检验科临床检验指南（2025版）

检验科临床检验指南（2025）一、血液一般检验（一）红细胞计数1.检测原理目前常用的是全自动血细胞分析仪检测法，其原理基于电阻抗法或光散射法。电阻抗法是将等渗电解质溶液稀释的细胞悬液置入不导电的容器中，将小孔管（又称传感器）插进细胞悬液中。小孔管内充满电解质溶液，并有一个内电极，小孔管外侧细胞悬液中有一个外电极。当接通电源后，位于小孔两侧的电极产生稳定电流，稀释细胞悬液从小孔管外侧通过小孔管壁上宝石小孔（直径一般为70100μm）向小孔管内部流动，使小孔感应区内电阻增高，引起瞬间电压变化形成脉冲信号，脉冲振幅越高，细胞体积越大；脉冲数量越多，细胞数量越多，由此得出细胞计数结果。光散射法是利用激光照射细胞，根据细胞对光的散射特性来分析细胞的大小、内部结构等信息，进而进行细胞计数。2.标本采集采用静脉采血法，一般采集23ml静脉血，注入含有EDTAK₂抗凝剂的采血管中，轻轻颠倒混匀58次，防止血液凝固。采血时应严格遵守无菌操作原则，避免标本污染。3.参考区间成年男性：（4.05.5）×10¹²/L；成年女性：（3.55.0）×10¹²/L；新生儿：（6.07.0）×10¹²/L。4.临床意义红细胞增多可见于相对性增多，如严重呕吐、腹泻、大量出汗、大面积烧伤等导致的血液浓缩；绝对性增多，如真性红细胞增多症，以及机体长期缺氧引起的继发性红细胞增多，如慢性阻塞性肺疾病、高原居民等。红细胞减少主要见于各种贫血，如缺铁性贫血、巨幼细胞贫血、再生障碍性贫血等，也可见于失血、溶血等情况。（二）血红蛋白测定1.检测原理常用的是氰化高铁血红蛋白（HiCN）测定法。血液中除硫化血红蛋白（SHb）外的各种血红蛋白均可被高铁氰化钾氧化为高铁血红蛋白（Hi），再与氰离子（CN⁻）结合生成稳定的棕红色氰化高铁血红蛋白。HiCN最大吸收峰为540nm，在特定条件下，其吸光度与血红蛋白含量成正比，通过比色法可测定血红蛋白含量。2.标本采集同红细胞计数，采集静脉血注入EDTAK₂抗凝管中。3.参考区间成年男性：120160g/L；成年女性：110150g/L；新生儿：170200g/L。4.临床意义其临床意义与红细胞计数相似，但在某些贫血类型中，血红蛋白降低的程度与红细胞数量减少的程度可能不一致。例如，缺铁性贫血时，血红蛋白降低更为明显；而巨幼细胞贫血时，红细胞数量减少更为突出。（三）白细胞计数及分类计数1.检测原理白细胞计数同样可采用全自动血细胞分析仪，基于电阻抗法或光散射法进行计数。白细胞分类计数则是在计数的基础上，利用细胞的不同特性，如大小、内部结构、化学组成等，通过特定的技术将白细胞分为中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞等不同类型。常见的分类方法有三分群法和五分类法，三分群法是根据白细胞体积大小将其分为小细胞群（主要为淋巴细胞）、中间细胞群（包括单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞等）和大细胞群（主要为中性粒细胞）；五分类法则能更准确地将白细胞分为上述五种具体类型。2.标本采集静脉采血23ml注入EDTAK₂抗凝管，混匀。3.参考区间白细胞计数：成人（4.010.0）×10⁹/L；儿童（5.012.0）×10⁹/L；新生儿（15.020.0）×10⁹/L。白细胞分类计数：中性粒细胞：50%70%；淋巴细胞：20%40%；单核细胞：3%8%；嗜酸性粒细胞：0.5%5%；嗜碱性粒细胞：0%1%。4.临床意义白细胞总数及分类计数的变化对疾病的诊断和病情监测有重要意义。中性粒细胞增多常见于急性感染，尤其是化脓性细菌感染，也可见于严重组织损伤、急性大出血、急性中毒等情况；减少见于某些病毒感染、血液系统疾病、物理化学因素损伤等。淋巴细胞增多常见于病毒感染，如麻疹、风疹、流行性腮腺炎等，也可见于淋巴细胞白血病等；减少主要见于应用肾上腺皮质激素、烷化剂等。嗜酸性粒细胞增多常见于过敏性疾病、寄生虫感染、某些皮肤病等；减少见于长期应用肾上腺皮质激素等。嗜碱性粒细胞增多可见于慢性粒细胞白血病等；单核细胞增多见于某些感染，如疟疾、结核病等，以及单核细胞白血病等。二、尿液检验（一）一般性状检查1.尿量（1）检测方法准确收集24小时尿液，用量筒测量尿液体积。（2）参考区间正常成人24小时尿量为10002000ml。（3）临床意义尿量增多可见于生理性因素，如大量饮水、饮啤酒等；病理性因素如糖尿病、尿崩症等。尿量减少可分为少尿（24小时尿量少于400ml）和无尿（24小时尿量少于100ml），常见于肾前性因素（如休克、脱水等导致肾血流量减少）、肾性因素（如急性肾小球肾炎、肾衰竭等）和肾后性因素（如尿路结石、肿瘤等导致尿路梗阻）。2.外观（1）检测方法通过肉眼直接观察尿液的颜色、透明度等。（2）参考区间正常新鲜尿液呈淡黄色、清晰透明。（3）临床意义尿液颜色异常可提示多种疾病。红色尿液可能为血尿，可见于泌尿系统结石、肿瘤、感染等；浓茶色或酱油色尿液可能为血红蛋白尿，常见于蚕豆病、血型不合的输血反应等；乳白色尿液可能为乳糜尿，多见于丝虫病等。尿液浑浊可能是由于尿液中含有大量白细胞、细菌、结晶等，提示泌尿系统感染、结石等疾病。3.气味（1）检测方法通过嗅觉辨别尿液的气味。（2）参考区间正常新鲜尿液具有微弱的芳香气味。（3）临床意义尿液气味异常也有一定的临床意义。氨味提示尿液在膀胱内停留时间过长，尿素分解产生氨；烂苹果味见于糖尿病酮症酸中毒；蒜臭味见于有机磷中毒等。（二）化学检查1.尿蛋白（1）检测原理常用的是干化学法，其原理基于指示剂蛋白误差法。在pH为3.2的条件下，溴酚蓝产生阴离子，与带阳离子的蛋白质结合后发生颜色变化，颜色深浅与蛋白质含量成正比。（2）标本采集随机尿或晨尿，一般留取中段尿。（3）参考区间定性试验：阴性；定量试验：<150mg/24h。（4）临床意义尿蛋白阳性可分为生理性蛋白尿和病理性蛋白尿。生理性蛋白尿可见于剧烈运动、发热、精神紧张等情况，一般为暂时性的。病理性蛋白尿见于肾小球疾病，如肾小球肾炎、肾病综合征等，主要是由于肾小球滤过膜损伤导致蛋白质滤出增多；肾小管疾病，如肾盂肾炎等，是由于肾小管重吸收功能障碍导致蛋白质排出增多；也可见于全身性疾病，如糖尿病肾病、高血压肾病等。2.尿糖（1）检测原理干化学法采用葡萄糖氧化酶过氧化物酶法。葡萄糖氧化酶将葡萄糖氧化为葡萄糖酸和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的作用下，使色素原氧化显色，颜色深浅与葡萄糖含量成正比。（2）标本采集同尿蛋白。（3）参考区间定性试验：阴性；定量试验：0.565.0mmol/24h。（4）临床意义尿糖阳性可分为血糖增高性糖尿，如糖尿病、甲状腺功能亢进等；血糖正常性糖尿，如肾性糖尿，是由于肾小管重吸收葡萄糖功能减退所致。此外，大量进食碳水化合物、静脉注射大量葡萄糖等也可引起暂时性尿糖阳性。3.尿酮体（1）检测原理干化学法采用亚硝基铁氰化钠法。尿中的乙酰乙酸和丙酮在碱性条件下与亚硝基铁氰化钠反应生成紫色化合物，颜色深浅与酮体含量成正比。（2）标本采集随机尿。（3）参考区间定性试验：阴性。（4）临床意义尿酮体阳性常见于糖尿病酮症酸中毒，是由于体内胰岛素缺乏，脂肪分解加速，产生大量酮体所致。也可见于饥饿、妊娠剧吐等情况，由于糖代谢障碍，脂肪分解增加，导致酮体生成增多。（三）显微镜检查1.检测方法取新鲜混匀尿液10ml于离心管中，以1500r/min离心5分钟，弃去上清液，留取沉渣0.2ml，混匀后取1滴置于载玻片上，加盖玻片，在显微镜下观察。2.参考区间红细胞：03个/HP（高倍视野）；白细胞：05个/HP；上皮细胞：少量；管型：偶见透明管型。3.临床意义红细胞增多可见于泌尿系统结石、肿瘤、感染等；白细胞增多主要见于泌尿系统感染，如肾盂肾炎、膀胱炎等。上皮细胞增多可见于泌尿系统炎症、损伤等。管型的出现对肾脏疾病的诊断有重要意义，如透明管型增多可见于发热、剧烈运动等生理情况，也可见于肾脏疾病的早期；颗粒管型提示肾脏有实质性病变；红细胞管型见于肾小球肾炎等；白细胞管型见于肾盂肾炎等。三、粪便检验（一）一般性状检查1.外观（1）检测方法通过肉眼直接观察粪便的颜色、形状、质地等。（2）参考区间正常成人粪便呈黄褐色、圆柱状、软便。（3）临床意义粪便颜色异常可提示多种疾病。黑色柏油样便提示上消化道出血，是由于血红蛋白中的铁在肠道内与硫化物结合形成硫化亚铁所致；暗红色血便多见于下消化道出血，如痔疮、肛裂、结肠癌等；陶土样便见于胆道梗阻，是由于胆汁排泄受阻，粪便中缺乏胆色素所致。粪便形状改变也有重要意义，如细条状便可能提示直肠狭窄，常见于直肠癌；稀水样便可见于急性肠炎、食物中毒等。2.气味（1）检测方法通过嗅觉辨别粪便的气味。（2）参考区间正常粪便有一定的臭味。（3）临床意义恶臭味粪便见于消化不良、胰腺疾病等；腥臭味粪便见于阿米巴痢疾；酸臭味粪便见于脂肪消化不良等。（二）显微镜检查1.检测方法取少量粪便置于载玻片上，加12滴生理盐水，混匀后加盖玻片，在显微镜下观察。2.参考区间正常粪便中可见少量植物细胞、淀粉颗粒等，偶见白细胞。3.临床意义白细胞增多见于肠道炎症，如细菌性痢疾等，且中性粒细胞增多为主。红细胞增多见于肠道下段炎症或出血，如阿米巴痢疾、结肠癌等。寄生虫卵的发现对肠道寄生虫感染的诊断有确诊意义，如蛔虫卵、钩虫卵、鞭虫卵等。真菌孢子和菌丝的出现可能提示肠道真菌感染，多见于长期使用抗生素、免疫抑制剂等情况。（三）隐血试验1.检测原理常用的是化学法，如邻联甲苯胺法。血红蛋白中的亚铁血红素具有过氧化物酶活性，能催化过氧化氢释放新生态氧，使邻联甲苯胺氧化成蓝色化合物。2.标本采集采集少量粪便送检，检测前3天应避免食用动物血、肉类、含铁药物等，以免出现假阳性结果。3.参考区间阴性。4.临床意义隐血试验阳性对消化道出血的诊断有重要价值。消化性溃疡时，隐血试验多为间歇性阳性；消化道肿瘤时，多为持续性阳性。因此，隐血试验可作为消化道肿瘤筛查的重要指标之一。四、临床生物化学检验（一）肝功能检验1.血清总胆红素测定（1）检测原理改良JG法。血清中的结合胆红素可直接与重氮试剂反应，生成紫红色偶氮胆红素；非结合胆红素在加速剂咖啡因苯甲酸钠醋酸钠作用下，也能与重氮试剂反应生成偶氮胆红素。通过比色法测定总胆红素和结合胆红素的含量，非结合胆红素含量可通过总胆红素减去结合胆红素得到。（2）标本采集空腹静脉采血35ml，避免标本溶血。（3）参考区间总胆红素：3.417.1μmol/L；结合胆红素：06.8μmol/L；非结合胆红素：1.710.2μmol/L。（4）临床意义总胆红素升高可分为生理性和病理性。生理性升高可见于新生儿生理性黄疸。病理性升高见于肝细胞性黄疸，如病毒性肝炎、肝硬化等，是由于肝细胞受损，对胆红素的摄取、结合和排泄功能障碍所致；梗阻性黄疸，如胆管结石、胆管癌等，是由于胆汁排泄受阻，结合胆红素反流入血所致；溶血性黄疸，如蚕豆病、血型不合的输血反应等，是由于红细胞破坏过多，非结合胆红素生成增多所致。2.血清氨基转移酶测定（1）检测原理常用速率法。丙氨酸氨基转移酶（ALT）催化丙氨酸和α酮戊二酸生成丙酮酸和谷氨酸，丙酮酸在乳酸脱氢酶的作用下被还原为乳酸，同时NADH被氧化为NAD⁺，通过监测340nm波长处吸光度的下降速率来测定ALT活性。天门冬氨酸氨基转移酶（AST）催化天门冬氨酸和α酮戊二酸生成草酰乙酸和谷氨酸，草酰乙酸在苹果酸脱氢酶的作用下被还原为苹果酸，同时NADH被氧化为NAD⁺，同样通过监测340nm波长处吸光度的下降速率来测定AST活性。（2）标本采集空腹静脉采血，避免剧烈运动和饮酒，以免影响结果。（3）参考区间ALT：540U/L；AST：840U/L；ALT/AST比值：1.15左右。（4）临床意义ALT主要存在于肝细胞胞质中，是反映肝细胞损伤的敏感指标。ALT升高常见于各种肝脏疾病，如病毒性肝炎、药物性肝损伤等。AST除存在于肝细胞中外，还存在于心肌、骨骼肌等组织中。在肝细胞损伤时，AST也可升高，急性肝炎时，ALT升高更为明显，ALT/AST比值常大于1；而在慢性肝炎、肝硬化等疾病中，AST升高更为显著，ALT/AST比值常小于1。心肌梗死时，AST也可明显升高。3.血清白蛋白测定（1）检测原理溴甲酚绿法。在pH为4.2的缓冲液中，溴甲酚绿与白蛋白结合形成绿色复合物，其颜色深浅与白蛋白含量成正比，通过比色法测定白蛋白含量。（2）标本采集空腹静脉采血。（3）参考区间3550g/L。（4）临床意义血清白蛋白降低常见于肝脏疾病，如肝硬化、肝癌等，由于肝脏合成白蛋白功能减退；也可见于营养不良、蛋白丢失过多，如肾病综合征、大面积烧伤等。升高可见于严重脱水等导致的血液浓缩。（二）肾功能检验1.血清肌酐测定（1）检测原理苦味酸法。肌酐与苦味酸在碱性条件下反应生成橙红色复合物，通过比色法测定肌酐含量。（2）标本采集空腹静脉采血。（3）参考区间男性：53106μmol/L；女性：4497μmol/L。（4）临床意义血清肌酐升高是反映肾小球滤过功能受损的重要指标。在肾脏疾病早期，由于肾脏有较强的代偿能力，血清肌酐可正常；当肾小球滤过功能下降到正常的50%以下时，血清肌酐才会升高。常见于各种原因引起的肾衰竭，如慢性肾小球肾炎、糖尿病肾病等。2.血尿素氮测定（1）检测原理脲酶波氏比色法。脲酶将尿素分解为氨，氨与苯酚及次氯酸钠在碱性条件下反应生成蓝色靛酚，颜色深浅与尿素含量成正比，通过比色法测定尿素氮含量。（2）标本采集空腹静脉采血。（3）参考区间成人：3.27.1mmol/L；儿童：1.86.5mmol/L。（4）临床意义血尿素氮升高可分为肾前性、肾性和肾后性因素。肾前性因素如脱水、心力衰竭等导致肾血流量减少，使尿素氮滤过减少；肾性因素如肾小球肾炎、肾衰竭等导致肾小球滤过功能受损；肾后性因素如尿路梗阻等导致尿素氮排泄障碍。血尿素氮降低可见于蛋白质摄入不足、肝功能严重受损等。3.血尿酸测定（1）检测原理尿酸酶过氧化物酶法。尿酸在尿酸酶的作用下被氧化为尿囊素和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的作用下，使色素原氧化显色，颜色深浅与尿酸含量成正比，通过比色法测定尿酸含量。（2）标本采集空腹静脉采血。（3）参考区间男性：150416μmol/L；女性：89357μmol/L。（4）临床意义血尿酸升高常见于痛风，是由于嘌呤代谢紊乱或尿酸排泄减少所致；也可见于某些肾脏疾病，如肾衰竭等，以及肿瘤化疗、放疗后，由于细胞破坏增多，核酸分解增加，导致尿酸生成增多。血尿酸降低可见于恶性贫血、范可尼综合征等。（三）血脂测定1.总胆固醇测定（1）检测原理胆固醇氧化酶法。胆固醇酯在胆固醇酯酶的作用下被水解为游离胆固醇和脂肪酸，游离胆固醇在胆固醇氧化酶的作用下被氧化为胆甾4烯3酮和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的作用下，使色素原氧化显色，颜色深浅与总胆固醇含量成正比，通过比色法测定总胆固醇含量。（2）标本采集空腹静脉采血1214小时，避免高脂饮食。（3）参考区间合适水平：<5.18mmol/L；边缘升高：5.186.19mmol/L；升高：≥6.22mmol/L。（4）临床意义总胆固醇升高是动脉粥样硬化的重要危险因素之一，常见于高脂血症、糖尿病、甲状腺功能减退等。降低可见于严重肝脏疾病、营养不良等。2.甘油三酯测定（1）检测原理甘油磷酸氧化酶过氧化物酶法。甘油三酯在脂蛋白脂肪酶的作用下被水解为甘油和脂肪酸，甘油在甘油激酶的作用下被磷酸化，然后在甘油磷酸氧化酶的作用下被氧化为磷酸二羟丙酮和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的作用下，使色素原氧化显色，颜色深浅与甘油三酯含量成正比，通过比色法测定甘油三酯含量。（2）标本采集同总胆固醇。（3）参考区间合适水平：<1.70mmol/L；边缘升高：1.702.25mmol/L；升高：≥2.26mmol/L。（4）临床意义甘油三酯升高常见于高脂血症、糖尿病、酗酒等。降低可见于甲状腺功能亢进、肝功能严重受损等。3.高密度脂蛋白胆固醇（HDLC）和低密度脂蛋白胆固醇（LDLC）测定（1）检测原理HDLC测定常用选择性抑制法，通过加入特定试剂抑制其他脂蛋白与酶试剂的反应，只让HDL与酶试剂反应，从而测定HDLC含量。LDLC测定可采用Friedewald公式计算法（LDLC=总胆固醇HDLC甘油三酯/2.2，当甘油三酯>4.52mmol/L时，该公式不适用）或直接测定法。（2）标本采集同总胆固醇。（3）参考区间HDLC：男性：1.161.42mmol/L；女性：1.291.55mmol/L；合适水平：≥1.04mmol/L；降低：<1.04mmol/L。LDLC：合适水平：<3.37mmol/L；边缘升高：3.374.12mmol/L；升高：≥4.14mmol/L。（4）临床意义HDLC被认为是“好胆固醇”，具有抗动脉粥样硬化的作用，HDLC降低是动脉粥样硬化的危险因素之一。LDLC被认为是“坏胆固醇”，LDLC升高可促进动脉粥样硬化的发生发展，是冠心病的重要危险因素。五、临床免疫学检验（一）免疫球蛋白检测1.检测原理常用免疫比浊法。抗原与相应抗体在特殊缓冲液中快速形成抗原抗体复合物，使反应液出现浊度。当抗体量固定时，浊度的高低与抗原的含量成正比，通过检测反应液的浊度来测定免疫球蛋白的含量。2.标本采集空腹静脉采血。3.参考区间IgG：7.016.6g/L；IgA：0.73.5g/L；IgM：0.42.3g/L。4.临床意义免疫球蛋白升高可分为多克隆性升高和单克隆性升高。多克隆性升高常见于慢性感染、自身免疫性疾病等，如系统性红斑狼疮、类风湿关节炎等。单克隆性升高主要见于多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症等，表现为某一种免疫球蛋白显著升高。免疫球蛋白降低可见于先天性免疫缺陷病、获得性免疫缺陷病等，如艾滋病患者可出现多种免疫球蛋白降低。（二）补体检测1.总补体活性（CH₅₀）测定（1）检测原理绵羊红细胞（SRBC）与相应抗体（溶血素）结合形成免疫复合物，可激活补体经典途径，导致SRBC溶解。通过观察不同稀释度的血清使50%的SRBC发生溶血的情况，来测定总补体活性。（2）标本采集空腹静脉采血，避免标本溶血。（3）参考区间50100kU/L。（4）临床意义CH₅₀升高可见于急性炎症、组织损伤等。降低可见于补体成分消耗过多，如系统性红斑狼疮活动期、急性肾小球肾炎等；补体合成减少，如肝硬化等；先天性补体缺乏等。2.补体C3测定（1）检测原理同免疫球蛋白检测的免疫比浊法。（2）标本采集同CH₅₀。（3）参考区间0.851.70g/L。（4）临床意义C3是补体系统中含量最多的成分，其变化具有重要的临床意义。C3升高可见于急性炎症、传染病早期等。降低常见于肾小球肾炎、系统性红斑狼疮等，是由于补体经典途径或旁路途径激活，导致C3消耗过多；也可见于肝脏疾病，如肝硬化等，导致C3合成减少。（三）自身抗体检测1.抗核抗体（ANA）检测（1）检测原理间接免疫荧光法。以Hep2细胞为抗原底物片，加入患者血清，若血清中存在ANA，则与细胞内的抗原结合，再加入荧光标记的抗人免疫球蛋白抗体，在荧光显微镜下可观察到细胞内出现荧光，根据荧光的模式和强度来判断ANA的阳性与否及滴度。（2）标本采集静脉采血。（3）参考区间阴性。（4）临床意义ANA是自身免疫性疾病的筛选指标，阳性常见于系统性红斑狼疮、干燥综合征、硬皮病等多种自身免疫性疾病。不同的荧光模式可能提示不同的自身抗体类型和疾病类型，如均质型常见于系统性红斑狼疮；核仁型常见于硬皮病等。2.类风湿因子（RF）检测（1）检测原理胶乳凝集法。将变性IgG包被在聚苯乙烯胶乳颗粒上，当加入患者血清时，若血清中存在RF，则与胶乳颗粒上的变性IgG结合，导致胶乳颗粒凝集，出现肉眼可见的凝集现象。（2）标本采集静脉采血。（3）参考区间阴性。（4）临床意义RF主要见于类风湿关节炎，阳性率可达70%80%，但也可见于其他自身免疫性疾病，如系统性红斑狼疮、干燥综合征等，以及某些感染性疾病，如传染性单核细胞增多症等。六、临床微生物学检验（一）标本采集1.血液标本（1）采集时间一般在患者发热初期或高峰时采集，尽量在使用抗生素前采集。（2）采集方法严格遵守无菌操作原则，消毒皮肤后，用注射器抽取静脉血510ml，分别注入需氧和厌氧培养瓶中，轻轻颠倒混匀。2.痰液标本（1）采集时间晨痰为佳，采集前患者应先用清水漱口，以减少口腔细菌污染。（2）采集方法深咳，将痰液咳出至无菌容器中。对于无痰或咳痰困难者，可采用雾化吸入等方法诱导咳痰。3.尿液标本（1）采集时间清洁中段尿，一般留取晨尿。（2）采集方法女性患者应先清洗外阴，然后用棉球擦拭尿道口，留取中段尿；男性患者应翻转包皮，清洗尿道口后留取中段尿。将尿液收集于无菌容器中。4.粪便标本（1）采集时间新鲜粪便，尽量在发病早期采集。（2）采集方法用无菌竹签挑取有脓血、黏液等异常部分的粪便，置于无菌容器中。（二）细菌培养与鉴定1.细菌培养（1）培养基选择根据不同的标本和可能的病原菌选择合适的培养基。如血培养常用需氧和厌氧培养基；痰液培养常用血平板、巧克力平板等；粪便培养常用选择性培养基，如SS琼脂平板等。（2）培养条件一般细菌在3537℃、5%10%CO₂环境下培养1824小时。对于一些特殊细菌，如结核分枝杆菌，需要在特定的培养基和培养条件下培养较长时间。2.细菌鉴定（1）形态学鉴定通过显微镜观察细菌的形态、大小、染色性等特征，如革兰染色可将细菌分为革兰阳性菌和革兰阴性菌；抗酸染色可用于鉴定结核分枝杆菌等。（2）生化鉴定利用细菌对各种生化底物的代谢能力不同，通过生化试验来鉴定细菌。如糖发酵试验、吲哚试验、尿素酶试验等。（3）血清学鉴定利用已知的特异性抗体来鉴定细菌的种、型等。如沙门菌的血清学分型。（4）分子生物学鉴定近年来，分子生物学技术在细菌鉴定中得到广泛应用。如聚合酶链反应（PCR）技术可快速检测细菌的特定基因序列，用于细菌的种属鉴定；16SrRNA基因测序可准确鉴定细菌的种类。（三）药敏试验1.检测方法（1）纸片扩散法（KB法）将含有一定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上，药物在琼脂中扩散，抑制细菌生长，形成抑菌圈。根据抑菌圈的大小判断细菌对该抗菌药物的敏感性。（2）稀释法包括肉汤稀释法和琼脂稀释法。将抗菌药物进行不同浓度的稀释，然后接种测试菌，观察细菌生长情况，以最低抑菌浓度（MIC）来判断细菌对该抗菌药物的敏感性。2.结果判读根据美国临床和实验室标准协会（CLSI）等制定的标准，将细菌对药物的敏感性分为敏感（S）、中介（I）和耐药（R）。敏感表示使用常规剂量的抗菌药物治疗有效；中介表示需要增加药物剂量或选用其他药物；耐药表示使用常规剂量的抗菌药物治疗无效。药敏试验结果对于临床合理选用抗菌药物具有重要指导意义。七、分子诊断检验（一）核酸提取1.原理核酸提取的基本原理是破坏细胞结构，使核酸释放出来，然后去除蛋白质、多糖等杂质，得到纯净的核酸。常用的方法有酚氯仿抽提法、硅胶膜吸附法等。酚氯仿抽提法是利用酚和氯仿的变性作用，使蛋白质变性沉淀，然后通过离心将核酸与蛋白质分离；硅胶膜吸附法是利用核酸在高盐低pH条件下可吸附在硅胶膜上，而杂质不吸附，然后通过洗涤去除杂质，最后在低盐高pH条件下将核酸洗脱下来。2.操作步骤以硅胶膜吸附法为例，首先将标本加入裂解液中，使细胞裂解，释放核酸；然后将裂解液转移至硅胶膜离心柱中，离心使核酸吸附在硅胶膜上；接着用洗涤液洗涤离心柱，去除杂质；最后用洗脱液将核酸从硅胶膜上洗脱下来。3.质量控制提取的核酸应进行质量检测，常用的方法有紫