生物药层析柱压力稳定性测试技师（中级）考试试卷及答案

生物药层析柱压力稳定性测试技师（中级）考试试卷及答案一、填空题（每题1分，共10分）1.层析柱常用压力单位有psi和______。2.反相层析柱常用固定相填料是______键合硅胶。3.层析柱压力随流动相流速增加而______（填“增大”“减小”或“不变”）。4.压力稳定性测试需保持流速、流动相组成及______恒定。5.离子交换层析压力异常升高可能因______堵塞导致。6.层析柱压力测试常规温度控制在______℃左右。7.常规HPLC分析柱压力上限一般不超过______psi。8.压力稳定性测试需记录初始压力和______后的压力变化。9.疏水相互作用层析（HIC）中，流动相盐浓度降低会使压力______（填“降低”或“升高”）。10.层析柱压力异常波动可能与______系统泄漏有关。二、单项选择题（每题2分，共20分）1.下列哪种情况会导致层析柱压力持续升高？A.流动相温度升高B.填料压实过度C.流速降低D.盐浓度降低2.压力稳定性测试的核心目的是？A.验证填料纯度B.确认柱性能稳定性C.检测流动相pHD.测量样品浓度3.离子交换层析柱压力测试时，流动相应避免？A.含缓冲盐B.含有机溶剂C.含颗粒杂质D.含目标蛋白4.常规HPLC柱压力上限一般不超过？A.3000psiB.4000psiC.5000psiD.6000psi5.下列哪种操作会导致柱压力瞬间升高？A.切换流动相未平衡B.流速突然增加C.温度突然升高D.样品进样量减少6.压力稳定性测试中压力下降明显，最可能原因是？A.填料流失B.流动相粘度增加C.流速稳定D.温度降低7.反相层析柱压力测试常用有机相是？A.甲醇B.乙腈C.乙醇D.丙酮8.层析柱压力测试常规时间周期为？A.10minB.30minC.1hD.2h9.下列属于亲和层析填料的是？A.ProteinAB.C18C.DEAED.CM10.压力稳定性测试需监控的参数不包括？A.压力B.流速C.温度D.样品纯度三、多项选择题（每题2分，共20分）1.影响层析柱压力的因素包括？A.流速B.流动相粘度C.填料粒径D.柱长2.压力异常升高的可能原因有？A.填料堵塞B.流速过快C.流动相含颗粒D.温度升高3.压力稳定性测试的关键控制条件包括？A.流速恒定B.温度恒定C.流动相组成恒定D.pH恒定4.离子交换层析压力测试需避免的操作是？A.流动相过滤B.流速超柱上限C.样品未过滤D.温度波动5.层析柱压力测试的步骤包括？A.柱平衡B.设定流速C.记录压力变化D.更换填料6.压力波动的可能原因有？A.泵气泡B.管路泄漏C.温度变化D.填料不均7.反相层析柱压力测试流动相选择原则是？A.粘度适中B.与填料兼容C.无颗粒D.含高浓度盐8.压力稳定性测试合格标准包括？A.压力波动≤5%初始值B.无持续压力升高C.流速稳定D.温度达标9.亲和层析柱压力测试需注意的是？A.避免配基脱落B.控制流速在耐受范围C.流动相不含蛋白酶D.无需过滤流动相10.导致柱压力下降的情况有？A.填料流失B.流动相粘度降低C.柱床塌陷D.流速降低四、判断题（每题2分，共20分）1.层析柱压力随流速增加呈线性关系。（）2.温度升高使流动相粘度降低，柱压力下降。（）3.压力稳定性测试只需记录初始压力。（）4.离子交换层析盐浓度越高，柱压力越高。（）5.填料粒径越小，柱压力越低。（）6.亲和层析柱可用高浓度尿素作流动相测试压力。（）7.压力波动超10%初始值为不合格。（）8.层析柱压力测试前无需过滤流动相。（）9.反相层析柱测试中乙腈比甲醇更常用。（）10.柱长越长，柱压力越高。（）五、简答题（每题5分，共20分）1.简述层析柱压力稳定性测试的基本步骤。2.分析层析柱压力持续升高的常见原因及解决方法。3.简述温度对层析柱压力的影响及控制要点。4.离子交换层析柱压力测试需注意哪些事项？六、讨论题（每题5分，共10分）1.讨论层析柱压力稳定性与生物药纯度的关系，及如何通过压力测试间接评估柱性能。2.讨论生物药生产中，层析柱压力稳定性测试的重要性及日常维护要点。---答案部分一、填空题1.bar2.C18（十八烷基）3.增大4.温度5.填料颗粒（样品杂质）6.257.40008.运行预设时间（1h）9.降低10.泵（管路）二、单项选择题1.B2.B3.C4.B5.B6.A7.B8.C9.A10.D三、多项选择题1.ABCD2.ABC3.ABCD4.BCD5.ABC6.ABCD7.ABC8.AB9.ABC10.ABC四、判断题1.×2.√3.×4.√5.×6.×7.√8.×9.√10.√五、简答题1.①柱准备：安装柱并连接系统；②流动相准备：过滤（0.22μm）、脱气；③系统平衡：设定流速（1mL/min）、温度（25℃），平衡至压力稳定；④记录初始压力；⑤运行1h，每10min记录压力；⑥判断：波动≤5%初始值则合格；⑦柱后冲洗保存。2.原因：①填料堵塞（样品/流动相含颗粒）；②流速过快；③填料压实过度；④温度过低。解决：①过滤样品/流动相；②降流速至推荐范围；③重新装柱；④调温至25℃；⑤堵塞严重则反冲或换填料。3.影响：温度升→粘度降→压力降；温度降→粘度升→压力升。控制：①用柱温箱控温（25℃±1℃）；②预热流动相；③记录温度确保可重复；④高盐流动相应严格控温。4.①流动相过滤脱气；②流速不超柱上限；③pH与填料兼容；④样品过滤；⑤每10min记录压力；⑥柱后用高盐缓冲液冲洗；⑦避免温度波动、泵气泡。六、讨论题1.压力稳定是柱性能良好的体现，直接影响纯度：①压力异常升→填料堵塞→分离不均→纯度降；②压力降→填料流失→柱床塌陷→纯度低。间接评估：①波动≤5%→柱床稳定，纯度可靠；②持续升→排查杂质，避免纯度受影响；③骤降→换柱，否则纯度