2025年微生物分枝杆菌检验操作规程培训试题及答案

2025年微生物分枝杆菌检验操作规程培训试题及答案一、填空题（共20空，每空1分，共20分）1.分枝杆菌属按照致病性及生长特性分为三类，分别是____、____、____。2.疑似肺结核患者送检痰标本的最低要求为____份，分别为____、____、____，合格痰标本的镜下判定标准为鳞状上皮细胞____个/低倍视野、白细胞____个/低倍视野。3.痰标本分枝杆菌检测前处理常用NALC-NaOH消化法，其中NaOH的工作浓度为____，NALC的工作浓度为____，消化静置时间为____，离心参数为____g离心____min。4.萋-尼抗酸染色的脱色剂为____，荧光染色法检测抗酸杆菌时，需至少观察____个视野方可报告阴性。5.结核分枝杆菌固体培养采用罗氏培养基，培养温度为____℃，最长培养____周未生长可报告阴性；液体MGIT培养最长培养____周未生长可报告阴性。6.XpertMTB/RIF检测的利福平耐药相关靶基因为____，一线抗结核药物中需在pH5.5酸性环境下开展药敏试验的是____。7.分枝杆菌病原学检测操作需在____级生物安全实验室开展，所有阳性标本处理需在II级生物安全柜内进行。二、单选题（共15题，每题2分，共30分）1.下列标本类型中，不适合开展分枝杆菌病原学检测的是（）A.晨起深部咳痰标本B.未抗凝的脑脊液标本C.中段尿标本D.碘伏消毒后采集的咽拭子标本2.痰标本前处理时NaOH浓度超过4%会导致的直接后果是（）A.杂菌污染率升高B.分枝杆菌被杀灭，检出率下降C.涂片染色背景浑浊D.培养菌落生长过快3.萋-尼抗酸染色结果判读时，10~99条抗酸杆菌/100个低倍视野，报告等级为（）A.抗酸杆菌阳性（1+）B.抗酸杆菌阳性（2+）C.抗酸杆菌阳性（3+）D.抗酸杆菌阳性（4+）4.罗氏培养基上结核分枝杆菌典型菌落形态为（）A.湿润、透明、圆形菌落B.干燥、粗糙、菜花状、淡黄色菌落C.黏液状、红色菌落D.溶血、灰白色菌落5.MGIT液体培养系统报阳性后，首先需要开展的验证操作是（）A.直接做药敏试验B.提取核酸做分子鉴定C.取培养液涂片做抗酸染色D.转种罗氏培养基6.下列分枝杆菌中，属于快速生长分枝杆菌的是（）A.结核分枝杆菌B.鸟胞内分枝杆菌复合群C.偶发分枝杆菌D.堪萨斯分枝杆菌7.XpertMTB/RIF检测结果提示MTB检出、RIF耐药，下一步优先开展的检验工作是（）A.重复Xpert检测B.开展二线抗结核药物药敏试验C.开展γ干扰素释放试验D.痰涂片复查8.结核分枝杆菌药敏试验比例法的耐药判定标准为，耐药菌落数占对照培养基菌落数的比例≥（）A.1%B.5%C.10%D.20%9.下列病原体中，不会出现抗酸染色阳性的是（）A.结核分枝杆菌B.诺卡菌C.非结核分枝杆菌D.肺炎克雷伯菌10.分枝杆菌阳性标本操作产生的医疗废弃物，处置方式正确的是（）A.直接作为感染性废物丢弃B.121℃高压灭菌30min后再按感染性废物处置C.用75%酒精喷洒后丢弃D.紫外照射30min后丢弃11.痰涂片抗酸染色的室内质量控制要求，每批次染色需同时带入阳性质控片和阴性质控片，阳性质控片的阳性等级应为（）A.1+B.2+C.3+D.4+12.下列关于分枝杆菌检验报告时限的说法，错误的是（）A.痰涂片抗酸染色结果需在24h内报告B.XpertMTB/RIF检测结果需在48h内报告C.固体培养阳性结果需在发现生长后24h内报危急值D.药敏试验结果需在获得纯培养后14d内报告13.非结核分枝杆菌的菌种鉴定金标准是（）A.抗酸染色形态B.培养生长速度C.16SrRNA+hsp65+rpoB多基因测序D.质谱检测14.下列人员中，不属于分枝杆菌检验职业暴露高风险人群的是（）A.标本接收人员B.涂片染色人员C.培养基制备人员D.药敏试验操作人员15.下列关于吡嗪酰胺药敏试验的说法，正确的是（）A.可直接用原始痰标本开展检测B.需在pH6.8的中性环境下开展C.仅需对利福平敏感菌株开展检测D.需在pH5.5的酸性环境下开展三、多选题（共5题，每题4分，共20分）1.下列属于结核分枝杆菌复合群的有（）A.人型结核分枝杆菌B.牛型结核分枝杆菌C.卡介苗菌株D.非洲分枝杆菌E.鸟胞内分枝杆菌2.XpertMTB/RIF检测可适用的标本类型包括（）A.痰标本B.肺泡灌洗液标本C.脑脊液标本D.胸腔积液标本E.粪便标本3.分枝杆菌检验过程中，正确的生物安全防护措施包括（）A.操作阳性标本时佩戴N95口罩、护目镜、双层手套、防水隔离衣B.所有标本离心操作使用带生物安全密封罩的转头C.实验台面污染后用0.5%过氧乙酸擦拭消毒D.移液操作时采用口吸移液管E.实验结束后实验室空气采用紫外照射30min消毒4.下列关于分枝杆菌培养的说法，正确的有（）A.液体培养的阳性检出率比固体培养高20%~30%B.固体培养接种后第3d、第7d各观察1次，之后每周观察1次C.分枝杆菌培养阳性即可确诊结核病D.培养阳性标本需首先进行抗酸染色确认E.分枝杆菌培养的湿度要求为50%~60%5.分枝杆菌检验的室内质量控制内容包括（）A.每批次抗酸染色带阴阳性质控片B.每批次培养基开展无菌试验和标准菌株生长试验C.每批次药敏试验带入H37Rv标准菌株开展质控D.每年参加不少于2次国家级或省级室间质量评价E.每月对涂片阳性率、培养阳性率、耐药率开展内部比对分析四、判断题（共5题，每题2分，共10分）1.抗酸染色阳性即可确诊为结核病。（）2.痰标本留取前嘱患者用清水漱口，可降低口腔杂菌污染率，提高检出率。（）3.利福平耐药的结核分枝杆菌菌株，90%以上存在rpoB基因耐药突变。（）4.γ干扰素释放试验阳性可替代病原学检测结果，作为结核病确诊依据。（）5.快速生长分枝杆菌多数对一线抗结核药物耐药，需开展快速生长分枝杆菌专属药敏试验。（）五、简答题（共2题，每题5分，共10分）1.简述2025版《全国结核病实验室检验操作规程》中痰标本的前处理标准流程。2.简述分枝杆菌病原学阳性结果的危急值报告流程。六、案例分析题（共1题，10分）患者男性，46岁，咳嗽、咳痰伴低热、盗汗3个月，胸部CT提示双肺多发空洞型病变，临床疑似肺结核，送检3份痰标本：即时痰涂片萋-尼抗酸染色结果为2+，晨痰XpertMTB/RIF检测提示MTB检出、RIF耐药，夜间痰罗氏培养第21天观察到典型结核分枝杆菌菌落。请回答以下问题：1.该患者的病原学诊断是什么？（3分）2.下一步需为临床提供哪些检验支持？（4分）3.该批标本检验过程中需落实哪些核心生物安全措施？（3分）参考答案部分一、填空题1.结核分枝杆菌复合群、非结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌2.3、即时痰、晨痰、夜间痰、<10、>253.1%~2%、0.5%、15min、3000、154.3%盐酸酒精、3005.37、8、66.rpoB、吡嗪酰胺7.BSL-2（生物安全2级）二、单选题1.D2.B3.A4.B5.C6.C7.B8.A9.D10.B11.A12.B13.C14.C15.D三、多选题1.ABCD2.ABCD3.ABCE4.ABDE5.ABCDE四、判断题1.×解析：非结核分枝杆菌、诺卡菌也可出现抗酸染色阳性，需结合菌种鉴定结果确诊结核病。2.√3.√4.×解析：γ干扰素释放试验仅能提示结核分枝杆菌感染，不能区分活动性结核和潜伏感染，不能替代病原学检测作为确诊依据。5.√五、简答题1.痰标本前处理标准流程：（1）标本核对：核对标本信息、标本量，确认无溢洒、无标识错误，痰标本量≥2ml为合格；（2）消化处理：将标本转移至50ml离心管，加入等体积的1%~2%NaOH+0.5%NALC混合消化液，涡旋振荡1~2min至痰标本完全液化；（3）静置消化：室温（15~25℃）静置15min，消化时间不得超过20min，避免杀灭分枝杆菌；（4）离心浓缩：加入pH6.8的0.067mol/L磷酸盐缓冲液至离心管45ml刻度处，密封后置于带生物安全转头的离心机，3000g离心15min；（5）弃上清：在生物安全柜内缓慢倾倒上清，避免产生气溶胶，留取0.5~1ml沉淀，震荡混匀后分别用于涂片、培养、分子检测。2.阳性结果危急值报告流程：（1）涂片阳性：痰涂片抗酸染色阳性后，需立即复核结果，确认无误后24h内出具书面报告，同时通过电话/信息系统通知临床主管医生和公共卫生管理部门，登记报告时间、报告人、接收人信息；（2）培养阳性：液体/固体培养发现分枝杆菌生长后，立即取培养物涂片抗酸染色确认，确认阳性后2h内报危急值，通知临床和公卫部门，同时开展菌种鉴定和药敏试验；（3）分子检测阳性：Xpert等分子检测提示MTB检出、尤其是利福平耐药的，需24h内出具报告，利福平耐药结果需立即通知临床和结核病防控部门，启动耐药结核防控流程；（4）药敏试验结果：确认利福平耐药或耐多药的结果，需2h内报危急值，同时上报属地结核病防控机构。六、案例分析题1.病原学诊断：利福平耐药肺结核（答出肺结核得1分，答出利福平耐药得2分，共3分）。2.下一步检验支持：（1）开展菌种鉴定：通过分子线性探针试验或多基因测序，确认菌株为结核分枝杆菌复合群，排除非结核分枝杆菌感染；（2）开展全谱系药敏试验：开展异烟肼、乙胺丁醇、吡嗪酰胺等一线抗结核药物药敏试验，同时开展氟喹诺酮类、二线注射类等二线抗结核药物药敏试验，明确耐药谱；（3）开展耐药基因检测：采用全基因组测序或线性探针试验，验证利福平耐药位点，同时检测其他耐药相关基因突变，辅助临床制定治疗方案；（4）定期复查痰标本：治疗过程中每月送检痰涂片、培养，评估治疗效果。3.核心