2025年医务人员核酸试题及答案

2025年医务人员核酸试题及答案一、单项选择题（每题2分，共40分）1.关于新型冠状病毒核酸检测采样拭子的选择，正确的是：A.需使用聚酯（PE）头拭子，避免棉拭子B.棉拭子因吸水性好，更适合采样C.尼龙植绒拭子可能破坏病毒结构，不宜使用D.普通棉签可替代专用采样拭子答案：A解析：棉拭子含有的天然棉纤维可能吸附病毒蛋白，影响检测结果；尼龙植绒拭子因结构更利于样本释放，是推荐类型；普通棉签无生物安全性认证，不可替代专用拭子。2.咽拭子采样时，正确的操作部位是：A.仅擦拭双侧扁桃体表面B.擦拭软腭悬雍垂后停止C.咽后壁、双侧扁桃体隐窝及表面D.舌面及口腔侧壁答案：C解析：咽拭子需充分暴露咽后壁、双侧扁桃体隐窝及表面，避免接触舌面、口腔侧壁等非目标区域，以提高病毒载量采集效率。3.病毒采样管中常用的灭活型保存液主要成分是：A.生理盐水B.胍盐+表面活性剂C.细胞培养液D.磷酸盐缓冲液（PBS）答案：B解析：灭活型保存液通过胍盐破坏病毒包膜，表面活性剂裂解蛋白，同时保留核酸完整性；生理盐水无灭活作用，细胞培养液用于非灭活样本保存。4.核酸检测实验室中，样本处理区（二区）与扩增分析区（三区）之间的气压要求是：A.二区压力＞三区压力B.二区压力＜三区压力C.二区与三区压力相等D.无明确压力要求答案：B解析：为防止扩增产物污染样本处理区，需维持“试剂准备区（一区）＞样本处理区（二区）＞扩增分析区（三区）”的递减压力梯度，即二区压力低于三区。5.某样本实时荧光PCR检测.Ct值为38，熔解曲线显示单峰且Tm值符合预期，正确的报告结论是：A.阳性（需复核）B.阴性C.临界值，建议24小时后复查D.无效结果答案：A解析：根据《新型冠状病毒核酸检测技术指南（2024年修订版）》，.Ct值≤37为阳性，37＜.Ct≤40需结合熔解曲线及临床情况复核后判定，本例.Ct=38且熔解曲线正常，应标记为阳性待复核。6.核酸提取过程中，若磁珠法提取仪提示“磁珠回收率＜90%”，最可能的原因是：A.样本量不足B.裂解液与样本比例不当C.磁珠未完全吸附D.洗脱缓冲液pH值偏高答案：C解析：磁珠回收率低主要因磁珠未完全吸附（如磁场强度不足、震荡时间过短）；样本量不足影响核酸浓度但不直接影响回收率；裂解液比例不当可能导致核酸释放不充分；洗脱缓冲液pH影响洗脱效率而非回收率。7.冷链运输的核酸检测样本，运输箱内温度应控制在：A.-20℃以下B.2-8℃C.15-25℃D.36-37℃答案：B解析：根据《病原微生物样本运输包装规范》，新型冠状病毒样本（属于B类感染性物质）需在2-8℃条件下运输，若超过48小时未检测则需-70℃以下冻存。8.核酸检测实验室生物安全柜的日常监测指标不包括：A.风速B.紫外线强度C.沉降菌D.压差答案：D解析：生物安全柜监测重点为风速（确保气流屏障）、紫外线强度（消毒效果）、沉降菌（洁净度）；压差是实验室区域间的监测指标，非安全柜本身参数。9.关于混采检测，错误的操作是：A.10:1混采时，每管样本量应一致B.混采管标注需包含所有受检者信息C.混采阳性后需对原管样本逐一单检D.混采管保存时间与单采管相同答案：B解析：混采管仅需标注混采组唯一编号，受检者信息应通过信息系统关联，避免标签信息过载导致混淆。10.实时荧光PCR扩增曲线“拖尾”（非特异性扩增）的常见原因是：A.引物浓度过低B.退火温度过高C.模板量过多D.探针标记荧光素衰减答案：C解析：模板量过多会导致扩增早期达到平台期，曲线出现拖尾；引物浓度过低可能无扩增信号；退火温度过高可能降低扩增效率；探针荧光衰减会导致信号强度下降但不拖尾。11.核酸检测实验室质量控制中，“弱阳性对照”的.Ct值应设定为：A.接近检测限（如35-37）B.15-20C.25-30D.无固定要求答案：A解析：弱阳性对照用于验证检测系统对低浓度样本的检出能力，其.Ct值应接近方法学检测限（通常35-37），若无法检出则提示灵敏度下降。12.采样人员穿脱防护服时，错误的步骤是：A.脱外层手套后无需手消毒直接脱防护服B.穿防护服前检查有无破损C.脱防护服时避免接触污染面D.摘护目镜时手不触碰面部答案：A解析：脱外层手套后需立即进行手消毒（如75%乙醇擦拭），再脱防护服，避免交叉污染。13.核酸检测结果“假阴性”的最主要原因是：A.实验室扩增产物污染B.样本采集不规范（如深度不足）C.试剂批间差异D.仪器校准偏差答案：B解析：临床研究显示，采样不规范（如咽拭子未接触咽后壁、鼻拭子未到达中鼻甲后缘）导致的样本病毒载量不足，是假阴性的主要原因（占比＞60%）。14.某实验室使用的核酸提取试剂效期为6个月（2-8℃保存），若在-20℃冻存，其实际可用时间：A.延长至12个月B.仍为6个月C.缩短至3个月D.需重新验证答案：D解析：试剂保存条件变更（如从2-8℃改为-20℃）可能影响稳定性，需通过加速稳定性试验（如37℃放置7天模拟6个月）验证后重新确定效期，不可直接延长。15.鼻拭子采样时，拭子插入深度应为：A.1-2cm（到达鼻前庭）B.3-5cm（超过鼻阈）C.5-7cm（中鼻甲后缘）D.8-10cm（接近鼻咽部）答案：C解析：鼻拭子需插入至中鼻甲后缘（约5-7cm），旋转至少4圈并停留15秒，确保采集到鼻咽部上皮细胞。16.核酸检测实验室“污染控制”措施中，不包括：A.每日紫外线消毒30分钟B.使用带滤芯的吸头C.各区物品严格专用D.扩增后反应管在二区打开答案：D解析：扩增后反应管含大量扩增产物（污染性物质），需在扩增分析区（三区）或专门的废弃物处理区打开，禁止返回样本处理区（二区）。17.关于“阴性质控品”的使用，正确的是：A.每批次检测至少1个B.可用生理盐水替代C.需与样本同批提取扩增D.结果.Ct值应＞45答案：C解析：阴性质控品需与样本同步处理（同批提取、扩增），以监测整个流程是否存在污染；每批次至少2个（室内质控要求）；生理盐水无核酸背景，不能替代含阴性基质的质控品；阴性结果应为无扩增曲线或.Ct值＞检测上限（通常＞40）。18.某样本核酸提取后浓度为0.8ng/μL（正常范围2-5ng/μL），可能的原因是：A.样本保存时间过短（＜2小时）B.裂解时间不足（仅5分钟）C.洗脱体积过小（50μL）D.磁珠吸附时间过长（30分钟）答案：B解析：裂解时间不足（通常需10-15分钟）会导致病毒核酸释放不充分，提取浓度降低；样本保存时间过短不影响浓度；洗脱体积小会提高浓度（浓度=总量/体积）；磁珠吸附时间过长可能增加非特异性吸附，但对浓度影响较小。19.核酸检测报告中，“未检测到新型冠状病毒核酸”与“阴性”的区别是：A.前者可能因样本质量差未检出，后者确认无病毒B.两者含义相同C.前者为初筛结果，后者为复核结果D.前者需结合临床症状，后者可直接排除感染答案：A解析：“未检测到”提示检测过程未获得有效信号，可能因样本质量（如降解、病毒载量过低）或操作问题导致，需结合临床评估；“阴性”指在检测灵敏度范围内未检出病毒，需排除采样和检测误差。20.核酸检测实验室发生样本溢洒（含新型冠状病毒），应急处理流程的第一步是：A.用75%乙醇覆盖溢洒区域B.立即通知实验室负责人C.穿戴额外防护装备（如双层手套）D.用吸水材料覆盖溢洒物答案：D解析：样本溢洒处理第一步是用吸水材料（如纱布）覆盖溢洒物，防止扩散，再用有效氯≥2000mg/L的含氯消毒液浸泡30分钟，最后清理并消毒环境。二、多项选择题（每题3分，共30分，少选、错选均不得分）1.影响核酸检测准确性的关键环节包括：A.样本采集部位与深度B.保存液类型及样本体积比C.提取过程中磁珠吸附时间D.扩增时反应体系配置答案：ABCD解析：采样部位（决定病毒载量）、保存液（影响核酸稳定性）、提取参数（影响核酸回收率）、扩增体系（影响扩增效率）均直接影响检测结果。2.核酸检测实验室“三区两缓”布局中，“两缓”指：A.试剂准备区缓冲间B.样本处理区缓冲间C.扩增分析区缓冲间D.清洁区与污染区过渡缓冲间答案：AB解析：标准PCR实验室布局为试剂准备区（一区）、样本处理区（二区）、扩增分析区（三区），以及一区与二区之间、二区与三区之间的缓冲间（两缓），用于人员换鞋、更防护服等。3.关于鼻拭子与咽拭子的比较，正确的是：A.鼻拭子对早期感染的检出率更高B.咽拭子受口腔微生物干扰更小C.鼻拭子采样患者舒适度更低D.两者联合采样可提高检出率答案：ACD解析：鼻拭子因靠近病毒复制的鼻咽部，早期检出率更高；咽拭子易受口腔细菌、食物残渣干扰；鼻拭子插入深度较深，患者不适更明显；联合采样可覆盖不同部位，减少漏检。4.核酸提取仪日常维护内容包括：A.定期校准加样针吸液量B.清洁磁棒套表面残留磁珠C.更换废液槽过滤膜D.检测紫外灯照射强度答案：ABC解析：提取仪维护重点为加样准确性（校准吸液量）、磁珠残留清理（避免交叉污染）、废液系统通畅（更换过滤膜）；紫外灯是实验室环境消毒设备，非提取仪维护内容。5.下列哪些情况需重新进行核酸检测？A.样本运输途中超过24小时未2-8℃保存B.扩增曲线出现双峰（Tm值偏差＞2℃）C.弱阳性对照未检出D.阴性质控品.Ct值为32答案：ABCD解析：样本保存不当（可能核酸降解）、双峰（非特异性扩增）、弱阳性对照未检出（灵敏度不足）、阴性质控阳性（污染）均需重新检测。6.核酸检测生物安全操作规范包括：A.样本离心时使用带盖离心管B.操作完成后用75%乙醇擦拭台面C.医疗废物分层包装（黄色垃圾袋+周转箱）D.实验服每日清洗后重复使用答案：ABC解析：实验服需一次性使用或经高压蒸汽灭菌后重复使用，不可仅清洗；其他选项均符合生物安全要求。7.实时荧光PCR仪校准项目包括：A.温度均匀性（各孔间温差≤0.5℃）B.荧光通道灵敏度（CV≤5%）C.升降温速率（≥2℃/s）D.软件数据存储功能答案：ABC解析：PCR仪校准重点为温度准确性（影响扩增效率）、荧光检测一致性（影响.Ct值重复性）、升降温速率（影响扩增时间）；软件存储功能属性能验证而非校准项目。8.混采检测的适用场景包括：A.大规模社区筛查B.发热门诊患者检测C.隔离点人员定期检测D.急诊手术前快速检测答案：AC解析：混采适用于低风险人群大规模筛查（提高效率）、隔离点定期监测（降低成本）；发热门诊、急诊患者属高风险，需单采单检以确保及时性和准确性。9.核酸检测结果审核时，需核查的内容有：A.样本信息与检测记录是否一致B.质控品结果是否符合要求C.扩增曲线是否符合判读标准D.检测人员是否具备资质答案：ABCD解析：结果审核需涵盖信息一致性（防张冠李戴）、质控有效性（确保检测可靠）、曲线规范性（排除污染或非特异性扩增）、人员资质（符合实验室管理要求）。10.降低核酸检测“假阳性”的措施有：A.使用UNG酶（尿嘧啶糖基化酶）防扩增产物污染B.分区操作时严格遵循“单向流程”C.扩增后反应管密封后再取出D.定期更换实验室空气过滤膜答案：ABCD解析：UNG酶可降解含dUTP的扩增产物（需配套使用dUTP试剂）；单向流程（一区→二区→三区，不可逆向）防止污染扩散；密封反应管减少气溶胶释放；更换空气过滤膜（如HEPA滤膜）降低环境中核酸残留。三、判断题（每题1分，共10分，正确填“√”，错误填“×”）1.核酸检测采样时，若受检者咳嗽，应立即停止采样并更换拭子。（×）解析：咳嗽是常见反应，无需停止采样，可嘱受检者深呼吸后继续，避免反复更换拭子导致样本量不足。2.病毒保存液的体积应至少为样本采集量的3倍。（√）解析：保存液体积需足够覆盖拭子头（通常3-6mL），确保病毒充分释放，一般样本量（拭子头吸附量约0.1-0.2mL）与保存液体积比为1:15-30，故3倍为最低要求。3.核酸提取过程中，洗涤液需完全吸净，避免残留影响洗脱效率。（√）解析：洗涤液残留（含乙醇等）会抑制后续PCR扩增，需彻底吸净。4.实时荧光PCR仪的ROX通道用于校正孔间荧光信号差异。（√）解析：ROX（参比染料）可消除因加样量、孔位置导致的荧光信号误差，提高.Ct值准确性。5.核酸检测报告中，“.Ct值”可直接作为病毒载量的定量依据。（×）解析：.Ct值与病毒载量呈对数负相关，但受采样量、提取效率等影响，需结合标准曲线换算，不能直接等同。6.实验室高压蒸汽灭菌器的生物监测应使用嗜热脂肪芽孢杆菌。（√）解析：嗜热脂肪芽孢杆菌是高压灭菌效果的指示菌（121℃，15分钟可被灭活），用于验证灭菌程序有效性。7.核酸检测样本的唯一标识应包含受检者姓名、采样时间、检测项目。（√）解析：唯一标识需确保可追溯，包含受检者信息（姓名/ID）、时间（采样/接收）、项目（避免混淆检测目标）。8.混采检测中，若1管10:1混采样本阳性，需对该管10人重新采样单检。（×）解析：应首先对原混采管样本进行单检（拆分原管样本），若仍阳性再重新采样，避免重复采样增加受检者负担。9.核酸检测实验室的“清洁区”可放置个人物品（如背包、手机）。（×）解析：清洁区（如更鞋间、缓冲区）需与污染区严格分隔，个人物品应存放于实验室外专用储物柜，避免交叉污染。10.核酸提取试剂开封后，若在2-8℃保存，效期可延长至1个月。（×）解析：试剂开封后效期需根据厂家说明书确定（通常缩短至7-14天），不可自行延长，需通过稳定性验证。四、案例分析题（每题10分，共20分）案例1：某社区卫生服务中心开展大规模核酸筛查，采用10:1混采。采样后6小时将样本送实验室，实验室接收时发现部分样本管标签模糊、保存液漏液。检测过程中，某混采管扩增曲线显示.SAR-CoV-2ORF1ab基因.Ct=33，N基因无扩增信号，内参基因（RP）.Ct=28（正常范围25-30）。问题：1.样本接收时发现的问题可能导致哪些后果？2.该混采管检测结果应如何判读？3.后续应采取哪些处理措施？答案：1.标签模糊可能导致样本信息错误（如受检者与检测结果不匹配）；保存液漏液可能造成样本核酸降解（与空气接触时间延长）或生物安全风险（病毒泄漏污染环境）。2.该混采管ORF1ab基因阳性（.Ct=33＜37），N基因阴性，内参基因正常（提示样本质量合格），需考虑以下可能：①样本中病毒载量极低，仅ORF1ab基因被检出（因引物探针灵敏度差异）；②非典型变异株（N基因区域突变导致引物探针不匹配）；③实验室污