卫生专业技术资格考试病理学技术模拟试题及答案

卫生专业技术资格考试病理学技术模拟试题及答案1.单项选择题（每题1分，共30分）1.下列哪项不是HE染色中“H”所代表试剂的作用A.与胞核DNA磷酸基结合呈蓝紫色B.对胞质RNA亦有着色C.在pH≈2.3时与嗜碱性颗粒结合D.与伊红形成复合物使胞质呈红色答案：D解析：H为苏木素，主要与核内DNA、RNA的酸性基团结合呈蓝紫色；伊红为“E”，与胞质碱性蛋白结合呈粉红色，二者不形成复合物。2.冷冻切片出现“冰晶空洞”最主要的原因是A.切片刀钝B.组织固定不充分C.组织速冻前水分未吸干D.切片厚度大于15μm答案：C解析：残留水分在低温下形成冰晶，融化后留下空洞；速冻前用滤纸吸干表面水分可有效避免。3.免疫组化热修复常用缓冲液pH值对Erα（雌激素受体）抗原最佳的是A.6.0B.7.0C.8.0D.9.0答案：D解析：Erα为核抗原，高pH（9.0）EDTA缓冲液可充分暴露抗原决定簇，提高阳性率。4.下列哪种固定剂兼具良好穿透力与脂类保存A.4%多聚甲醛B.10%中性缓冲福尔马林C.Bouin液D.4%戊二醛+1%多聚甲醛答案：D解析：戊二醛交联能力强，保存超微结构及脂类；多聚甲醛提高穿透速度，二者混合用于电镜。5.PAS染色阳性物质出现品红色颗粒，其化学基础是A.糖原1→4糖苷键B.糖醛酸羧基C.中性脂肪酯键D.磷脂酰胆碱极性头答案：A解析：PAS通过高碘酸氧化1→2乙二醇基生成醛，与Schiff试剂结合呈品红色，糖原富含该结构。6.石蜡切片脱蜡至水步骤中，最关键的控制参数是A.二甲苯时间B.梯度酒精浓度C.环境温度D.水流速度答案：A解析：脱蜡不彻底将致拒染，二甲苯时间不足是常见原因；梯度酒精仅起复水作用。7.图像分析测胶原面积百分比，若视野面积S=0.58

，胶原像素=A.18.8%B.23.1%C.25.4%D.28.9%答案：A解析：百分比=×8.下列哪项不是免疫荧光非特异性染色来源A.抗体浓度过高B.切片干燥C.Fc受体结合D.抗原热修复过度答案：B解析：切片干燥会导致自发荧光增强，但属物理现象，不归类为非特异性免疫反应。9.电镜包埋常用环氧树脂其聚合温度是A.45℃B.60℃C.80℃D.100℃答案：B解析：Epon812系列树脂60℃24h聚合完全，温度过高易脆裂。10.若显微镜NA=1.30，λ=550nm，则理论分辨率d约为A.0.21μmB.0.25μmC.0.29μmD.0.33μm答案：B解析：d=11.组织芯片打孔直径1.0mm，供体组织直径1.5mm，其面积保留率为A.33.3%B.44.4%C.55.6%D.66.7%答案：B解析：保留面积比==12.原位杂交中RNA探针长度最佳范围A.50–150bpB.200–500bpC.600–1000bpD.1200–2000bp答案：B解析：200–500bp兼顾组织穿透性与杂交稳定性，过长穿透差，过短信号弱。13.苦味酸-酸性品红（VanGieson）染色中，苦味酸主要作用A.媒染B.分化C.对比染色D.复染答案：C解析：苦味酸使胶原呈黄色，与酸性品红形成对比，属对比染色。14.自动染色机出现“滴染”现象，最先检查A.试剂液位B.机械臂水平C.气泵压力D.程序时序答案：B解析：机械臂倾斜致滴头偏移，试剂滴落位置错误，出现滴染。15.下列哪种酶可用于骨组织脱钙后抗原修复A.胰蛋白酶B.胃蛋白酶C.蛋白酶KD.胶原酶II型答案：D解析：胶原酶II型可消化残留胶原，暴露抗原，且对组织形态损伤小。16.流式细胞术PI染色测细胞周期，PI荧光强度与哪项成正比A.细胞体积B.DNA含量C.RNA含量D.蛋白质含量答案：B解析：PI嵌入双链DNA，荧光强度与DNA含量线性相关。17.石蜡切片厚度8μm，其理论可切最大细胞核直径A.8μmB.12μmC.16μmD.20μm答案：B解析：核直径超过切片厚度时易致“核丢失”，经验上限≈1.5×厚度。18.免疫组化阳性对照应选择A.已知阳性组织B.同批阴性组织C.试剂空白D.自身正常组织答案：A解析：阳性对照用于验证体系有效性，必须采用外源已知阳性组织。19.组织固定后流水冲洗目的A.终止固定B.去除多余固定剂C.增加组织硬度D.促进染色答案：B解析：冲洗去除残留固定剂，防止其与染料或抗体发生非特异性结合。20.下列哪项不是Masson三色染色中丽春红-酸性品红作用A.染肌纤维B.染胞质C.染红细胞D.染胶原答案：D解析：胶原被苯胺蓝/亮绿染色，丽春红-酸性品红染肌纤维、胞质、红细胞。21.电镜锇酸固定液最佳pHA.6.0B.7.0C.7.4D.8.0答案：C解析：锇酸在pH7.4左右氧化不饱和脂肪酸形成电子致密沉淀，利于膜结构保存。22.免疫组化DAB显色后，苏木素复染时间通常A.5sB.30sC.2minD.5min答案：B解析：过染会掩盖DAB棕色，30s足够显示核轮廓。23.组织切片出现“刀痕”最可能原因A.石蜡温度过高B.切片刀缺口C.抗卷板过紧D.组织脱水不足答案：B解析：刀刃缺口在切片表面留下周期性线状痕迹。24.原位杂交中DEPC水作用A.灭活RNaseB.激活DNaseC.增强探针穿透D.降低背景答案：A解析：DEPC与RNase活性位点组氨酸结合，0.1%DEPC水37℃过夜可灭活RNase。25.下列哪项属于特殊染色中“嗜银染色”A.PASB.网状纤维C.黏液卡红D.油红O答案：B解析：网状纤维含硫酸黏多糖，吸附银离子，经还原呈黑色。26.自动封片机出现气泡，最先调整A.盖玻片速度B.中性树胶黏度C.平台温度D.滴胶量答案：A解析：盖玻片下降过快易夹带空气，降低速度可排泡。27.免疫组化抗体4℃过夜孵育较37℃30min优势A.背景低B.信号强C.时间短D.成本低答案：A解析：低温降低非特异性结合，背景干净，但信号强度需通过提高抗体浓度补偿。28.石蜡切片展片水温通常A.30–35℃B.40–45℃C.50–55℃D.60–65℃答案：B解析：低于石蜡熔点3–5℃，既展平又不溶蜡。29.电镜铅柠檬酸染色后，出现“电子不透明沉淀”应A.缩短染色时间B.提高温度C.增加CO₂暴露D.用NaOH洗涤答案：A解析：铅与CO₂形成碳酸铅沉淀，缩短时间并密闭染色可减少。30.病理实验室生物安全二级要求，操作结核组织应在A.开放台B.A2型生物安全柜C.通风橱D.层流间答案：B解析：结核分枝杆菌属二类病原，需BSC-A2负压操作。2.共用题干单项选择题（每题2分，共20分）（31–35题共用题干）男性，58岁，胃镜活检标本，固定于4%中性缓冲福尔马林6h，常规脱水包埋，HE染色可见黏膜腺体结构消失，胞浆淡染，核深染，间质黏液湖形成。31.初步病理诊断考虑A.慢性浅表性胃炎B.高级别上皮内瘤变C.黏液腺癌D.印戒细胞癌答案：C解析：黏液湖+腺体消失提示产生大量黏液的腺癌。32.若行AB-PAS染色，阳性区域应呈A.蓝色B.红色C.紫色D.棕色答案：A解析：ABpH2.5染酸性黏液呈蓝色，PAS染中性黏液呈红色，黏液腺癌以酸性黏液为主。33.为证实细胞来源，首选免疫标记A.CD20B.CD3C.CK7D.Desmin答案：C解析：CK7为上皮来源标记，可排除淋巴瘤及间叶肿瘤。34.若切片出现“灰染”背景，最可能原因A.苏木素过染B.伊红过染C.分化不足D.脱水不足答案：C解析：分化步骤可去除非特异性苏木素，不足致背景灰染。35.若需电镜观察，固定剂应改为A.10%福尔马林B.2.5%戊二醛C.95%乙醇D.Bouin液答案：B解析：戊二醛保存超微结构优于福尔马林。（36–40题共用题干）女性，45岁，乳腺肿块粗针活检，行ER、PR、HER2免疫组化。36.ER阳性判定标准，阳性细胞百分比需≥A.1%B.5%C.10%D.20%答案：A解析：ASCO/CAP指南≥1%即视为阳性，可内分泌治疗。37.HER22+时，下一步应A.报告阴性B.报告阳性C.行FISH检测D.重复IHC答案：C解析：2+为不确定，需FISH验证基因扩增。38.免疫组化采用EnVision法，HRP催化底物为A.AECB.DABC.Fast-RedD.BCIP/NBT答案：B解析：EnVision-HRP系统常用DAB显棕黄色。39.若出现非特异性胞浆阳性，最可能原因A.抗原修复过度B.一抗浓度过高C.内源性生物素封闭不足D.切片过厚答案：B解析：一抗过高可致非特异性吸附胞浆蛋白。40.阳性对照应选用A.乳腺肌上皮B.已知ER阳性乳腺癌C.正常淋巴结D.试剂空白答案：B解析：外源已知阳性组织为阳性对照金标准。3.多项选择题（每题2分，共20分，每题至少2个正确答案，多选少选均不得分）41.下列哪些属于降低免疫组化背景措施A.3%H₂O₂灭活内源酶B.10%正常羊血清封闭C.增加一抗稀释度D.延长DAB显色时间E.使用TBS替代PBS答案：A、B、C解析：D延长显色增加信号亦增背景；E无差异。42.石蜡切片脱蜡不彻底可导致A.拒染B.核固缩C.伊红着色不均D.免疫组化脱片E.网状纤维断裂答案：A、C、D解析：拒染、着色不均、脱片均与残蜡有关；核固缩与固定相关；网状纤维与染色相关。43.电镜包埋常见注意事项A.湿度<50%B.温度60℃C.避免CO₂D.加速剂DMP-30需预冷E.包埋板提前烘烤答案：A、B、C、E解析：DMP-30常温即可，预冷致黏度大不利混合。44.下列哪些染色需用新鲜冷冻切片A.油红OB.NADH-TRC.琥珀酸脱氢酶D.乙酰胆碱酯酶E.网状纤维答案：A、B、C、D解析：网状纤维可用石蜡切片。45.图像分析系统校准包括A.光场均匀性B.像素大小C.颜色空间D.曝光时间E.物镜NA答案：A、B、C解析：曝光时间及NA为硬件参数，非软件校准。46.原位杂交探针标记方法A.随机引物B.切口平移C.末端标记D.PCR掺入E.化学合成直接标记答案：A、B、C、D、E解析：均可用于DNA/RNA探针标记。47.下列哪些属于特殊染色媒染剂A.钾明矾B.磷钼酸C.铁氰化钾D.钨酸E.碘酸钠答案：A、B、D解析：铁氰化钾为氧化剂；碘酸钠为氧化剂。48.自动染色机每日维护包括A.清洗试剂喷嘴B.校准机械臂C.检查液位传感器D.更换压缩空气滤芯E.备份程序答案：A、B、C解析：滤芯及备份为周或月维护。49.冷冻切片OCT包埋剂作用A.支撑B.防冰晶C.增加硬度D.促进染色E.方便定位答案：A、B、C、E解析：OCT无促进染色作用。50.病理实验室质量控制图可监控A.染色强度CVB.阳性率趋势C.脱片率D.抗体效价E.室温波动答案：A、B、C解析：效价及室温为操作参数，非质控图直接监控。4.判断题（每题1分，共10分，正确请选“√”，错误选“×”）51.免疫组化一抗4℃孵育后可直接进行显色。答案：×解析：需依次二抗、酶复合物、显色。52.锇酸固定后组织需避光保存。答案：√解析：锇酸还原后生成黑色沉淀，避光防进一步还原。53.石蜡熔点越高，切片越易皱缩。答案：√解析：高熔点石蜡硬度大，展片难，易皱。54.图像分析中光密度与透射率成反比。答案：√解析：OD=−T，55.免疫荧光封片可用中性树胶。答案：×解析：中性树胶自发荧光强，需用无荧光封片剂。56.梯度乙醇脱水时，95%乙醇可溶解脂褐素。答案：×解析：脂褐素耐有机溶剂，需强氧化剂褪色。57.电镜铅染色可在空气中进行。答案：×解析：铅与CO₂生成沉淀，需密闭或加NaOH颗粒。58.组织芯片制作时受体蜡块温度应略高于供体组织温度。答案：√解析：略高使界面融合，防止脱落。59.原位杂交探针长度超过1000bp需超声打断。答案：√解析：长探针穿透差，超声至200–500bp最佳。60.病理实验室生物安全柜需每年检测风速及HEPA完整性。答案：√解析：为强制性维护项目。5.填空题（每空1分，共20分）61.免疫组化HIER常用缓冲液pH6.0为________抗原修复液，pH9.0为________抗原修复液。答案：柠檬酸，EDTA62.石蜡切片厚度理论公式：t=，其中d为________距离，n答案：手轮前进，转轮63.电镜分辨率公式d=，若λ=0.0037答案：0.2364.组织固定后流水冲洗时间一般________h，若固定剂含重铬酸钾则需________h。答案：2–4，12–2465.自动染色机试剂瓶需每日检查________与________，防止干烧。答案：液位，喷嘴堵塞66.冷冻切片防卷板角度一般设定为________°，刀刃与板间距________μm。答案：5–10，50–10067.图像分析测阳性面积比，阈值设定常用________法，其公式T=μ+答案：Otsu，068.原位杂交杂交液甲酰胺浓度通常为________%，其作用是________双链稳定性。答案：50，降低69.免疫荧光淬灭剂常用________衍生物，其机制为________自由基。答案：苯二胺，清除70.病理实验室二级生物安全柜前窗工作面风速应≥________m/s，但≤________m/s。答案：0.4，0.66.简答题（每题10分，共30分）71.简述免疫组化染色中“特异性对照”类型及其意义。答案：1.阳性对照：使用已知阳性组织，验证系统有效性，排除假阴性。2.阴性对照：使用已知阴性组织，验证抗体特异性，排除假阳性。3.空白对照：省略一抗，检测二抗及显色系统是否非特异染色。4.同型对照：使用与一抗同型无关抗体，排除Fc段非特异结合。5.吸收对照：用纯化抗原预先中和抗体，验证染色是否被完全抑制。以上对照共同确保结果可信，准确指导临床。72.说明冷冻切片出现“龟裂”外观的原因及纠正措施。答案：原因：1.组织速冻过慢，冰晶增大致结构撕裂。2.切片温度过低（＜−25℃），组织脆性增加。3.抗卷板压力过大，机械牵拉。4.组织内含大量脂肪，脂肪晶化膨胀。纠正：1.使用液氮-异戊烷混合，提高速冻速度。2.调整机箱温度至−18~−20℃。3.减小防卷板压力，保持刀刃锋利。4.脂肪丰富组织可先用20%蔗糖-甘油浸泡再切，或改用漂片法。73.概述石蜡切片免疫组化染色“脱片”常见原因及预防措施。答案：原因：1.载玻片未涂胶或电荷不足，组织附着力差。2.烤片温度低或时间短，残存水分。3.抗原修复剧烈沸腾，机械震荡。4.酶消化过度，组织松散。5.梯度酒精脱水不足，残蜡影响附着。预防：1.使用阳离子电荷玻片或APES涂片。2.60℃烤片≥2h，彻底去