2026年病理切片制作试题及答案

2026年病理切片制作试题及答案一、单项选择题（每题2分，共10分）1.病理标本固定时，最常用的固定液是A.95%乙醇B.10%中性福尔马林C.戊二醛D.Bouin液答案：B解析：10%中性福尔马林（4%甲醛）因穿透性好、对组织收缩小、能较好保存组织抗原和形态结构，是病理常规固定的首选。2.组织脱水时，正确的乙醇浓度梯度顺序是A.50%→70%→80%→95%→无水乙醇B.70%→80%→95%→无水乙醇（2次）C.95%→无水乙醇→70%→80%D.无水乙醇→95%→80%→70%答案：B解析：脱水需从低浓度到高浓度梯度进行，避免组织因渗透压骤变导致过度收缩或破裂。常规顺序为70%（去血污）→80%→95%（2小时）→无水乙醇（2次，每次12小时）。3.组织透明时，若使用二甲苯过度，最可能出现的问题是A.组织软化无法切片B.组织变脆易碎裂C.石蜡无法渗透D.染色时脱片答案：B解析：二甲苯透明时间过长会导致组织过度脱脂、质地变脆，切片时易出现破碎或断裂。4.包埋石蜡的熔点选择主要依据A.标本大小B.实验室温度C.组织类型（如脂肪/纤维）D.以上均是答案：D解析：大标本需高熔点石蜡（5860℃）以保持硬度；脂肪或疏松组织用低熔点（5254℃）防止收缩；实验室温度高时需适当提高石蜡熔点避免切片变形。5.切片时，组织出现“空泡”状裂隙，最可能的原因是A.固定不充分B.脱水不彻底C.透明不充分D.浸蜡不充分答案：D解析：浸蜡不充分时，组织内残留透明剂（如二甲苯）未被石蜡完全置换，切片时因石蜡与残留液密度差异形成裂隙。二、简答题（每题10分，共30分）1.简述组织固定的主要目的及常用固定液选择原则。答案：固定的主要目的：①防止组织自溶和腐败，保存细胞形态结构；②凝固或沉淀细胞内物质（如蛋白质、酶），避免流失；③保持组织抗原性，利于后续免疫组化等检测；④使组织硬化，便于后续处理（如取材、脱水）。固定液选择原则：①根据检测需求（如电镜用戊二醛，免疫组化用中性福尔马林）；②组织类型（如神经组织需穿透性强的固定液）；③固定时间与组织大小匹配（厚度≤0.5cm时，10%福尔马林固定624小时）。2.脱水过程中为何需严格遵循浓度梯度？若脱水不彻底会对后续步骤产生哪些影响？答案：严格梯度脱水的原因：组织内水分需逐步被乙醇置换，低浓度到高浓度可避免细胞因渗透压骤变导致过度收缩（高浓度直接脱水）或肿胀（低浓度时间过长），保证组织形态完整。脱水不彻底的影响：①透明时，残留水分与二甲苯不互溶，导致组织浑浊；②浸蜡时，石蜡无法渗透（石蜡与水不溶），组织中心未浸透，切片易脆裂；③染色时，水分残留可能导致染液扩散不均，着色浅或背景模糊。3.简述HE染色中“分化”步骤的操作要点及意义。答案：操作要点：切片经苏木精染色后，用1%盐酸乙醇（分化液）短时间处理（数秒至10秒），镜下观察至胞核清晰、胞质无明显蓝色即可，随后立即用温水返蓝。意义：苏木精为碱性染料，可同时染核和胞质（尤其含核糖体的胞质），分化可去除胞质中多余染料，使胞核着色深且轮廓清晰，胞质呈淡蓝色或无色，增强组织对比度。三、操作题（30分）请详细描述“胃黏膜活检标本制成HE染色切片”的完整操作流程（需包含关键参数）。答案：1.标本接收与登记：核对患者信息，记录标本数量（通常13粒，直径25mm），观察颜色、大小（避免遗漏）。2.固定：立即放入10%中性福尔马林（体积为标本的1020倍），固定68小时（胃黏膜薄，固定时间可缩短）。3.取材：用眼科镊轻取标本，置于滤纸上吸干，修去坏死组织，按解剖方向（黏膜面朝上）放入包埋盒，标记编号。4.脱水：梯度乙醇处理（70%1小时→80%1小时→95%1小时→无水乙醇Ⅰ45分钟→无水乙醇Ⅱ45分钟）。5.透明：二甲苯Ⅰ（纯二甲苯）20分钟→二甲苯Ⅱ20分钟（胃黏膜薄，时间可适当减少，避免脆化）。6.浸蜡：5658℃石蜡Ⅰ30分钟→石蜡Ⅱ30分钟（确保组织完全浸透）。7.包埋：将组织放入包埋框，黏膜面朝下（便于切片时暴露表面），注入石蜡，冷却至完全凝固（约30分钟）。8.切片：修块至组织暴露，设置切片厚度34μm（胃黏膜细胞密集，过厚易重叠），切片后用4045℃温水展片（避免皱缩），捞至载玻片（带切片面朝上）。9.烤片：60℃烤箱烤片30分钟（使切片贴附牢固，避免染色脱片）。10.HE染色：脱蜡：二甲苯Ⅰ5分钟→二甲苯Ⅱ5分钟→无水乙醇Ⅰ1分钟→无水乙醇Ⅱ1分钟；复水：95%乙醇1分钟→80%乙醇1分钟→70%乙醇1分钟→蒸馏水2分钟；苏木精染色5分钟，流水冲洗1分钟；1%盐酸乙醇分化3秒，流水冲洗5分钟（返蓝）；伊红染色30秒1分钟（根据着色调整），流水冲洗1分钟；脱水：70%乙醇1分钟→80%乙醇1分钟