(2025年)空气、物表培养采集方法及注意事项测试题附答案

(2025年)空气、物表培养采集方法及注意事项测试题附答案一、单项选择题（每题2分，共30分）1.采用自然沉降法进行空气微生物采样时，II类环境（如普通手术室）的采样高度应控制在A.0.8-1.0米B.1.0-1.2米C.1.2-1.5米D.1.5-1.8米2.对面积为20㎡的新生儿病房进行物表采样时，若采用5cm×5cm模板，需至少选择几个采样点？A.2个B.3个C.4个D.5个3.浮游菌采样法中，采样流量为100L/min的采样器对III类环境（如普通门急诊）采样时，单次采样时间应不低于A.5分钟B.10分钟C.15分钟D.20分钟4.进行物表采样时，若被采表面曾使用含氯消毒剂消毒，棉拭子需浸润的中和剂应为A.0.1%蛋白胨水B.0.3%吐温-80生理盐水C.硫代硫酸钠溶液D.卵磷脂吐温-80中和液5.空气采样前，若环境为有人状态，需关闭门窗的时间是A.10分钟B.20分钟C.30分钟D.60分钟6.物表采样时，棉拭子涂抹的顺序应为A.由外到内，单向涂抹B.由内到外，环形涂抹C.随机区域，重点覆盖D.上下垂直，交叉涂抹7.采用沉降法采样空气时，培养皿暴露时间应为A.5分钟B.10分钟C.15分钟D.30分钟8.对医疗设备表面（如监护仪按钮）采样时，若表面不规则，应优先选择的采样方法是A.棉拭子直接涂抹法B.接触碟压印法C.冲洗液收集法D.擦拭洗脱法9.空气采样后，培养皿需在多长时间内送达实验室？A.0.5小时B.1小时C.2小时D.4小时10.物表采样时，若采样面积为25cm²（5cm×5cm），棉拭子应浸润的液体量为A.0.5mlB.1mlC.2mlD.3ml11.判定II类环境空气菌落总数合格的标准（沉降法）是A.≤2CFU/皿B.≤4CFU/皿C.≤6CFU/皿D.≤8CFU/皿12.浮游菌采样法中，采样器的采样头应距离墙面的最小距离是A.0.1米B.0.2米C.0.3米D.0.5米13.物表采样时，若被采表面有明显污渍，正确的处理方式是A.直接采样，记录污渍情况B.用生理盐水擦拭后采样C.用75%酒精消毒后采样D.更换采样区域14.空气采样时，若环境温度为28℃，相对湿度为75%，对结果的影响是A.无影响B.可能导致菌落数偏低C.可能导致菌落数偏高D.需重新调整温湿度后采样15.物表采样后，棉拭子需剪去手接触部分，放入含中和液的试管中，试管需标注的信息不包括A.采样时间B.采样者姓名C.被采物体名称D.中和液浓度二、填空题（每空1分，共20分）1.空气微生物采样的两种主要方法为__________和__________，其中__________更适用于洁净度要求高的环境。2.物表采样时，若被采表面≤100cm²，应__________采样；若＞100cm²，取__________的代表性区域采样。3.自然沉降法布点原则：室内面积≤30㎡时，设__________个采样点（对角线内中外三点）；＞30㎡时，设__________个采样点（东、南、西、北、中五点）。4.浮游菌采样法中，采样器的高度应与__________高度一致，通常为__________米。5.物表采样使用的棉拭子需经__________处理，采样后需在__________小时内完成检测，若延迟需冷藏保存（__________℃），但不超过__________小时。6.空气采样前，环境若为无人状态，需关闭门窗__________分钟；若为有人状态，需在__________操作30分钟后采样。7.判定物表菌落总数合格的标准：I类环境（如层流手术室）≤__________CFU/cm²，II类环境≤__________CFU/cm²，III类环境≤__________CFU/cm²。8.采样过程中，操作人员需穿戴__________、__________和__________，避免自身微生物污染样本。三、简答题（每题8分，共40分）1.简述自然沉降法空气采样的具体操作步骤。2.物表采样时，如何选择中和剂？请列举3种常见消毒剂对应的中和剂。3.空气采样后，若培养结果出现大量真菌菌落，可能的原因有哪些？4.简述浮游菌采样法与自然沉降法的主要区别及适用场景。5.物表采样中，如何避免交叉污染？需采取哪些措施？四、案例分析题（每题15分，共30分）案例1：某医院ICU病房采用自然沉降法进行空气采样，共设置5个采样点（面积40㎡），培养48小时后，其中2个培养皿菌落数分别为6CFU和7CFU，其余3个为2-3CFU。已知ICU属于II类环境，判定该次采样是否合格？并分析可能的操作失误。案例2：某实验室对手术器械表面进行采样，使用棉拭子浸润生理盐水后涂抹25cm²区域，剪去手接触部分放入含生理盐水的试管中，震荡洗脱后取1ml接种平皿，培养48小时后菌落数为15CFU。但根据标准，手术器械属于I类环境，合格标准为≤0.5CFU/cm²。请指出操作中的错误，并计算实际菌落数是否合格。答案一、单项选择题1.C2.B3.A4.C5.C6.B7.D8.B9.C10.B11.B12.C13.A14.C15.D二、填空题1.自然沉降法（沉降法）、浮游菌采样法、浮游菌采样法2.全部、100cm²3.3、54.呼吸带、1.2-1.55.高压灭菌、2、2-8、246.10、人员7.0.25、5、108.无菌手套、口罩、帽子三、简答题1.操作步骤：①采样前关闭门窗30分钟（无人状态）或人员停止活动30分钟（有人状态）；②根据房间面积布点（≤30㎡设3点，＞30㎡设5点），高度1.2-1.5米；③打开普通营养琼脂平皿（直径9cm），盖扣于旁，暴露30分钟；④盖好平皿，及时送检；⑤36±1℃培养48小时，计数菌落数。2.中和剂选择依据：根据被采表面使用的消毒剂种类。常见对应关系：①含氯/过氧化物消毒剂→硫代硫酸钠溶液；②季铵盐类消毒剂→吐温-80+卵磷脂；③醛类消毒剂→甘氨酸溶液；④醇类消毒剂→吐温-80。3.可能原因：①采样环境湿度＞70%，利于真菌生长；②培养皿或培养基被真菌污染（如未彻底灭菌）；③采样后运输时间过长（＞2小时）且未冷藏，真菌大量繁殖；④环境中有发霉物品（如地毯、织物）未及时清理。4.主要区别：①原理：沉降法利用微生物自然沉降至平皿，浮游菌法通过采样器主动吸入空气过滤；②准确性：浮游菌法更精准（可定量），沉降法受气流影响大；③适用场景：浮游菌法用于洁净手术室、层流病房等高精度环境；沉降法用于普通病房、门急诊等常规监测。5.避免交叉污染措施：①采样前用75%酒精消毒采样工具（如模板、镊子）；②每采一个物体后更换棉拭子；③采样顺序从清洁区到污染区（如先采桌面，后采地面）；④操作人员避免手接触棉拭子头部；⑤采样时平皿盖避免长时间暴露，减少环境微生物落入。四、案例分析题案例1：判定：不合格（II类环境标准≤4CFU/皿，2个培养皿分别为6和7CFU，超出标准）。可能操作失误：①采样前未关闭门窗30分钟（人员活动未停止）；②培养皿暴露时间不足（应30分钟，可能提前收回）；③采样高度不符合（低于1.2米或高于1.5米，导致微生物沉降量异常）；④培养基配制错误（营养不足或pH偏差）；⑤培养条件未达标（温度＜35℃或时间＜48小时）。案例2：操作错误：①手术器械属于I类环境，应使用含中和剂的洗脱液（生理盐水无法中和可能残留的消毒剂，导致部分细菌被抑制，结