药物分析题库及答案

药物分析题库及答案1.简述药物分析中"鉴别试验"的主要目的及常用方法。答：鉴别试验的主要目的是通过特定的化学反应或仪器分析手段，确证药物的真伪，判断其是否为标签所标示的药物，而非对纯度或含量的评价。常用方法包括：（1）化学鉴别法（如显色反应、沉淀反应、气体提供反应）；（2）光谱鉴别法（如红外光谱法、紫外-可见分光光度法）；（3）色谱鉴别法（如薄层色谱法、高效液相色谱法的保留时间比较）；（4）生物学鉴别法（如微生物法、酶反应法）；（5）物理常数测定（如熔点、沸点、比旋度等）。2.某药物的含量测定采用高效液相色谱法（HPLC），系统适用性试验需考察哪些指标？各指标的具体要求是什么？答：HPLC系统适用性试验需考察以下指标：（1）理论板数（n）：用于评价色谱柱的分离效能，一般要求n≥2000（根据具体药物调整）；（2）分离度（R）：衡量相邻色谱峰的分离程度，定量分析时R≥1.5，鉴别或杂质检查时R≥1.0；（3）重复性：取同一对照品溶液连续进样5次，峰面积的相对标准偏差（RSD）≤2.0%；（4）拖尾因子（T）：衡量色谱峰的对称性，一般要求0.95≤T≤1.05（特殊情况可放宽至0.85-1.15）；（5）灵敏度：以信噪比（S/N）表示，定量限（LOQ）要求S/N≥10，检测限（LOD）要求S/N≥3。3.阿司匹林原料药的含量测定为何采用直接酸碱滴定法？而阿司匹林片的含量测定为何需采用两步滴定法？答：阿司匹林原料药分子结构中含游离羧基（-COOH），在中性乙醇中可与氢氧化钠定量反应，故采用直接酸碱滴定法（NaOH滴定液直接滴定）。但阿司匹林片的辅料（如淀粉、硬脂酸镁等）及水解产物（水杨酸、醋酸）会干扰滴定：（1）片剂中的稳定剂（如酒石酸、枸橼酸）可能消耗NaOH；（2）阿司匹林在制片过程中可能水解提供水杨酸和醋酸，直接滴定会导致结果偏高。因此需采用两步滴定法：第一步中和所有酸性物质（包括阿司匹林的羧基、水解产生的醋酸及稳定剂）；第二步水解阿司匹林（加入过量NaOH加热水解为水杨酸钠和醋酸钠），再用硫酸滴定液回滴剩余的NaOH，从而消除干扰，准确测定阿司匹林的含量。4.简述气相色谱法（GC）在药物分析中的应用范围及检测器选择原则。答：GC主要用于挥发性药物或经衍生化后可挥发的药物分析，应用范围包括：（1）有机溶剂残留量检查（如ICH规定的一类、二类溶剂）；（2）挥发性药物的含量测定（如乙醇、乙醚、麻醉剂等）；（3）中药挥发油成分分析；（4）甾体类药物的衍生物分析（如三甲基硅醚衍生物）。检测器选择原则：（1）热导检测器（TCD）：通用型，适用于无机气体和有机物的常量分析（灵敏度低）；（2）氢火焰离子化检测器（FID）：对含碳有机物灵敏度高（最常用）；（3）电子捕获检测器（ECD）：对电负性强的物质（如卤素、硝基化合物）灵敏度极高，适用于含卤素药物（如氯霉素）或农药残留分析；（4）氮磷检测器（NPD）：对含氮、磷化合物选择性高，适用于生物碱、有机磷农药分析；（5）火焰光度检测器（FPD）：对含硫、磷化合物敏感，用于含硫药物（如甲巯咪唑）或有机磷杂质检查。5.维生素C（抗坏血酸）的含量测定为何常用碘量法？测定时为何需加入稀醋酸？答：维生素C分子结构中含连二烯醇基（-C(OH)=C(OH)-），具有强还原性，可被碘定量氧化为二酮基，反应式为：C6H8O6+I2→C6H6O6+2HI，故可用碘量法直接滴定。加入稀醋酸的目的是：（1）降低溶液pH，抑制维生素C的水解（在碱性条件下更易水解为酮古洛糖酸）；（2）减慢维生素C被空气中O2氧化的速度（酸性条件下还原性稍弱，稳定性提高）；（3）使滴定终点更敏锐（碘在酸性条件下与淀粉指示剂的显色反应更稳定）。6.某药物的紫外吸收光谱在278nm处有最大吸收（ε=1200），采用紫外-可见分光光度法测定其含量时，若称取样品0.0250g，溶解并定容至100mL，取5mL稀释至50mL，测得吸光度A=0.580，计算样品的含量（按干燥品计，摩尔质量M=180g/mol）。答：根据朗伯-比尔定律A=εcl，其中c为摩尔浓度（mol/L），l=1cm。（1）计算稀释后溶液的浓度c：c=A/(εl)=0.580/(1200×1)=4.833×10^-4mol/L（2）稀释后溶液的体积为50mL，故稀释前5mL溶液中含药量：m1=c×V×M=4.833×10^-4mol/L×0.05L×180g/mol=0.00435g（3）原100mL溶液中含药量：m总=m1×(100/5)=0.00435g×20=0.0870g（4）样品含量（质量分数）：含量%=(m总/取样量)×100%=(0.0870g/0.0250g)×100%=348%（注：此结果明显异常，可能题目数据设置不合理，实际应调整ε或A值使结果在合理范围，此处仅为计算演示）。7.简述药物中"有关物质"检查的意义及常用方法。答：有关物质指药物在生产、储存过程中产生的降解产物、中间体、异构体及原料残留等杂质，可能影响药物的安全性和有效性。检查意义在于控制药物纯度，确保临床用药安全。常用方法包括：（1）HPLC法（主成分自身对照法、外标法、面积归一化法）；（2）薄层色谱法（TLC，杂质对照品法、自身稀释对照法）；（3）气相色谱法（GC，适用于挥发性有关物质）；（4）毛细管电泳法（CE，适用于生物大分子药物）。其中HPLC法因分离效率高、灵敏度好，是最常用的方法。8.葡萄糖注射液中"5-羟甲基糠醛"的检查原理是什么？为何需控制该杂质？答：葡萄糖在高温灭菌（如热压灭菌）过程中易发生脱水分解，提供5-羟甲基糠醛（5-HMF）。5-HMF对人体有害（可能引起溶血、肝肾损伤），且其含量与葡萄糖分解程度正相关，故需控制。检查原理：5-HMF在284nm处有特征吸收，采用紫外-可见分光光度法测定其吸光度，规定吸光度不得超过0.32（ChP2020规定），从而间接控制葡萄糖的分解程度。9.简述高效液相色谱法中"梯度洗脱"的适用场景及与"等度洗脱"的区别。答：梯度洗脱适用于以下场景：（1）样品中各组分极性差异大（如同时含弱极性和强极性成分）；（2）复杂样品（如中药提取物、生物样品）的分离；（3）需缩短分析时间（避免强保留组分在色谱柱上残留）。与等度洗脱的区别：（1）流动相组成：梯度洗脱过程中流动相的比例（如甲醇-水的比例）随时间线性或非线性变化；等度洗脱流动相组成恒定。（2）分离效果：梯度洗脱可提高复杂样品的分离度，避免弱保留组分重叠、强保留组分拖尾；等度洗脱适用于组分极性相近的样品。（3）仪器要求：梯度洗脱需二元或多元泵系统，等度洗脱单泵即可。10.某药物的鉴别试验中，红外光谱法与标准图谱不一致，可能的原因有哪些？答：可能原因包括：（1）样品纯度不足（杂质干扰光谱）；（2）制样方法不当（如KBr压片时未干燥，导致水峰干扰；或样品与KBr混合不均匀）；（3）仪器参数设置错误（如扫描范围未覆盖4000-400cm^-1，分辨率过低）；（4）标准图谱来源不同（如不同仪器、不同制样方法的图谱差异）；（5）样品晶型不同（同一药物的不同晶型红外光谱可能有差异）；（6）样品潮解或分解（如吸潮后羟基峰增强，分解后出现新的官能团峰）。11.简述原子吸收分光光度法在药物分析中的应用及定量方法。答：应用：主要用于药物中金属元素的测定，包括（1）重金属检查（如铅、镉、汞）；（2）微量元素分析（如铁、锌、铜等必需元素）；（3）催化剂残留检查（如钯、铂等金属催化剂）；（4）中药中重金属及有害元素限量（如ChP2020规定的铅≤5mg/kg、镉≤0.3mg/kg等）。定量方法：（1）标准曲线法：配制系列浓度的标准溶液，测定吸光度绘制标准曲线，样品吸光度代入计算；（2）标准加入法：适用于样品基质复杂、干扰严重的情况，向样品中加入不同量的标准溶液，测定吸光度后外推求得样品浓度；（3）内标法：加入内标元素（与待测元素性质相近），通过待测元素与内标元素的吸光度比值定量，减少仪器波动误差。12.简述药物分析中"方法验证"的主要内容及各内容的目的。答：方法验证的主要内容及目的：（1）准确度：用回收率表示，验证方法测定结果与真实值的接近程度（原料药≥98.0%-102.0%，制剂≥95.0%-105.0%）；（2）精密度：包括重复性（同批样品）、中间精密度（不同日期/人员）、重现性（不同实验室），验证方法的稳定性（RSD≤2.0%）；（3）专属性：验证方法能准确区分待测成分与杂质、辅料的能力（如HPLC中空白溶液无干扰峰）；（4）线性：验证待测物浓度与响应值的线性关系（相关系数r≥0.999）；（5）范围：验证方法适用的浓度区间（如含量测定为80%-120%，杂质检查为限度的20%-200%）；（6）检测限（LOD）：能检测到的最低浓度（S/N≥3），用于杂质检查；（7）定量限（LOQ）：能准确定量的最低浓度（S/N≥10），用于含量测定或杂质定量；（8）耐用性：验证实验条件微小变化（如流动相pH±0.2、柱温±2℃）对结果的影响（RSD≤2.0%）。13.盐酸普鲁卡因注射液中"对氨基苯甲酸"的检查为何需采用HPLC法？简述其检查原理。答：盐酸普鲁卡因在储存过程中易水解提供对氨基苯甲酸（PABA），PABA不仅失去疗效，还可能引起过敏反应，故需控制。采用HPLC法的原因：（1）PABA与普鲁卡因的结构相似（均含苯环、氨基），TLC分离效果差；（2）HPLC可通过调整流动相pH（如加入磷酸盐缓冲液），利用两者极性差异（普鲁卡因含酯基，极性小于PABA）实现基线分离；（3）HPLC灵敏度高（可检测到0.1%的杂质），满足限度要求（ChP2020规定PABA≤0.5%）。检查原理：以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，磷酸盐缓冲液（pH3.0）-甲醇为流动相，紫外检测器（279nm）检测，采用主成分自身对照法，比较杂质峰面积与对照溶液峰面积（取供试品溶液稀释100倍作为对照），计算PABA的含量。14.简述紫外-可见分光光度法中"吸收系数法"测定含量的步骤及注意事项。答：步骤：（1）确定最大吸收波长（λmax）：扫描样品溶液的紫外光谱，找到λmax；（2）计算吸收系数（E1%1cm）：查阅药典或文献，获取该药物在λmax处的E1%1cm值；（3）样品测定：称取适量样品，溶解并稀释至适宜浓度（使A在0.3-0.7之间），测定吸光度A；（4）含量计算：根据公式含量%=(A×D)/(E1%1cm×100×m)×100%，其中D为稀释倍数，m为取样量（g）。注意事项：（1）需验证λmax的准确性（避免溶剂或杂质干扰）；（2）溶液需澄清（避免悬浮物散射光影响A值）；（3）溶剂选择（与对照品一致，避免溶剂吸收干扰）；（4）仪器校正（波长准确度、吸光度准确度需定期校验）；（5）线性范围验证（确保A与浓度呈线性关系）。15.简述气相色谱法中"内标法"的优点及操作步骤。答：优点：（1）消除进样量误差（内标物与待测物同时进样，体积波动对两者影响一致）；（2）减少仪器参数波动（如载气流速、柱温变化对相对响应值影响小）；（3）适用于样品前处理复杂的情况（如衍生化，内标物与待测物同步处理）。操作步骤：（1）选择内标物：与待测物结构相似、性质相近、不与样品反应、在色谱图中与待测物峰分离（R≥1.5）；（2）配制内标溶液：准确称取内标物，用溶剂溶解并定容；（3）配制对照品溶液：精密称取对照品，加入一定量内标溶液，稀释至刻度；（4）配制样品溶液：精密称取样品，加入与对照品溶液等量的内标溶液，稀释至刻度；（5）进样测定：分别测定对照品溶液和样品溶液中待测物与内标物的峰面积（或峰高）；（6）计算含量：根据公式，样品含量=(A样/A内标样)×(C对照×A内标对照/A对照)×(稀释倍数/取样量)。16.简述高效液相色谱法中"色谱柱"的选择原则（以反相色谱为例）。答：反相色谱常用C18（十八烷基硅烷键合硅胶）、C8（辛基硅烷键合硅胶）色谱柱，选择原则如下：（1）待测物极性：极性小（如甾体、生物碱）选C18（保留强）；极性大（如氨基酸、糖）选C8（保留弱，避免洗脱时间过长）；（2）待测物分子量：小分子（<2000）选常规颗粒（5μm）；大分子（如蛋白质）选大孔径（300Å）、大颗粒（10μm）色谱柱；（3）pH稳定性：待测物需在酸性条件下分离（如pH2-3），选耐酸色谱柱（键合相含封尾基团，减少硅醇基裸露）；碱性条件（pH7-8）选耐碱色谱柱（如硅胶基质表面包覆聚合物）；（4）柱长与内径：常规分析用250mm×4.6mm（兼顾分离度与分析时间）；快速分析用短柱（50-100mm）或细内径（2.1mm）柱（降低溶剂消耗）；（5）品牌与批次：优先选择稳定性好的品牌（如Waters、Agilent），同一方法需使用同一批次色谱柱（避免保留时间漂移）。17.某药物的含量测定采用非水溶液滴定法（冰醋酸为溶剂，高氯酸滴定液），简述其原理及注意事项。答：原理：对于碱性较弱的药物（如胺类、生物碱类），在水溶液中滴定突跃不明显，需在酸性非水溶剂（如冰醋酸）中增强其碱性，用高氯酸（强酸）滴定，反应式为：B·HClO4←B+HClO4（B为弱碱药物）。注意事项：（1）溶剂纯度：冰醋酸需加入醋酐除去水分（水会降低溶剂的酸性，影响滴定突跃）；（2）滴定液标定：高氯酸滴定液需用基准邻苯二甲酸氢钾标定（在冰醋酸中，邻苯二甲酸氢钾显碱性，与高氯酸定量反应）；（3）指示剂选择：常用结晶紫（酸式色为黄色，碱式色为紫色，终点为蓝绿色）；（4）温度校正：高氯酸滴定液的体积随温度变化较大（冰醋酸膨胀系数大），若滴定与标定时温度差>10℃，需校正浓度（c1=c0×[1+0.0011(t1-t0)]，0.0011为冰醋酸的体积膨胀系数）；（5）防止干扰：若药物为盐酸盐（如盐酸麻黄碱），需加入醋酸汞试液（与Cl^-提供难离解的HgCl2，消除Cl^-对滴定的干扰）。18.简述中药制剂分析的特点及常用方法。答：特点：（1）成分复杂（含生物碱、黄酮、挥发油等多类成分）；（2）基质干扰大（辅料、药材粉末可能影响分离）；（3）有效成分不明确（部分制剂无单一指标成分，需多指标控制）；（4）质量波动大（药材产地、采收季节、炮制方法影响成分含量）。常用方法：（1）TLC：用于鉴别（如人参皂苷、大黄蒽醌的鉴别）；（2）HPLC：用于含量测定（如丹参中丹参酮ⅡA、黄芪中黄芪甲苷的测定）；（3）GC：用于挥发油成分分析（如薄荷脑中薄荷醇的含量测定）；（4）UV-Vis：用于总黄酮、总生物碱的含量测定（如芦丁为对照品测定总黄酮）；（5）指纹图谱：通过HPLC或GC建立多成分指纹图谱，整体控制质量（如中药注射剂的指纹图谱要求）；（6）原子吸收/ICP-MS：用于重金属及有害元