2025 年大学生物技术（生物技术实验）上学期期末测试卷

2025年大学生物技术（生物技术实验）上学期期末测试卷

（考试时间：90分钟满分100分）班级______姓名______一、选择题（总共10题，每题3分，每题只有一个正确答案，请将正确答案填写在括号内）1.在生物技术实验中，用于核酸分离与纯化的常用方法是（）A.离子交换层析B.亲和层析C.凝胶过滤层析D.离心法2.以下哪种试剂常用于蛋白质定量分析（）A.双缩脲试剂B.斐林试剂C.碘液D.苏丹Ⅲ染液3.进行PCR反应时，需要的酶是（）A.DNA聚合酶B.RNA聚合酶C.限制性内切酶D.连接酶4.细胞培养过程中，常用的培养基是（）A.肉汤培养基B.马铃薯培养基C.合成培养基D.半合成培养基5.用于检测DNA片段的常用方法是（）A.聚丙烯酰胺凝胶电泳B.琼脂糖凝胶电泳C.SDSD.双向电泳6.蛋白质印迹技术中，用于检测蛋白质的显色剂是（）A.溴酚蓝B.考马斯亮蓝C.二氨基联苯胺D.伊红7.在基因克隆实验中，常用的载体是（）A.质粒B.噬菌体C.病毒D.以上都是8.以下哪种技术可用于基因表达分析（）A.NorthernblotB.WesternblotC.SouthernblotD.原位杂交9.生物技术实验中，常用的灭菌方法是（）A.干热灭菌B.湿热灭菌C.过滤灭菌D.以上都是10.用于细胞固定的常用试剂是（）A.甲醛B.乙醇C.丙酮D.以上都是二、多项选择题（总共5题，每题4分，每题有两个或两个以上正确答案，请将正确答案填写在括号内，多选、少选或错选均不得分）1.生物技术实验中常用的缓冲液有（）A.Tris-HCl缓冲液B.PBS缓冲液C.柠檬酸缓冲液D.醋酸缓冲液2.以下哪些仪器可用于核酸定量分析（）A.紫外可见分光光度计B.荧光定量PCR仪C.凝胶成像系统D.离心机3.蛋白质纯化过程中常用的方法有（）A.盐析B.透析C.离子交换层析D.亲和层析4.基因工程实验中，常用的工具酶有（）A.限制性内切酶B.DNA连接酶C.DNA聚合酶D.逆转录酶5.细胞培养过程中需要注意的事项有（）A.无菌操作B.合适的培养基C.适宜的温度和pHD.定期传代三、判断题（总共10题，每题2分，请判断下列说法的正误，正确的打“√”，错误的打“×”）1.所有的核酸都可以通过凝胶电泳进行分离和检测。（）2.蛋白质定量分析只能使用一种方法进行。（）3.PCR反应中，引物的设计对扩增结果没有影响。（）4.细胞培养过程中，不需要添加血清。（）5.基因克隆实验中，载体的选择不重要。（）6.蛋白质印迹技术只能检测蛋白质的分子量。（）7.生物技术实验中，所有的试剂都需要灭菌。（）8.用于检测DNA的探针可以是DNA、RNA或蛋白质。（）9.细胞固定后，就不能再进行其他实验操作了。（）10.基因表达分析只能通过定量PCR技术进行。（）四、简答题（总共3题，每题10分，请简要回答下列问题）1.请简述核酸分离与纯化的主要步骤及原理。2.蛋白质印迹技术的基本原理是什么？有哪些应用？3.简述基因克隆的基本流程及关键步骤。五、实验设计题（总共1题，每题20分）设计一个实验方案，从植物组织中提取总RNA，并进行反转录合成cDNA。要求写出实验原理、主要试剂及仪器、实验步骤。答案：一、选择题1.D2.A3.A4.C5.B6.C7.D8.A9.D10.D二、多项选择题1.ABCD2.ABC3.ABCD4.ABCD5.ABCD三、判断题1.×2.×3.×4.×5.×6.×7.×8.×9.×10.×四、简答题1.核酸分离与纯化主要步骤包括破碎细胞、去除杂质、沉淀核酸等。原理是利用核酸与其他生物大分子在溶解性、电荷等方面的差异，通过离心、层析等方法将核酸分离出来。2.蛋白质印迹技术基本原理是将蛋白质从凝胶转移到固相膜上，然后用特异性抗体进行检测。应用包括蛋白质定性定量分析、蛋白质分子量测定、蛋白质相互作用研究等。3.基因克隆基本流程包括获取目的基因、选择载体、连接目的基因与载体、转化宿主细胞、筛选阳性克隆。关键步骤有目的基因的获取和载体的选择与构建。五、实验设计题实验原理：利用RNA提取试剂裂解植物组织细胞，释放出总RNA，通过一系列步骤去除杂质得到纯净总RNA，再以总RNA为模板，利用反转录酶合成cDNA。主要试剂及仪器：植物RNA提取试剂盒、反转录试剂盒、离心机、移液器、PCR仪等。实验步骤