2025年病毒检测试题及答案

2025年病毒检测试题及答案一、单项选择题（每题2分，共30分）1.关于实时荧光定量PCR（qPCR）检测病毒的原理，以下描述错误的是：A.通过荧光标记的探针或染料监测扩增产物累积B.Ct值与初始模板量呈正相关C.扩增曲线的指数期用于Ct值计算D.常用的荧光染料包括SYBRGreen和TaqMan探针2.2025年新型病毒快速检测试剂盒中采用的"纳米孔生物传感器"技术，其核心检测原理是：A.基于病毒表面糖蛋白与纳米孔表面抗体的特异性结合引发电流变化B.通过纳米孔对病毒核酸进行电荷标记后测序C.利用纳米孔的光散射特性识别病毒颗粒形态D.纳米孔内酶促反应产生化学发光信号3.某实验室使用抗原检测试剂检测呼吸道病毒，出现"钩状效应"（HookEffect）的主要原因是：A.样本中病毒载量过高导致抗原抗体比例失衡B.试剂保存温度波动引起抗体变性C.样本采集时混入唾液稀释病毒浓度D.检测板条孵育时间不足导致反应不完全4.以下哪项不属于病毒核酸检测质量控制的关键环节？A.样本采集时使用无菌一次性拭子B.提取核酸时加入内标（IC）监测提取效率C.扩增反应体系中设置阴/阳性对照D.检测报告中仅标注"阳性/阴性"不提供Ct值5.针对2025年新发现的RNA病毒"V-25"，实验室采用逆转录环介导等温扩增（RT-LAMP）技术检测，其与传统qPCR相比的主要优势是：A.无需严格控温设备，适合基层快速检测B.可同时检测多个病毒靶标C.检测灵敏度提高10倍以上D.能直接获得病毒全基因组序列6.关于病毒全基因组测序（WGS）在疫情溯源中的应用，以下说法正确的是：A.仅需1个阳性样本即可完成溯源分析B.基于单核苷酸多态性（SNP）差异构建进化树C.测序深度需达到50×才能满足分析要求D.样本中宿主核酸占比不影响测序结果准确性7.某实验室检测新型冠状病毒变异株时，发现针对S基因的引物扩增失败，但ORF1ab基因检测阳性，最可能的原因是：A.样本中病毒载量低于检测下限B.S基因发生高频突变导致引物错配C.核酸提取过程中RNA降解D.扩增仪温度校准偏差8.2025年推广的"多靶标联检试剂盒"可同时检测7种呼吸道病毒，其设计核心是：A.采用微流控芯片实现反应体系分区B.所有靶标使用相同的扩增条件C.荧光通道复用技术（如不同发射波长探针）D.优化引物浓度避免交叉扩增9.关于病毒检测中"灰区"结果的处理，正确的操作是：A.直接报告"不确定"并建议重新采样检测B.增加扩增循环数至45次后重新检测C.换用不同检测原理的试剂进行复核D.稀释样本后再次检测以排除抑制物干扰10.实验室生物安全二级（BSL-2）环境下进行病毒检测，以下操作不符合规范的是：A.样本处理在生物安全柜内进行B.实验人员穿戴一次性防护服、N95口罩C.离心管未加盖直接放入离心机D.实验结束后用10%次氯酸钠溶液消毒台面11.新型冠状病毒抗原检测试剂的"分析灵敏度"定义为：A.能检测到的最低病毒载量（拷贝数/mL）B.正确识别阳性样本的比例（真阳性率）C.检测结果与金标准一致的概率D.试剂在不同温度下的稳定性12.关于数字PCR（dPCR）检测病毒的特点，错误的是：A.无需标准曲线即可绝对定量B.对低丰度突变检测能力优于qPCRC.适合检测病毒载量动态变化D.扩增效率波动会显著影响结果准确性13.某儿童患者出现发热、皮疹症状，实验室怀疑登革病毒感染，应优先选择的检测方法是：A.急性期血清IgM抗体检测B.发病5天内血清核酸检测C.恢复期血清IgG抗体检测D.全血病毒分离培养14.2025年某实验室引入AI辅助判读系统分析病毒检测结果，其核心算法不包括：A.基于扩增曲线的异常模式识别（如拖尾、双峰）B.病毒变异株的探针匹配度预测C.样本类型与检测方法的智能推荐D.实验人员操作视频的动作合规性分析15.病毒检测中"假阴性"结果的常见原因不包括：A.样本采集部位错误（如应采肺泡灌洗液却采咽拭子）B.病毒处于潜伏期，载量低于检测下限C.检测试剂对新型变异株无交叉反应性D.严格按照SOP进行核酸提取和扩增二、填空题（每空1分，共20分）1.逆转录PCR（RT-PCR）中，逆转录酶的主要作用是将_________转化为_________。2.抗原检测试剂的"特异性"是指对_________样本的正确识别能力，通常用_________（公式）表示。3.病毒核酸提取过程中，常用_________（试剂）裂解病毒包膜释放核酸，_________（物质）用于沉淀核酸。4.实时荧光PCR的Ct值是指_________，临床通常将Ct值_________作为阳性判断阈值。5.生物安全柜根据防护等级分为_________类，病毒检测中样本处理应在_________级生物安全柜内进行。6.2025年新型"等温扩增-侧向流检测"技术结合了_________的快速扩增优势和_________的可视化判读特点。7.病毒全基因组测序前需进行_________（步骤）去除宿主核酸，常用方法包括_________和外切酶消化。8.检测结果的"一致性评价"需同时评估_________（不同时间检测同一样本）和_________（不同实验室检测同一样本）。9.针对RNA病毒检测，实验室需特别注意_________（酶）的活性保存，常用_________（物质）抑制RNA酶活性。10.2025年发布的《病毒检测质量控制指南》要求，每批次检测需包含_________（至少3类）对照，以监控试剂性能和操作误差。三、简答题（每题8分，共40分）1.请比较实时荧光PCR（qPCR）、抗原检测、病毒全基因组测序（WGS）三种方法在病毒检测中的优缺点，需从检测时间、灵敏度、特异性、成本和适用场景五方面展开。2.解释"Ct值"的临床意义，并说明为何2025年新版指南建议在检测报告中同时标注Ct值和定性结果。3.简述病毒检测中"室内质控"与"室间质评"的区别，实验室应如何通过两者结合保障检测质量。4.2025年某地区出现新型冠状病毒变异株（S基因存在3个关键突变），请分析其对现有检测试剂的影响及实验室应采取的应对措施。5.某实验室进行呼吸道病毒检测时，发现多份样本的内标（IC）扩增失败，但病毒靶标检测阳性，可能的原因有哪些？应如何排查和处理？四、案例分析题（共10分）患者张某，男，35岁，因"发热3天（体温38.5℃）、咳嗽、乏力"就诊。流行病学史显示1周前曾接触过境外输入病例。实验室检测结果如下：新型冠状病毒抗原检测（胶体金法）：阴性新型冠状病毒qPCR检测（ORF1ab/N基因）：Ct值32（阳性阈值≤35）流感病毒A/B型抗原检测：阴性血常规：白细胞4.2×10⁹/L（正常4-10），淋巴细胞0.8×10⁹/L（正常1-3）问题：（1）分析该患者检测结果的可能原因。（2）实验室应如何验证qPCR结果的准确性？（3）结合临床症状和检测结果，给出下一步诊疗建议。答案一、单项选择题1.B（Ct值与初始模板量呈负相关）2.A（纳米孔传感器通过分子通过时的电流变化检测）3.A（高浓度抗原导致抗体饱和）4.D（需提供Ct值辅助判断病毒载量）5.A（LAMP无需热循环仪）6.B（通过SNP差异构建进化树）7.B（变异导致引物结合失败）8.C（多荧光通道区分靶标）9.C（换原理复核是标准操作）10.C（离心管需加盖防气溶胶）11.A（分析灵敏度指最低检测限）12.D（dPCR不受扩增效率影响）13.B（登革病毒急性期核酸检测更敏感）14.D（AI判读不涉及操作视频分析）15.D（严格操作可降低假阴性）二、填空题1.病毒RNA；cDNA2.非目标；真阴性率/（真阴性+假阳性）×100%3.裂解液（如胍盐）；无水乙醇（或异丙醇）4.荧光信号达到阈值时的循环数；≤35（或实验室设定值）5.三；Ⅱ6.等温扩增（如LAMP）；侧向流试纸条7.去宿主；链霉亲和素磁珠捕获（或特异性探针捕获）8.重复性；再现性9.逆转录酶；DEPC水（或RNA酶抑制剂）10.空白对照、阳性对照、内标对照三、简答题1.（1）qPCR：时间2-3小时，灵敏度高（10²-10³拷贝/mL），特异性高（引物/探针设计），成本中等，适用于常规筛查和定量；（2）抗原检测：时间15-30分钟，灵敏度较低（10⁵-10⁶拷贝/mL），特异性依赖抗体质量，成本低，适用于快速初筛；（3）WGS：时间1-3天，灵敏度受测序深度影响，特异性最高（全基因组分析），成本高，适用于变异株溯源和耐药性分析。2.Ct值反映样本中病毒初始载量（Ct值越低，载量越高）。2025年指南要求标注Ct值，因可辅助判断传染性（Ct≤30通常传染性强）、评估治疗效果（动态监测Ct值变化），避免单一"阳性/阴性"结果导致的临床决策偏差。3.室内质控是实验室日常检测中使用的内部质量控制（如每批检测加入阴/阳性对照、内标），用于监控操作过程和试剂稳定性；室间质评是外部机构发放盲样，评估实验室检测能力。两者结合可确保检测结果的准确性（室内控过程）和可比性（室间质评控结果）。4.影响：若变异位点位于引物/探针结合区，可能导致qPCR检测失败（假阴性）；抗原检测若针对突变的S蛋白表位，可能降低检出率。应对措施：（1）评估现有试剂对变异株的覆盖能力（通过生物信息学分析或实验验证）；（2）更换覆盖变异区域的引物/探针或多靶标检测试剂；（3）对可疑样本补充WGS确认。5.可能原因：（1）样本中存在PCR抑制物（如血红蛋白、痰液中的粘蛋白）；（2）核酸提取效率低（试剂失效或操作失误）；（3）内标对照配制错误（浓度过低或降解）。排查处理：（1）重复提取核酸并检测内标；（2）用已知阳性样本验证试剂有效性；（3）稀释样本后重新检测（降低抑制物浓度）；（4）若仍异常，更换提取试剂或设备。四、案例分析题（1）可能原因：①患者处于感染早期，病毒载量接近检测下限（Ct32提示低载量），抗原检测因灵敏度不足出现假阴性；②样本采集质量影响（如咽拭子未到达正确部位）；③新型冠状