临床微生物检验质量保证

临床微生物检验质量保证归巧娣临床微生物检验质量保证环节标本合格判定培养基、试剂仪器设备等质控患者准备标本留取运送和保存分析前分析中分析后结果报告联系临床分析前质量控制分析前质量控制患者准备标本采集标本运送和保存患者准备作好解释工作

、争取配合。避免饮食、药物等的影响。告知正确留取方法及注意事项。标本采集注意事项无菌操作，防止污染采集时间最好是病程早期、急性期或症状典型时，且在使用抗菌药物前采集足够量标本容器：无菌、带盖密闭容器每份标本都应有标记标本运送和保存注意事项运送:置于防漏、密封的运送箱内。运送时间：不能超过2小时；厌氧菌标本量少应在15-30min内送达。对温度敏感的淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌感染标本应立即送检，注意保温。标本保存条件:一般4℃保存不能超过24小时；厌氧菌在厌氧环境条件下,25℃可以保存20-24h。脑脊液、生殖道、眼睛、内耳标本应立即送检，不可冷藏，25℃保存。1）发热（≥38℃）或低温（≤36℃）2）寒战3）白细胞增多（大于10×109/L,特别有”核左移”）。4）粒细胞减少（小于1×109/L）。5）血小板减少。6）皮肤粘膜出血。7）昏迷。8）多器官衰竭。9）血压降低。10）呼吸加快。血液标本的采集指征血液标本采集注意事项采血时机:最好在抗菌治疗前,以寒战和发热前1小时为宜。采血部位:多部位，通常在两前臂采血数量：24小时采集2-3套（1需氧+1厌氧=1套）采血量：一定要足够，成人每瓶10ml,儿童每瓶1-3ml。EffectofVolumeOverall/Mayo血量的影响#Bottles1234Volumeofblood(ml)Relativeyield(%)5

10104015602070Volumeofblood(ml)Relativeyield(%)104020

7030804090JCM2007*CLSIRecommendation(Neveronesetonly)Cumitech1C:BloodCulturesIV(2005血液标本的采集需注意的问题采血间隔:一般采血后2-5d不需重复采血，但有例外（如亚急性感染性心内膜炎患者）。采血部位皮肤消毒：推荐使用碘酊、次氯酸和洗必泰或碘伏。消毒剂需要有足够的作用时间以保证消毒效果（碘酊和洗必泰作用30s；碘伏作用1.5～2min）。下呼吸道标本采集方法自然咳痰:清晨、清水漱口3次后，用力深咳痰液。气管穿刺法:仅用于昏迷患者纤维支气管镜抽吸:胃液抽取法:采集次数尿标本采集指征1）有典型的尿道刺激征状2）肉眼脓尿或血尿3）尿常规检查表现为白细胞或亚硝酸盐阳性4）不明原因的发热，无其他局部症状5）留置导尿管超过48h的患者出现发热6）泌尿系统疾病手术前。尿液标本的采集需注意的问题采集时间：抗菌药物之前或停用抗菌药5d之后;尿液在膀胱内应停留6～8h以上，一般要求晨尿采集方法：清洁排尿法:清洁中段尿导尿：膀胱穿刺法:肾盂尿采集法：粪便标本的采集采集时间：急性腹泻期及未使用抗生素之前采集方法：自然排便和肛拭子取材部位：挑取脓血、黏液部分。不能用棉棒、卫生纸留取胸腹水等无菌体液标本的采集

采集方式：无菌穿刺采集,立即送检。标本运送：立即送检，脑脊液应35℃保温立即送检或床边接种。第一管病原学检验，第二管化学免疫学，第三管理学细胞学检验脓液标本的采集开放脓肿：用无菌盐水或70%乙醇擦去表面渗出物，用拭子深入溃疡基地部或边缘部采集。闭锁脓肿：用注射器抽取，刺入无菌橡皮塞中送检。分析中质量控制分析中质量控制室内质控标本处理流程室内质控培养基试剂染液鉴定系统药敏仪器设备培养基质量控制肉眼检查无菌试验生长试验生长抑制试验（必要时）常用培养基生长试验孵育条件已知菌株（ATCC)预期结果血琼脂需氧或CO2，24小时化脓链球菌19615肺炎链球菌6035大肠埃希菌25922生长，ß溶血生长，α溶血生长巧克力琼脂需氧或CO2，48小时淋病奈瑟菌43069流感嗜血杆菌10211生长生长SS琼脂需氧，24小时鼠伤寒沙门菌14028福氏志贺菌12022粪肠球菌29212大肠埃希菌25922生长生长部分生长或抑制部分生长或抑制常用培养基生长试验孵育条件已知菌株（ATCC)预期结果麦康凯琼脂

需氧，24小时大肠埃希菌25922福氏志贺菌12022金黄色葡萄球菌25923分解乳糖，菌落红色不分解乳糖，菌落无色透明不生长中国蓝琼脂需氧，24小时大肠埃希菌25922福氏志贺菌12022金黄色葡萄球菌25923分解乳糖，菌落蓝色不分解乳糖，菌落无色不生长

营养琼脂需氧，24小时金黄色葡萄球菌25923生长沙保罗琼脂需氧，24小时白色假丝酵母菌生长试剂质量控制具体要求：每批次或使用当天用相应的标准菌株作阴、阳性对照。氧化酶试验血浆凝固酶试验过氧化氢酶试验染色液的质量控制频率质控菌株结果判读设备质量控制设备运行监控、设备维护保养严格按照操作规程操作培训操作人员设备定期校准纸片扩散法药物敏感试验质量控制频率质控菌株结果判读频率连续30天失控≥4d继续30天失控≤3d1周1次失控连续5天失控零失控质控菌株及结果判读标本处理流程查对标本合格判断选择合适培养基选择适合的培养条件病原菌判断鉴定标本拒收：申请单（或条形码）与相关标本未同时送达检验科；申请单标本种类与送检标本不符；申请单病人信息不完整或不清晰；样本上无病患标签（或条形码）或与检验申请单不符合。样本以不适当的温度、运送培养基及容器运送。样本的量不足、已被防腐剂固定和运送时间过长。样本外漏、容器破损及明显受污染的样本。痰标本涂片为不合格标本。尿液标本培养，标本量太少（少于10ml）。粪标本培养，放置时间过长，已干。。。。。。。。拒收登记制度染色的意义有助于正确鉴别标本来源和性质,排除污染,确定感染有助于判断机体某些系统微生态是否平衡有助于对病原菌的判断有助于提高标本阳性检出率有利于临床早诊断､早治疗合格标本评价

合格痰标本：白细胞≥25/LP,鳞状上皮细胞≤10/LP培养基和培养条件选择

根据标本来源和可能存在的致病菌，确定选用各种分离培养基及孵育环境

病原菌的判断考虑正常菌群的影响无菌体液病原菌尿液菌落计数污染菌判定……….上呼吸道正常菌群微球菌草绿色链球菌表皮葡萄球菌奈瑟氏菌棒杆菌血培养常见污染菌凝固酶阴性的葡萄球菌棒状杆菌微球菌丙酸杆菌芽孢杆菌如何判断血培养污染菌？

细菌的种类病人的临床症状阳性报告时间长短多套血培养中出现情况其它部位细菌培养情况其它辅助检查尿标本病原菌判断

尿标本中革兰阴性杆菌菌落计数大于105cfu/ml、革兰阳性球菌计数大于104cfu/ml方有诊断意义。若同份标本中检到3种以上不同种微生物，应认为收集或处理标本不当被污染，重新留取。血及骨髓培养鉴定流程（自第三版操作规程）脑脊液鉴定流程（自第三版操作规程）尿培养鉴定流程（自第三版操作规程）下呼吸道标本培养鉴定流程（自第三版操作规程）粪标本培养鉴定流程（自第三版操作规程）分析后质量控制分析后质量控制报告的核对与审核分级报告报告结果的保存加强与临床的沟通交流报告的核对与审核检测项目与申请单内容是否一致。病人基本信息、检测项目与申请单内容是否一致。细菌的分离和鉴定流程是否符合标准。鉴定的细菌和临床标本是否相符。细菌的耐药情况是否合理？对于连续送检的患者，结果是否有变化？血培养三级报告一级：报阳涂片初报二级：初步药敏三级：最终鉴定及药敏结果细菌“危急值”报告无菌区体液（如血液、CSF）培养阳性无菌区体液涂片发现细菌培养出多重耐药菌如VRE、MRSA等涂片发现抗酸杆菌发现高致病微生物

………..登记加强与临