了解NK细胞的免疫检查点

了解NK细胞的免疫检查点

人类自然杀伤细胞（NK）占所有循环淋巴细胞的15虬NK细

胞发现于20世纪70年代，主要与杀死感染的微生物和恶性转化

的同种异体和自体细胞有关。NK细胞表现出抗肿瘤细胞毒性，无

需事先致敏和产生细胞因子以及调节各种免疫反应的趋化因子。

根据细胞表面CD56的密度,将NK细胞分为CD56bright和

CD56dim两者类型，它们具有不同的表型特征。CD56brightNK细

胞具有产生丰富细胞因子的能力，而CD56dimNK细胞具有更强的

细胞毒性，表达更多的免疫球蛋白样受体和FCYRIII（FCY受体

III,又称CD16）o

激活性受体和抑制性受体均在NK细胞表面表达，有助于NK

细胞执行功能。MHCT（主要组织相容性复合物I类）抗原特异性

的抑制性受体可密叨调节NK细胞介导的细胞毒性和淋巴因子的

产生。这种MHC-1识别抑制性受体形成了NK细胞表面受体的三个

家族，即KIRs（杀伤细胞免疫球蛋白样受体）、LIRs（白细胞免

疫球蛋白样受体）和NKG2A（自然杀伤细胞2族A）。

NK细胞的杀伤作用不仅需要通过抑制性受体检测转化细胞上

的MHC-I分子，还需要通过激活性受体激活NK细胞。自然细胞毒

性受体（NCR）是一组自然杀伤细胞表面激活性受体，包括NKp46、

NKp30和NKp44oCD16（或FcyRIII）也是一种激活性受体，主

要由CD56dimNK细胞亚群表达，对IgG包被靶细胞的抗体依赖性

细胞毒性（ADCC）至关重要。

肿瘤通过建立免疫抑制肿瘤微环境来逃避免疫系统。涉及NK

细胞的免疫逃避包括多种机制，肿瘤利用NK细胞抑制性受体进行

免疫逃避就是这样一种机制，称为免疫检查点抑制，并已被证明

是最有效和最受欢迎的治疗靶点。

KIRs

KIR家族（也被称为CD158）是一类具多样性和多态性的NK

细胞受体亚型，包含抑制性和激活性KIRs,每个受体识别特定的

HLAI类同系物（HLA-a.-B或-C）作为配体。抑制性KIR2DL1、

KIR2DL2和KIR2DL3识另UHLA-C作为它们的酉己体，而HLA-B和HLA-A

作为其他KIRs的配体,包括抑制性KIR3DL1和KIR3DL2。除了NK

细胞外，T细胞亚群和NKT细胞（不变自然杀伤性T细胞）也表

达KIRo作为KIRs和KIRs配体的MHC-I分子（HLA-A、-B和-C）

本身表现出广泛的刍然多态性。KTR等位基因组合的多样性（染

色体19ql3,14上共有17个KIR基因），每个基因内的多态性,

以及每个表达KIR的NK细胞，使得这个复杂的KIR序列能够识别

MHC-I表达的微小变化。

IPH2101和lirilumab（IPH2102/BMS-986015）是针对

KIR2DL1/2/3NK细胞抑制受体的IgG4单克隆抗体，目前正在各种

血液学（AML、CLL、NHL）或实体恶性加瘤（乳腺癌和卵巢癌）进

行临床评估和开发°据报道，高达10mg/kg的IPH2101仍然具有

良好的耐受性。然而到目前为止，IPH2101作为单一疗法还没有

取得令人满意的效果。在IPH2101作为单药治疗RRMM的剂量递增

I期试验，只有11例（34%）的患者获得了疾病稳定的最佳反应。

lirilumab的II期试验因未能达到为MM患者设定的客观疗

效标准（M蛋白下降50%）而终止，总共9名入选患者中，仅有1

名（11%）和6名（66%）达到最低反应和疾病稳定。然而，lirilumab

增强了elotuzumab介导的细胞杀伤作用，目前正在进行一项I期

（NCT2252263）研究,评估elotuzumablirilumab联合治疗多

发性骨髓瘤患者的安全性。

最近，这组抗KIR抗体的第三个成员IPH4102,一种人源化

抗KIR3DL2单克隆抗体，已经进入临床评估阶段。IPH4102,也称

为Lacutamab,在复发/难治性皮肤T细胞淋巴瘤的I期临床评估

中耐受性良好，最常见的不良反应包括水肿、疲劳和淋巴细胞减

少。临床活性也令人鼓舞，44例患者中有16例（36%）获得了总

体疗效。复发/难治性皮肤T细胞淋巴瘤伴S6zary综合征的患者

表现出更好的临床反应（43%）o目前，一项IT期临床试验

（NCT03902184）正在研究IPH4102作％单一药物或联合化疗治疗

T细胞淋巴瘤。

LIRs（ILTs）

白细胞免疫球蛋白样受体（LIR）或免疫球蛋白样转录物（ILT）

与KIR一样，属于Ig超家族，由激活性受体和抑制性受体组成。

在总共11个LIR成员中鉴定出5个抑制受体（LIRB1-5）。许多

免疫细胞（NK、T、B和包括巨噬细胞和树突状细胞在内的髓系细

胞）不同程度地表达这些受体。其中，LIRBKILT2）和LIRB2QLT4）

除了其它配体外，还识别HAL-G作为它们的主要配体，从而导致

免疫原性耐受。ILT2在自然杀伤细胞（正常NK细胞的36±18%）.

T细胞、B细胞、单核细胞、树突状细胞亚群和髓源性抑制细胞

（MDSCs）上表达，而ILT4主要在髓系细胞上表达。因此，ILT2

和HLA-G相互作用可以抑制NK、T和B细胞的免疫功能，从而作

为一个免疫治疗靶点。

各种原发性肿瘤和转移性恶性肿瘤都表达HLA-G,它也被认

为是各种癌症进展和预后的指标。它的表达与各种癌症中NK功能

的降低有关，如肝细胞癌（HCC）、卵巢癌、非小细胞肺癌（NSCLC）、

胶质瘤和肾细胞癌（RCC）o此外，膜表面表达的HLA-G或可溶性

HLA-G与1LT2的相互作用已证明抑制NK功能，包括细胞毒性、

细胞因子产生和趋化因子分泌。

NGK2A和CD94

NKG2A（也称为CD159）和CD94是C型凝集素家族的异二聚

体抑制性受体，它识别非经典MHC-I分子HLA-E作为配体。

CD94-NKG2A及其HLA-E配体呈非多态性。HLA-E*0101和

HLA-E*0103是全球人群中仅有的两个HLA-E等位基因。外周血中

近50%的NK细胞表达CD94/NKG2A,主要是那些不表达抑制性KIR

的NK细胞。CD94/NKG2A与其他不同特异性的抑制性受体也存在

共表达。此外，Y6和cd8+T细胞也表达CD94/NKG2A。NKG2A和

CD94与正常细胞上表达的HLA-E反应可抑制信号激活，从而避免

对正常旁观者细胞的破坏。

肿瘤细胞（血液学和实体瘤）为了避免NK细胞的杀伤，表现

出HLA-E表达的上调。在各种癌症中，预后不良与HLA-E上调有

关。用抗体阻断CD94/NKG2A受体可作为一种治疗策略。因此，天

然制药公司开发的抗CD94/NKG2A抗体（IPH2201Monalizumab）

已用于各种试验。体外和体内研究结果表明人源化抗NKG2A抗体

对血液恶性肿瘤的应用是安全有效的。在体外实验中，

monalizumab可改善慢性淋巴细胞白血病的NK细胞功能障碍。

Monalizumab作为单药治疗妇科恶性肿瘤具有良好的耐受性（静

脉给药或SC给药可达10mg/kg）,未报告DTLs或SAEs。这项正

在进行的大量预处理队列试验显示，41%的可评估患者（128人）

病情稳定。

此夕卜,Monalizumab也正在与durvalumab>cetuximab和

ibrutinib进行联合评估。monalizumab联合cetuximab对先前治

疗过、复发和/或转移的头颈部鳞状细胞癌（SCC）的安全性和有

效性进行了初步评，'古，结果显示联合用药的ORR（客观缓解率）

为27.5%,5个月的中位PFS（无进展生存率）和10个月的中位

总生存率（OS）。如果与以往研究中单用cetuximab疗效的历史

记录相比，这是一个令人鼓舞的结果（0RR12.6%,PFS2.3m,OS

5.6m）o联合治疗的不良反应与单用cetuximab相似。最近的体

内分析表明,NKG2A对CD8+T细胞的诱导会阻碍疫苗治疗的效果，

阻断NKG2A受体可提高疫苗治疗的疗效。总的来说，阻断NKG2A

代表了一种令人兴奋的治疗方法，特别是，它与其他免疫肿瘤治

疗药物的结合是前进的方向，并值得进一步的探索。

TIGIT和CD96

TIGIT（具有免疫球蛋白和ITIM域的T细胞免疫受体）是一

种在NK和T细胞上表达的免疫抑制性受体，如活化的NK、T、mT

（记忆T细胞）、fTh（滤泡辅助性T细胞）和调节性T细胞（Tregs）。

与TIGIT相比，CD96是同一免疫球蛋白超家族的成员，具有类似

的抑制作用，但与配体CD155的结合亲和力较低。CD226是一种

激活性受体，与TIGIT和CD96竞争结合CD155oCD155(主要)

和CD112作为TIGIT和CD96结合的配体,以抑制T细胞和NK细

胞介导的免疫。

TIGIT固有表达抑制NK和CD8+T细胞功能,从而帮助肿瘤(结

肠直肠癌)在体内生长。TIGIT与荷瘤小鼠和结肠癌患者的NK细

胞耗竭有关，而这种耗竭通过其阻断而恢复，从而激发了强大的

抗肿瘤免疫。NK细胞的存在对于TIGIT和/或PD-L1阻断或双重

阻断这两个检查点的治疗效果非常重要，因为NK细胞缺失与IFN-

Y-或TNF-分泌TIL(CD8+)频率较低和PD-1表达TIL(CD8+)

频率较高相关。NK细胞占肝脏淋巴细胞的25-50%,这表明它们对

肝脏免疫的重要性。此外，HCC患者的生存和预后与血液和肿瘤

组织中的NK细胞数呈正相关。HCC患者的肿瘤进展与肿瘤浸润性

NK细胞功能紊乱有关，主要是CDllb-CD27-NK亚群。Sun等人发

现衰竭的肿瘤浸润性CD96+NK细胞，发现其表达与HCC患者不良

临床结局相关。当床96-CD155相互作用或TGF-B1被阻断时,NK

细胞衰竭被逆转。

近年来，检查点抑制剂的联合应用越来越受到重视，以达到

协同效应。据报道，抗TIGIT加抗PD-L1阻断剂可防止荷瘤小鼠

和结肠癌患者的NK细胞衰竭。另一方面，抗CD96联合阿霉素化

疗、抗CTLA-4或抗PD-1在三种不同的肿瘤模型中显示出更有效

的抑制肿瘤转移。膀胱癌(BC)患者的衰竭NK细胞在外周和肿瘤

中均显示TIM-3和TIGIT的上调。事实上,TIGIT和CD96在各种

癌症中NK细胞衰竭中的作用仍在研究中，还需要进一步的揭示,

以确定其作为单药治疗或与其他检查点联合使用的潜力。

Siglec-7/9

唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素(Siglecs)是一种免疫调节

性唾液酸结合受体，属于I型凝集素家族。Siglecs在各种免疫

细胞上表达，这些免疫细胞包括淋巴和髓系来源的免疫细胞。

Siglecs在两个性质上表现出多样性：表达和对含唾液酸配体的

特异性。这些Siglec大多是抑制性受体，如Siglec-2、Siglec-3、

Siglec-5、Siglec-6、Siglec_7>Siglec-8,Siglec-9、Siglec-10

和Siglec-11o在抑制性Siglec中，Siglec-7和Siglec-9被报

道在人类NK细胞上表达。与经典NK细胞抑制受体NKG2A/CD94和

KIRs类似，抑制性siglec在其胞内段C端也含有一个或多个ITIM

和ITIM样基序。连接后，LHM被Src家族激酶磷酸化，招募并

激活Src同源2(SH2)结构域的蛋白质，主要是酪氨酸磷酸酶SHP1

和SHP2或细胞因子信号转导3蛋白的抑制因子(SOCS3)o

Siglec-唾液酸相互作用参与免疫耐受的调节，并可作为诱导

抗肿瘤免疫的靶点。针对这些抑制检查点抗体(抗Siglec-2；

Inotuzumabozogamicin和抗Siglec-3；Gemtuzumabozogamicin)

与细胞毒性剂结合的抗体偶联药物，已经在临床测试了疗效。人

类NK细胞主要上调Siglec-7和Siglec-9。此外，在癌症中，外

周NK细胞也上调Siglec-9,主要在cd56dimcdl6+NK细胞上。Fab

片段阻断Siglec-7和Siglec-9可提高NK细胞体外抗肿瘤细胞

(K562)的细胞毒性。在移植人NK细胞和人肿瘤细胞的免疫缺陷

小鼠体内模型中，胪瘤细胞的杀伤是通过抑制NK细胞的唾液聚糖

依赖性介导的。已开发的NK-92Ml细胞系的Siglec-7阴性表型表

明对白血病细胞具有高度和持续的细胞毒性。唾液酸酶治疗后，

乳腺、脑、结肠、肝脏或淋巴组织的各种重塑肿瘤株(Siglec-7

丰富型肿瘤细胞系)对NK细胞杀伤的敏感性增加。唾液酸酶与靶

向HER2抗体的体外融合增强了NK细胞对HER2+肿瘤细胞的杀伤

作用。通过唾液酸酶切断唾液酸配体，特别是Siglec-7和

Siglec-9结合的配体，可以增强NK细胞介导的杀伤作用。这表

明，这种抗体唾液酸酶结合物使肿瘤细胞的表面糖蛋白选择性去

唾液酸化可以使肿瘤更容易受到的ADCC的影响。

高亲和力Siglec-9抗体通过阻断唾液酸在肿瘤靶细胞上的

表达而增强NK细胞的细胞毒性。这些针对Siglec-9的抗体也提

高了NKG2A阻断剂诱导的抗肿瘤反应。Siglec-9在非小细胞肺癌、

卵巢癌和结直肠癌中对肿瘤浸润的CD8+T细胞上调。黑色素瘤中

的肿瘤内效应记忆CD8+T细胞亚群也显示Siglec-9通过磷酸化

SHP1参与上调和抑制。体外和体内靶向唾液酸聚糖-SAMP/Siglec

通路可增强抗肿瘤免疫。其他抑制性受体如PD-1也由表达

Siglec-9的T细胞共同表达，这提示了共同抑制的可能性。

Siglec-9在不同类型的免疫细胞上表达，提示Siglec-9的多模

式作用。这些数据支持了这样一种观点，即抗Siglec-7和抗

Siglec-9阻断抗体可以开发用于癌症免疫治疗，并可与其他免疫

检查点抑制剂结合使用。

LAG-3

LAG-3（淋巴细胞活化基因-3）也是免疫球蛋白超家族受体的

一员，具有抑制性。LAG-3被发现在活化的CD4+T细胞、CD8+T细

胞和NK细胞表面上调。除了这些细胞外，Lag-3还表达在其他几

种免疫细胞上，包括TIL、调节性T细胞、iNKT细胞、B细胞和

DC细胞。它识别MHCII类分子，与CD4分子结构相似，但与MHC-II

分子结合的亲和力大于CD40LSECtin在肝脏和其他几种肿瘤中表

达,是DC-SIGN家族的一员，也被描述为表达LAG-3免疫细胞的

潜在配体。LAG-3参与抑制T细胞效应器功能，并参与T细胞衰

竭。它还促进调节性T细胞的抑制活性。阻断LAG-3已被证明可

以诱导T细胞功能的改善。Relatlimab是一种抗LAG-3单克隆抗

体，目前正在进行的几项临床试验中进行研究，无论是单独使用

还是与PD-1阻断剂联合应用，都可以用于各种癌症。LAG-3和PD-1

在T细胞功能调节中显示出协同作用，以促进肿瘤免疫逃逸。

尽管LAG-3在NK细胞上有表达，但其在NK细胞调控中的作

用尚未得到充分证实。在小鼠模型中敲除LAG-3基因导致NK细胞

不能杀死某些肿瘤。然而，这种缺失对MHCI类错配的细胞溶解

活性没有影响。另一方面，人类NK细胞却表现出相反的结果。阻

断LAG-3通路的抗体不能诱导人NK细胞产生细胞毒性。可溶性

LAG-3能与MHC-II分子结合，对人类NK细胞的杀伤能力也没有

影响。在HIV患者口，病毒控制与NK细胞上LAG-3的低表达以及

其他抑制分子有关。Wiskott-Aldrich综合征蛋白（WASp）缺乏

与癌症的高易感性用关，很可能是由于NK细胞和DC的抗癌能力

受损所致。WASp敲除的NK细胞显示出细胞衰竭和NK细胞记忆

LAG-3表达增强相关。这似乎有一个明显的关联，然而，LAG-3对

NK细胞功能的直接影响和潜在机制还需要进一步研究。与NK细

胞相比，其对NKT（自然杀伤性T细胞）功能的调节已被广泛报

道。在慢性HIV患者中，iNKT细胞耗竭和IFN-Y产生减少与LAG-3

表达升高有关。LAG-3信号通路通过阻断S期细胞周期，下调活

化的CDld限制NKT细胞的增殖。

可溶性重组LAG-3Tg融合蛋白Eftilagimodalpha（IMP321）

已被用作免疫佐剂，用于预防各种感染和癌症。它也被应用于癌

症的单一治疗或联合化疗。在体外的短期试验中，IMP321能够在

健康个体（60个捐赠者中的52个）诱导NK细胞产生细胞因子（IFN-

Y和/或TNF-Q）,以及在较低程度上在21个未经治疗的转移性

癌症患者体内诱导产生细胞因子。在转移性肾癌患者中，IMP321

在剂量递增研究（P003）中，作为单药治疗诱导NK细胞活化。标

准化疗的IMP321与乳腺癌患者数月内NK细胞活化增强相关。因

此，LAG-3具有激活T细胞和NK细胞的潜力。因此，它可以作为

检查点抑制的潜在鸵点进行进一步的研究。此外，在最近对CIML

NK细胞的研究中，CD56bright.CD16-和CD62L+NK细胞被鉴定为

细胞因子诱导的记忆样（CIML）NK细胞的优势亚群，NKG2A的持

续表达参与抑制HLA-E阳性靶细胞的杀伤。CIML-NK细胞亚群KIR+

和NKG2C+表达LAG-3,表明CIML-NK细胞是双重检查点抑制的潜

在靶点。

TIM-3

共抑制受体TIM-3（T细胞免疫球蛋白和粘蛋白结构域3）识

别galectin-9作为配体，在各种癌症和慢性感染中上调。此外,

TIM-3可变IgV结构域也被报道与其他配体结合，如HMGB1（高迁

移率组蛋白B1蛋白）、Ceacam-1（癌胚抗原细胞粘附分子1）和

PtdSer（磷脂酰丝氨酸）。TIM-3的表达是多种多样的，包括几

种类型的免疫细胞，包括CD4+T细胞、CD8+T细胞、调节性T细

胞、B细胞、NK细胞、NKT细胞和髓样细胞。TIM-3与其配体的结

合通过耗尽T细胞和NK细胞来诱导免疫耐受。这种途径的上调与

各种慢性感染和癌症中T和NK细胞的耗竭有关，使TIM-3成为T

和NK细胞免疫的负调节因子。相应地，它的阻断作用逆转了T细

胞或NK细胞功能障碍。TIM-3和PD-1的共表达参与介导了多种

癌症和慢性病毒感染中CD8+T细胞衰竭。研究表明，TIM-3和/或

PD-1阻断可逆转T细胞耗竭，并减缓肿瘤生长。针对TIM-3的抗

体，如Sym023,Cobolimab.LY3321367.BGB-A425和MBG453,

以及几种抗PDT/PD-L1抗体，正在进行临床研究，以确定其对各

种癌症的疗效。

TIM-3在NK细胞上的表达有几个方面的原因。它被认为是成

熟、活化和预后的标志物。与CD56+/CD3+NKT和CD56-/CD3+T细

胞群相比，TIM-3在静止CD56+/CD3+NK细胞群中高表达。健康成

人血液中部分成熟CD56dimCD16+NK细胞亚群显示TIM-3表达，而

其在未成熟CD56brightCD16-NK细胞亚群中的表达不均一。此外，

几种细胞因子（ILT2、ILT5和IL-18）强烈诱导TIM-3的表达，

主要是在未成熟的CD56brightNK细胞中。ILT2和IL-18诱导的

NK细胞活化和IL-15诱导的成熟是TIM-3在这些细胞中表达的主

要原因，识别出TIM-3在NK细胞中的表达作为活化和分化或两者

兼而有之的标记。TIM-3在外周NK细胞中的上调在一些癌症中被

观察到，即胃癌、肺腺癌、晚期黑色素瘤和膀胱癌，导致NK细胞

衰竭。肿瘤生长的NK细胞中TIM-3水平的增加表明TIM-3的表达

是一个预后的生物标志物。GIST（胃肠道间质瘤）和膀胱癌患者

的肿瘤浸润性NK细胞也表达TIM-3。与TIM-3和PD-1在T细胞

中的共表达相似，衰竭的肿瘤浸润NK细胞在MHC-I缺陷肿瘤中也

显示出可检测的共表达。然而，GIST患者在TIM-3+肿瘤浸润性

NK细胞中缺乏PDT共表达。

CD200R

CD200R是另一种在T、B、NK和髓系细胞上表达的抑制性受

体。它识别CD200作为其配体，除了在各种肿瘤上表达外，CD200

还表达于各种正常组织，如中枢神经系统、视网膜、毛囊细胞、

血管内皮细胞和胸眼细胞，以及活化的T、B和DC细胞。CD200

被认为是肿瘤进展的标志物，因为它在造血和非造血源的各种癌

症上过度表达，其表达与最差预后相关。此外，CD200的表达也

可以诱导癌细胞。事实上，癌细胞表达CD200对CD200-CD200R

信号抑制抗癌反应没有影响。因此，CD200阻断剂是一种潜在的

治疗选择，不局限于治疗表达CD200的肿瘤。抑制性CD200-CD200R

通路通过调节巨噬细胞和DC细胞间接抑制T细胞的效应器功能。

因此，阻断CD200-CD200R的相互作用可以抑制肿瘤生长，这支

持了拮抗性CD200或CD200R抗体作为癌症治疗的一种选择。

Samalizumab（人源化抗CD200抗体）耐受性良好,CD4阳性T细

胞和CD200阳性B-CLL呈剂量依赖性变化，Thl细胞因子反应中

等。

对于NK细胞，有证据表明CD200-CD200R抑制途径直接参与

了NK细胞的抑制。在AML患者中，CD200的过度表达抑制了NK

细胞的抗肿瘤反应，从而增加了这些患者复发的风险。AML患者

的NK细胞亚群表达CD200R,提示CD200-CD200R相互作用抑制了

NK细胞。此外，在CD200hi患者中，阻断CD200的抗体可恢复NK

细胞的活性。这些数据表明CD200-CD200R相互作用直接导致AML

患者NK细胞的抑制。这是唯一直接表明表达CD200的靶细胞能够

抑制NK细胞的细胞毒性和IFNY产生活性的研究。Liu等人在研

究CD200+黑色素瘤生长和转移限制中的CD200信号部分时发现,

在CD200缺乏的转移性肿瘤生长的肝脏中，NK细胞的数量显著减

少。然而，CD200缺乏如何影响肝脏局部NK反应仍有待解释。这

提示CD200-CD200R检查点是血液学和实体瘤检查点阻断的一个

很好的靶点。由于NK细胞与AML和多发性骨髓瘤中的其他检查点

受体(如KIR和NKG2A)相关，因此在这类患者中可以验证联合

检查点靶点。

CD47

CD47,也被称为整合素相关蛋白(IAP),是免疫球蛋白超家

族中广泛表达的糖蛋白。其作为参与B3整合素介导的信号转导

的白细胞膜蛋白被首次发现。它是一种跨膜蛋白，除了整合素外，

还与血小板反应蛋白T(TSP-1)和信号调节蛋白a(SIRPa)相

互作用。在CD47所执行的功能中，它与SIRPa和TSP-1的结合，

确立了其作为一种抑制受体的作用，通过抑制吞噬、抗原呈递和

T/NK细胞抑制参与癌症的免疫逃避。因此，用抗体靶向这个信号

通路显示出潜在的治疗肿瘤的能力。

CD-47在NK细胞介导的抗病毒或抗肿瘤细胞毒性中起抑制作

用。NK细胞毒性与HNSCC细胞CD47表达有关。高表达CD47的HNSCC

细胞株表现出较低水平的NK细胞毒性。用中和MHC-1或抗CD47

抗体预处理细胞可增加NK细胞对HNSCC细胞系的细胞毒性。SIRP

a和TSP-1均与NK细胞介导的细胞毒性有关。在免疫功能正常的

同基因小鼠中，抗SIRPa抗体通过阻断CD47的相互作用而显著

抑制RCC或黑色素瘤细胞的肿瘤形成。除了巨噬细胞和CD8+T细

胞外，NK细胞的选择性耗竭大大削弱了抗SIRPaAb的抗肿瘤作

用。然而，在体外，NK细胞对肿瘤细胞的杀伤作用不受同一抗体

的抑制，提示NK细胞的CD47功能与SIRPa无关。与此类似,TSP-1

也被证明在抑制NK细胞早期增殖和促进晚期扩张中发挥作用，但

CD47的作用尚未被证实。因此，在这方面仍有许多问题有待解决。

然而，用抗体攻击CD-47是值得探索的，不仅在巨噬细胞、树突

状细胞和T细胞，而且在NK细胞。CD47与PD-L1的双重阻断作

用也已被研究，并被证明能增强对循环肿瘤细胞的免疫治疗作用。

抗CD47抗体Magrolimab(IIu5F9-G4)壬在多个I期和II期临床

试验中与其他药物(如利妥昔单抗、西妥昔单抗、阿扎胞昔、

acalabrutinib和atezolizumab等)进行不同组合的研究°

CTLA-4

CTLA-4(细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4)是一种共抑制受

体，可在多种免疫细胞上表达，如荷瘤小鼠的活化T淋巳细胞

(CD4+T细胞和CD8+T细胞)、调节性T细胞、肿瘤浸润性NK细

胞和脾脏Kit+CDllb-NK细胞，并在IL-2刺激下诱导小鼠NK细

胞。CTLA-4与共刺激受体CD28竞争癌细胞或抗原呈递细胞上的

配体B7-1(CD80)和B7-2(CD86)。CTLA-4被公认为T细胞活

化的负调节因子和外周T细胞耐受性和自身反应性的调控者。用

抗体阻断CTLA-4(ipilimumab)可以改善各种癌症的T细胞功能。

已有研究表明CTLA-4/CD28/CD80/CD86通路参与NK细胞介导

的细胞毒性。在体内，CD28触发NK细胞的增殖，它们的细胞毒

性和细胞因子的分泌已经在许多研究中被描述。癌细胞上的配体

B7-1和B7-2似乎也能提高人类NK细胞的细胞毒性。同样，NK细

胞表达的CTLA-4作用树突状细胞的B7-1可以抑制IFN-Y的产生。

在小鼠中，肿瘤细胞产生的IL-18可诱导具有B7-H1依赖性免疫

清除功能的Kit+CDllb-NK细胞。Kit+CDllb-NK细胞乜报告

CTLA-4上调；然而，其在NK细胞控制的癌症中参与肿瘤进展的

情况尚未被研究。这些研究揭示了这一途径在NK细胞介导的细胞

毒性中的不可否认的作用。然而，人类NK细胞中不存在

CD80-CD28/CTLA-4介导的共刺激。共刺激CD28/B7也被否认在小

鼠CMV感染的外周NK细胞中起任何重要作用。

CTLA-4+肿瘤浸润性NK细胞是一个基于抗CTLA-4单克隆抗体

的前瞻性免疫治疗耙点。如上图所示，阻断CTLA-4可能间接地减

轻被抑制的NK细胞。CTLA-4在Tregs上的表达被认为是其抑制

功能所必需的。在西妥昔单抗治疗的头颈部癌患者中，NK细胞毒

性抑制和CTLA-4阳性Tregs增加与预后不良相关。Ipilimumab

是一种抗CTLA-4单克隆抗体，导致Tregs的耗竭，以Fc介导的

方式对黑色素瘤患者产生临床疗效，部分原因可能是由于减轻了

Tregs对NK细胞毒性的抑制。Ipilimumab还可以通过原代NK细

胞以及IL-2激活的NK细胞和Y6T细胞上的FcyRIHA与黑色素

瘤细胞系和组织上的CTLA-4反应来触发ADCC作用。此外，

Ipilimumab和CTLA-4阳性黑色素瘤细胞的相互作用也导致NK细

胞释放TNF-a。CTLA-4阻断和IL-2免疫治疗联合应用可延缓黑

色素瘤的生长和延长生存期，显示协同作用。CTLA-4阻断可增加

免疫细胞（包括CD8阳性T细胞和NK组胞）的肿瘤浸润,而IL-2

可降低肿瘤浸润性NK细胞耗尽和分化的比例。Ipilimumab在NK

细胞表型上诱导IL-2R。链表达，随后增强对IL-2刺激和细胞毒

性的反应，这与晚期黑色素瘤患者更好的临床反应相关。

PD-1

程序性死亡受体-1（PD-1）在各种免疫细胞上表达，包括T

细胞（CD4+&CD8+）、B细胞和髓细胞、NK细胞、NKT细胞和其他

固有淋巴细胞。PD-1.PD-L1和PD-L2配体的上调在各种癌症中

已有报道，它们的用互作用导致T细胞抑制，导致免疫逃逸。大

约四分之一健康人的外周血中可检测到NK细胞上PD-1的高表达。

然而，在癌症患者，如卵巢癌患者的腹水、卡波西肉瘤患者的外

周血、肾细胞癌和多发性骨髓瘤患者中，NK细胞上PD-1的表达

上调。在消化道癌，如食道癌、胃癌、胆管癌、肝癌和结直肠癌

中，外周血NK细胞和肿瘤浸润性NK细胞也同样上调。慢性感染

如HIV（人类免疫缺陷病毒）、HCV（丙型肝炎病毒）、HCMV（人

类巨细胞病毒）和结核分枝杆菌也显示出NK细胞PDT表达增强。

PD-1在NK细胞上的表达是多种多样的，因癌症而异。PD-1

在CD56brightNK细胞中普遍缺乏表达。然而，CD56dimNK细胞已

证明PD-1表达受限于NKG2A-KIR+CD57+表型，一种完全成熟的

NK细胞。NKG2A-KIR+CD57+表型NK细胞被认为具有显著下调的

激活受体，如NKp30和NKp46。此外，PD-1表达与NK细胞抗肿瘤

活性受损之间存在相关性，而抗体干扰PD-1和PD-L1的相互作用

导致部分修复。PTLD儿童移植患者也显示出NK细胞功能改变，

PDT增加，NKp46和NKG2D表达降低。另一方面，CD56brightNK

细胞在慢性HCV患者中表达PD-1。同时，在消化道癌症患者中，

两种类型的NK细胞(CD56bright和CD56dimNK细胞)都显示PD-1

表达增加。此外，新发现的肝癌组织中浸润的CD3-CD49a+CD56+NK

细胞也显示其表面有大量PD-1表达，这与肝细胞癌患者的生存率

降低有关。

在一些癌症中，NK细胞PD-1表达上调表明NK细胞处于功能

失调状态，可能是由于缺乏MHC-I的肿瘤细胞过度刺激所致。比

较PD-1+NK细胞和PD-1-NK细胞发现PD-1+NK细胞功能衰竭，细

胞毒性和细胞因子生成受损，增殖能力降低。抗PDT单抗的阻断

已被证明能恢复NK细胞的功能。小鼠肿瘤细胞表达PDT,抗PD-1

阻断剂诱导NK细胞产生抗肿瘤免疫应答。在体外，抗PD-1抗体

增强了NK细胞介导的对自体MM细胞的杀伤作用。PD-1阻断剂也

促进了小鼠NK细胞对小鼠胶质瘤干细胞的杀伤作用。

B7-H3

B7同源物3蛋白(B7-H3)是B7-CD28家族的配体分子，其

受体可能存在于T细胞和NK细胞上，它似乎可以同时抑制T细胞

和NK细胞的功能，但尚未被证实。B7-H3被认为可以同时共刺激

和共抑制来调节T细胞功能。B7-H3通过与TLT-2结合来刺激T

细胞活化，而与未知受体的结合导致T细胞的共同抑制。同时，

通过激活未知受体，它可以抑制NK细胞和成骨细胞。

B7-H3在胰腺、肝脏、小肠、结肠、心脏、胸腺、脾脏、胎

盘和睾丸等各种正常组织上的表达有限。然而，B7-H3的异常表

达可见于各种与预后不良相关的恶性肿瘤，包括肾细胞癌、乳腺

癌、肺癌、食管鳞癌、胃癌、胰腺癌、胆囊癌、结直肠癌、前列

腺癌、卵巢癌、宫顼癌、子宫内膜癌、骨肉瘤，神经母细胞瘤。

肺癌、肾细胞癌、肝细胞癌、结直肠癌和胶质瘤患者的循环血清

B7-H3水平显著高