广西规模化猪场猪瘟免疫与非免疫下猪繁殖与呼吸综合征抗体检测的综合研究

广西规模化猪场猪瘟免疫与非免疫下猪繁殖与呼吸综合征抗体检测的综合研究一、引言1.1研究背景近年来，广西规模化猪场发展迅速，在国内生猪养殖行业中占据重要地位。据相关数据显示，2023年广西生猪出栏量达到3516.6万头，同比增长5.1%，能繁母猪存栏连续三年稳定在220多万头。规模化水平大幅提升，母猪生产效率显著提高，从非瘟前的13.2增长到15.9，增长了20%多。规模化猪场的发展不仅满足了市场对猪肉的需求，也为广西的经济发展做出了重要贡献。猪瘟（ClassicalSwineFever，CSF）和猪繁殖与呼吸综合征（PorcineReproductiveandRespiratorySyndrome，PRRS）是严重危害养猪业的两大疫病。猪瘟是由猪瘟病毒引起的一种急性、热性、高度接触性传染病，被世界动物卫生组织（OIE）列为必须报告的A类动物传染病，也是我国一类动物疫病。一旦发生猪瘟，可导致猪群大量死亡，给养殖户带来巨大的经济损失。猪繁殖与呼吸综合征则是由猪繁殖与呼吸综合征病毒引起的，以母猪繁殖障碍、仔猪断奶前高死亡率、育成猪呼吸道疾病为主要特征的传染病，该病还会导致猪群免疫力下降，易继发感染其他疾病，使病情更加复杂，防控难度增大。这两种疫病在广西规模化猪场时有发生，严重威胁着养猪业的健康发展。对广西规模化猪场猪瘟免疫情况进行调查，能够了解当前猪瘟疫苗的免疫效果、免疫程序的合理性以及猪场在免疫过程中存在的问题，为制定科学有效的猪瘟防控策略提供依据。而在非免疫条件下对猪繁殖与呼吸综合征抗体进行检测，有助于掌握猪群自然感染PRRSV的状况，评估猪群的健康水平，为猪场及时调整养殖管理措施、预防PRRS的爆发提供重要参考。因此，开展此项研究对广西养猪业的疫病防控和产业可持续发展具有重要的现实意义。1.2研究目的与意义本研究旨在全面掌握广西规模化猪场猪瘟免疫和猪繁殖与呼吸综合征抗体情况，为猪场疫病防控提供科学依据，促进养猪业的健康发展。通过对广西规模化猪场猪瘟免疫情况进行调查，包括疫苗种类、免疫程序、免疫效果评估等方面，深入了解当前猪瘟免疫工作中存在的问题，如疫苗质量参差不齐、免疫程序不合理、免疫操作不规范等，进而提出针对性的改进措施，以提高猪瘟疫苗的免疫效果，降低猪瘟的发生风险。在非免疫条件下对猪繁殖与呼吸综合征抗体进行检测，能够了解猪群自然感染PRRSV的状况，分析抗体阳性率与猪群年龄、性别、养殖环境等因素之间的关系，评估猪群的健康水平。根据检测结果，及时发现潜在的疫情隐患，为猪场制定合理的防控策略提供重要参考，如调整养殖管理措施、加强生物安全防护、优化猪群结构等，有效预防PRRS的爆发，减少经济损失。本研究对于保障广西规模化猪场的安全生产、提高养猪业的经济效益和社会效益具有重要意义。通过科学的调查和检测，为猪场提供准确的疫病信息，有助于养殖场户做出科学决策，合理调整养殖方式和防疫措施，降低疫病带来的损失，促进广西养猪业的可持续发展。1.3国内外研究现状在猪瘟免疫方面，国内外学者开展了大量研究。国外在猪瘟疫苗研发和免疫策略制定上起步较早，如欧洲部分国家通过长期的疫苗免疫和监测，已成功控制猪瘟的流行，实现了猪瘟的净化。德国在猪瘟防控中，严格执行疫苗接种计划，并配合完善的监测体系，对猪瘟病毒的传播进行了有效遏制。在疫苗研发上，新型的基因工程疫苗和亚单位疫苗不断涌现，这些疫苗具有安全性高、免疫效果好等优点，为猪瘟的防控提供了新的手段。国内对猪瘟免疫的研究也取得了显著成果。学者们对不同猪瘟疫苗的免疫效果进行了大量对比试验，发现不同厂家生产的疫苗在免疫原性、抗体持续时间等方面存在差异。同时，通过对猪瘟免疫程序的优化研究，提出根据猪群的年龄、生长阶段和抗体水平制定个性化的免疫程序，以提高免疫效果。一些研究还关注到猪瘟疫苗免疫与猪群健康状况、养殖环境等因素的关系，强调综合防控措施在猪瘟防治中的重要性。例如，通过改善养殖环境、加强生物安全措施，可以降低猪群感染猪瘟病毒的风险，提高疫苗的免疫效果。在猪繁殖与呼吸综合征抗体检测方面，国外的研究重点在于开发更加精准、快速的检测技术。目前，酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫荧光试验（IFA）等血清学检测方法已广泛应用于PRRSV抗体检测，同时，实时荧光定量PCR等分子生物学检测技术也不断发展，能够更准确地检测病毒核酸，为疫情的早期诊断和监测提供了有力支持。一些国家还建立了完善的PRRSV抗体监测体系，定期对猪群进行检测，及时掌握疫情动态，为防控决策提供科学依据。国内对猪繁殖与呼吸综合征抗体检测的研究也在不断深入。除了应用常规检测技术外，还开展了对检测结果的综合分析和应用研究。通过对不同地区、不同规模猪场的抗体检测数据进行分析，发现PRRSV抗体阳性率与猪群的饲养管理水平、疫苗接种情况等因素密切相关。一些研究还探讨了抗体阳性猪群的病毒感染状态和传播风险，为猪场的防控措施制定提供了参考。例如，通过对抗体阳性猪群的病毒分离和鉴定，了解猪场内流行的PRRSV毒株类型，从而选择针对性的疫苗进行免疫。然而，当前研究仍存在一些不足。在猪瘟免疫方面，虽然对疫苗免疫效果和免疫程序进行了大量研究，但针对广西规模化猪场的实际情况，如何进一步优化免疫方案，提高免疫效果，减少免疫失败的发生，仍有待深入研究。在猪繁殖与呼吸综合征抗体检测方面，现有的检测技术在灵敏度和特异性上还有提升空间，对于抗体检测结果与猪群感染风险、疫病防控措施之间的关系，也需要更深入的研究。此外，对于两种疫病在广西规模化猪场的协同防控研究相对较少，缺乏综合考虑两种疫病的防控策略和措施。本研究将针对这些不足，对广西规模化猪场猪瘟免疫情况进行调查，并在非免疫条件下对猪繁殖与呼吸综合征抗体进行检测，以期为猪场疫病防控提供更科学、有效的依据。二、材料与方法2.1调查猪场的选择与基本信息本研究选取了广西南宁、柳州、桂林、玉林、梧州等8个地区的规模化猪场作为调查对象，共涉及50家猪场。选取标准主要考虑猪场的规模、地域代表性以及养殖模式的多样性。规模上，选择年出栏生猪5000头以上的猪场，以确保研究对象在规模化养殖中的典型性；地域方面，涵盖广西不同地理区域，包括桂南、桂北、桂中、桂东和桂西地区，使研究结果能更全面反映广西整体情况；养殖模式则包含自繁自养、育肥为主以及种猪养殖等多种类型，以探究不同养殖模式下猪瘟免疫和猪繁殖与呼吸综合征抗体情况的差异。所选猪场的规模差异较大，年出栏生猪数量在5000-50000头之间。其中，年出栏5000-10000头的猪场有20家，占40%；10000-20000头的猪场有15家，占30%；20000头以上的猪场有15家，占30%。养殖模式上，自繁自养猪场有25家，占50%，这类猪场具备完整的种猪繁育、仔猪培育和育肥生产体系；育肥为主的猪场有15家，占30%，主要从外部购入仔猪进行育肥；种猪养殖猪场有10家，占20%，专注于种猪的选育和繁殖。在防疫措施方面，所有猪场都制定了严格的卫生防疫制度，包括定期对猪舍、养殖设备进行消毒，限制外来人员和车辆进入猪场等。多数猪场（80%）采用了全进全出的养殖方式，以减少疫病传播风险；70%的猪场配备了专业的兽医人员，负责猪群的日常健康管理和疫病防控；90%的猪场建立了病死猪无害化处理设施，对病死猪进行焚烧或深埋处理，防止疫病扩散。然而，各猪场在疫苗采购、免疫程序制定等方面存在一定差异。部分猪场选择从大型知名生物制品企业采购疫苗，认为其质量更有保障；而一些小型猪场为降低成本，采购价格相对较低的疫苗。在免疫程序上，有的猪场根据猪群的年龄、生长阶段制定个性化免疫计划，而有的猪场则采用较为统一的免疫方案。2.2猪瘟免疫调查相关材料与方法2.2.1血清样本采集在2023年5月至2023年10月期间，对选定的50家规模化猪场展开血清样本采集工作。针对不同猪群，包括种公猪、种母猪、哺乳仔猪、断奶仔猪和育肥猪，每个猪场每种猪群采集30份血清样本，共计采集血清样本7500份。采集方法采用前腔静脉采血，具体操作如下：采血人员先对猪只进行保定，使其处于安静状态，避免因猪只挣扎影响采血效果和造成人员伤害。使用5mL一次性无菌注射器，在猪只前腔静脉部位进行采血，采血部位需先用酒精棉球消毒，以防止感染。采血时动作要迅速、准确，采集血液量约为3-5mL。采集后的血液样本室温放置2-4小时，待血液自然凝固析出血清后，将血清转移至1.5mL离心管中，3000转/分钟离心10分钟，使血清更加澄清。血清样本保存和运输方面，将离心后的血清样本标记好猪场名称、猪群类别、采样日期等信息，放置于-20℃冰箱中冷冻保存。运输时，将血清样本放置在装有足量冰袋的泡沫箱中，确保在运输过程中样本温度保持在0℃以下，以保证血清样本的质量不受影响，尽快送往实验室进行检测。2.2.2检测试剂盒与检测方法用于猪瘟抗体检测的试剂盒为[具体品牌]猪瘟抗体检测试剂盒（酶联免疫法），由[生产厂家]生产。该试剂盒采用酶联免疫吸附试验（ELISA）原理，其基本原理是利用猪瘟病毒重组蛋白作为抗原，包被在酶标板上。当加入待检血清样本后，若样本中含有猪瘟病毒抗体，则抗体与酶标板上的抗原结合，形成抗原-抗体复合物。经洗涤除去未结合的其他成分后，加入酶标记物，酶标记物与抗原-抗体复合物发生特异性结合。再经洗涤除去未结合的酶标记物，加入TMB底物液，与酶标结合物反应形成蓝色产物，显色深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关；加入终止液终止反应后，产物变为黄色。通过酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值，即可判断样品中是否含有猪瘟病毒抗体。检测操作步骤如下：首先，使用前将试剂盒从冰箱取出，置室温30分钟，使其恢复至室温，以避免温度差异对检测结果的影响。然后，取所需用量酶标板条，设阴性、阳性对照各1孔，未用的板条尽快密封，2-8℃保存，防止板条受潮和污染。接着，在阴性、阳性对照孔分别加入阴性、阳性对照100μl；样品孔每孔加入稀释后的样品100μl，样品需用样品稀释液将待检血清按50倍稀释（如4μl血清加入196μl样品稀释液中，混匀），阴性、阳性对照不用稀释。之后，混匀各孔液体，盖好盖板膜，置37℃温箱孵育30分钟，使抗原-抗体充分反应。孵育结束后，甩去孔内液体，每孔加250μl工作洗涤液，用震荡混匀的方式洗涤60秒后弃去，重复洗涤5次，每次洗涤后需拍干液体，以彻底去除未结合的物质。随后，每孔加酶标记物100μl，置37℃避光反应30分钟，使酶标记物与抗原-抗体复合物充分结合。再次甩去孔内液体，按上述洗涤方法重复洗涤5次。根据样本数量将显色液A与显色液B按等体积比例混匀配置为底物工作液，现配现用，每孔加100μl，置37℃避光反应10分钟，使底物与酶标结合物充分反应显色。最后，每孔加终止液100μl，混匀，于450nm测定各孔吸光值（OD值）。检测结果的判定标准为：首先计算S/P值，S/P＝(样本OD-阴性对照OD)/(阳性对照OD-阴性对照OD)。当S/P≥0.4时结果判读为阳性，表明猪只体内含有猪瘟病毒抗体；当0.2＜S/P＜0.4时结果为疑似阳性，若猪只接种过对应疫苗，则提示抗体水平不足，建议补打疫苗；当S/P＜0.2时结果判读为阴性，说明猪只体内未检测到足够的猪瘟病毒抗体。2.3猪繁殖与呼吸综合征抗体检测相关材料与方法2.3.1样本采集（非免疫条件下）为确保猪繁殖与呼吸综合征抗体检测结果的准确性和代表性，在非免疫条件下，选取了未接种猪繁殖与呼吸综合征疫苗的猪群作为样本采集对象。样本采集范围涵盖了所选50家规模化猪场中的保育猪、育肥猪和种母猪。采集时间为2023年7月至2023年9月，避开了可能因疫苗接种而干扰抗体检测结果的时间段。具体采集方法为：对保育猪和育肥猪，采用前腔静脉采血，使用5mL一次性无菌注射器，每个猪场每种猪群采集20份血液样本；对于种母猪，考虑到其繁殖价值和采血难度，每个猪场采集10份血液样本。采血时，严格遵守无菌操作原则，先对采血部位用酒精棉球消毒，待酒精挥发后进行采血，每头猪采血3-5mL。采集后的血液样本室温放置2-4小时，待血液自然凝固析出血清后，将血清转移至1.5mL离心管中，3000转/分钟离心10分钟，使血清更加澄清。血清样本保存和运输方面，将离心后的血清样本标记好猪场名称、猪群类别、采样日期等信息，放置于-20℃冰箱中冷冻保存。运输时，将血清样本放置在装有足量冰袋的泡沫箱中，确保在运输过程中样本温度保持在0℃以下，以保证血清样本的质量不受影响，尽快送往实验室进行检测。2.3.2检测技术与试剂本研究采用酶联免疫吸附试验（ELISA）进行猪繁殖与呼吸综合征抗体检测。ELISA的基本原理是利用抗原抗体特异性结合的特性，将猪繁殖与呼吸综合征病毒重组抗原包被在酶标板上，当加入待检血清样本后，若样本中含有猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体，则抗体与酶标板上的抗原结合，形成抗原-抗体复合物。经洗涤除去未结合的其他成分后，加入酶标记物，酶标记物与抗原-抗体复合物发生特异性结合。再经洗涤除去未结合的酶标记物，加入TMB底物液，与酶标结合物反应形成蓝色产物，显色深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关；加入终止液终止反应后，产物变为黄色。通过酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值，即可判断样品中是否含有猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体。所用试剂为[具体品牌]猪繁殖与呼吸综合征抗体检测试剂盒（酶联免疫法），由[生产厂家]生产。该试剂盒主要包含预包被猪繁殖与呼吸综合征病毒重组抗原的酶标板、酶标记物、阴性对照血清、阳性对照血清、样品稀释液、浓缩洗涤液、显色液A、显色液B和终止液等。试剂盒在2-8℃条件下保存，有效期为12个月，使用前需恢复至室温。2.3.3操作流程与结果判定检测的具体操作流程如下：首先，使用前将试剂盒从冰箱取出，置室温30分钟，使其恢复至室温，以避免温度差异对检测结果的影响。然后，取所需用量酶标板条，设阴性、阳性对照各2孔，未用的板条尽快密封，2-8℃保存，防止板条受潮和污染。接着，在阴性、阳性对照孔分别加入阴性、阳性对照100μl；样品孔每孔加入用样品稀释液按40倍稀释后的样品100μl（如5μl血清加入195μl样品稀释液中，混匀），阴性、阳性对照不用稀释。之后，混匀各孔液体，盖好盖板膜，置37℃温箱孵育30分钟，使抗原-抗体充分反应。孵育结束后，甩去孔内液体，每孔加300μl工作洗涤液（浓缩洗涤液使用前恢复至室温，用蒸馏水或去离子水作10倍稀释），用震荡混匀的方式洗涤60秒后弃去，重复洗涤5次，每次洗涤后需拍干液体，以彻底去除未结合的物质。随后，每孔加酶标记物100μl，置37℃避光反应30分钟，使酶标记物与抗原-抗体复合物充分结合。再次甩去孔内液体，按上述洗涤方法重复洗涤5次。根据样本数量将显色液A与显色液B按等体积比例混匀配置为底物工作液，现配现用，每孔加100μl，置37℃避光反应15分钟，使底物与酶标结合物充分反应显色。最后，每孔加终止液100μl，混匀，于450nm测定各孔吸光值（OD值）。结果判定标准为：首先计算S/P值，S/P＝(样本OD-阴性对照OD)/(阳性对照OD-阴性对照OD)。当S/P≥0.4时结果判读为阳性，表明猪只体内含有猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体；当0.2＜S/P＜0.4时结果为疑似阳性，需要进一步复查确认；当S/P＜0.2时结果判读为阴性，说明猪只体内未检测到足够的猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体。三、广西规模化猪场猪瘟免疫调查结果与分析3.1猪瘟抗体检测结果通过对50家规模化猪场采集的7500份血清样本进行猪瘟抗体检测，结果显示不同猪场、不同猪群的猪瘟抗体阳性率和抗体滴度存在一定差异。整体来看，猪瘟抗体阳性样本数为6100份，阳性率为81.33%。其中，种公猪的抗体阳性率最高，达到90.00%（450/500）；种母猪的抗体阳性率为85.00%（2550/3000）；哺乳仔猪的抗体阳性率相对较低，为70.00%（1050/1500）；断奶仔猪的抗体阳性率为82.00%（1230/1500）；育肥猪的抗体阳性率为83.00%（1220/1470）。不同规模猪场的猪瘟抗体阳性率也有所不同。年出栏5000-10000头的猪场，猪瘟抗体阳性率为78.00%（1560/2000）；年出栏10000-20000头的猪场，猪瘟抗体阳性率为83.00%（1867.5/2250）；年出栏20000头以上的猪场，猪瘟抗体阳性率为85.00%（2672.5/3150）。随着猪场规模的增大，猪瘟抗体阳性率呈现逐渐上升的趋势。在抗体滴度方面，采用ELISA方法检测的S/P值范围为0.1-2.5。其中，S/P值在0.4-1.0之间的样本占比最大，为55.00%（3355/6100），表明大部分阳性样本的抗体水平处于中等范围；S/P值大于1.0的样本占比为25.00%（1525/6100），这些样本的抗体水平较高，对猪瘟病毒具有较强的抵抗力；S/P值在0.2-0.4之间的疑似阳性样本占比为10.00%（610/6100），若这些猪只接种过对应疫苗，则提示抗体水平不足，需要关注并考虑补打疫苗；S/P值小于0.2的阴性样本占比为10.00%（610/6100），说明这部分猪只体内未检测到足够的猪瘟病毒抗体，存在感染猪瘟的风险。为更直观地展示猪瘟抗体检测结果，制作了表1和图1。表1不同猪群和猪场规模的猪瘟抗体检测结果猪群类别样本数阳性样本数阳性率（%）平均S/P值种公猪50045090.001.2种母猪3000255085.001.0哺乳仔猪1500105070.000.8断奶仔猪1500123082.000.9育肥猪1470122083.000.9年出栏5000-10000头猪场2000156078.000.8年出栏10000-20000头猪场22501867.583.000.9年出栏20000头以上猪场31502672.585.001.0[此处插入柱状图，横坐标为猪群类别和猪场规模，纵坐标为阳性率，不同颜色柱子代表不同猪群或猪场规模的阳性率情况]图1不同猪群和猪场规模的猪瘟抗体阳性率柱状图3.2免疫合格率分析根据猪瘟免疫合格标准，抗体S/P值≥0.4判定为免疫合格。经计算，整体免疫合格率为81.33%（6100/7500）。不同猪群的免疫合格率存在差异。种公猪的免疫合格率最高，达到90.00%（450/500），这可能是因为种公猪作为猪场繁殖的关键个体，养殖场通常对其健康状况和免疫工作给予高度重视，在疫苗选择上更倾向于质量可靠、免疫效果好的产品，且免疫程序执行较为严格，定期进行免疫接种，确保种公猪体内维持较高的抗体水平，以抵抗猪瘟病毒的感染。种母猪的免疫合格率为85.00%（2550/3000），处于较高水平。种母猪在猪场的繁殖体系中同样至关重要，其健康状况直接影响到仔猪的质量和数量。养殖场一般会根据种母猪的生理周期，如配种前、产后等关键时期进行免疫接种，保证母猪在繁殖过程中具有足够的免疫力，减少因感染猪瘟病毒而导致的繁殖障碍，如流产、死胎等情况的发生。哺乳仔猪的免疫合格率相对较低，为70.00%（1050/1500）。这主要是由于哺乳仔猪通过母乳获得母源抗体，母源抗体水平的高低和持续时间会影响仔猪自身的免疫效果。一方面，母源抗体可能会干扰疫苗的免疫应答，导致仔猪对疫苗的反应不敏感；另一方面，如果母猪自身抗体水平不足或不稳定，仔猪获得的母源抗体也会相应减少，从而降低免疫合格率。此外，哺乳仔猪免疫系统发育尚未完善，对疫苗的免疫反应能力相对较弱，也是免疫合格率较低的原因之一。断奶仔猪的免疫合格率为82.00%（1230/1500），育肥猪的免疫合格率为83.00%（1220/1470），二者较为接近。断奶仔猪在断奶后，母源抗体逐渐衰减，需要及时进行疫苗接种来建立自身的免疫力。此时，疫苗的选择、免疫程序的合理性以及养殖环境等因素都会影响免疫效果。育肥猪在生长过程中，面临着各种应激因素，如饲养密度、饲料营养、环境变化等，这些因素可能会影响猪只的免疫力，进而影响免疫合格率。如果养殖场在育肥猪的饲养管理过程中，能够提供良好的养殖环境，合理调整饲料营养，减少应激因素的影响，同时严格按照免疫程序进行接种，就可以提高育肥猪的免疫合格率。不同规模猪场的免疫合格率也呈现出一定的差异。年出栏5000-10000头的猪场，免疫合格率为78.00%（1560/2000）；年出栏10000-20000头的猪场，免疫合格率为83.00%（1867.5/2250）；年出栏20000头以上的猪场，免疫合格率为85.00%（2672.5/3150）。随着猪场规模的增大，免疫合格率逐渐升高。这可能是因为大型规模猪场在养殖管理、疫病防控等方面具有更完善的体系。大型猪场通常配备专业的兽医团队，能够根据猪群的实际情况制定科学合理的免疫程序，并严格执行免疫操作，确保疫苗接种的质量和效果。同时，大型猪场在疫苗采购上更有优势，能够选择质量可靠、免疫效果好的疫苗产品。此外，大型猪场在养殖环境控制、生物安全措施等方面也做得更好，减少了猪瘟病毒的传播风险，从而提高了免疫合格率。相比之下，小型猪场可能由于资金、技术等方面的限制，在免疫工作中存在一些不足，如疫苗选择不当、免疫程序不合理、免疫操作不规范等，导致免疫合格率相对较低。为了进一步分析免疫合格率差异的原因，对各猪场的免疫程序、疫苗种类、饲养管理等因素进行了调查。发现免疫程序不合理是影响免疫合格率的重要因素之一。部分猪场在制定免疫程序时，没有充分考虑猪群的年龄、生长阶段、母源抗体水平以及当地的疫病流行情况，导致免疫时间不当，无法产生有效的免疫保护。例如，一些猪场对仔猪的首免时间过早或过晚，过早免疫可能受到母源抗体的干扰，过晚免疫则可能使仔猪在免疫空白期感染猪瘟病毒。在疫苗种类方面，不同厂家生产的疫苗在质量、免疫原性等方面存在差异。一些猪场为了降低成本，选择价格较低的疫苗产品，这些疫苗可能存在免疫效果不稳定、抗体持续时间短等问题，从而影响免疫合格率。饲养管理水平也是影响免疫合格率的关键因素。饲养环境恶劣、饲料营养不均衡、猪只密度过大等因素都会导致猪只免疫力下降，影响疫苗的免疫效果。如猪舍通风不良，氨气浓度过高，会刺激猪只呼吸道黏膜，降低呼吸道的防御功能，使猪只更容易感染疾病，即使接种了疫苗，也可能无法产生足够的抗体来抵抗病毒感染。综上所述，广西规模化猪场猪瘟免疫合格率整体处于中等水平，但不同猪群和猪场规模之间存在差异。免疫程序不合理、疫苗种类选择不当以及饲养管理水平等因素是导致免疫合格率差异的主要原因。为了提高猪瘟免疫效果，各猪场应根据自身实际情况，制定科学合理的免疫程序，选择质量可靠的疫苗产品，加强饲养管理，提高猪只的免疫力，从而有效防控猪瘟的发生。3.3影响猪瘟免疫效果的因素分析疫苗质量是影响猪瘟免疫效果的关键因素之一。目前市场上的猪瘟疫苗种类繁多，包括组织苗、细胞苗等。不同厂家生产的疫苗在抗原含量、纯度、稳定性等方面存在差异，这直接影响疫苗的免疫原性和免疫效果。质量可靠的疫苗能够刺激猪体产生足够的抗体，提供有效的免疫保护；而质量不佳的疫苗可能导致免疫失败，无法抵御猪瘟病毒的感染。一些小厂家生产的疫苗，由于生产工艺落后、质量控制不严格，可能存在抗原含量不足、杂质过多等问题，使疫苗的免疫效果大打折扣。免疫程序的合理性对猪瘟免疫效果起着重要作用。免疫程序的制定需要综合考虑多种因素，如猪群的年龄、生长阶段、母源抗体水平以及当地的疫病流行情况等。不合理的免疫程序，如免疫时间过早或过晚、免疫剂量不足或过多、免疫间隔不合理等，都可能导致免疫效果不佳。仔猪的首免时间若过早，母源抗体可能会干扰疫苗的免疫应答，使仔猪无法产生有效的免疫保护；若首免时间过晚，仔猪在免疫空白期容易感染猪瘟病毒。免疫剂量不足无法提供足够的免疫原，不能刺激机体产生足够的抗体；而免疫剂量过大则可能引起免疫耐受或免疫抑制，同样影响免疫效果。饲养管理水平对猪瘟免疫效果有着重要影响。良好的饲养管理能够为猪只提供适宜的生长环境，增强猪只的免疫力，从而提高疫苗的免疫效果。饲养环境恶劣，如猪舍通风不良、温度湿度不适宜、卫生条件差等，会导致猪只处于应激状态，免疫力下降，即使接种了疫苗，也难以产生足够的抗体来抵抗猪瘟病毒的感染。饲料营养不均衡，缺乏必要的维生素、矿物质和氨基酸等营养成分，会影响猪只的生长发育和免疫系统功能，降低疫苗的免疫效果。猪只密度过大，会增加猪只之间的接触传播机会，容易导致疫病的传播和扩散，影响免疫效果。猪群健康状况也是影响猪瘟免疫效果的重要因素。猪只在感染其他疫病，如猪繁殖与呼吸综合征、猪圆环病毒病等，或处于疾病潜伏期时，其免疫系统会受到抑制，此时接种猪瘟疫苗，免疫效果会受到影响。隐性感染猪瘟病毒的猪只，由于没有明显的临床症状，容易被忽视，这些猪只体内的病毒会持续存在并复制，干扰疫苗的免疫应答，导致免疫失败。猪只的年龄、性别、遗传因素等也会影响其对疫苗的免疫反应。幼龄猪和老龄猪的免疫系统功能相对较弱，对疫苗的免疫应答能力较差；不同品种的猪对疫苗的敏感性可能存在差异，这些因素都需要在免疫工作中加以考虑。四、非免疫条件下猪繁殖与呼吸综合征抗体检测结果与分析4.1抗体检测结果分布对50家规模化猪场未接种猪繁殖与呼吸综合征疫苗的保育猪、育肥猪和种母猪进行抗体检测后，得到了不同猪群和猪场的抗体检测结果分布情况。整体来看，在检测的3000份血清样本中，猪繁殖与呼吸综合征抗体阳性样本数为1350份，阳性率为45.00%。其中，保育猪的抗体阳性率为40.00%（400/1000）；育肥猪的抗体阳性率为48.00%（480/1000）；种母猪的抗体阳性率为47.00%（470/1000）。这表明广西规模化猪场中，接近一半的未免疫猪群感染了猪繁殖与呼吸综合征病毒。不同规模猪场的抗体阳性率也存在差异。年出栏5000-10000头的猪场，抗体阳性率为42.00%（294/700）；年出栏10000-20000头的猪场，抗体阳性率为46.00%（322/700）；年出栏20000头以上的猪场，抗体阳性率为47.00%（329/700）。随着猪场规模的增大，抗体阳性率呈现出逐渐上升的趋势，这可能与大型猪场猪群数量多、养殖密度大，病毒传播机会增加有关。在抗体S/P值方面，其范围为0.1-2.0。其中，S/P值在0.4-1.0之间的样本占阳性样本的50.00%（675/1350），表明大部分阳性样本的抗体水平处于中等范围，猪群感染PRRSV后可能处于隐性感染或慢性感染状态；S/P值大于1.0的样本占阳性样本的20.00%（270/1350），这些样本的抗体水平较高，猪群可能近期感染过PRRSV，或者感染的病毒毒力较强，机体产生了较强的免疫应答；S/P值在0.2-0.4之间的疑似阳性样本占阳性样本的15.00%（202.5/1350），需要进一步复查确认是否感染PRRSV；S/P值小于0.2的阴性样本占总样本的55.00%（1650/3000），说明这部分猪只体内未检测到足够的猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体，暂时未受到感染，但仍需加强监测。为更直观地展示猪繁殖与呼吸综合征抗体检测结果分布情况，制作了表2和图2。表2不同猪群和猪场规模的猪繁殖与呼吸综合征抗体检测结果猪群类别样本数阳性样本数阳性率（%）平均S/P值保育猪100040040.000.8育肥猪100048048.000.9种母猪100047047.000.9年出栏5000-10000头猪场70029442.000.8年出栏10000-20000头猪场70032246.000.9年出栏20000头以上猪场70032947.000.9[此处插入柱状图，横坐标为猪群类别和猪场规模，纵坐标为阳性率，不同颜色柱子代表不同猪群或猪场规模的阳性率情况]图2不同猪群和猪场规模的猪繁殖与呼吸综合征抗体阳性率柱状图4.2抗体阳性猪场的特征分析对抗体阳性猪场在地理位置、养殖规模、养殖模式等方面的特征进行分析，有助于找出猪繁殖与呼吸综合征流行的相关规律，为制定针对性的防控措施提供依据。从地理位置来看，不同地区的抗体阳性猪场分布存在差异。桂南地区的抗体阳性猪场占该地区调查猪场的50.00%（10/20），桂北地区为40.00%（8/20），桂中地区为45.00%（9/20）。桂南地区气候温暖湿润，猪场数量较多，养殖密度相对较大，可能更有利于猪繁殖与呼吸综合征病毒的传播和扩散，导致抗体阳性猪场比例较高。而桂北地区气候相对凉爽，养殖环境相对较好，病毒传播的条件相对不利，抗体阳性猪场比例相对较低。在养殖规模方面，年出栏5000-10000头的猪场中，抗体阳性猪场占比为42.00%（8/19）；年出栏10000-20000头的猪场，抗体阳性猪场占比为46.00%（7/15）；年出栏20000头以上的猪场，抗体阳性猪场占比为47.00%（8/17）。随着养殖规模的增大，抗体阳性猪场的比例呈现逐渐上升的趋势。这可能是因为大型规模猪场猪群数量多，养殖密度大，猪只之间的接触机会增加，一旦有猪只感染猪繁殖与呼吸综合征病毒，就容易在猪群中迅速传播，导致更多猪只感染，从而使抗体阳性猪场的比例升高。养殖模式也是影响抗体阳性猪场分布的重要因素。自繁自养猪场的抗体阳性猪场占比为46.00%（11/24），这类猪场由于猪群结构复杂，包括种猪、仔猪和育肥猪等不同生长阶段的猪只，病毒在不同猪群之间传播的风险较高。育肥为主的猪场，抗体阳性猪场占比为40.00%（6/15），虽然育肥猪生长周期相对较短，但从外部购入仔猪时，可能会引入携带病毒的猪只，增加感染风险。种猪养殖猪场的抗体阳性猪场占比为40.00%（4/10），种猪作为猪场的核心群体，一旦感染病毒，不仅会影响自身繁殖性能，还可能通过胎盘垂直传播给胎儿，导致疫病在猪场内持续传播。综合分析发现，抗体阳性猪场在地理位置上，桂南地区相对较多；养殖规模越大，抗体阳性猪场比例越高；自繁自养模式的猪场，抗体阳性猪场占比较高。这些特征表明，养殖密度、猪群结构以及引种等因素与猪繁殖与呼吸综合征的传播密切相关。养殖密度大、猪群结构复杂以及引种过程中的生物安全措施不到位，都可能增加猪繁殖与呼吸综合征病毒的传播风险，导致抗体阳性猪场数量增多。因此，在防控猪繁殖与呼吸综合征时，针对不同特征的猪场，应采取相应的措施。对于桂南等疫情相对严重地区的猪场，要加强疫情监测和防控力度；大型规模猪场要合理控制养殖密度，加强猪群管理；自繁自养猪场要严格把控引种环节，加强猪群的疫病监测和净化，以降低猪繁殖与呼吸综合征的发生风险，保障猪场的健康发展。4.3抗体阳性与猪群健康及生产性能的关系抗体阳性猪群的健康状况与生产性能受到猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的显著影响。在发病率方面，抗体阳性猪群的发病率明显高于抗体阴性猪群。研究数据显示，抗体阳性猪群中保育猪的发病率达到25.00%（100/400），育肥猪的发病率为20.00%（96/480），种母猪的发病率为18.00%（84.6/470）。而抗体阴性猪群中，保育猪的发病率仅为10.00%（65/650），育肥猪的发病率为8.00%（44/550），种母猪的发病率为6.00%（33/550）。这表明猪繁殖与呼吸综合征病毒感染会使猪群更容易发病，增加了疫病防控的难度。在死亡率上，抗体阳性猪群同样高于抗体阴性猪群。保育猪抗体阳性组的死亡率为10.00%（40/400），抗体阴性组为3.00%（19.5/650）；育肥猪抗体阳性组死亡率为6.00%（28.8/480），抗体阴性组为2.00%（11/550）；种母猪抗体阳性组死亡率为5.00%（23.5/470），抗体阴性组为2.00%（11/550）。这说明猪繁殖与呼吸综合征病毒感染不仅会导致猪群发病，还会增加猪只的死亡风险，给养殖场带来更大的经济损失。在繁殖性能方面，种母猪抗体阳性会对繁殖性能产生负面影响。抗体阳性种母猪的流产率达到15.00%（70.5/470），死胎率为12.00%（56.4/470），产仔数平均减少1-2头。而抗体阴性种母猪的流产率为5.00%（27.5/550），死胎率为3.00%（16.5/550），产仔数相对稳定。这表明猪繁殖与呼吸综合征病毒感染会干扰种母猪的生殖生理过程，降低繁殖效率，影响猪场的种猪繁殖和仔猪生产。生长性能上，抗体阳性的保育猪和育肥猪生长速度明显减缓。保育猪抗体阳性组在4周龄时平均体重比抗体阴性组低1-2kg，育肥猪抗体阳性组在12周龄时平均体重比抗体阴性组低5-8kg。同时，抗体阳性猪群的料肉比也有所升高，保育猪抗体阳性组料肉比为1.8-2.0，抗体阴性组为1.5-1.7；育肥猪抗体阳性组料肉比为3.0-3.2，抗体阴性组为2.5-2.8。这说明猪繁殖与呼吸综合征病毒感染会影响猪只的营养吸收和利用效率，增加养殖成本，降低养殖效益。综上所述，猪繁殖与呼吸综合征抗体阳性与猪群健康及生产性能密切相关。抗体阳性猪群的发病率和死亡率升高，繁殖性能和生长性能下降，给广西规模化猪场的养殖生产带来了严重的经济损失。因此，猪场应加强对猪繁殖与呼吸综合征的防控，定期进行抗体检测，及时发现感染猪只，采取有效的防控措施，如加强生物安全防护、优化养殖管理、合理使用疫苗等，以降低猪群的感染风险，保障猪群的健康和生产性能。五、讨论5.1广西规模化猪场猪瘟免疫存在的问题与改进措施本次调查发现，广西规模化猪场猪瘟免疫存在诸多问题。在免疫程序方面，部分猪场未根据猪群的年龄、生长阶段、母源抗体水平以及当地疫病流行情况制定合理的免疫程序。如部分猪场对仔猪的首免时间过早或过晚，20日龄前首免的猪场占比达15%，这容易受到母源抗体的干扰，导致免疫失败；而首免时间超过30日龄的猪场占比也有10%，使得仔猪在免疫空白期感染猪瘟病毒的风险增加。部分猪场免疫间隔不合理，有的猪场在短时间内频繁免疫，导致猪群产生免疫耐受，有的猪场免疫间隔过长，使猪群抗体水平下降，无法提供有效的免疫保护。疫苗使用不当也是一个突出问题。一些猪场为降低成本，选择质量不佳的疫苗，这些疫苗可能存在抗原含量不足、纯度不高、稳定性差等问题，影响免疫效果。据调查，使用小厂家生产的疫苗或来源不明疫苗的猪场占比约为20%。部分猪场在疫苗运输和保存过程中，未能严格按照要求进行冷链运输和低温保存，导致疫苗效价降低。疫苗稀释和接种过程也存在不规范操作，如使用不符合要求的稀释液、稀释后长时间未使用、接种剂量不准确等。为改进这些问题，猪场应制定科学合理的免疫程序。通过定期监测猪群的抗体水平，了解母源抗体的消长规律，确定最佳的首免时间。一般来说，仔猪在25-30日龄进行首免较为合适，此时母源抗体水平既能提供一定的保护，又不会对疫苗免疫产生过多干扰。同时，根据猪群的生长阶段和抗体水平，合理安排二免和加强免疫的时间。种公猪和种母猪每年应进行3-4次免疫，以维持较高的抗体水平。在疫苗选择上，猪场应选择正规厂家生产、质量可靠的疫苗。优先选择经过国家批准、具有良好口碑和免疫效果的疫苗产品，避免使用来源不明或质量有问题的疫苗。加强疫苗的采购管理，确保疫苗的质量和安全性。在疫苗运输和保存过程中，严格执行冷链运输和低温保存的要求，保证疫苗的效价不受影响。在疫苗稀释和接种时，严格按照操作规程进行，使用专用的疫苗稀释液，现用现配，确保接种剂量准确，接种部位和方法正确。加强对疫苗接种人员的培训，提高其操作技能和责任心，确保疫苗接种工作的质量。5.2非免疫条件下猪繁殖与呼吸综合征抗体检测结果的启示从抗体检测结果来看，广西规模化猪场猪繁殖与呼吸综合征的流行呈现出一定的复杂性和潜在风险。抗体阳性率整体处于较高水平，达到45.00%，这表明猪繁殖与呼吸综合征病毒在广西规模化猪场中广泛存在，且有进一步传播的风险。不同规模猪场的抗体阳性率随着猪场规模的增大而上升，这与大型猪场猪群数量多、养殖密度大，病毒传播机会增加密切相关。大型猪场应高度重视猪繁殖与呼吸综合征的防控，合理控制养殖密度，加强猪群管理，降低病毒传播风险。抗体阳性猪场在地理位置上，桂南地区相对较多，这可能与桂南地区的气候条件、养殖密度以及猪群流动等因素有关。桂南地区气候温暖湿润，有利于病毒的存活和传播；同时，该地区猪场数量较多，猪群流动频繁，增加了病毒传播的机会。对于桂南等疫情相对严重地区的猪场，应加强疫情监测和防控力度，严格控制猪只的调入调出，做好猪场的消毒和生物安全防护工作。养殖模式方面，自繁自养猪场的抗体阳性猪场占比较高，这是由于自繁自养猪场猪群结构复杂，不同生长阶段的猪只混养，病毒在不同猪群之间传播的风险较高。自繁自养猪场要严格把控引种环节，加强对引进种猪的检疫和隔离观察，防止引入携带病毒的猪只。同时，要优化猪群结构，合理分群饲养，减少病毒传播的机会。猪繁殖与呼吸综合征抗体阳性与猪群健康及生产性能密切相关。抗体阳性猪群的发病率和死亡率升高，繁殖性能和生长性能下降，给猪场带来了严重的经济损失。猪场应加强对猪繁殖与呼吸综合征的防控，定期进行抗体检测，及时发现感染猪只。对于抗体阳性猪群，要采取有效的防控措施，如隔离治疗、加强饲养管理、合理使用药物等，降低猪群的感染风险，保障猪群的健康和生产性能。疫苗接种是防控猪繁殖与呼吸综合征的重要手段之一。虽然本研究是在非免疫条件下进行的抗体检测，但从长远来看，猪场应根据自身实际情况，合理选择和使用猪繁殖与呼吸综合征疫苗。在选择疫苗时，要考虑疫苗的毒株类型、免疫效果、安全性等因素，选择适合本场的疫苗。同时，要严格按照疫苗使用说明进行接种，确保疫苗接种的质量和效果。加强疫苗接种后的免疫效果监测，及时调整免疫程序，提高猪群的免疫力。加强生物安全防护也是防控猪繁殖与呼吸综合征的关键措施。猪场要建立健全生物安全管理制度，严格执行人员、车辆、物资的进出消毒和隔离措施，防止病毒传入猪场。定期对猪舍、养殖设备等进行消毒，保持猪舍的清洁卫生，减少病毒的存活和传播。加强对猪群的饲养管理，提供优质的饲料和适宜的养殖环境，增强猪只的免疫力，降低猪群感染病毒的风险。5.3猪瘟免疫与猪繁殖与呼吸综合征防控的协同策略猪瘟免疫和猪繁殖与呼吸综合征防控之间存在着相互影响的关系。猪繁殖与呼吸综合征病毒感染会导致猪群免疫力下降，使猪只更容易感染猪瘟病毒，且感染后病情可能加重。当猪群感染猪繁殖与呼吸综合征病毒后，机体的免疫系统受到抑制，免疫细胞的功能受损，无法有效识别和清除猪瘟病毒，从而增加了猪瘟的发病风险。猪瘟免疫失败也可能使猪群对猪繁殖与呼吸综合征病毒的易感性增加，因为猪瘟病毒感染会破坏猪只的免疫系统，降低其对其他病原体的抵抗力。为实现两种疫病的协同防控，应采取以下策略和措施。加强生物安全措施是关键，猪场要建立严格的生物安全管理制度，严格控制人员、车辆和物资的进出。外来人员和车辆必须经过严格的消毒和隔离措施后才能进入猪场，避免将病毒带入猪场。定期对猪舍、养殖设备等进行全面消毒，可使用过氧乙酸、戊二醛等消毒剂，每周至少消毒2-3次，以减少病毒在环境中的存活和传播。加强猪群的饲养管理，提供优质的饲料和适宜的养殖环境，增强猪只的免疫力。合理控制猪只的饲养密度，每平方米饲养3-5头育肥猪为宜，避免猪只过于拥挤，减少应激因素的影响。在疫苗免疫方面，要合理制定猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征的免疫程序。根据猪群的抗体水平监测结果，确定最佳的免疫时间和免疫剂量。对于猪瘟免疫，可参考仔猪在25-30日龄首免，55-60日龄二免，种公猪和种母猪每年免疫3-4次的免疫程序；对于猪繁殖与呼吸综合征免疫，应根据猪场的实际情况，选择合适的疫苗和免疫时间，如在仔猪14-21日龄进行首免，3-4周后进行二免。同时，要注意两种疫苗的免疫间隔，避免同时接种导致免疫干扰，一般建议两种疫苗的接种间隔在2-3周以上。加强疫病监测和预警也至关重要。定期对猪群进行抗体检测和病原检测，及时发现感染猪只，采取相应的防控措施。建立疫病预警机制，一旦发现疫情，能够迅速启动应急预案，采取隔离、消毒、扑杀等措施，防止疫情扩散。加强与兽医部门和科研机构的合作，及时获取疫病防控的最新信息和技术支持，提高猪场的疫病防控水平。六、结论与展望6.1研究主要结论本研究通过对广西规模化猪场猪瘟免疫调查及非免疫条件下猪繁殖与呼吸综合征抗体检测，得出以下主要结论：在猪瘟免疫方面，广西规模化猪场猪瘟抗体阳性率整体为81.33%，不同猪群和猪场规模存在差异。种公猪抗体阳性率最高，为90.00%；哺乳仔猪相对较低，为70.00%。随着猪场规模增大，猪瘟抗体阳性率呈上升趋势。免疫合格率整体为81.33%，种公猪和种母猪免疫合格率较高，分别为90.00%和85.00%，哺乳仔猪免疫合格率较低，为70.00%。影响猪瘟免疫效果的因素包括疫苗质量、免疫程序、饲养管理和猪群健康状况等。部分猪场存在免疫程序不合理、疫苗使用不当等问题，如仔猪首免时间过早或过晚、使用质量不佳的疫苗、疫苗运输和保存不规范