病理技术考试题及答案

病理技术考试题及答案1.单项选择题（每题1分，共30分）1.1石蜡切片出现“裂片”最常见的原因是A.固定不足 B.脱水过度 C.浸蜡温度过高 D.切片刀钝 E.展片水温过低答案：C1.2用于显示横纹肌横纹的磷钨酸苏木素（PTAH）染色中，磷钨酸的主要作用是A.媒染 B.分化 C.氧化 D.还原 E.络合答案：A1.3免疫组化热修复抗原时，枸橼酸钠缓冲液最适pH为A.3.0 B.6.0 C.7.4 D.8.0 E.9.0答案：B1.4下列哪种固定液兼有脱钙作用A.10%中性甲醛 B.Bouin液 C.Zenker液 D.4%多聚甲醛 E.70%乙醇答案：C1.5冷冻切片出现“冰晶空洞”主要由于A.组织速冻过慢 B.切片刀角度过大 C.抗卷板过紧 D.载片未粘胶 E.固定过度答案：A1.6用于显示含铁血黄铁的普鲁士蓝反应中，亚铁氰化钾与三价铁离子形成的化合物分子式为A.F[Fe(CN B.K答案：C1.7在自动染色机中，防止试剂挥发最关键的措施是A.降低室温 B.加盖密封 C.减少试剂体积 D.提高湿度 E.缩短程序时间答案：B1.8下列哪项不是PAS染色的阳性对照组织A.肝糖原 B.肾基底膜 C.胃粘膜粘液 D.胰腺酶原颗粒 E.甲状腺胶体答案：E1.9免疫荧光染色后，切片最适封固剂为A.中性树胶 B.甘油-PBS(1:1) C.二甲苯 D.石蜡 E.加拿大树胶答案：B1.10电镜超薄切片厚度标准为A.50nm B.100nm C.200nm D.500nm E.1μm答案：B1.11用于显示神经纤维的Bielschowsky银染中，氨银液配制后需立即过滤，其目的是A.去除杂质 B.降低pH C.提高银离子浓度 D.防止还原 E.增加粘度答案：D1.12下列哪项不是造成HE染色核浆共染的原因A.苏木素氧化过度 B.分化不足 C.返蓝不足 D.伊红过染 E.切片过厚答案：D1.13组织处理过程中，二甲苯的替代环保试剂异构烷烃的沸点约为A.38℃ B.68℃ C.98℃ D.138℃ E.178℃答案：B1.14免疫组化二步法（聚合物法）相比ABC法的最大优势是A.敏感性高 B.背景低 C.操作时间短 D.成本低 E.信号放大倍数高答案：B1.15下列哪种酶用于消除内源性过氧化物酶活性A.胰酶 B.胃蛋白酶 C.过氧化氢酶 D.3%H₂O₂ E.胶原酶答案：D1.16组织芯片制作中，供体组织穿孔直径通常选择A.0.1mm B.0.6mm C.1.5mm D.2.0mm E.3.0mm答案：B1.17用于显示淀粉样物的刚果红染色，其最大吸收波长为A.405nm B.450nm C.495nm D.550nm E.600nm答案：C1.18石蜡切片烤片最佳温度与时间为A.37℃30min B.45℃30min C.60℃30min D.60℃12h E.80℃5min答案：C1.19下列哪项不是冷冻切片快速诊断的禁忌证A.脂肪组织 B.骨组织 C.钙化组织 D.甲状腺乳头状癌 E.需免疫组化分型淋巴瘤答案：D1.20免疫组化染色中，DAB显色颗粒的电子密度为A.低 B.中等 C.高 D.无 E.可变答案：C1.21用于显示黑色素的中性红染色，其机制是A.氧化还原 B.酸碱指示 C.物理吸附 D.络合 E.酶促答案：C1.22组织固定后，若未及时脱水，最安全的临时保存液为A.自来水 B.70%乙醇 C.固定液原液 D.PBS E.蒸馏水答案：B1.23下列哪种染料属于噻嗪类A.伊红Y B.苏木素 C.甲苯胺蓝 D.亮绿 E.橙黄G答案：C1.24免疫组化pH9.0EDTA修复液主要适用于A.细胞核抗原 B.细胞膜抗原 C.细胞质抗原 D.细胞骨架抗原 E.所有抗原答案：A1.25用于显示脂质的油红O染液，其溶剂为A.水 B.乙醇 C.异丙醇 D.丙酮 E.二甲苯答案：C1.26组织透明剂作用机制是A.溶解蛋白质 B.溶解脂类 C.取代水分 D.氧化糖类 E.还原核酸答案：C1.27免疫组化染色中，一抗4℃孵育过夜较37℃1h的主要优势是A.节省时间 B.降低背景 C.提高特异性 D.降低成本 E.信号更强答案：C1.28用于显示幽门螺杆菌的Warthin-Starry银染，其银颗粒直径约为A.1nm B.10nm C.50nm D.100nm E.500nm答案：B1.29石蜡切片脱蜡至水程序中，二甲苯Ⅰ、Ⅱ各需A.1min B.3min C.5min D.10min E.15min答案：C1.30免疫组化结果判读时，IRS评分中阳性细胞比例81–100%对应得分为A.1 B.2 C.3 D.4 E.5答案：D2.多项选择题（每题2分，共20分；每题至少2个正确答案，多选少选均不得分）2.1下列哪些因素可导致免疫组化假阴性A.抗原修复不足 B.一抗浓度过高 C.内源性生物素封闭不足 D.显色时间过短 E.切片过厚答案：A、D2.2属于亲银反应的有A.Masson-Fontana B.Grimelius C.Sevier-Munger D.Churukian-Schenk E.Fontana-Masson答案：B、C2.3下列哪些组织需延长固定时间A.肺穿刺 B.乳腺粗针 C.淋巴结切除 D.脾外伤切除 E.甲状腺腺瘤答案：C、D2.4免疫荧光双重标记中，防止交叉反应的措施包括A.一抗种属不同 B.二抗荧光光谱分离 C.使用Fab片段 D.降低一抗浓度 E.使用生物素放大答案：A、B、C2.5下列哪些属于环境友好型脱蜡剂A.柠檬烯 B.异构烷烃 C.矿物油 D.丙二醇甲醚 E.二甲苯答案：A、B、D2.6影响石蜡切片褶皱的因素有A.展片水温过高 B.切片刀钝 C.抗卷板压力不足 D.组织浸蜡不足 E.切片速度过快答案：B、C、D、E2.7免疫组化阳性对照应选择A.已知阳性组织 B.患者自身正常组织 C.试剂公司提供的对照片 D.阴性组织 E.空白对照答案：A、B、C2.8下列哪些属于特殊染色中异染性染料A.甲苯胺蓝 B.硫堇 C.亮绿 D.碱性品红 E.天青A答案：A、B、E2.9电镜固定液戊二醛的最终浓度为A.0.5% B.1% C.2.5% D.4% E.6%答案：B、C2.10造成冷冻切片“跳片”的原因有A.载片未粘胶 B.组织过大 C.切片室温度高 D.抗卷板过紧 E.切片刀温度高答案：A、B、C3.填空题（每空1分，共20分）3.1常规HE染色中，苏木素氧化成熟需借助__________离子，其氧化还原半反应为He答案：三价铁3.2免疫组化EnVision二步法中，聚合物骨架为__________分子。答案：葡聚糖3.3石蜡熔点一般为__________℃。答案：56–583.4用于显示弹性纤维的Verhoeff染液，其核心染料为__________。答案：碘-苏木素3.5组织处理机中，丙醇脱水浓度梯度通常为__________%、__________%、100%。答案：70、953.6免疫荧光FITC最大激发波长为__________nm。答案：4953.7电镜锇酸固定液浓度为__________%。答案：13.8显示横纹肌的PTAH染色需酸性环境，其分化液为__________%盐酸乙醇。答案：13.9组织芯片受体蜡块孔距通常为__________mm。答案：1.0–1.53.10免疫组化DAB显色终止液常用__________。答案：自来水3.11冷冻切片OCT包埋剂主要成分为__________和聚乙烯醇。答案：聚乙二醇3.12用于显示钙盐的VonKossa法中，银离子被还原为__________。答案：金属银3.13免疫组化高压热修复常用压力为__________kPa。答案：1033.14石蜡切片厚度公差允许范围为±__________μm。答案：13.15免疫组化抗体储存温度长期为__________℃。答案：-203.16用于显示DNA的Feulgen反应中，酸水解常用__________mol/LHCl。答案：13.17组织透明剂折光指数接近__________。答案：1.503.18免疫组化背景染色最常见原因为__________封闭不足。答案：内源性过氧化物酶3.19电镜超薄切片捞片常用__________网格。答案：铜3.20免疫荧光淬灭主要因__________照射。答案：激发光4.名词解释（每题3分，共15分）4.1抗原修复答案：通过热、酶或化学方法恢复因固定交联而遮蔽的抗原表位，提高抗体结合效率的技术。4.2异染性答案：染料与组织成分结合后呈现与染料本身颜色不同的现象，如甲苯胺蓝染肥大细胞颗粒呈紫红色。4.3亲银反应答案：组织内还原物质直接使银离子还原为金属银而显色，无需外加还原剂，如Grimelius染色。4.4冰晶答案：组织冷冻过程中水分子形成的晶体，可破坏细胞结构，导致切片空洞。4.5背景染色答案：非特异性结合或内源性物质导致的非目标区域着色，影响结果判读。5.简答题（每题5分，共25分）5.1简述石蜡切片“裂片”原因及对策。答案：原因：浸蜡温度过高或时间过长导致组织脆硬；切片刀钝；组织固定过度；脱水透明不足。对策：降低浸蜡温度2℃；更换新刀片；缩短固定时间；重新优化脱水程序；在蜡中加入5%蜂蜡增加韧性。5.2简述免疫组化阳性对照设置原则。答案：选择与待检抗原相同种属、相同固定方式、相同处理流程的已知阳性组织；每批次染色必须同步进行；位置应位于切片边缘便于定位；若使用组织芯片，需含阳性核心；记录并归档结果以备追溯。5.3简述冷冻切片快速诊断质量控制要点。答案：取材≤2cm、厚度≤0.3cm；速冻采用异戊烷-液氮法；切片室-20℃；刀温-15℃；切片厚度5–6μm；即时固定95%乙醇；染色时间压缩但保证分化；双人双镜签字；30min内完成；剩余组织全部送石蜡对照。5.4简述电镜超薄切片染色铀铅双染步骤。答案：切片捞于镍网；2%醋酸铀水溶液室温避光10min；超纯水冲洗3×1min；Reynolds柠檬酸铅室温5min；0.02mol/LNaOH漂洗3×30s；超纯水终洗；干燥后观察；铅染需在CO₂少环境防止碳酸铅沉淀。5.5简述特殊染色质量失控常见环节。答案：试剂过期或浓度漂移；温度湿度未记录；对照组织失效；染色缸交叉污染；分化时间凭经验无计时；脱水透明不足导致褪色；封固剂pH偏酸致染料溶解；未使用阳性对照致假阴性漏检；未建立室内质控图。6.计算与分析题（每题10分，共30分）6.1某实验室欲配制500mL0.01mol/L、pH6.0枸橼酸缓冲液用于抗原修复，现有0.1mol/L枸橼酸和0.1mol/L枸橼酸钠，求两者体积。答案：设枸橼酸体积，枸橼酸钠体积，+pH=pKa+lg，枸橼酸pKa₁=3.13，pKa₂=4.76，pKa₃=6.40，选pKa₃：6.0=6.40+lglg=-0.40 ⇒ =0.398 ⇒ =0.398代入：+0.398=500 ⇒ 1.398=500 ⇒ =357.7mL，=142.3mL取0.1mol/L枸橼酸357.7mL，0.1mol/L枸橼酸钠142.3mL，加水至500mL即可。6.2某组织块经测量长1.5cm、宽1.0cm、厚0.2cm，密度1.08g/cm³，固定液用量需为组织体积20倍，计算需10%中性甲醛多少毫升？答案：体积V=1.5×1.0×0.2=0.3cm³质量m=0.3×1.08=0.324g固定液体积=0.3cm³×20=6cm³=6mL答：需6mL。6.3免疫组化染色后，用ImageJ测得阳性区域平均光密度（MOD）为0.182，背景MOD为0.018，计算校正光密度并评估表达水平。答案：校正MOD=0.182−0.018=0.164参照实验室建立标准：MOD<0.05阴性，0.05–0.15弱阳，0.15–0.30中阳，>0.30强阳。结论：中度阳性表达。7.综合应用题（每题15分，共30分）7.1病例：58岁男性，胃镜活检2块，直径0.1cm，临床怀疑幽门螺杆菌感染。实验室拟用Warthin-Starry银染、免疫组化H.pylori抗体、Giemsa对比。请设计完整流程，包括固定、包埋、切片、染色、对照、判读标准及生物安全。答案：固定：10%中性甲醛，≥6h；脱水：自动机，70%→80%→95%→100%→二甲苯→石蜡；包埋：标准石蜡，标记“胃窦”；切片：3μm，涂粘附胶，45℃展片，60℃烤片1h；Warthin-Starry：0.5%硝酸银56℃1h；5%明胶还原3min；显色至幽门螺杆菌呈棕黑