2025年高级卫生专业技术资格考试病理学技术(正高级)试卷及答案

2025年高级卫生专业技术资格考试病理学技术(正高级)试卷及答案一、单项选择题（共20题，每题1分，每题仅有一个正确选项）1.关于组织固定的基本原则，正确的是A.固定液体积应为组织体积的12倍B.标本应在离体后30分钟内开始固定C.厚大组织需先切开再固定D.冷冻组织可直接用甲醛固定答案：C2.常用于电镜标本固定的双固定液组合是A.10%中性福尔马林+乙醇B.戊二醛+锇酸C.Bouin液+Zenker液D.Carnoy液+丙酮答案：B3.石蜡包埋时，组织透明的理想试剂是A.无水乙醇B.二甲苯C.正丁醇D.叔丁醇答案：B4.HE染色中，苏木精染色后分化的常用试剂是A.1%盐酸乙醇B.伊红染液C.氨水D.蒸馏水答案：A5.免疫组织化学染色中，内源性生物素最常见于A.神经组织B.肝脏、肾脏C.脂肪组织D.骨组织答案：B6.荧光原位杂交（FISH）技术中，探针变性的温度通常为A.37℃B.55℃C.75℃D.95℃答案：C7.冰冻切片制作时，组织最佳厚度为A.12μmB.46μmC.810μmD.1215μm答案：B8.用于显示网状纤维的染色方法是A.Masson三色染色B.银染色（Gomori法）C.甲苯胺蓝染色D.阿尔辛蓝染色答案：B9.分子病理学中，RNA提取时最关键的防降解措施是A.使用DEPC处理水B.快速操作C.低温环境D.加入蛋白酶K答案：A10.细胞学涂片固定时，最常用的固定液是A.95%乙醇B.10%中性福尔马林C.戊二醛D.丙酮答案：A11.组织脱水时，从70%乙醇到无水乙醇的正确梯度是A.70%→80%→90%→95%→无水乙醇B.70%→90%→无水乙醇C.70%→85%→95%→无水乙醇D.70%→95%→无水乙醇答案：A12.特殊染色中，显示糖原的经典方法是A.PAS染色B.刚果红染色C.油红O染色D.普鲁士蓝染色答案：A13.免疫组化结果判读时，阳性信号的定位不包括A.细胞膜B.细胞质C.细胞核D.组织间隙答案：D14.数字病理切片扫描的分辨率要求通常为A.0.5μm/像素B.2μm/像素C.5μm/像素D.10μm/像素答案：A15.电子显微镜标本包埋常用的树脂是A.石蜡B.环氧树脂C.甲基丙烯酸酯D.明胶答案：B16.原位杂交技术中，探针标记物最常用的是A.放射性同位素B.生物素C.荧光素D.地高辛答案：D17.组织芯片制作时，供体蜡块的组织芯直径一般为A.0.6mmB.1.2mmC.2.0mmD.3.0mm答案：A18.流式细胞术检测细胞周期时，常用的DNA染料是A.碘化丙啶（PI）B.异硫氰酸荧光素（FITC）C.藻红蛋白（PE）D.4',6二脒基2苯基吲哚（DAPI）答案：A19.病理技术质量控制中，切片厚度的标准偏差应不超过A.0.5μmB.1.0μmC.1.5μmD.2.0μm答案：B20.新型冠状病毒（SARSCoV2）核酸检测的金标准靶点是A.ORF1ab基因B.E基因C.N基因D.S基因答案：A二、多项选择题（共10题，每题2分，每题有2个及以上正确选项，错选、漏选均不得分）1.影响组织固定效果的因素包括A.固定液类型B.组织大小与厚度C.固定时间D.固定温度答案：ABCD2.免疫组化染色中，常见的非特异性染色原因有A.抗体浓度过高B.血清封闭不充分C.内源性过氧化物酶未阻断D.孵育时间过短答案：ABC3.分子病理实验室的质量控制环节包括A.标本采集与保存B.核酸提取纯度检测C.扩增效率验证D.结果判读标准答案：ABCD4.冰冻切片的优点包括A.制片速度快B.保存酶活性C.适合脂肪组织D.抗原保存良好答案：ABD5.特殊染色中，需要使用氧化步骤的有A.PAS染色B.网状纤维染色C.弹力纤维染色D.黑色素染色答案：AC6.电子显微镜标本制备的步骤包括A.固定B.脱水C.包埋D.超薄切片答案：ABCD7.数字病理系统的组成包括A.切片扫描仪B.图像存储服务器C.远程会诊软件D.病理诊断工作站答案：ABCD8.流式细胞术样本制备的关键要求有A.单细胞悬液B.细胞活性＞80%C.无细胞碎片D.避光处理答案：ABCD9.组织芯片的应用场景包括A.肿瘤标志物筛选B.药物疗效评估C.基因表达谱分析D.常规病理诊断答案：ABC10.病理技术安全操作规范包括A.二甲苯使用时需通风B.甲醛溶液需密闭保存C.锐器使用后放入专用容器D.生物样本按医疗废物处理答案：ABCD三、填空题（共10题，每空1分）1.组织固定时，10%中性福尔马林的pH值应控制在______。答案：7.27.42.石蜡包埋的关键温度是______，需高于石蜡熔点35℃。答案：5860℃3.HE染色中，伊红染液的分化剂通常为______。答案：0.5%冰醋酸4.免疫组化中，抗原修复的常用方法包括______和酶消化法。答案：热修复（或高温高压修复）5.FISH技术中，杂交后洗涤的关键参数是______和盐浓度。答案：温度6.冰冻切片机的工作温度一般设置为______。答案：20℃至25℃7.透射电镜观察的超薄切片厚度应为______。答案：5070nm8.分子病理中，DNA提取的常用方法有酚氯仿法、______和磁珠法。答案：硅胶膜吸附法9.细胞学液基制片技术中，常用的固定液是______。答案：乙醇（或CytoLyt固定液）10.病理技术档案保存期限至少为______年。答案：30四、简答题（共5题，每题6分）1.简述石蜡切片制作的主要流程及各步骤的关键技术要点。答案：主要流程：标本处理→固定→脱水→透明→浸蜡→包埋→切片→贴片→烤片→染色→封片。关键要点：固定：体积比≥10:1，时间648小时；脱水：梯度乙醇（70%→80%→90%→95%→无水乙醇），每步13小时；透明：二甲苯透明至组织呈半透明，避免过度；浸蜡：60℃蜡箱中23次，每次12小时；切片：厚度46μm，刀片角度1520°；烤片：60℃烤30分钟，避免脱片。2.列举免疫组织化学染色的质量控制措施（至少6项）。答案：①使用已知阳性对照组织；②设置阴性对照（替代一抗为PBS或非免疫血清）；③内对照（组织内已知阳性细胞，如淋巴细胞CD3）；④抗体浓度滴定；⑤检测系统校准（如DAB显色时间标准化）；⑥结果判读双盲法；⑦定期参加室间质评（EQA）。3.分析冰冻切片出现冰晶的可能原因及解决方法。答案：可能原因：①组织未完全冷冻（温度过高）；②组织含水量过高（如水肿组织）；③冷冻速度过慢；④切片机温度波动。解决方法：①降低切片机温度至25℃以下；②对含水量高的组织先用OCT包埋剂预包埋；③采用快速冷冻法（如液氮预冷）；④检查切片机制冷系统，稳定温度。4.简述分子病理学中RNA提取的注意事项（至少5项）。答案：①使用无RNA酶环境（DEPC处理器材、戴手套）；②标本采集后立即处理（避免RNA降解）；③选择合适的提取方法（TRIzol法适用于组织，柱提法适用于少量样本）；④检测RNA纯度（OD260/280应在1.82.2）；⑤定量后分装保存（80℃，避免反复冻融）；⑥避免DNA污染（加入DNA酶消化）。5.说明特殊染色与免疫组化的主要区别（从原理、应用、局限性三方面）。答案：原理：特殊染色基于化学/物理反应（如PAS染色利用糖原的醛基与Schiff试剂结合）；免疫组化基于抗原抗体特异性结合。应用：特殊染色用于显示组织成分（如胶原、黏液）；免疫组化用于细胞表型、病原体检测。局限性：特殊染色特异性较低（多种成分可能显色）；免疫组化依赖抗体质量，可能出现交叉反应。五、案例分析题（共2题，每题10分）案例1：某医院病理科接收1例胃窦活检标本，临床怀疑胃癌。常规HE切片显示：黏膜腺体结构紊乱，细胞异型性明显，但背景存在大量出血坏死，影响诊断。问题：（1）为明确诊断，可采用哪些病理技术辅助？（2）针对出血坏死组织，制片时需注意哪些改进措施？答案：（1）辅助技术：①免疫组化（如CK7、CK20、CDX2鉴别上皮来源，Ki67评估增殖活性）；②特殊染色（如网状纤维染色观察基底膜完整性）；③分子检测（如HER2扩增检测指导靶向治疗）；④重新取材（若标本量足够，避开坏死区重新制片）。（2）制片改进措施：①固定前修剪坏死组织（保留可疑存活区域）；②延长固定时间（10%中性福尔马林固定812小时）；③脱水时增加70%乙醇停留时间（23小时），避免组织硬脆；④透明后浸蜡前用正丁醇过渡（减少二甲苯对坏死组织的收缩）；⑤切片时使用新刀片，降低切片速度（避免坏死区碎裂）。案例2：某实验室免疫组化检测结果显示：阳性对照着色强，阴性对照无着色，但待测标本出现弥漫性背景着色。问题：（1）分析可能的原因（至少4项）；（2）提出针对性解决措施。答案：（1）可能原因：①一抗浓度过高（非特异性结合增加）；②血清封闭不充分（组织中的非特异性蛋白与二抗结合）；③孵育时间过长（抗体非特异性吸附）；④洗涤不彻底（残留