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2025年高职生物技术(细胞培养)模拟试题
(考试时间:90分钟满分100分)班级______姓名______第I卷(选择题共30分)答题要求:每题只有一个正确答案,请将正确答案的序号填在括号内。(总共10题,每题3分)1.细胞培养中常用的基础培养基是()A.DMEMB.RPMI1640C.MEMD.以上都是2.细胞培养时,最适宜的pH值范围是()A.6.5-7.0B.7.0-7.2C.7.2-7.4D.7.4-7.63.细胞培养过程中,防止微生物污染的重要措施是()A.严格的无菌操作B.使用抗生素C.定期更换培养液D.控制培养温度4.能够促进细胞贴壁的物质是()A.胶原蛋白B.胰蛋白酶C.青霉素D.葡萄糖5.细胞培养箱中维持细胞生长的气体环境主要是()A.O₂和CO₂B.N₂和CO₂C.O₂和N₂D.CO₂和H₂6.用于细胞计数的仪器是()A.显微镜B.血细胞分析仪C.流式细胞仪D.血球计数板7.细胞冻存时常用的保护剂是()A.DMSOB.甘油C.乙醇D.以上都是8.原代细胞培养的来源通常是()A.动物组织B.细胞系C.肿瘤细胞D.胚胎干细胞9.细胞培养中,血清的主要作用是()A.提供营养物质B.促进细胞贴壁C.调节细胞代谢D.以上都是10.细胞传代培养时,通常采用的消化方法是()A.胰蛋白酶消化B.胶原蛋白酶消化C.木瓜蛋白酶消化D.以上都可以第II卷(非选择题共70分)11.(10分)简述细胞培养的基本条件。12.(15分)请详细说明细胞培养过程中如何预防微生物污染。13.(15分)阐述血清在细胞培养中的作用及使用注意事项。14.(15分)材料:在细胞培养实验中,某同学按照常规方法接种细胞后,发现细胞生长缓慢,且形态异常。分析可能导致这种情况的原因。15.(15分)材料:现有一批细胞系,需要进行长期保存。请设计一个细胞冻存方案,并说明每个步骤的目的。答案:1.D2.C3.A4.A5.A6.D7.D8.A9.D10.A11.细胞培养基本条件包括:合适的培养基,提供细胞生长所需营养;适宜的温度,一般哺乳动物细胞为37℃左右;合适的pH值,多在7.2-7.4;气体环境,主要是O₂和CO₂;无菌环境,防止微生物污染;合适的渗透压等。12.预防微生物污染措施:操作前严格消毒培养箱、超净台等设备;操作人员严格遵守无菌操作规范,如戴口罩、手套,操作前后洗手消毒;使用的培养液、血清等试剂确保无菌;定期更换培养液;对培养的细胞定期观察,发现污染及时处理;定期清洁和消毒实验室环境等。13.血清作用:提供营养物质如氨基酸、维生素、矿物质等;含有多种生长因子,促进细胞生长、增殖和分化;调节细胞代谢;提供贴壁因子等促进细胞贴壁。使用注意事项:选择质量可靠的血清;注意血清的批次差异;血清需灭活处理;避免反复冻融血清;储存血清要在合适条件下,防止变质。14.可能原因:培养基配制有误,营养成分不足或比例不当;血清质量不佳,含有有害物质或生长因子缺乏;培养条件如温度、pH值不合适;细胞冻存复苏后活力未完全恢复;接种细胞密度过低;培养器皿未彻底清洗消毒残留有害物质;操作过程中引入微生物污染等。15.细胞冻存方案:收集对数生长期细胞,胰蛋白酶消化制成细胞悬液;1000-1500r/min离心5-10分钟,弃上清;加入含10%-20%DMSO的冻存液重悬细胞;将细胞悬液分装至冻存管,每管1-2ml;先将冻存管置于4℃30分钟,再放于-20℃2小时,最后转入-
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