2026年病理学技术试题及答案

2026年病理学技术试题及答案一、单项选择题（共30题，每题1.5分）1.病理技术中最常用的固定液是（）。A.95%乙醇B.4%多聚甲醛C.10%中性缓冲福尔马林D.Carnoy固定液2.在常规HE染色中，苏木精染液的作用主要是使细胞核着色，其性质属于（）。A.酸性染料B.碱性染料C.中性染料D.复合染料3.组织块在进行脱水处理时，乙醇浓度梯度通常从低到高，最高浓度一般不超过（）。A.75%B.85%C.95%D.100%4.冰冻切片制作过程中，组织块通常需要使用何种物质进行支撑固定以利于切片？（）A.石蜡B.OCT包埋剂C.明胶D.琼脂5.下列哪种特殊染色主要用于显示基底膜？（）A.Masson三色染色B.PAS染色C.刚果红染色D.普鲁士蓝染色6.免疫组化染色中，最常用的抗原修复方法是（）。A.酶消化修复B.酸水解修复C.热诱导修复（微波或高压）D.碱性修复7.在病理常规制片中，透明处理的目的是（）。A.赋予组织块硬度B.去除组织内的水分并使组织透明C.使细胞核着色更清晰D.杀灭组织内的细菌8.下列关于石蜡包埋温度的描述，正确的是（）。A.越高越好，可缩短时间B.应低于石蜡熔点2-4℃C.应高于石蜡熔点10℃以上D.室温即可9.显示心肌细胞横纹的最佳染色方法是（）。A.HE染色B.PTAH染色C.网状纤维染色D.抗酸染色10.脱钙过程中，常用的脱钙液是（）。A.10%盐酸B.5%硝酸C.10%醋酸D.丙酮11.细胞病理学涂片固定中，为了保持细胞形态结构，常使用（）。A.95%乙醇B.10%福尔马林C.丙酮D.戊二醛12.在免疫荧光技术中，常用的荧光素是（）。A.辣根过氧化物酶（HRP）B.异硫氰酸荧光素（FITC）C.碱性磷酸酶（AP）D.二氨基联苯胺（DAB）13.组织切片在染色前必须进行脱蜡，常用的脱蜡溶剂是（）。A.乙醇B.二甲苯C.丙酮D.氯仿14.下列哪种染色可用于鉴别淀粉样物质？（）A.PAS染色B.刚果红染色C.吉姆萨染色D.瑞氏染色15.在电子显微镜技术中，用于固定生物组织超微结构的标准固定液是（）。A.10%福尔马林B.2.5%戊二醛C.95%乙醇D.Bouin液16.组织切片中出现“空洞”或“裂纹”，最常见的原因是（）。A.固定时间不足B.脱水不彻底C.染色时间过长D.封片剂太稀17.显示网状纤维常用的染色方法是（）。A.镀银染色B.苏丹III染色C.甲苯胺蓝染色D.伊红染色18.在免疫组化非生物素检测法（如EnVision法）中，第二抗体通常携带（）。A.生物素B.荧光素C.酶标多聚体D.放射性同位素19.为了显示组织内的脂肪成分，应选用下列哪种固定液？（）A.福尔马林B.乙醇C.丙酮D.甲醛-钙液20.常规石蜡切片的最佳厚度一般为（）。A.1-2μmB.3-5μmC.8-10μmD.15-20μm21.下列哪项不是组织固定的目的？（）A.防止组织自溶B.防止细菌腐败C.使组织硬化便于切片D.增强细胞核的着色能力22.在骨髓活检标本处理中，为了同时进行形态学和免疫组化分析，常采用（）。A.塑料包埋B.石蜡包埋C.冰冻切片D.火棉胶包埋23.苏木精染液分化过度时，细胞核呈现的颜色是（）。A.深蓝色B.浅蓝色或无色C.紫黑色D.红色24.显示神经轴突和神经髓鞘的特殊染色方法是（）。A.Nissl染色B.Luxolfastblue染色C.PAS染色D.Masson染色25.在PCR技术中，延伸步骤通常使用的酶是（）。A.限制性内切酶B.DNA连接酶C.TaqDNA聚合酶D.逆转录酶26.组织芯片制作过程中，受体蜡块中打孔的直径通常为（）。A.0.5mmB.1.0mmC.2.0mmD.5.0mm27.下列关于伊红染液的描述，错误的是（）。A.是一种酸性染料B.可使细胞质着色C.通常配成水溶液D.是醇溶性染料28.原位杂交技术中，用于检测mRNA的探针通常是（）。A.cDNA探针B.寡核苷酸探针C.RNA探针D.以上均可29.在病理实验室质量控制中，用于评估染色效果的外部质控品称为（）。A.对照切片B.阳性对照片C.阴性对照片D.以上都是30.导致切片“厚薄不均”的主要原因之一是（）。A.切片刀角度不正确B.染色时间太短C.脱水时间太长D.固定液浓度太高二、多项选择题（共15题，每题3分。每题所有正确选项均需选出，错选、漏选均不得分）1.常规病理技术包括以下哪些主要内容？（）A.标本取材和固定B.脱水、透明和包埋C.切片和染色D.封片和阅片E.分子生物学检测2.下列哪些固定液属于混合固定液？（）A.10%中性缓冲福尔马林B.Zenker固定液C.Bouin固定液D.Carnoy固定液E.95%乙醇3.组织脱水过程中，如果脱水不彻底，可能产生的后果有（）。A.组织切片出现白色云雾状B.切片难以展平C.染色不均匀D.细胞结构模糊E.封片后产生气泡4.关于苏木精-伊红染色（HE染色），下列描述正确的有（）。A.苏木精对细胞核亲和力强B.伊红对细胞质亲和力强C.染色后需经分化步骤E.细胞核着蓝色，细胞质着红色5.免疫组化染色中，设置阴性对照的目的是（）。A.检测第一抗体的特异性B.排除内源性生物素的干扰C.排除非特异性背景染色D.验证检测系统的敏感性E.评估修复效果6.下列哪些染色方法可用于显示纤维结缔组织？（）A.Masson三色染色B.VanGieson染色C.网状纤维染色D.PAS染色E.油红O染色7.电子显微镜样品制备的基本步骤包括（）。A.前固定（戊二醛）B.后固定（锇酸）C.脱水（丙酮或乙醇）D.包埋（环氧树脂）E.超薄切片和染色8.影响冰冻切片质量的因素包括（）。A.组织块的新鲜程度B.恒冷箱温度C.切片刀的锋利度D.抗原修复方式E.组织块是否含钙化9.下列关于病理实验室安全防护的描述，正确的有（）。A.处理福尔马林时需在通风橱内操作B.二甲苯对人体有害，应尽量减少接触C.废液应分类收集并专门处理D.实验室应配备洗眼装置E.切片刀可以直接用手传递10.常用的特殊染色包括（）。A.抗酸染色（查结核杆菌）B.网状纤维染色C.糖原染色（PAS）D.脂肪染色E.免疫荧光染色11.组织切片出现“染色太深”的情况，可能的原因是（）。A.染液浓度过高B.染色时间过长C.分化不足D.脱水不干净E.温度过高12.在原位杂交技术中，探针标记物可以是（）。A.地高辛B.生物素C.荧光素D.放射性同位素E.酶13.下列哪些病变适合进行冰冻切片诊断？（）A.术中确定肿瘤性质B.确定切缘有无残留C.查找淋巴结转移癌D.激素受体检测E.基因重排检测14.导致免疫组化出现非特异性背景染色的原因有（）。A.内源性过氧化物酶未阻断B.抗体浓度过高C.孵育时间过长D.组织坏死E.洗涤不充分15.病理图像分析系统中，常用的定量分析参数包括（）。A.光密度（OD值）B.面积C.周长D.形状因子E.细胞核浆比三、填空题（共20空，每空1分）1.病理学研究方法主要分为__________和__________两大类。2.组织固定的核心机制是通过化学试剂与蛋白质发生交联或沉淀，从而__________细胞和组织的__________结构。3.在常规石蜡切片技术中，组织经过固定后，依次经过__________、__________、__________三个主要步骤才能进入包埋。4.HE染色中，细胞核被苏木精染成__________色，细胞质被伊红染成__________色。5.常用的脱钙液有酸类脱钙液和__________脱钙液，其中__________脱钙速度较快但对组织损伤较大。6.免疫组化染色中，DAB显色后的阳性结果通常呈现__________色。7.电子显微镜下，线粒体的双层膜结构中，内膜向内折叠形成__________。8.显示糖原的PAS染色，其全称是__________。9.冰冻切片中，为了防止组织产生冰晶，通常在取材后需用__________处理或置于__________中速冻。10.PCR技术的三个基本步骤是：变性、__________、__________。11.病理技术中，用于消除组织内源性过氧化物酶活性的试剂通常是__________溶液。12.组织切片封片时，常用的中性封片剂是__________。13.网状纤维染色中，网状纤维被染成__________色，胶原纤维被染成__________色。14.在细胞学涂片染色中，巴氏染色主要用于__________细胞的检查。15.组织芯片技术是将多个__________按设计规律排列在同一个受体蜡块上，从而进行高通量检测。四、判断题（共15题，每题1分。对的打“√”，错的打“×”）1.10%中性缓冲福尔马林是目前病理诊断最理想的常规固定液，因为它穿透力强且固定均匀。（）2.组织块的大小对固定效果没有影响，只要固定液量足够即可。（）3.脱水过程中，组织可以直接从70%乙醇跳入100%乙醇以节省时间。（）4.苏木精是一种天然染料，可以直接使用，无需氧化成熟。（）5.冰冻切片的厚度通常比石蜡切片厚，一般约为5-10μm。（）6.免疫组化染色中，一抗和二抗的孵育温度越高越好，因为可以缩短时间。（）7.所有的病理标本在取材后都必须立即进行脱钙处理。（）8.Masson三色染色中，肌纤维通常被染成红色，胶原纤维被染成蓝色。（）9.透射电镜主要用于观察组织的表面超微结构。（）10.PCR技术只能用于检测DNA，不能用于检测RNA。（）11.组织切片在染色前如果脱蜡不干净，会导致染色效果差或不上色。（）12.阴性对照在免疫组化实验中是可以省略的，只要阳性对照显色即可。（）13.刚果红染色在偏振光显微镜下观察，淀粉样物质会呈现苹果绿双折光。（）14.病理技术员在操作切片机时，必须佩戴防护手套，以防割伤。（）15.数字病理切片扫描仪可以将传统的玻璃玻片转化为数字图像，便于远程会诊。（）五、名词解释（共8题，每题4分）1.固定2.脱水3.免疫组织化学4.抗原修复5.冰冻切片6.网状纤维7.原位杂交8.组织芯片六、简答题（共6题，每题8分）1.简述10%中性缓冲福尔马林（NBF）的配制方法及其优点。2.简述常规石蜡切片制作技术的基本流程。3.试述HE染色中常见的质量问题及其可能的原因（至少列举3种）。4.简述免疫组化染色中SP法（链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法）的基本原理。5.简述透射电镜生物样品制备的主要步骤及注意事项。6.简述病理技术中常用的特殊染色类型及其主要用途（至少列举4种）。七、综合分析题（共3题，每题15分）1.某病理技术员在制作一批肾穿刺活检标本的石蜡切片时，发现切片在染色后显微镜下观察，组织结构模糊，细胞核与细胞质分辨不清，且切片上有许多细小的空泡。请分析：(1)造成这种质量缺陷的可能原因有哪些？(2)针对这些原因，应采取哪些改进措施？2.在进行乳腺癌HER2免疫组化检测中，实验员发现阳性对照组织着色良好，但待测的乳腺癌组织切片呈现出均匀的深棕色背景染色，无法判断细胞膜的真实着色情况。请分析：(1)这种现象被称为什么？最可能的原因是什么？(2)请详细制定一个排除故障的方案，包括试剂调整和操作步骤的优化。3.某实验室收到一例疑似淋巴瘤的淋巴结标本，需要进行诊断。(1)请列出该标本应进行的常规处理及染色项目。(2)如果形态学怀疑为霍奇金淋巴瘤，需要通过免疫组化检测哪些抗体来辅助诊断？请简述这些抗体的预期表达结果。(3)在免疫组化检测中，如果CD30和CD15阳性，对诊断有何意义？参考答案及解析一、单项选择题1.C。解析：10%中性缓冲福尔马林（NBF）因其穿透力强、固定均匀、对形态结构保存好且成本适中，是病理诊断最常用的常规固定液。2.B。解析：苏木精是从苏木属植物中提取的染料，为碱性染料，易与细胞核中酸性物质（如DNA、RNA）结合，使细胞核着色。3.D。解析：脱水通常从低浓度乙醇开始，逐步过渡到高浓度，最终必须使用无水乙醇（100%）才能彻底去除组织中的水分，为下一步透明做准备。4.B。解析：OCT（OptimalCuttingTemperature）化合物是一种聚乙二醇和聚乙烯醇的水溶性混合物，冰冻切片中用于支撑组织，便于切片且后续操作方便。5.B。解析：PAS（PeriodicAcid-Schiff）染色通过氧化糖类中的乙二醇基团生成醛基，再与品红硫酸Schiff试剂反应生成紫红色复合物，常用于显示糖原、基底膜等富含多糖的结构。6.C。解析：福尔马林固定会导致部分抗原表位被交联掩盖，热诱导修复（如高压锅、微波水浴）通过高温打断亚甲基桥，暴露抗原表位，是目前最常用的方法。7.B。解析：透明剂（如二甲苯）既能溶解脱水剂（乙醇），又能溶解包埋剂（石蜡），同时能使组织折光率与透明剂接近，变得透明。8.B。解析：包埋温度应控制在石蜡熔点以上2-4℃，温度过高易致组织块烫伤收缩，过低则石蜡凝固不均。9.B。解析：PTAH（磷钨酸苏木精）染色主要用于显示横纹肌的肌纤维、纤维蛋白等，能使肌纤维横纹清晰可见。10.B。解析：硝酸脱钙液（通常5%-10%）脱钙速度快，适用于较硬的骨组织，但需注意控制时间以免损伤组织形态。11.A。解析：95%乙醇能迅速穿透细胞膜，固定细胞内蛋白质并保持糖原，是细胞学涂片最常用的固定液。12.B。解析：FITC（异硫氰酸荧光素）是免疫荧光技术中最常用的荧光标记物，在激发光下呈黄绿色荧光。13.B。解析：石蜡包埋的组织在染色前必须用二甲苯溶解掉组织中的石蜡，才能让水溶性染料进入组织。14.B。解析：刚果红染色与淀粉样物质结合，在普通光镜下呈橙红色，在偏振光显微镜下呈特征性的苹果绿双折光。15.B。解析：戊二醛是一种双醛基固定剂，对蛋白质交联作用强，能极好地保存超微结构，是电镜标本的首选固定剂。16.B。解析：脱水不彻底会导致组织中残留水分，进入二甲苯时呈浑浊状（乳化），导致切片出现云雾状空洞。17.A。解析：网状纤维主要由III型胶原蛋白构成，嗜银性最强，常用镀银染色（如Gomori法）将其染成黑色。18.C。解析：EnVision法利用二抗与多聚HRP酶结合，形成多聚体，携带大量酶分子，敏感性高且无需生物素-卵白素步骤。19.B。解析：脂类易被乙醇等有机溶剂溶解，若要显示脂肪，应选用能沉淀脂肪且不溶解它的固定液，如福尔马林钙液或锇酸。但在常规显示脂肪的染色（如油红O）中，常采用冷冻切片避免脂质丢失，固定则首选甲醛类。此处题目问固定液，若必须选能保存脂肪且不溶解，锇酸最好但不是常规，福尔马林钙液是常规选择。然而，在选项中，若是为了后续染色，通常不做化学固定直接冷冻，或用甲醛。但在给出的选项中，乙醇会溶解脂肪，福尔马林对脂肪保存一般，丙酮也有溶解性。若题目意在考察“什么溶剂溶解脂肪用于去除脂肪”则另当别论。但问“显示脂肪成分”，需保留脂肪。常规技术中，显示脂肪通常不用福尔马林固定后石蜡包埋（因被溶解），而是冰冻切片。若在冰冻切片中，常用甲醛固定。选项中A、B、C、D，乙醇和丙酮是脱水剂也是脂肪溶剂，福尔马林是水溶性，对脂质保存相对较好（虽不完美）。注：此题若考察溶解脂肪则选乙醇，但“显示”意味着保留。故选D（甲醛-钙液常用于脂肪染色固定）或A（常规固定）。在病理技术题库中，显示脂肪通常不用石蜡包埋，若固定，常用福尔马林。选项中D更特指脂肪固定。修正：题目选项D为甲醛-钙液，这是专门用于保存脂肪的固定液配方。修正：题目选项D为甲醛-钙液，这是专门用于保存脂肪的固定液配方。20.B。解析：3-5μm是常规HE染色最理想的厚度，既能保证细胞重叠少便于观察，又能保证切片完整。21.D。解析：固定的目的是防止自溶、腐败，沉淀或凝固蛋白质（硬化），保存组织结构。增强着色能力不是固定的直接目的，虽然某些固定液（如Zenker液）有媒染作用，但不是通用目的。22.A。解析：塑料包埋（如甲基丙烯酸树脂或乙二醇甲基丙烯酸酯）能切出1-2μm的薄切片，细胞结构清晰，且能保留抗原性，适合骨髓活检。23.B。解析：分化是用酸或酸性乙醇分化液脱去过度结合的苏木精，分化过度会导致细胞核着色过浅甚至褪色。24.B。解析：Luxolfastblue（劳克坚牢蓝）是显示中枢神经系统髓鞘的常用染色方法。25.C。解析：TaqDNA聚合酶具有耐热性和5'-3'聚合活性，是PCR反应中延伸步骤的关键酶。26.C。解析：组织芯片受体蜡块打孔直径一般在0.6mm-2.0mm之间，最常用的是1.5mm或2.0mm。27.C。解析：伊红是酸性染料，通常配成醇溶性染料（如伊红Y-乙醇溶液），因为其水溶性较差，且在乙醇中染色效果更好。28.D。解析：cDNA、寡核苷酸、RNA探针均可用于检测mRNA，其中RNA探针（cRNA）特异性最高。29.D。解析：对照切片、阳性对照片、阴性对照片均属于质控体系的一部分，用于评估染色系统的可靠性。30.A。解析：切片刀角度（刀刃角与组织平面的夹角）过大或过小都会导致切片厚薄不均、皱褶或无法成片。二、多项选择题1.ABCD。解析：常规病理技术涵盖从取材到制片的全过程，分子生物学检测通常归为分子病理技术，虽广义上属于病理技术，但在传统分类中常单列。但在现代病理技术中，分子检测也是重要部分。此处选ABCD最稳妥，若按现代大病理技术概念，E也正确。鉴于题目“常规病理技术”，通常指形态学基础技术。2.BCD。解析：Zenker（含氯化汞、重铬酸钾）、Bouin（含苦味酸、甲醛、乙酸）、Carnoy（含乙醇、氯仿、冰醋酸）均为混合固定液。10%NBF为单一固定液。3.ABCDE。解析：脱水不彻底会导致水分残留，进入透明剂时乳化，导致切片浑浊（白色云雾）、展片困难、染色不均、结构模糊及封片气泡。4.ABCE。解析：苏木精碱性染核（蓝），伊红酸性染质（红），染色后通常需分化去除背景。D选项描述反了，应是“苏木精是碱性染料，伊红是酸性染料”。5.ABC。解析：阴性对照主要用于排除非特异性染色、内源性干扰及验证抗体特异性。敏感性通常通过阳性对照评估。6.ABC。解析：Masson、VG、网状纤维染色均可显示纤维结缔组织。PAS显示糖类/基底膜，油红O显示脂肪。7.ABCDE。解析：电镜制样流程包括前固定（戊二醛）、后固定（锇酸）、脱水、包埋、切片、染色（铀、铅）。8.ABCE。解析：组织新鲜度、温度、刀锋利度、组织质地（含钙）直接影响冰冻切片质量。抗原修复是后续步骤，不影响切片物理质量。9.ABCD。解析：病理试剂多为有毒有害，需通风、防护、废液处理及急救设施。切片刀极其锋利，严禁手传递，必须用镊子或持刀器。10.ABCDE。解析：广义上，上述均为病理技术中的特殊染色或染色技术。11.ABC。解析：染色太深主要与染液浓度、时间、分化程度有关。脱水和温度影响相对较小或作用不同。12.ABCDE。解析：地高辛、生物素、荧光素、放射性同位素、酶均可作为探针的标记物。13.ABC。解析：术中快速病理（冰冻）主要用于确定肿瘤性质（良恶性）、切缘、淋巴结转移。D和E通常需石蜡切片或分子检测，不常规用于冰冻。14.ABCDE。解析：内源性酶未阻断、抗体浓度过高、时间过长、组织坏死（释放内源性生物素/酶）、洗涤不充分均可导致背景染色。15.ABCDE。解析：图像分析可对面积、光密度（着色强度）、周长、形状、核浆比等进行定量测量。三、填空题1.形态学研究方法；功能和代谢研究方法（或实验病理学研究方法）2.保存；形态学3.脱水；透明；浸蜡4.蓝；红（或粉红）5.螯合剂（如EDTA）；酸类6.棕褐（或棕黄）7.嵴（或线粒体嵴）8.过碘酸-雪夫反应（或过碘酸-Schiff反应）9.OCT包埋剂；液氮10.退火；延伸11.过氧化氢（或）12.树胶（或中性树胶）13.黑；黄（或红，视具体染色方法而定，如Gomori法网状纤维黑色，胶原黄色）14.妇科脱落（或宫颈/阴道/痰液等脱落）15.组织标本（或组织芯）四、判断题1.√。解析：NBF确实是标准固定液。2.×。解析：组织块过大会导致中心固定不良，固定液体积应为组织体积的10-20倍以上。3.×。解析：脱水应梯度进行，直接跳入高浓度乙醇会导致组织剧烈收缩。4.×。解析：苏木精原液（氧化苏木精）需经氧化成熟（如自然氧化或加氧化剂）才能具备染色能力。5.√。解析：冰冻切片因无需脱水包埋，支撑较差，且为了防止细胞破裂，厚度通常比石蜡切片厚。6.×。解析：温度过高可能导致抗体非特异性吸附增加，背景深，且易导致切片脱落，通常4℃或室温孵育。7.×。解析：仅含钙质的骨组织需要脱钙，软组织不需要。8.√。解析：Masson三色染色典型结果：肌纤维红，胶原蓝。9.×。解析：透射电镜观察内部超微结构，扫描电镜（SEM）观察表面结构。10.×。解析：RT-PCR（逆转录PCR）可用于检测RNA。11.√。解析：脱蜡不净，染料无法进入组织，导致不上色或着色极差。12.×。解析：阴性对照必须设置，以排除假阳性。13.√。解析：这是刚果红染色诊断淀粉样变性的金标准特征。14.√。解析：生物安全操作规范。15.√。解析：数字病理是现代病理发展趋势。五、名词解释1.固定：将组织浸入某些化学试剂（固定液）中，使细胞内蛋白质沉淀或凝固，终止细胞生命过程，防止细胞自溶和细菌腐败，从而保持组织和细胞原有的形态结构和成分。2.脱水：利用脱水剂（如乙醇）逐级置换组织内的水分，为透明剂进入创造条件，最终使组织完全干燥以便于石蜡渗透的过程。3.免疫组织化学：利用抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记在抗体上的显色剂（如酶、荧光素）显色，从而确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质）的表达及其定位、定性及定量的技术。4.抗原修复：由于甲醛固定会导致抗原决定簇被交联掩盖，通过加热（热诱导）或酶消化（酶诱导）等方法，将被掩盖的抗原表位重新暴露，以便抗体结合的过程。5.冰冻切片：利用低温冷冻技术使组织变硬，在恒冷箱切片机上直接进行切片的方法。其特点是制片速度快（约15-30分钟），常用于术中快速病理诊断。6.网状纤维：网状纤维是疏松结缔组织中的主要纤维成分，主要由III型胶原蛋白构成，分支交织成网，HE染色下不可见，需用银染法将其染成黑色，具有嗜银性。7.原位杂交：将核酸探针（DNA或RNA）标记后，与组织或细胞中对应的核酸序列进行特异性杂交，通过显色反应或荧光检测，在原位检测特定核酸序列存在及其表达位置的技术。8.组织芯片：又称组织微阵列，将数十个甚至数百个不同个体组织标本按预先设计好的顺序排列在一张固相载体（如蜡块）上，制成微阵列组织切片，用于高通量检测多种指标（如免疫组化、原位杂交）的技术。六、简答题1.简述10%中性缓冲福尔马林（NBF）的配制方法及其优点。配制方法：取40%甲醛（福尔马林）100ml，加入900ml蒸馏水，再加入磷酸二氢钠（NaP）和磷酸氢二钠（优点：(1)穿透力强，固定均匀。(2)对组织收缩小，能较好地保存形态结构。(3)中性环境能防止福尔马林产生甲醛色素，减少细胞核的人工假象。(4)保存抗原性较好，适用于大多数免疫组化染色。2.简述常规石蜡切片制作技术的基本流程。(1)取材与固定：切除病变组织，立即投入固定液中固定。(2)脱水：由低浓度到高浓度乙醇（75%→85%→95%→100%）逐级脱水。(3)透明：使用二甲苯等透明剂置换组织中的乙醇。(4)浸蜡：在熔化的石蜡中浸透，置换出透明剂。(5)包埋：将组织块放入充满石蜡的蜡盒中凝固。(6)切片：使用切片机将蜡块切成3-5μm的薄片。(7)展片与烤片：温水展片，捞片后烘干以紧密粘贴玻片。(8)染色：通常进行HE染色（脱蜡→水化→苏木精→分化→伊红→脱水→透明）。(9)封片：滴加树胶，加盖玻片封固。3.试述HE染色中常见的质量问题及其可能的原因。(1)切片染色模糊、结构不清：原因可能为固定不佳、脱水不彻底、分化过度或染色时间过短。(2)细胞核着色过浅或不着色：原因可能为苏木精染液陈旧失效、分化时间过长、酸分化液浓度过高。(3)细胞核着色过深、呈黑色：原因可能为苏木精染色时间过长、分化不足。(4)细胞质着色过浅或发灰：原因可能为伊红染液浓度低、被脱水剂洗脱、或切片在碱性溶液中停留过久。(5)切片出现大量气泡或裂纹：原因可能为脱水不彻底、透明时间过长、封片剂有气泡。4.简述免疫组化染色中SP法的基本原理。SP法即链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法。其原理基于生物素-亲和素的高亲和力。步骤：(1)特异性第一抗体与组织中的抗原结合。(2)生物素标记的第二抗体与第一抗体结合。(3)链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶（SP）复合物中的链霉亲和素与第二抗体上的生物素结合。(4)最后加入底物（如DAB），在过氧化物酶催化下显色，显示抗原位置。特点：灵敏度高，背景低，因为链霉亲和素几乎不含有非特异性结合位点。5.简述透射电镜生物样品制备的主要步骤及注意事项。步骤：(1)前固定：取材要快（<1分钟），置于2.5%戊二醛中固定。(2)后固定：经缓冲液冲洗后，用1%锇酸固定。(3)脱水：丙酮或乙醇梯度脱水。(4)包埋：环氧树脂（如Epon812）包埋，聚合。(5)超薄切片：超薄切片机切制50-70nm切片。(6)染色：醋酸铀和柠檬酸铅双重染色。注意事项：取材必须迅速、准确，避免机械损伤；所有试剂需高纯度；操作需避免重金属污染。6.简述病理技术中常用的特殊染色类型及其主要用途。(1)网状纤维染色：显示网状纤维，用于鉴别肿瘤的类型（如癌与肉瘤）、观察基底膜完整性。(2)Masson三色染色：区分胶原纤维（蓝）和肌纤维（红），用于观察器官纤维化程度、心肌病变。(3)PAS染色：显示糖原、真菌、基底膜等，用于诊断糖原贮积病、真菌感染。(4)抗酸染色：检