2026年生物化学技术与方法DNA测序技术题库

2026年生物化学技术与方法DNA测序技术题库一、单选题（每题2分，共20题）1.在高通量测序技术中，哪一种平台是目前主流的下一代测序（NGS）技术？A.Sanger测序法B.IonTorrent测序平台C.Illumina测序平台D.Pyrosequencing技术2.DNA测序中，用于标记测序反应的荧光染料不包括以下哪一项？A.FAM（荧光素）B.Cy3（氰基荧光素）C.TexasRed（四甲基罗丹明）D.HPLC（高效液相色谱）检测剂3.在二代测序中，哪种方法可以实现单碱基分辨率的测序？A.Illumina测序B.IonTorrent半导体测序C.PacBioSMRTbell™测序D.OxfordNanopore测序4.DNA测序中，以下哪一项不是PCR扩增的必要条件？A.DNA模板B.引物C.DNA聚合酶D.RNA聚合酶5.在宏基因组测序中，哪种文库构建方法适用于低丰度基因的捕获？A.常规双端测序文库B.桥式PCR扩增法C.末端修复法D.末端修复和加A尾法6.DNA测序中，以下哪种碱基修饰会影响测序准确性？A.甲基化（MethylatedC）B.亚硫酸氢盐修饰（Bisulfitemodification）C.亚硝基化（Nitrosatedbase）D.碱基缺失7.在三代测序技术中，哪种方法可以实现长读长测序？A.Illumina测序B.IonTorrent测序C.PacBioSMRTbell™测序D.OxfordNanopore测序8.DNA测序中，哪种方法适用于检测基因组重排？A.双端测序（Paired-endsequencing）B.单端测序（Single-endsequencing）C.连接组测序（Metagenomicsequencing）D.桥式PCR扩增法9.在DNA测序中，以下哪种试剂用于去除PCR反应中的引物二聚体？A.荧光染料B.聚乙二醇（PEG）C.DNA聚合酶抑制剂D.热稳定引物10.DNA测序中，哪种方法适用于检测RNA序列？A.Sanger测序B.RNA-SeqC.宏基因组测序D.精确测序法二、多选题（每题3分，共10题）1.高通量测序技术的优势包括哪些？A.高通量B.高精度C.低成本D.长读长2.DNA测序中，哪种试剂用于PCR扩增的退火步骤？A.DNA模板B.引物C.DNA聚合酶D.脱氧核苷三磷酸（dNTPs）3.DNA测序中，哪种方法适用于检测基因表达差异？A.RNA-SeqB.宏基因组测序C.ChIP-SeqD.桥式PCR扩增法4.三代测序技术的缺点包括哪些？A.成本高B.通量低C.读长较短D.噪音较大5.DNA测序中，哪种方法适用于检测基因组变异？A.全基因组测序（WGS）B.全外显子组测序（WES）C.RNA-SeqD.ChIP-Seq6.宏基因组测序的适用场景包括哪些？A.环境微生物群落分析B.疾病病原体检测C.基因组重排分析D.基因表达研究7.DNA测序中，哪种试剂用于PCR扩增的延伸步骤？A.DNA模板B.引物C.DNA聚合酶D.脱氧核苷三磷酸（dNTPs）8.二代测序技术的平台包括哪些？A.Illumina测序B.IonTorrent测序C.PacBioSMRTbell™测序D.OxfordNanopore测序9.DNA测序中，哪种方法适用于检测基因组结构变异？A.双端测序（Paired-endsequencing）B.单端测序（Single-endsequencing）C.连接组测序（Metagenomicsequencing）D.桥式PCR扩增法10.DNA测序中，哪种试剂用于去除PCR反应中的非特异性产物？A.荧光染料B.聚乙二醇（PEG）C.DNA聚合酶抑制剂D.热稳定引物三、判断题（每题2分，共10题）1.Sanger测序法是目前主流的高通量测序技术。（×）2.二代测序技术可以实现单碱基分辨率的测序。（×）3.DNA测序中，PCR扩增是必要的步骤。（√）4.宏基因组测序适用于检测低丰度基因。（√）5.三代测序技术的读长可以达到几十kb。（√）6.DNA测序中，荧光染料用于检测PCR产物。（√）7.RNA-Seq适用于检测基因组重排。（×）8.二代测序技术的通量比三代测序高。（√）9.DNA测序中，桥式PCR扩增法适用于文库构建。（√）10.DNA测序中，热稳定引物可以提高扩增效率。（√）四、简答题（每题5分，共6题）1.简述Illumina测序技术的原理。2.简述PacBioSMRTbell™测序技术的特点。3.简述RNA-Seq的文库构建步骤。4.简述宏基因组测序的适用场景。5.简述DNA测序中，PCR扩增的优化方法。6.简述三代测序技术的应用领域。五、论述题（每题10分，共2题）1.比较二代测序和三代测序技术的优缺点。2.论述DNA测序技术在临床诊断中的应用。答案与解析一、单选题1.C-Illumina测序平台是目前主流的二代测序技术，具有高通量和高精度的特点。2.D-HPLC检测剂用于分离和检测化合物，不属于测序染料。3.D-OxfordNanopore测序可以实现单碱基分辨率的测序，读长较长。4.D-PCR扩增需要RNA聚合酶进行RNA模板的扩增，DNA测序以DNA模板为基础。5.B-桥式PCR扩增法适用于低丰度基因的捕获，提高测序效率。6.C-亚硝基化会影响测序准确性，其他修饰如甲基化和亚硫酸氢盐修饰通常不影响。7.C-PacBioSMRTbell™测序可以实现长读长测序，读长可达几十kb。8.A-双端测序可以检测基因组重排，通过分析两端序列的间距变化。9.B-聚乙二醇（PEG）用于去除PCR反应中的引物二聚体，提高产物纯度。10.B-RNA-Seq适用于检测RNA序列，研究基因表达差异。二、多选题1.A、B、C-高通量测序技术的优势包括高通量、高精度和低成本。2.B、C、D-PCR扩增需要引物、DNA聚合酶和dNTPs，DNA模板是反应基础。3.A、C-RNA-Seq和ChIP-Seq适用于检测基因表达差异。4.A、B、D-三代测序技术的缺点包括成本高、通量低和噪音较大。5.A、B-全基因组测序和全外显子组测序适用于检测基因组变异。6.A、B-宏基因组测序适用于环境微生物群落分析和疾病病原体检测。7.B、C、D-PCR扩增需要引物、DNA聚合酶和dNTPs。8.A、B、C、D-二代测序平台包括Illumina、IonTorrent、PacBio和OxfordNanopore。9.A、B-双端测序和单端测序可以检测基因组结构变异。10.B、C-聚乙二醇和DNA聚合酶抑制剂用于去除非特异性产物。三、判断题1.×-Sanger测序法是第一代测序技术，目前主要应用于小片段测序。2.×-二代测序技术的读长较短，三代测序技术可以实现单碱基分辨率。3.√-DNA测序通常需要PCR扩增，提高模板浓度。4.√-宏基因组测序适用于检测低丰度基因。5.√-三代测序技术的读长可以达到几十kb，远超二代测序。6.√-荧光染料用于标记测序反应，通过荧光信号检测碱基。7.×-RNA-Seq适用于检测基因表达差异，ChIP-Seq用于检测蛋白质-DNA相互作用。8.√-二代测序技术的通量比三代测序高，适用于大规模测序。9.√-桥式PCR扩增法适用于文库构建，提高测序效率。10.√-热稳定引物可以提高PCR扩增效率，减少非特异性产物。四、简答题1.Illumina测序技术的原理-Illumina测序技术基于边合成边测序（BYSS）原理，通过测序集群将DNA片段固定在流动细胞表面，进行PCR扩增。然后，通过添加荧光标记的dNTPs，逐个碱基延伸，通过成像系统检测荧光信号，从而确定碱基序列。2.PacBioSMRTbell™测序技术的特点-PacBioSMRTbell™测序技术基于半导体测序原理，可以实现长读长测序（几十kb），适用于基因组组装、宏基因组分析和变异检测。但通量较低，成本较高。3.RNA-Seq的文库构建步骤-RNA-Seq的文库构建步骤包括：①RNA提取；②反转录为cDNA；③末端修复和加A尾；④加接头；⑤PCR扩增；⑥文库质检和测序。4.宏基因组测序的适用场景-宏基因组测序适用于环境微生物群落分析、疾病病原体检测、基因功能研究等场景，可以研究未培养微生物的基因组信息。5.DNA测序中，PCR扩增的优化方法-PCR扩增的优化方法包括：①选择合适的引物；②优化退火温度；③调整Mg2+浓度；④添加DMSO提高GC含量；⑤控制循环数。6.三代测序技术的应用领域-三代测序技术的应用领域包括基因组组装、宏基因组分析、变异检测、RNA测序等，尤其适用于长片段DNA的测序。五、论述题1.比较二代测序和三代测序技术的优缺点-二代测序（如Illumina）：优点是高通量、高精度、成本低；缺点是读长较短（几百bp），难以检测长片段结构变异。-三代测序（如PacBio、OxfordNanopore）：优点是读长长（几十kb），可以检测长片段结构变异；缺点是通量低、成本高、噪音较大。-应用场景：二代测序适用于全外显子组测序和宏基因组分析，三代测序适