复方党参胶囊的药理作用和临床疗效

目录TOC\o"1-3"\h\u8302摘要 42598Abstract 5108621.绪论 6109361.1引言 6230781.1.1复方党参胶囊的药理作用和临床疗效 6327441.1.2复方党参胶囊方解 6255221.2复方党参胶囊组方中化学成分的研究 796181.2.1党参 748391.2.2当归 75091.2.3枸杞子 8244881.2.4酒大黄 854571.2.5天门冬 8230501.3关于复方党参胶囊建立质量标准的研究 896451.3.1党参 9216431.3.2当归 9135841.3.3枸杞子 994311.3.4大黄 9223872.实验部分 11225222.1实验材料 11293802.2仪器设备 11237972.3实验方法 12326752.3.1当归的薄层鉴别 122622.3.2大黄的薄层鉴别 12227942.3.3枸杞子的薄层鉴别 12130932.4实验结果 13231192.4.1当归的薄层鉴别 13288102.4.2大黄的薄层鉴别 13179552.4.3枸杞子的薄层鉴别 142609结论 151644参考文献 1613243致谢 19摘要目的为了保证复方党参胶囊的质量疗效，我们建立薄层色谱鉴别方法。方法按照《中国药典(2015版)》制定的各种药材的定性鉴别方法，对复方党参胶囊除天门冬以外的四种药材进行薄层鉴别实验。结果在薄层色谱中检测出三种药材（除党参），并且在薄层色谱中这三种药材具有清晰的荧光斑点，分离度较好，阴性样品及对照品都没有影响。结论该鉴别方法步骤简单、可靠易懂、专属性强且重复性好,可以更好的把控其质量。关键词：复方党参胶囊；定性鉴别；薄层色谱AbstractOBJECTIVEWe

established

a

method

for

TLC

identificationtoassurethequalityandefficacyofcompoundcodonopsiscapsule.METHODAccordingtotheChinesepharmacopoeia(2015edition),theTLCidentificationmethodsofallkindsofcrudedrugsweredeveloped,andthecompoundcodonopsispilosulacapsulewasidentifiedqualitatively.RESULTSThreekindsofChineseangelica,ChinesewolfberryandrhubarbweredetectedbyTLC,thecharacteristicspotswereclearandtheseparationdegreewashigh.CONCLUSIONTheidentificationmethodiseasytooperate,reliableandeasytounderstand,withstrongspecificityandgoodrepeatsbility,whichcancontrolitsqualitybetter.Keywords:Compounddangshencapsuie;qualitativediscrimination;thin-layerchromatography.1.绪论1.1引言复方党参胶囊是将传统方剂‘复方党参方’经现代工艺研制，由党参、当归、枸杞子、酒大黄等药材制成的胶囊剂。而胶囊剂与传统药方相比较，具有携带方便、掩饰药物难闻气味、服用剂量小等优点。其中五味中药是根据八珍汤、当归补血汤,以及党参枸杞鸡肉汤的益气补血的功效为依据筛选而出，经长期临床实验观察确定具有一定的抗氧化、延缓衰老等作用[1]。目前该药还在研发过程中，对其了解不够深入，考虑到药理活性成分的复杂及相互影响多种因素，还需更多实验来确保其质量疗效，我们建立对复方党参胶囊中的党参、当归、大黄、枸杞子的性状鉴别和定性的薄层色谱实验方法，对其质量进行更加全面的控制，以便复方党参胶囊之后的更深层次的研究。为了更好的了解和本实验相关的研究内容，现将复方党参胶囊的药理作用和临床疗效、主要化学成分、定性等方面的目前研究概况作以下陈述。1.1.1复方党参胶囊的药理作用和临床疗效当今社会随着人口老龄化速度不断加快，越来越多的人不论男女都对冻龄有着无与伦比的执着，这也促使具有抗氧化，延缓衰老功能的产品的市场份额不断上涨。中药在具有延缓衰老功效产物应用中的优点也越加突出。而复方党参胶囊作为保健品还在研发过程中。大量文献证实复方党参方中五味药材的提取物均具有清除自由基，抗氧化，延缓衰老作用[2-8]。通过阅读有关研究复方党参胶囊的抗氧化能力的文献[9]，我们可以知道复方党参胶囊具备降低肝及血清里面的丙二醛（MDA）含量、提高总超氧化物歧化酶（T-S0D）与谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活性的能力，而且对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼、羟自由基以及超氧阴离子自由基有清除能力，并具有剂量依赖性。因此复方党参胶囊可以抗氧化、抗衰老。1.1.2复方党参胶囊方解随着科技的发展，社会的进步，科研人员对人体衰老机制的研究不断深入，人们更加意识到衰老的复杂性，在人体衰老的过程中大多脏器也都参与了进去。从中医学来讲，衰老的原因除了“虚”还有“实”，而延缓衰老的药方也分类较多，比如补脾，补肾，脾肾双补的等等,不过药材都以性温和为主[10-12]。党参甘平和缓，入脾、肺二经，益气健脾、生津止咳。当归性温、辛，味甘，入肝、心、脾经，补气和血，调经止痛。枸杞子性平、味甘，入肝、肾经。滋阴益肾，润肺止咳，清肝明目。天门冬性甘、味苦，入肺、肾经，滋阴补肾、润肺生津。酒大黄性寒、味苦。归胃、大肠、肝经，泻下攻击、清热解毒、利湿退黄。1.2复方党参胶囊组方中化学成分的研究复方党参胶囊是由党参、当归、枸杞子等五味药构成。每味药都具有较多的化学成分，而且经过多年的提取、分离、分析、鉴定的研究，已经可以初步确定各味药的主要化学成分，现将各味药的主要化学成分研究作以下概述。1.2.1党参党参的药用部位是根和根茎，大多数情况下只使用根，而不用叶[13]，属于桔梗科，是补气常用药材。含有的化学成分包括三萜类、植物甾醇类、多糖类、苷类及内酯类。通过阅读文献[14]我们可以知道党参经过甲醇提取分离能得到7个化合物,包含7R/7S,8S-guaiacylglycerol-8-O-4’-(coniferylalcohol)ether、党参炔苷、紫丁香苷、党参苷Ⅰ、苍术内酯Ⅲ以及党参吡咯烷鎓B，其中7R/7S,8S-guaiacylglycerol-8-O-4’-(coniferylalcohol)ether是第一次分离出来，并具有一定的体外抗氧化活性。在这几种化合物中党参炔苷是目前生药质量评价主要指标成分。1.2.2当归当归的药用部位是根，属于伞形科，多产于甘肃。具有镇痛、扩张血管、抗癌等作用。当归所含的化学成分主要包括挥发油、有机酸、多糖等等。目前生药质量评价主要指标成分是阿魏酸和挥发油，其中阿魏酸是最早分离出来的成分[15]。在挥发油中属于中性油的藁本内酯的含量最高，但是藁本内酯极易发生异构化反应（如水解、氧化等）[16]。1.2.3枸杞子枸杞子是宁夏枸杞的干燥成熟果实，属于茄科植物，具有保护肝脏、抗氧化、延缓衰老、抗阿尔茨海默病(Alzheimer’sdisease,AD)以及提高免疫力等诸多作用[17]。其化学成分主要包含生物碱类（如甜菜碱）、维生素类（B1、B2）、氨基酸类（如谷氨酸）以及一些微量元素（钾、钠等），通过阅读众多参考文献我们可以知道枸杞子中的主要活性成分是枸杞多糖、多酚和类胡萝卜素类，其中枸杞多糖和甜菜碱是目前生药质量评价主要指标成分，并且枸杞子在经乙醇提取分离后又新得到了27个化合物[18]。1.2.4酒大黄大黄的入药部位是根和根茎，属于廖科。酒大黄是生大黄经酒炙后得到的药材，保留了生大黄的大部分药用成分，而且泻下作用要比生大黄更加温和，活血效果更好，在临床上的应用相对来说也比较多[19]。其化学成分主要包括蒽类、苯丁酮苷类、二苯乙烯苷类、鞣质、挥发油等等，其中蒽类包括蒽醌类和双蒽酮类，而大黄素、大黄酚、芦荟大黄素、大黄素甲醚、大黄酸这五种游离型蒽醌是目前生药质量评价主要指标成分[20]。双蒽酮类中的番泻苷是大黄的主要泻下成分[21]。1.2.5天门冬天门冬，也称天冬，属于\t"/item/%E5%A4%A9%E9%97%A8%E5%86%AC/_blank"百合科、多年生草本植物，在这世上大概有300种，常用入药部位是块根[22]，并且具有抗肿瘤、抗菌、保护胃黏膜等作用。主要化学成分包含天门冬素和甾体皂甙类（如天冬呋甾醇寡糖甙、甲基原薯蓣皂甙等）。而近期从根茎中分离鉴定出新的甾体皂甙，其甙元且只含葡萄糖和鼠李糖。还有7个寡糖Ⅰ-Ⅶ，天冬多糖A、B、C、D以及谷氨酸，丝氨酸，赖氨酸等多种氨基酸。1.3关于复方党参胶囊建立质量标准的研究通过阅读关于复方党参胶囊的质量标准的文献[23]，我们可以知道通过TLC法对复方党参胶囊中四种药材（除天门冬）进行定性鉴别，并且通过HPLC法对其进行含量测定研究。现将复方党参胶囊中四味药材的定性鉴别及含量测定有关研究进行以下陈述。1.3.1党参马燕[24]对含有党参的制剂进行研究，通过薄层色谱法对党参进行定性鉴别，主要是以党参对照药材溶液、党参阴性对照溶液作为对照。张进芳、刘茹丽等人[25、26]采用HPLC法对含有党参的制剂进行含量测定研究，主要以ODS为固定相，乙腈-水为流动相，以党参炔苷对照品溶液作对照。1.3.2当归谭杰、李月平等人[27]通过薄层色谱法对八珍丸中的当归进行定性鉴别研究，主要是以阿魏酸对照品溶液、当归阴性样品溶液作为对照。严维花、白德涛等人[28]对当归不同炮制品采用HPLC法进行含量测定研究，主要是以C18为固定相，乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相，以阿魏酸对照品溶液作为对照。1.3.3枸杞子高婷婷、纪开明[29]对含有枸杞子的制剂（复合氨基酸口服液）进行研究，通过薄层色谱法对枸杞子进行定性鉴别，主要是以枸杞子对照药材溶液、枸杞子阴性对照溶液作为对照。库尔班江[30]采用苯酚-硫酸法衍生,紫外-可见分光光度法测定枸杞多糖含量。陈晶等[31]以HPLC-UV法测定枸杞子中甜菜碱含量，主要以XBridgeAmide为固定相，乙腈-水为流动相，通过甜菜碱对照品溶液作对照。1.3.4大黄在王道芳,李有文[32]对含有大黄的制剂（咽喉康胶囊）的研究中，通过TLC法对大黄进行定性鉴别实验，主要是以大黄对照药材溶液、大黄阴性样品溶液、大黄酸对照品溶液作为对照。刘文惠、王太亮等人[33]对肾康(通肾络)超微粉胶囊中大黄采用HPLC法进行含量测定，以C18柱为固定相，乙腈-甲醇-0.1%磷酸溶液为流动相，主要是以大黄素、大黄酚对照品溶液作为对照。2.实验部分2.1实验材料阿魏酸上海市中药标准化中心甲醇美国Fisher公司甲酸美国Dikma公司甲苯广东予能实验室设备科技有限公司大黄酸上海市中药标准化中心环己烷广东予能实验室设备科技有限公司二氯乙烷广东予能实验室设备科技有限公司乙酸乙酯南京森贝伽生物科技有限公司石油醚南京森贝伽生物科技有限公司甲酸乙酯南京森贝伽生物科技有限公司2.2仪器设备CT15RE高速冷冻离心机日本HITACHI公司KQ-5200E型实验室超声波清洗器上海锦玟仪器设备有限公司CPA225D电子分析天平深圳市盛美仪器有限公司2.3实验方法2.3.1当归的薄层鉴别精密称取三批样品各3g于锥形瓶中,各加50mL1%碳酸氢钠溶液充分溶解,超声震荡15分钟,离心,分别用稀盐酸将上清液的pH值调至3。将上清液用乙醚40ml分2次振摇提取,合并提取液,挥干,残渣加1mL甲醇溶解,作为三批样品溶液。取阿魏酸标准品，加甲醇制成浓度为1mg/ml的溶液，此为对照品溶液。阴性样品溶液：按照处方称取除当归以外的药材，按照复方党参胶囊的制备工艺制得缺当归的阴性样品，再按照供试品溶液的制备方法制备。按照《中国药典》2015年版当归薄层鉴别实验，分别吸取上述5种溶液5μL,点于同一硅胶G板上，以环己烷-二氯乙烷-乙酸乙酯-甲酸（4：1：1：0.1）为展开剂展开,取出,吹干,在紫外灯(365nm)下进行检视。2.3.2大黄的薄层鉴别精密称取两批样品各0.1g，加入甲醇溶液浸泡1小时，用漏斗过滤，取滤液5ml倒入蒸发皿中，蒸干，残渣中加入10ml水使其溶解，再加入1ml盐酸回流提取，马上冷却，用乙醚40ml分2次振摇提取，合并提取液，蒸干，残渣倒入1ml三氯甲烷溶液溶解，作为两批样品溶液。另取大黄对照药材0.1g，按照上述供试品处理方法制成对照药材溶液。按照2.3.1阴性样品制备方法制备缺大黄的阴性样品溶液。取大黄酸标准品，加甲醇制成浓度为1mg/ml的溶液，此为对照品溶液。参照《中国药典》2015年版本中大黄的薄层鉴别进行实验，分别吸取上述5种溶液5μL,逐个点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚-甲酸乙酯-甲酸（15：5：1）为展开剂展开,取出,晾干,在紫外灯(365nm)下进行检视。2.3.3枸杞子的薄层鉴别精密称取三批样品各0.5g，各加入35ml水，煮沸，过滤，用15ml乙酸乙酯提取其滤液，取乙酸乙酯部位浓缩至1ml，作为三批样品溶液。另取0.5g枸杞药材，按照上述供试品处理方法制成对照药材溶液。按照3.1.1阴性样品制备方法制备缺枸杞子的阴性样品溶液。参照《中国药典》2015年版本中枸杞子的薄层鉴别进行实验，分别吸取上述5种溶液5μL,逐个点于同一硅胶G薄层板上以甲苯-乙酸乙酯-甲酸（6∶4∶0.2）为展开剂展开,取出,晾干,在紫外灯(365nm)下进行检视。2.4实验结果2.4.1当归的薄层鉴别图1.当归的薄层色谱图（1-3：样品；4:阴性样品；5：阿魏酸）结果：在色谱图中可以看出样品与阿魏酸对照品的斑点位置及颜色一致，并且阴性样品没有出现斑点。2.4.2大黄的薄层鉴别图2.大黄的薄层色谱图（1、2：样品；3：对照药材；4：大黄酸；5：阴性样品）结果：在色谱图中可以看出样品与对照药材以及大黄酸对照品的斑点位置及颜色一致，且经氨熏后斑点颜色由橙黄色变为红色，并且阴性样品没有出现斑点。2.4.3枸杞子的薄层鉴别图3.枸杞子的薄层色谱图（1-3：样品；4：对照药材；5：阴性样品）结果：在色谱图中可以看出样品与对照药材的斑点位置及颜色一致，并且阴性样品没有出现斑点。结论复方党参胶囊是由党参、当归、枸杞子等五味药构成，因为天冬在中国药典中并没有薄层鉴别，所以对处方中的党参、当归、大黄和枸杞子4味药材进行薄层色谱鉴别，而最终鉴定出除党参以外的3种药材。在薄层色谱中检出当归、枸杞子、大黄的荧光斑点清晰,阴性样品及对照品都没有影响,且专属性强,重现性好,可有效的鉴别复方党参胶囊，为控制其质量疗效奠定基础，也可以推动以后的含量测定等方面更加深刻的研究。参考文献：[1]郑晓萍.青娥方及复方党参方的药学研究[D].兰州大学,2017.[2]周丽梅,詹敏,张涛.对党参多糖的提取、结构及抗氧化活性的分析与研究[J].当代医药论丛,2017,15(17):162-164.[3]庞丹清,阙祖亮,陈勇,陈子隽,李金洲,魏江存,张昕.响应面法优化当归藤多糖提取工艺及抗氧化活性研究[J].时珍国医国药,2019,30(01):22-25.[4]曾秀兰,施帆,郑琪,张晓蕾,黎芷晖,陈欣彤,王治平.黑果枸杞与枸杞子水提取液抗氧化活性比较研究[J].中国民族民间医药,2017,26(22):21-23.[5]谭娟,黄静,欧立军.天门冬水提液体外抗氧化及抑菌作用观察[J].中成药,2014,36(08):1753-1756.[6]袁诗俊,龚梦瑀,李梦林,顺远枫,黄毅.大黄中抗氧化物质的提取工艺优化[J].食品工业科技,2018,39(19):147-149+155.[7]国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].第一部.北京:中国医药科技出版社,2015:23—24[8]国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].第四部.北京:中国医药科技出版社,2015:356[9]王燕萍,杨平荣,孙银红,白瑞斌,张静,郑晓萍,马铭,刘景龙,崔方,胡芳弟.复方党参胶囊抗氧化活性研究[J].兰州大学学报(医学版),2019,45(03):1-6.[10]张敏,赵江鹏,张雪亮.基于中医传承辅助平台的古代抗衰老方用药规律分析[J].中国中医基础医学杂志,2018,24(03):393-396.[11]王丽芬,查青林.延缓衰老保健食品的中药药性分析[J].浙江中医药大学学报,2019,43(11):1271-1275.[12]沈玮,詹向红.中医衰老病机与五脏相关性的理论探讨[J].辽宁中医杂志,2016,43(08):1630-1633.[13]DoudouYang,YuanChen,FengxiaGuo,BaotingHuang,SamuelAnimOkyere,HuiWang.Comparativeanalysisofchemicalcomposition,antioxidantandantimicrobialactivitiesofleaves,leafteaandrootfromCodonopsispilosula[J].IndustrialCrops&Products,2019,142.[14]殷生楠,李秀芹.党参化学成分及其体外抗氧化活性分析[J].临床医药文献电子杂志,2019,6(72):143+150.[15]黄红泓,覃日宏,柳贤福.中药当归的化学成分分析与药理作用探究[J].世界最新医学信息文摘,2019,19(58):127+153[16]姚淞允,张开霞,马强,金永生.藁本内酯的临床前研究进展[J].药学服务与研究,2019,19(02):106-110.[17]GaoKai,LiuMeiyou,DingYi,YaoMinna,ZhuYanrong,ZhaoJinyi,ChengLianghua,BaiJuan,WangFan,CaoJinyi,LiJiankang,TangHaifeng,JiaYanyan,WenAidong.Aphenolicamide(LyA)isolatedfromthefruitsofLyciumbarbarumprotectsagainstcerebralischemia-reperfusioninjuryviaPKCε/Nrf2/HO-1pathway.[J].Aging,2019,11(24).[18]周正群.枸杞子抗阿尔茨海默病活性成分研究[D].暨南大学,2016.[19]戴八十三.大黄的炮制方法与药性研究[J].世界最新医学信息文摘,2019,19(15):189+191.[20]屈义虎.药用大黄成分分析及结合型蒽醌生物转化研究[D].陕西理工大学,2019.[21]王玉,杨雪,夏鹏飞,马肖,杨蕊菁,虎峻瑞,樊秦,靳晓杰,武晓玉,彭雪晶,赵磊.大黄化学成分、药理作用研究进展及质量标志物的预测分析[J].中草药,2019,50(19):4821-4837.[22]朱国磊.天门冬的化学成分及其细胞毒活性研究[D].昆明理工大学,2013.[23]王燕萍,李安平,孙银红,杨平荣,张静,白瑞斌,郑晓萍,马铭,刘景龙,崔方,胡芳弟.复方党参胶囊的制备及质量标准研究[J].兰州大学学报(医学版),2019,45(03):7-12.[24]马燕.新一代高原抗缺氧药物的定性鉴别[C].中国生理学会.中国生理学会第六届应用生理学委员会全国学术会议论文摘要汇编.中国生理学会:中国生理学会,2003:9.[25]李海池,李菁,张超,沈雪梅.复方党参胶囊的质量研究[J].天津中医药大学学报,2013,32(04):225-228.[26]刘茹丽.高效液相色谱法测定复方党参片中丹酚酸B含量[J].中国药业,2016,25(08):67-68.[27]谭杰,陈琤,李月平.八珍丸中川芎、当归薄层色谱定性鉴别的研究[J].科技视界,2013(15):173.[28]严维花,曹虹虹,郭爽,顾丽亚,胡玮,成铭,白德涛,陈杰,毛春芹,李林,陆兔林.当归不同炮制品的UPLC指纹图谱与多成分含量测定研究[J].中国中药杂志,2019,44(12):2499-2510.DOI:10.19540/ki.cj