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2025年园艺植物育种学试题库参考答案一、名词解释1.远缘杂交:指不同种、属或更高分类单位的植物之间的杂交,其后代称为远缘杂种。与近缘杂交相比,远缘杂交可打破物种间基因交流障碍,引入异源优良性状(如抗病、抗逆基因),但常面临杂交不亲和、杂种不育或后代疯狂分离等问题,需通过染色体加倍、胚胎拯救等技术克服。2.分子标记辅助选择(MAS):利用与目标性状紧密连锁的分子标记(如SSR、SNP)对育种材料进行间接选择的技术。通过检测标记基因型,可在早期(如苗期)准确筛选出携带目标性状的个体,显著提高选择效率,尤其适用于隐性性状、多基因控制性状及受环境影响大的性状选择。3.自交不亲和性:指两性花植物自花授粉或同株异花授粉后,雌蕊不能接受自花花粉而无法受精结实的现象。自交不亲和性由S基因控制,可分为配子体型(如茄科、蔷薇科)和孢子体型(如十字花科)两类,是杂种优势利用中简化制种程序的重要性状(如甘蓝、白菜的自交不亲和系制种)。4.多倍体育种:通过人工诱导或自然变异获得多倍体植株(如三倍体、四倍体),并筛选优良性状的育种方法。常用秋水仙素处理分生组织(如茎尖、萌动种子)诱导染色体加倍,多倍体常表现为器官增大(如果实、花朵)、抗逆性增强,但部分类型(如三倍体)因减数分裂异常表现为不育(如无籽西瓜)。5.轮回选择:一种多世代、多群体的群体改良方法,通过选择优良个体杂交重组,形成新群体,重复“选择-杂交-重组”过程,逐步提高群体中有利基因频率。适用于异花授粉植物(如玉米、南瓜)或自花授粉植物的群体改良,可同时改良多个数量性状(如产量、品质)。6.雄性不育系:指雌蕊正常、雄蕊发育异常(无花粉或花粉败育)的品系,简称“不育系”。在杂种优势利用中,不育系需与保持系(能使不育系后代保持不育性)和恢复系(能使不育系后代恢复可育性)配套使用(即“三系法”),避免人工去雄,降低制种成本(如水稻、辣椒的雄性不育系应用)。7.芽变选种:利用植物芽的分生组织细胞发生遗传变异(芽变),通过筛选、鉴定获得新品种的方法。芽变可能表现为果实颜色、风味、成熟期或抗性的改变(如红富士苹果的着色芽变),具有变异频率低(10⁻⁶~10⁻⁸)、嵌合体常见等特点,需通过分离、纯化(如嫁接、扦插)获得稳定株系。8.配合力:指亲本通过杂交产生优良后代的能力,分为一般配合力(GCA)和特殊配合力(SCA)。一般配合力反映亲本加性效应的平均值(由基因累加作用决定),特殊配合力反映亲本非加性效应(显性、上位性)的组合效应。配合力测定是杂交育种中亲本选择的核心依据(如番茄杂交组合选配)。9.加性效应:指多个等位基因或非等位基因的效应累加,其遗传符合数量遗传学规律(如多基因控制的产量、株高)。加性效应可稳定遗传给后代,是选择育种(如系统选种)和轮回选择的主要利用对象;而非加性效应(显性、上位性)因基因互作无法稳定遗传,主要在杂种一代(F₁)中表现(如杂种优势)。10.基因编辑育种:利用CRISPR/Cas9、TALEN等技术对目标基因进行定点编辑(敲除、插入、替换),获得性状改良材料的育种方法。与转基因技术不同,基因编辑可实现内源基因的精准修饰(如敲除感病基因PDS获得抗白粉病番茄),且无外源基因插入,部分国家(如美国、日本)将其视为非转基因作物,具有广阔应用前景。二、简答题1.简述园艺植物杂种优势利用的主要途径及适用条件。杂种优势利用的核心是获得高纯度、强优势的F₁代,主要途径包括:(1)人工去雄制种:适用于花器大、去雄容易的植物(如西瓜、南瓜),需确保父本花粉充足,制种成本较高。(2)雄性不育系制种(三系法):利用不育系(A)、保持系(B)、恢复系(R)配套,不育系与保持系杂交繁殖不育系,不育系与恢复系杂交生产F₁。适用于花器小、人工去雄困难的作物(如水稻、辣椒),需筛选稳定的不育系和恢复系。(3)自交不亲和系制种(两系法):利用自交不亲和系(S)作为母本,与父本杂交生产F₁,同时通过蕾期授粉繁殖自交不亲和系。适用于十字花科植物(如甘蓝、白菜),需解决自交不亲和性的稳定性及繁殖效率问题。(4)化学杀雄制种:利用化学药剂(如乙烯利、杀雄剂1号)抑制雄蕊发育,母本喷药后与父本杂交生产F₁。适用于缺乏雄性不育系或自交不亲和系的作物(如小麦、番茄),但需严格掌握药剂浓度和处理时期,避免药害。(5)标记性状制种:利用显性标记性状(如叶色、花色)区分真假杂种,母本选择隐性性状,父本选择显性性状,F₁表现显性性状即可淘汰假杂种。适用于标记性状明显、遗传稳定的作物(如黄瓜的黄绿叶标记)。2.比较常规杂交育种与分子标记辅助育种的异同点。相同点:均以基因重组为基础,目标是将优良性状整合到同一品种中;需经过杂交、选择、鉴定等环节;最终通过表型验证确定新品种。不同点:(1)理论基础:常规杂交育种依赖表型选择,基于孟德尔遗传规律和数量遗传学;分子标记辅助育种(MAS)结合分子生物学,利用标记与目标基因的连锁关系进行选择。(2)选择效率:常规育种需等待性状表达(如果实成熟)才能选择,周期长(5~8年);MAS可在苗期(甚至种子阶段)通过DNA检测选择,缩短育种周期(3~5年)。(3)准确性:常规育种受环境影响大(如产量、品质易受气候干扰),选择准确性低;MAS直接检测基因型,避免环境误差,尤其适用于隐性性状(如抗病基因)和多基因性状(如抗逆性)的选择。(4)技术要求:常规育种依赖育种家经验;MAS需掌握分子标记开发(如SSR、SNP)、PCR检测等技术,需实验室支持。(5)应用范围:常规育种适用于所有园艺植物;MAS更适合目标基因明确、标记与性状紧密连锁(遗传距离<5cM)的性状改良(如抗虫、抗除草剂基因)。3.简述芽变选种的关键步骤及注意事项。关键步骤:(1)变异发现:在园艺植物生长周期中(如果实成熟期、花期)观察异常表现(如果色、果形、抗性改变),记录变异部位(如某一枝条、花序)。(2)变异鉴定:①遗传型变异与饰变区分:通过无性繁殖(嫁接、扦插)观察变异是否稳定遗传(饰变不能遗传);②嵌合体分离:若为周缘嵌合体(如LⅠ、LⅡ层细胞基因型不同),需通过多次无性繁殖或组织培养获得纯合体;③性状对比:与原品种进行多地点、多世代田间试验,比较目标性状(如果实品质、产量)及非目标性状(如抗性、生育期)的差异显著性。(3)繁殖与推广:变异稳定后,通过无性繁殖扩大繁殖,进行区域试验和生产试验,符合品种审定标准后推广。注意事项:①重点关注经济性状(如果实大小、风味)和抗性(如抗病、抗寒)的正向变异;②注意芽变的多效性(如早熟芽变可能伴随果个变小),需综合评估;③嵌合体需及时分离,避免因细胞层竞争导致变异丢失;④变异鉴定需排除病毒感染、栽培措施(如施肥、修剪)等环境因素的干扰。4.论述多倍体育种中染色体加倍的常用方法及鉴定技术。常用加倍方法:(1)化学诱导法:最常用秋水仙素处理分生组织(如茎尖、萌动种子、侧芽),浓度0.01%~0.4%,处理时间6~72小时(草本植物时间短,木本植物时间长)。秋水仙素通过抑制纺锤体形成,使染色体复制后无法分离,导致细胞染色体加倍。(2)物理诱导法:包括高温(35~40℃)、低温(0~4℃)、射线(X射线、γ射线)处理,通过干扰细胞分裂诱导染色体加倍,但效率低于化学法,且易引发染色体断裂等损伤。(3)生物诱导法:利用体细胞杂交(如原生质体融合)获得异源多倍体(如番茄+马铃薯的体细胞杂种),或通过未减数配子杂交(如二倍体×四倍体获得三倍体)。鉴定技术:(1)形态学鉴定:多倍体常表现为叶片变厚、叶色加深、气孔增大、花粉粒增大(可通过显微镜观察),但需与环境饰变区分。(2)细胞学鉴定:①染色体计数法:取根尖、茎尖或幼叶,经卡诺氏固定液固定、解离、染色(如醋酸洋红)后压片,在显微镜下统计染色体数目(如二倍体番茄2n=24,四倍体为2n=48);②流式细胞术:提取细胞核DNA,用荧光染料(如PI)染色后通过流式细胞仪检测DNA含量,快速判断倍性(如四倍体细胞DNA含量是二倍体的2倍)。(3)分子标记鉴定:利用SSR、AFLP等标记检测基因组大小变化,或通过定量PCR(qPCR)比较特定基因的拷贝数(如多倍体中基因拷贝数为二倍体的2倍)。5.简述基因编辑技术(CRISPR/Cas9)在园艺植物育种中的应用策略。(1)目标基因敲除:针对负向调控性状的基因(如感病基因、抑制果实成熟的基因),设计sgRNA引导Cas9蛋白切割靶位点,通过非同源末端连接(NHEJ)修复引入移码突变,使基因失活。例如,敲除番茄感病基因SlDMR6-1可显著提高对叶霉病的抗性;敲除苹果多酚氧化酶基因MdPPO可获得抗褐变果实。(2)基因定点插入/替换:利用同源重组(HDR)修复机制,在靶位点插入目的基因或替换原有基因(如抗病基因、品质相关基因)。例如,将番茄抗根结线虫基因Mi-1插入感病品种基因组,获得抗病新材料;替换草莓果实着色基因FaMYB1的启动子,增强花色苷合成,提高果实色泽。(3)基因表达调控:利用无核酸酶活性的dCas9(deadCas9)与转录激活/抑制结构域融合(如dCas9-VP64、dCas9-Repressor),靶向调控目标基因的表达水平(如激活番茄果实糖转运基因SlSWEET15,提高果实含糖量;抑制草莓乙烯合成基因FaACO,延长果实保鲜期)。(4)多基因编辑:通过设计多个sgRNA,同时编辑多个基因(如多基因控制的抗逆通路)。例如,同时编辑番茄干旱响应基因SlAREB1、SlDREB2和SlERF5,协同提高植株抗旱性;编辑菊花花型相关基因CmCYC2、CmTCP1和CmTCP3,培育重瓣新品种。三、论述题1.结合实例论述杂种优势的遗传机制及在园艺植物育种中的应用。杂种优势是指两个遗传背景不同的亲本杂交产生的F₁代在生长势、抗逆性、产量、品质等方面优于双亲的现象。其遗传机制主要有以下假说:(1)显性假说:认为杂种优势是显性有利基因互补的结果。例如,亲本P₁(AAbb)和P₂(aaBB)杂交,F₁(AaBb)同时携带显性基因A和B,掩盖了隐性不利基因(a、b)的效应,表现出优势。番茄抗叶霉病(Cf-9基因显性)与高糖(Sucr基因显性)亲本杂交,F₁同时表现抗病和高糖,验证了显性互补的作用。(2)超显性假说:认为等位基因杂合(Aa)时的效应超过纯合(AA或aa),可能因基因互作产生新功能。例如,玉米的乙醇脱氢酶(Adh)基因杂合体(Adh¹/Adh²)比纯合体具有更高的酶活性,促进代谢效率,提高产量;草莓的果实大小相关基因FaSIZ1杂合体(SIZ1/siz1)比纯合体(SIZ1/SIZ1或siz1/siz1)表现出更大的果个,支持超显性假说。(3)上位性假说:认为非等位基因间的互作(上位效应)是杂种优势的重要来源。例如,番茄的产量由多个数量性状位点(QTL)控制,QTL1(AABB)和QTL2(CCDD)的互作效应(AABBCCDD)大于各QTL单独效应之和,F₁代因整合双亲QTL而表现高产。在园艺植物育种中的应用:(1)蔬菜作物:十字花科(如结球甘蓝)利用自交不亲和系制种,F₁代整齐度高、产量比常规品种提高30%~50%;葫芦科(如西瓜)通过人工去雄或雄性不育系制种,三倍体无籽西瓜(二倍体×四倍体)因杂种优势表现出果大、抗枯萎病等特性。(2)果树作物:柑橘通过“枳橙×甜橙”杂交获得抗寒、抗裂皮病的砧木,F₁代根系发达,适应性强;苹果的“嘎拉×富士”杂交后代(如“蜜脆”苹果)果实风味浓郁、耐贮运,综合双亲优点。(3)花卉作物:矮牵牛利用杂种优势培育多倍体品种,F₁代花径增大、花色丰富(如“波浪”系列矮牵牛);菊花通过“夏菊×秋菊”杂交,F₁代花期延长,适应周年生产。需注意,杂种优势的表现受亲本遗传差异(一般差异越大,优势越强)、环境(如温度、光照影响基因表达)及性状类型(数量性状优势显著,质量性状优势有限)的影响。实际育种中需通过配合力测定(如顶交法、双列杂交法)筛选强优势组合,并优化制种技术(如不育系繁殖、自交不亲和系蕾期授粉),确保F₁代的纯度和一致性。2.论述分子标记辅助选择(MAS)在园艺植物抗病育种中的应用进展及局限性。应用进展:(1)抗病基因的标记开发与定位:通过图位克隆、关联分析等方法,已开发出多种园艺植物抗病基因的紧密连锁标记。例如,番茄抗根结线虫基因Mi-1与SSR标记CT220紧密连锁(遗传距离1.2cM),辣椒抗黄瓜花叶病毒(CMV)基因Cmr与SNP标记CAPS101连锁(距离0.8cM),可用于苗期抗病材料筛选。(2)回交育种中的MAS:利用MAS加速抗病基因的导入。例如,将野生番茄(Lycopersiconperuvianum)的抗叶霉病基因Cf-9导入栽培番茄品种“Moneymaker”,通过标记筛选(如SCAR标记SCAR10)在BC₃代即可获得背景回复率>95%的抗病株系,比常规回交缩短2~3个世代。(3)多抗病基因聚合:通过MAS同时导入多个抗病基因(基因累加),培育广谱抗病品种。例如,番茄育种中同时聚合抗叶霉病(Cf-9)、抗枯萎病(I-2)和抗根结线虫(Mi-1)的标记,筛选出多抗材料,田间表现对多种病害的抗性显著高于单基因材料。(4)隐性抗病基因选择:常规表型选择难以区分显性纯合(RR)和杂合(Rr)个体,而MAS可通过标记直接鉴定基因型。例如,黄瓜抗白粉病隐性基因pm-1的SSR标记SSR123,可在苗期区分rr(感病)、Rr(杂合)和RR(抗病),避免误选杂合体。局限性:(1)标记与目标基因的连锁不紧密:部分抗病基因(尤其是数量抗性基因QTL)的标记与目标基因遗传距离较大(>5cM),可能因重组导致标记与性状分离,降低选择准确性。(2)基因背景效应:标记在不同遗传背景中可能出现多态性差异(如某些标记仅在特定亲本组合中适用),需进行标记验证和多群体测试。(3)技术成本与操作难度:MAS需实验室设备(PCR仪、电泳仪)和技术人员,中小型育种单位难以普及;大规模群体检测(如万份材料)的成本较高(约0.5~2元/样本)。(4)抗病基因的时效性:病原菌小种变异可能导致已聚合的抗病基因失效(如番茄叶霉病菌新小种克服Cf-9基因),需持续开发新抗病基因的标记。未来发展方向:结合全基因组关联分析(GWAS)和重测序技术开发高密度SNP标记,提高标记与目标基因的连锁强度;利用液相芯片(如KASP技术)实现高通量、低成本检测;整合MAS与表型选择(如高光谱成像),构建“基因型+表型”的精准育种体系。3.结合实例说明现代生物技术(如基因编辑、体细胞杂交)与传统育种技术的协同应用。现代生物技术与传统育种的协同应用可突破传统方法的瓶颈,加速育种进程,以下为典型案例:(1)基因编辑+杂交育种:目标:培育抗晚疫病、高维生素C的番茄新品种。传统方法:需通过杂交将野生番茄(抗晚疫病)的Rpi-vnt1.1基因与栽培番茄(高维生素C)的GGP基因整合,周期长(8~10年),且可能引入野生种的不良性状(如果小、风味差)。协同应用:①利用CRISPR/Cas9编辑栽培番茄的感病基因SlDMR6-1(负调控抗病性),获得抗晚疫病材料(编辑株系);②同时通过杂交将高维生素C基因GGP(来自樱桃番茄)导入栽培番茄,利用SSR标记(如SSR-GGP)辅助选择;③将编辑株系与高维生素C株系杂交,获得同时抗晚疫病、高维生素C的F₁代;④通过自交和分子标记筛选(检测SlDMR6-1编辑位点和GGP基因),获得稳定株系;⑤田间试验验证性状稳定性,最终育成新品种。优势:基因编辑直接改良栽培种的抗病性,避免野生种不良性状的连锁累赘;杂交与MAS加速优良性状整合,周期缩短至4~5年。(2)体细胞杂交+多倍体育种:目标:培育抗盐碱、优质的柑橘砧木。传统方法:柑橘属间杂交(如枳×甜橙)存在杂交不亲和性,胚败育率高,难以获得杂种植株。协同应用:①分离枳(抗盐碱,2n=18)的叶肉原生质体和甜橙(优质,2n=18)的悬浮细胞原生质体;②通过PEG诱导融合,获得异源四倍体(2n=36)体细胞杂种;③利用流式细胞术鉴定倍性,染色体计数确认杂种(含枳和甜橙的染色体);④将杂种与二倍体甜橙回交,获得三倍体(2n=27)砧木;⑤田间试验评估抗盐碱能力(如NaCl胁迫下的存活率、离子吸收)和嫁接亲和性(如接穗的生长量、果实品质);⑥筛选出抗盐碱(枳的耐盐基因SOS1、NHX1)、嫁接后果实品质优良(甜橙的糖转运基因SWEET)的砧木品种。优势:体细胞杂交克服属间杂交不亲和,直接获得异源多倍体,保留双亲优良性状;多倍体育种结合回交,降低杂种的遗传复杂度,提高选择效率。(3)分子标记辅助选择+轮回选择:目标:改良西瓜的抗枯萎病性和果实含糖量(多基因控制性状)。传统方法:轮回选择需多代表型选择,抗枯萎病性(受Foc1、Foc2等基因控制)和含糖量(受多个QTL控制)的选择效率低。协同应用:①构建基础群体(包含高抗枯萎病、低糖;低抗、高糖;中抗、中糖等类型);②利用SSR标记(如与Foc1连锁的SSR-Foc1)和SNP标记(如与含糖量QTL连锁的SNP-SWC)进行MAS,筛选同时携带抗病基因和高糖QTL的个体;③将筛选个体杂交重组,形成新群体;④重复“MAS选择-杂交-重组”过程3~4轮,提高群体中抗病基因和高糖QTL的频率;⑤从最终群体中选择优良单株,自交纯化,获得稳定品系。优势:MAS解决多基因性状选择准确性低的问题,轮回选择扩大基因重组范围,协同提高群体改良效率,含糖量比原始群体提高20%~30%,枯萎病发病率降低50%以上。四、案例分析题案例:某公司拟培育抗根结线虫的番茄新品种,现有资源包括高抗线虫的野生番茄(P1,学名Solanumpennellii,2n=24,果小、味酸)和综合性状优良但感病的栽培番茄(P2,学名Solanumlycopersicum,2n=24,果大、味甜、早熟)。请设计育种方案并说明关键步骤。育种方案设计:采用“杂交育种+分子标记辅助选择(MAS)+回交转育”技术路线,目标是将P1的抗根结线虫基因(假设为Mi-3,显性)导入P2遗传背景,同时保留P2的优良性状(果大、味甜、早熟)。关键步骤:1.亲本鉴定与杂交组合配制(第1年):(1)确认P1的抗性:通过人工接种根结线虫(Meloidogyneincognita)鉴定,P1发病率<5%(高抗),P2发病率>90%(高感);(2)开发Mi-3基因的紧密连锁标记:查阅文献或通过QTL定位,确定与Mi-3连锁的SSR标记(如SSR-Mi3,遗传距离2cM);(3)配制杂交组合:以P2为母本,P1为父本,杂交获得F₁代(P2×P1),F₁理论基因型为Mi-3/mi-3(杂合,表现抗性)。2.回交转育与MAS筛选(第2~4年):(1)BC₁代(第2年):①F₁(Mi-3/mi-3)与P2回交,获得BC₁群体;②利用SSR-Mi3标记筛选携带Mi-3的单株(标记阳性),同时表型筛选接近P2的个体(如果形、果色、熟期);③保留约20株标记阳性、表型优良的BC₁单株。(2)BC₂代(第3年):①选择BC₁中最优单株(Mi-3/mi-3)与P2回交,获得BC₂群体;②再次用
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