二酚，富集产物进行工业色谱分离，得到高纯度大麻二酚。该工艺得到的大麻二酚产品含量大于99%,总转移率在85%以上，且不含四氢大麻酚。本发明提供21.一种高纯度大麻二酚的提取分离方法，其特征在于包括如下步骤：(1)超临界CO₂萃取：采用两级解析的超临界CO₂萃取系统，将工业大麻干粉加至超临界恒压至所需萃取时间，萃取完成后收集解析釜II萃取物，即得到大麻二酚粗提物；(2)分子蒸馏富集：将步骤(1)所得大麻二酚粗提物加至分子蒸馏装置恒温槽，升温至所需蒸馏温度，调节真空度至所需压力，开始蒸馏过程，收集大麻二酚馏分，即得到大麻二酚富集产物；(3)工业色谱分离：将步骤(2)的大麻二酚馏分用溶剂溶解，过滤后上工业色谱柱，以乙醇为洗脱剂进行洗脱，收集大麻二酚分离液，60～70℃减压浓缩干燥，即得高纯度大麻二酚产品。2.根据权利要求1所述的高纯度大麻二酚的提取分离方法，其特征在于：步骤(1)中，采用高压超临界萃取，高压萃取压力为40～60MPa,萃取温度为52～65℃,萃取时间为30~3.根据权利要求1所述的高纯度大麻二酚的提取分离方法，其特征在于：步骤(1)中，采用两级解析，解析釜I压力为16～20MPa、温度为55～65℃,解析釜II压力与回路压力一致，为5～6MPa,温度为50～55℃。4.根据权利要求1所述的高纯度大麻二酚的提取分离方法，其特征在于：步骤(2)中，大麻二酚粗提物分子蒸馏的蒸馏温度为120～160℃,真空度为0.1Pa～5Pa。5.根据权利要求1所述的高纯度大麻二酚的提取分离方法，其特征在于：步骤(2)中，刮板转速200～300r/min。6.根据权利要求1所述的高纯度大麻二酚的提取分离方法，其特征在于：步骤(3)中，大麻二酚富集产物用适当的溶剂溶解后，加入工业色谱分离柱，色谱柱的填料为UniQ10、7.根据权利要求1所述的高纯度大麻二酚的提取分离方法，其特征在于：步骤(3)中，工业色谱柱规格为50×250mm。8.根据权利要求1所述的高纯度大麻二酚的提取分离方法，其特征在于：步骤(3)中，洗脱剂乙醇的体积分数为50%～80%。9.根据权利要求1所述的高纯度大麻二酚的提取分离方法，其特征在于：步骤(3)中，洗脱剂的流速为10mL/min～50mL/min。3技术领域[0001]发明涉及天然产物提取分离技术领域，特别是涉及一种高纯度大麻二酚的提取分背景技术[0002]工业大麻是指四氢大麻酚(THC)含量低于0.3%的大麻，又称汉麻。大麻是大麻科(Cannabinaceae)大麻属(Cannabis)1年生草本植物，分为工业大麻和毒品大麻。如图1所示，大麻二酚(Cannabidiol,简称CBD)是工业大麻中的主要化学成分，是大麻中的非成瘾性种药理活性，而四氢大麻酚(THC)是工业大麻中国际国内严禁的毒品成分。因此，采用先进、高效节能、绿色环保的技术从工业大麻中提取制备高纯度、不残留THC的大麻二酚具有重要的意义。目前国外主要应用于药品、食品及化妆品等行业的大麻为工业大麻及其提取物，特别是美国FDA批准了大麻二酚类治疗药物上市后，大麻类项目引起来国内外学术界及工业界的极大关注。有关大麻二酚提取分离的研究成为热点，专利层出不穷，然而这些专利，首先主要集中在大麻二酚粗提物阶段；其次，虽然有提取分离高纯度大麻二酚的方法出现，其第一步也有用超临界萃取技术提取，但其后面的分离纯化还是有机溶剂用量大、收率低的传统落后工艺。[0003]目前，从工业大麻中提取分离大麻二酚的常用方法有乙醇提取、超临界萃取、溶剂萃取、硅胶柱层析等，如中国专利(CN201710631532.9)公开了利用超临界二氧化碳萃取大麻二酚的方法及其大麻二酚产品，其存在萃取阶段引入易燃易爆的汽油、石油醚、乙酸乙酯等作为夹带剂；产品尚属于粗提取物，大麻二酚纯度低；由于采用的超临界萃取压力低，其提取率较低、萃取时间长等。中国专利(CN201710754364.2)公开了一种从汉麻中提取纯化大麻二酚的方法，该方法采用超临界CO₂萃取、大孔树脂纯化、硅胶柱层析提取分离大麻二酚，其后续工艺存在提取分离时间长、有机溶剂用量大且毒性较大等问题。中国专利(CN201710314318.0)公开了一种富集大麻二酚的方法，该方法采用超临界CO₂萃取技术、大孔树脂/硅胶柱层析提取制备大麻二酚，含量最高为89.13%的产品，也存在产品制备周期长、有机溶剂用量大且毒性高以及产品纯度较低等问题。申请号为CN201种萃取富含大麻二酚的工业大麻油的方法”专利、申请号为CN20131022界二氧化碳萃取火麻仁油脂的工艺”专利均采用超临界CO₂萃取技术萃取含有大麻二酚的油脂，两者只考虑油脂的提取，未考虑大麻二酚的提取率和高纯度的大麻二酚的分离制备，存在无法得到高纯度的大麻二酚等问题。[0004]申请号为CN201710049805.9的“一种从大麻中提取大麻二酚的方法”和申请号为CN201610674119.6的“一种从工业大麻花叶中提取大麻二酚的方法”均采用乙醇提取、水沉、柱层析、结晶等工艺提取制备大麻二酚，其存在乙醇提取杂质多，增加后续工艺纯化难大麻植物中分离提取大麻二酚的方法”采用乙醇提取、有机溶剂萃取、硅胶柱层析、反相柱4层析等工艺提取分离大麻二酚，其存在有机溶剂用量大、毒性大以及制备周期长等问题。申请号为CN201810331099.1的“一种大麻二酚的制备方法”、申请号为CN201910148366.6的“一种大麻二酚提取物及其制备方法”、申请号为CN201910137611.3的“一种分离大麻二酚的方法”,三者同样存在有机溶剂用量大、毒性大以及纯度较低或未考虑高纯度大麻二酚的制备等问题。发明内容[0005]为了解决现有技术中大麻二酚提取工艺杂质多、有机溶剂用量大、产品纯度低、制备周期长等问题，本发明提供一种大麻二酚收率高、纯度高、过程简单、溶剂毒性小且用量小的绿色环保提取方法。[0006]本发明的技术方案是这样实现的：[0007]一种高纯度大麻二酚的提取分离方法，该方法包括如下步骤：[0008](1)超临界CO₂萃取：采用两级解析的超临界CO₂萃取系统，将工业大麻干粉加至超恒温恒压至所需萃取时间，萃取完成后收集解析釜II萃取物，即得到大麻二酚粗提物；[0009](2)分子蒸馏富集：将步骤(1)所得大麻二酚粗提物加至分子蒸馏装置恒温槽，升温至所需蒸馏温度，调节真空度至所需压力，开始蒸馏过程，收集大麻二酚馏分，即得到大麻二酚富集产物；[0010](3)工业色谱分离：将步骤(2)的大麻二酚馏分用适当溶剂溶解，过滤后上工业色谱柱，以乙醇为洗脱剂进行洗脱，收集大麻二酚分离液，60～70℃减压浓缩干燥，即得高纯度大麻二酚产品。[0011]优选的，步骤(1)中，萃取压力为40～60MPa,萃取温度为52～65℃,萃取时间为30~90min。[0012]优选的，步骤(1)中，解析釜I压力为16～20MPa,温度为55～65℃,解析釜IⅡ压力5~6MPa,温度为50～55℃。[0013]优选的，步骤(2)中，大麻二酚粗提物分子蒸馏的蒸馏温度为120～160℃,真空度[0014]优选的，步骤(2)中，分子蒸馏的刮板转速200～[0015]优选的，步骤(3)中，色谱柱的填料为UniQ10、UniSil10、UniPSA10、UniPS10、[0017]优选的，步骤(3)中，洗脱剂乙醇的体积分数为50%～80%。[0019]本发明的有益效果是：本发明首次采用超临界CO2萃取一分子蒸馏富集一工业色谱分离成套技术从工业大麻中提取分离大麻二酚的方法。采用高压超临界CO₂快速萃取大麻二酚，避免了现有提取工艺中乙醇或其他有机试剂的使用，同时减少了杂质的量，降低了后续工艺纯化的难度；采用分子蒸馏技术对超临界萃取物进行纯化，解决了现用工艺采用溶剂萃取或大孔树脂吸附分离富集存在有机用量大、毒性大、效率低等问题；采用工业色谱技术对分子蒸馏馏分进行定向分离，解决现有硅胶柱层析等工艺存在的效率、收率低、工艺5不稳定、有机溶剂用量大等问题。本发明建立了一条从工业大麻中提取、富集、分离纯化大附图说明[0020]图1是大麻二酚(CBD)结构图。具体实施方式[0021]下面将结合本发明实施例对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。[0023](1)超临界CO₂萃取：称取粉碎后工业大麻药材1.0Kg,装于超临界CO₂萃取装置萃取釜，萃取釜升压至50MPa,升温至60℃;解析釜I升压至18MPa,升温至60℃;解析釜II升压至6MPa,升温至53℃,开始循环萃取，保持恒温恒压，萃取50min,萃取完成后收集解析釜II萃取物，得到大麻二酚萃取物105.0g;[0024](2)分子蒸馏纯化：取步骤(1)所得大麻二酚萃取物90.0g,加至分子蒸馏装置恒温槽，升温至蒸馏温度150℃,调节真空度至1Pa,刮膜转速250r/min,开始蒸馏过程，收集大麻二酚馏分32.8g;[0025](3)工业色谱分离：将步骤(2)的大麻二酚馏分用65%乙醇溶解，过滤，装至工业色谱进样罐中，色谱柱规格50×250mm,以UniSil10为填料，以65%乙醇为洗脱剂，流速25ml/min,检测波长220nm进行洗脱，收集大麻二酚分离液，60～70℃减压浓缩干燥，即得大麻二酚产品18.2g。[0027](1)超临界CO₂萃取：称取粉碎后工业大麻药材1.0Kg,装于超临界CO₂萃取装置萃取釜，萃取釜升压至40MPa,升温至52℃;解析釜I升压至16MPa,升温至55℃;解析釜II升压至6MPa,升温至50℃,开始循环萃取，保持恒温恒压，萃取90min,萃取完成后收集解析釜II萃取物，得到大麻二酚萃取物97.3g;[0028](2)分子蒸馏纯化：取步骤(1)所得大麻二酚萃取物90.0g,加至分子蒸馏装置恒温槽，升温至蒸馏温度130℃,调节真空度至0.1Pa,刮膜转速300r/min,开始蒸馏过程，收集大麻二酚馏分36.7g;[0029](3)工业色谱分离：将步骤(2)的大麻二酚馏分用80%乙醇溶解，过滤，装至工业色谱进样罐中，色谱柱规格50×250mm,以UniPS10为填料，以80%乙醇为洗脱剂，流速10ml/min,检测波长220nm进行洗脱，收集大麻二酚分离液，60～70℃减压浓缩干燥，即得大麻二酚产品18.9g。[0030]实施例3:[0031](1)超临界CO₂萃取：称取粉碎后工业大麻药材1.0Kg,装于超临界CO₂萃取装置萃取釜，萃取釜升压至60MPa,升温至65℃;解析釜I升压至20MPa,升温至65℃;解析釜II升压至6MPa,升温至55℃,开始循环萃取，保持恒温恒压，萃取30min,萃取完成后收集解析釜II萃取物，得到大麻二酚萃取物112.1g;6[0032](2)分子蒸馏纯化：取步骤(1)所得大麻二酚萃取物90.0g,加至分子蒸馏装置恒温槽，热油机升温至180℃,调节真空度至5Pa,刮膜转速200r/min,开始蒸馏过程，收集大麻二酚馏分31.5g;[0033](3)工业色谱分离：将步骤(2)的大麻二酚馏分用50%乙醇溶解，过滤，装至工业色谱进样罐中，色谱柱规格50×250mm,以UniQ10为填料，以50%乙醇为洗脱剂，流速50ml/min,检测波长220nm进行洗脱，收集大麻二酚分离液，60～70℃减压浓缩干燥，即得大麻二酚产品16.7g。[0034]实施例4:[0035]分别对实施例1、实施例2、实施例3中各步骤的大麻二酚样品进行液相色谱检测，并根据高效液相色谱检测结果记录峰面积，对照标准品溶液中有效成分的峰面积与浓度的线性关系，计算出各步骤