合成生物基因编辑工程师岗位招聘考试试卷及答案

合成生物基因编辑工程师岗位招聘考试试卷及答案一、填空题（每题1分，共10分）1.CRISPR-Cas9系统中引导Cas9切割靶DNA的RNA是______。答案：sgRNA（单导向RNA）2.Ⅱ型限制酶识别的回文序列通常为______个碱基对。答案：4-63.基因编辑常用的非病毒载体是______。答案：质粒载体4.PCR扩增的热稳定DNA聚合酶是______。答案：Taq酶5.实现C→T转换的碱基编辑器是______。答案：CBE（胞嘧啶碱基编辑器）6.合成启动子的核心元件包括TATA盒和______。答案：转录起始位点（TSS）7.植物基因转化常用______介导法。答案：农杆菌8.第二代测序技术的代表是______测序。答案：Illumina9.基因转录后调控方式包括可变剪接和______。答案：RNA干扰10.合成生物学核心是“设计-构建-测试-______”循环。答案：学习二、单项选择题（每题2分，共20分）1.CRISPR-Cas9中PAM序列的作用是（）A.引导sgRNA结合B.识别切割标志C.稳定Cas9D.促进修复答案：B2.无需PAM序列的基因编辑工具是（）A.Cas9B.TALENC.ZFND.CBE答案：B3.AAV载体的特点是（）A.随机整合基因组B.免疫原性高C.可递送大片段D.无致病性答案：D4.检测基因编辑突变的常用方法是（）A.琼脂糖电泳B.Sanger测序C.蛋白印迹D.ELISA答案：B5.合成代谢途径“前体充足”属于（）A.途径选择B.酶学优化C.调控优化D.宿主适配答案：A6.合成生物学常用宿主不包括（）A.大肠杆菌B.酵母菌C.CHO细胞D.噬菌体答案：D7.RNA干扰的核心分子是（）A.siRNAB.miRNAC.shRNAD.以上都是答案：A8.先导编辑（PE）的优势是（）A.无需PAMB.任意碱基替换C.脱靶为0D.编辑大片段答案：B9.禁止的基因编辑应用是（）A.体细胞治疗B.生殖细胞编辑C.肿瘤编辑D.遗传病治疗答案：B10.Cas13系统的作用是（）A.编辑DNAB.编辑RNAC.切割双链DNAD.调控表达答案：B三、多项选择题（每题2分，共20分）1.基因编辑工具包括（）A.CRISPR-CasB.TALENC.ZFND.碱基编辑器答案：ABCD2.合成生物学关键技术有（）A.基因合成B.编辑C.调控D.高通量测序答案：ABCD3.载体必需元件包括（）A.启动子B.终止子C.抗性标记D.复制原点答案：ABCD4.脱靶效应影响因素有（）A.sgRNA长度B.PAM特异性C.Cas9浓度D.靶位点结构答案：ABCD5.代谢途径优化方法有（）A.途径工程B.代谢流分析C.蛋白工程D.转录调控答案：ABCD6.细胞转化方法有（）A.电穿孔B.脂质体转染C.农杆菌介导D.基因枪答案：ABCD7.CRISPR衍生技术包括（）A.BEB.PEC.Cas13RNA编辑D.CRISPRi答案：ABCD8.合成生物学应用领域有（）A.医药B.农业C.能源D.环境治理答案：ABCD9.基因编辑伦理问题涉及（）A.生殖细胞编辑B.基因增强C.专利D.知情同意答案：ABCD10.合成启动子设计策略有（）A.组合转录因子位点B.调整TATA盒C.引入增强子D.优化TSS答案：ABCD四、判断题（每题2分，共20分）1.Cas9只能编辑DNA不能编辑RNA。（）答案：×2.ZFN识别序列是回文结构。（）答案：×3.AAV可整合到AAVS1特定位点。（）答案：√4.PCR只能扩增已知序列。（）答案：×5.合成启动子必须含TATA盒。（）答案：×6.脱靶效应可完全避免。（）答案：×7.TALEN识别模块含34个氨基酸重复。（）答案：√8.合成生物学核心是DBTL循环。（）答案：√9.RNAi只能抑制不能敲除基因。（）答案：√10.基因编辑仅用于医药领域。（）答案：×五、简答题（每题5分，共20分）1.简述CRISPR-Cas9编辑原理。答案：CRISPR-Cas9源于细菌免疫。sgRNA的5’端互补靶DNA，3’端结合Cas9；Cas9识别靶DNA的PAM（NGG），在PAM上游切割双链DNA（DSB）；细胞通过NHEJ修复易产生插入/缺失（基因敲除），通过HDR可整合外源DNA（基因敲入/定点突变）。2.如何降低脱靶效应？答案：①优化sgRNA：选择高特异性靶序列，控制长度18-20nt；②用高保真Cas9变体（如HF1）；③控制Cas9/sgRNA浓度；④用双切口酶（需两个sgRNA）；⑤结合GUIDE-seq等检测筛选低脱靶体系。3.常用基因调控元件及作用？答案：①启动子：结合RNA聚合酶启动转录；②终止子：终止转录；③增强子：增强启动子活性；④绝缘子：阻断基因间干扰；⑤RBS：结合核糖体启动翻译；⑥调控因子（转录因子、小RNA）：响应信号调控表达。4.AAV载体的优势？答案：①免疫原性低，无致病性；②可改造衣壳实现组织靶向；③不整合/低频率整合特定位点，安全；④高效转导分裂/非分裂细胞；⑤容量适中（~4.7kb），满足编辑元件递送。六、讨论题（每题5分，共10分）1.CRISPR临床应用的伦理挑战及应对？答案：挑战：①生殖细胞编辑（改变germline）；②基因增强（加剧不平等）；③知情同意不足；④专利垄断。应对：①禁止生殖细胞编辑，限制增强；②加强公众教育；③完善专利共享政策；④建立严格伦理审查，明确适应症。2.合成生物学+基因编辑在生物制造的前景及风险？答案：前景：