《病理科诊疗指南及操作规范(2025版)》

《病理科诊疗指南及操作规范(2025版)》一、标本接收与登记规范病理标本的规范接收与登记是保证诊疗准确性的首要环节，需严格执行双人核对制度，确保信息完整、可追溯。1.1接收标准-临床信息完整性：接收标本时需核对申请单与标本标识的一致性，内容应包括患者姓名、性别、年龄、住院号/门诊号、标本来源（如左肺上叶切除）、手术方式（如根治性切除/活检）、临床诊断（需注明可疑病变部位及特征）、特殊检查结果（如影像学提示占位大小、内镜所见）。缺少关键信息（如患者标识、标本来源）的申请单应退回临床补充，紧急情况下需电话确认并记录备案。-标本固定要求：所有手术切除标本（除需新鲜处理的分子检测标本外）应在离体30分钟内完成固定，固定液为10%中性缓冲福尔马林（pH7.0-7.4），体积需为标本体积的5-10倍。小活检标本（如胃镜/肠镜活检）应立即放入固定液，避免干燥或自溶；若标本为囊性或含血液，需先排空内容物再固定。未规范固定（如固定液不足、使用非缓冲福尔马林）的标本需标注并记录，必要时与临床沟通确认是否影响诊断。-特殊标本处理：需进行分子检测的新鲜组织（如基因测序、FISH）应在离体30分钟内置于专用保存液（如RNAlater）或-80℃冻存，接收时需核对保存条件（温度、保存液类型），不符合要求的标本不得用于检测。1.2登记与保存接收后需通过实验室信息系统（LIS）完成电子登记，内容包括接收时间、标本类型（切除/活检/细胞学）、数量、固定状态、备注（如“固定延迟2小时”）。纸质申请单与电子信息需同步存档，保存期限不低于15年。标本容器需标注唯一病理号，与申请单一一对应，避免混淆。二、标本取材操作规范取材是病理诊断的核心环节，直接影响后续制片质量与诊断准确性，需根据标本类型制定标准化流程。2.1手术切除标本取材-总则：取材前需全面观察标本，记录大小、形状、颜色、包膜完整性、切面特征（如肿瘤位置、大小、质地、与周围组织关系），必要时拍照留存。肿瘤标本需标记切缘（如用墨汁涂抹），并记录肿瘤距切缘的最短距离。-具体器官规范：-胃肠道：沿肠系膜对侧剪开肠管，展平后固定；肿瘤标本需记录肿瘤长度（环周/纵轴）、浸润深度（穿透浆膜层需注明），取材时包括肿瘤中心（含坏死区）、肿瘤与正常组织交界区、切缘（近端/远端/环周）、区域淋巴结（胃癌需至少取材15枚，结直肠癌需至少12枚）。-乳腺：切除标本需标记方位（上/下/内/外），肿瘤需测量三维径线，取材包括肿瘤核心（含钙化区）、乳头/皮肤切缘（怀疑Paget病时需重点取材）、腋窝淋巴结（按LevelI/II/III分区取材）。-肝胆胰：肝癌标本需记录卫星结节、血管侵犯（门脉/肝静脉），取材包括肿瘤、癌旁肝组织（距肿瘤2cm内）、切缘；胰腺癌需重点取材胰管侵犯情况及神经周围浸润。2.2活检标本取材-小活检（如内镜/穿刺）：需使用放大镜观察，记录标本数量（如“5粒，最大径0.2cm”）、质地（软/硬）；若为黏膜标本，需平铺于滤纸上固定，避免卷曲；疑为淋巴瘤时需取完整淋巴结（避免挤压），取材时保留部分组织用于分子检测（如流式细胞术、基因重排）。-细胞学标本（如胸腹水、细针穿刺）：液基细胞学需离心后取沉渣制片，细胞块需包埋石蜡；穿刺标本需涂片2-4张（1张用于快速染色初筛），剩余组织制作细胞块。2.3取材记录所有取材过程需在取材记录单中详细描述，包括取材部位（如“胃窦小弯侧肿瘤中心1块，交界区1块”）、组织块数量（常规每块大小1.5cm×1.5cm×0.3cm）、特殊处理（如“标记切缘”）。记录单需与切片一一对应，确保可追溯性。三、组织处理与制片技术规范制片质量直接影响诊断准确性，需严格控制每一步骤参数。3.1脱水与透明-脱水流程：梯度乙醇（75%→85%→95%→无水乙醇Ⅰ→无水乙醇Ⅱ），每步时间根据组织类型调整（小活检4-6小时，大标本8-12小时），避免过度脱水（组织变脆）或脱水不足（切片模糊）。-透明：使用二甲苯或环保透明剂，时间以组织透明为准（小活检15-30分钟，大标本45-60分钟），避免透明过度导致组织硬脆。3.2包埋与切片-包埋：组织需平整放入包埋框，切面朝下（如胃肠道黏膜面朝上）；脂肪组织需用镊子轻压固定，避免漂浮；骨组织需脱钙完全（脱钙液pH≥4.0，脱钙后冲洗30分钟）。-切片：使用半薄切片机（厚度4-5μm），刀距调整至0.5μm，避免刀痕；连续切片3-5张（1张HE，余者备用），漂浮水温40-45℃（避免组织皱缩）。3.3染色与封片-HE染色：苏木精染色5-8分钟，分化液（1%盐酸乙醇）分化3-5秒，蓝化（温水或稀氨水）至组织变蓝；伊红染色30秒-2分钟（根据组织类型调整）。染色后需检查细胞核与细胞质对比（核蓝质红），避免过染或欠染。-特殊染色与免疫组化（IHC）：-特殊染色（如Masson三色染胶原、抗酸染色找结核杆菌）需设置阳性对照（如已知阳性组织），结果判读需结合形态学。-IHC需选择经CFDA或FDA认证的抗体，严格按说明书操作（抗原修复类型：热修复/酶消化；一抗孵育时间：30分钟-2小时）；结果判读需记录阳性细胞比例（0-100%）与强度（弱/中/强），避免主观偏差。四、病理诊断流程与报告规范诊断需遵循“初诊-复核-签发”三级审核制度，确保准确性与规范性。4.1常规病理诊断-初诊医师：需具有5年以上病理诊断经验，结合临床信息、大体描述、镜下形态作出初步诊断，记录疑难点（如“不典型增生，需鉴别良恶性”）。-复核医师：由高年资主治医师或副主任医师担任，重点核查肿瘤分级（如乳腺癌的Elston-Ellis评分）、分期（如AJCC第9版）、切缘状态（阴性/阳性）、淋巴结转移情况（数目及位置），对疑难病例提出鉴别诊断思路。-签发医师：副主任医师及以上职称，最终确认诊断结论，必要时查阅原始切片或补充检测（如加做IHC、分子检测）。4.2快速冰冻诊断-适应症：仅限用于术中确定病变性质（如肿瘤良恶性）、切缘是否干净、淋巴结是否转移，禁止用于交界性肿瘤（如卵巢交界性上皮肿瘤）或需要特殊染色/分子检测的病例。-操作规范：标本离体后10分钟内送至病理科，取材后30分钟内出具报告；冰冻切片厚度6-8μm，避免过厚导致细胞重叠；诊断需双人核对，记录与石蜡切片的符合率（目标≥98%），不符合病例需分析原因并反馈临床。4.3分子病理诊断-检测前评估：需确认标本质量（肿瘤细胞比例≥20%，DNA/RNA浓度≥50ng/μl，片段长度≥100bp），不符合者需重新取材或与临床沟通。-检测项目选择：根据指南推荐（如肺癌检测EGFR/ALK/ROS1，结直肠癌检测RAS/BRAF），避免过度检测；结果解读需结合形态学（如肺腺癌EGFR突变阳性支持靶向治疗）。-报告内容：需注明检测方法（如NGS/PCR）、变异类型（如EGFRexon19缺失）、丰度（如变异allelefrequency35%），并给出临床意义（如“提示对奥希替尼敏感”）。4.4病理报告签发-时限要求：常规病理报告3-5个工作日（小活检2-3个工作日），冰冻报告30分钟内，分子检测报告7-10个工作日（复杂项目可延长）。-内容规范：-基本信息：患者姓名、病理号、标本类型、送检科室。-诊断结论：使用规范术语（如“胃窦部腺癌，中分化，浸润至浆膜层（pT4a），淋巴结转移3/18（pN2），切缘阴性”），避免模糊表述（如“倾向恶性”需改为“考虑腺癌”）。-附加信息：分子检测结果、特殊染色提示（如“CK20+、CDX2+，支持肠道来源”）、临床建议（如“建议检测HER2状态指导治疗”）。五、质量控制与持续改进建立全流程质量控制体系，涵盖人员、设备、流程、数据四个维度。5.1人员培训与考核-技术员：需通过病理技术资格认证，每2年接受继续教育（如新型染色技术、数字化病理平台操作），考核内容包括切片合格率（目标≥95%）、染色一致性（HE切片背景清晰率≥98%）。-诊断医师：需参加国家级病理读片会（如中华医学会病理分会），每年度完成100例以上疑难病例讨论，考核指标包括诊断符合率（与外院会诊/随访结果对比≥95%）、报告及时率（≥98%）。5.2设备与试剂管理-设备校准：切片机每月校准刀距（误差≤0.5μm），染色机每季度检测温度（HE染色水温40±2℃），冰箱/温箱每日记录温度（4℃冰箱波动≤2℃）。-试剂质控：福尔马林每月检测pH值（7.0-7.4），抗体每批次检测阳性对照（如CKpan在正常上皮中阳性），不合格试剂立即停用并追溯。5.3流程监控与改进-建立质量指标数据库：每月统计切片退片率（因质量问题重切的比例≤2%）、诊断延迟率（超过规定时限的报告比例≤1%）、冰冻与石蜡不符率（≤2%），分析异常指标原因（如取材不规范、设备故障）并制定改进措施。-患者反馈机制：通过医院平台收集临床科室意见（如“报告术语需更通俗”），每季度召开临床-病理沟通会，优化服务流程（如增设分子检测咨询窗口）。5.4数字化与信息化管理-推广数字病理切片（WSI）存储，重要病例（如疑难肿瘤、教学病例）扫描存档（分辨率≥40倍物镜），支持远程会诊与教学。-LIS系统需与医院HIS系统对接，实现标本追踪（接收-取材-制片-诊断-报告全流程可查）、危急值自动提醒（如“淋巴结转移≥N3”），确保信息安全（符合《个人信息保护法》）。六、生物安全与伦理规范-生物安全：标本处理需在BSL-2级实验室进行，操作人员穿戴防护装备（