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紫外-可见光分光光度法测定水中有机物吸收光谱实验二指导教师:01实验目的与原理02实验装置与步骤03数据记录与分析04注意事项与思考题目录一、实验目的与原理了解实验目的和测定原理明确实验要达成的目标01掌握测定原理方法掌握紫外-可见光分光光度法测定有机物吸收光谱的原理和方法。02熟练操作仪器熟练掌握紫外-可见光分光光度计的操作与使用。03学会绘制曲线分析学会绘制有机物吸收光谱曲线和标准曲线图,并进行定量分析。实验目的理解实验背后的科学原理有机物的吸收特性有机化合物对特定波长光线有吸收特性,可扫描测定最大吸收光谱。1紫外-可见光吸收光谱研究物质在200-800nm区分子吸收光谱,属于电子光谱。2电子跃迁产生光谱有机物不饱和键吸收特定光,产生电子跃迁形成吸收光谱。3定性分析依据定性分析根据吸收光谱图上最大吸收波长、强度和吸收系数。4定量分析依据定量分析根据Beer定律,吸光度与浓度、光程长度有关。5实验原理二、实验装置与步骤熟悉实验所需设备和操作流程了解实验所需仪器和试剂包括紫外-可见光分光光度计、电子天平、比色皿等。01仪器有邻苯二甲酸氢钾、藏红T、甲基蓝标准储备液和超纯水。02试剂如容量瓶、移液管、玻璃棒、烧杯等常用玻璃器皿。03其他玻璃器皿实验装置与试剂按照步骤进行实验操作配制不同浓度邻苯二甲酸氢钾、藏红T、甲基蓝标准系列溶液。标准溶液配制1220nm处测透光率,偏差小于0.5%的比色皿可使用并记录校正值。比色皿配套性检查2选标准溶液,200-600nm范围绘制吸收曲线,确定特征波长。有机物定性分析3特征波长处测标准溶液吸光度,以浓度和吸光度为坐标绘制曲线。标准曲线绘制4选未知样,测吸光度,根据标准曲线计算未知样浓度。有机物定量分析5实验步骤三、数据记录与分析记录实验数据并进行科学分析准确记录实验相关数据记录各浓度标准溶液的吸光度,绘制标准曲线并计算回归方程。标准曲线数据1多次测定未知样吸光度,计算浓度、平均值、误差和标准偏差。未知样数据分析2数据记录根据标准曲线数据,计算回归方程和相关系数。计算回归方程01依据标准曲线回归方程,计算未知样中有机物浓度。计算未知样浓度02按公式计算实验的相对误差和相对标准偏差。计算误差与标准偏差03对实验数据误差产生的原因进行分析。分析误差原因04对实验数据进行分析数据分析四、注意事项与思考题明确实验注意要点并思考相关问题实验过程中需要注意的事项仪器防水防潮注意紫外-可见光分光光度计的仪器防水与防潮。1比色皿使用石英比色皿易碎,要轻拿轻放,使用前检查配套性并调零。2溶液使用标准溶液现配现用,未知样品均匀混合避免沉淀。3佩戴手套实验过程中尽量佩戴手套,避免接触化学品。45更换波长模式校零每次更换波长或模式时,需重新校基线或校零。注意事项对实验内容进行深入思考适用有机物类型思考紫外-可见光分光光度法适用于哪些类型的有机物及原因。01特征波长选择
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