课时规范练48　微生物的培养技术及其应用

课时规范练48微生物的培养技术及其应用高考总复习优化设计GAOKAOZONGFUXIYOUHUASHEJI2025必备知识基础练12345678考点一

微生物的基本培养技术1.(2023·湖北模拟)下列有关培养基的叙述,正确的是(

)A.筛选、培养硝化细菌的培养基中不能加入氮源B.固体培养基中的琼脂能为微生物的生长提供碳源C.在进行微生物的富集培养时常选用液体培养基D.培养基中加入刚果红可用于尿素分解菌的鉴定C12345678解析

硝化细菌属于自养型生物,因此制备培养硝化细菌的培养基不需要添加碳源,但需要添加氮源,A项错误;固体培养基中的琼脂只是作为凝固剂,不能为微生物生长提供碳源,B项错误;液体培养基可以增大菌体与培养基的接触面积,为菌株的生长和繁殖提供更多的营养和空间,所以在进行微生物的富集培养时常选用液体培养基,C项正确;培养基中加入刚果红可用于纤维素分解菌的鉴定,D项错误。123456782.微生物纯培养的过程中需要配制固体培养基。下列叙述正确的是(

)A.配制固体培养基都需要添加琼脂B.稀释涂布平板法是在固体培养基中加入无菌水稀释,再用涂布器刮涂均匀C.可以利用固体培养基上的菌落特征来初步判断和鉴别细菌的类型D.如果固体培养基上单菌落太多,则未达到菌种纯化的目的C12345678解析

配制固体培养基需要添加凝固剂,通常选择琼脂作为凝固剂,但琼脂并非唯一的凝固剂,A项错误;稀释涂布平板法是将菌液进行梯度稀释后,滴加一定量菌液在固体培养基表面,用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面上进行培养的操作,B项错误;不同的菌种形成的单菌落的特征往往具有明显差异,可以利用固体培养基上的菌落特征来初步判断和鉴别细菌的类型,C项正确;如果平板上出现生长良好的单菌落,则达到了菌种纯化的目的,D项错误。123456783.无菌技术在微生物培养中至关重要,下列相关叙述正确的是(

)A.培养基高压蒸汽灭菌后,再将培养基的pH调整为中性或微碱性B.接种环、接种针等金属用具,可直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧C.使用后的培养基应立即丢弃,以免污染实验室其他培养物D.巴氏消毒法能杀死牛奶中所有微生物,且不破坏牛奶的营养成分B解析

应将培养基的pH调整为中性或微碱性后,再对培养基进行高压蒸汽灭菌,以免杂菌污染,A项错误;使用后的培养基应在灭菌处理后再丢弃,以免污染环境,C项错误;巴氏消毒法可以杀死牛奶中的绝大多数微生物,并且基本不会破坏牛奶中的营养成分,D项错误。123456784.(2023·山东潍坊质检)硝化细菌是化能自养菌,通过

的氧化过程获取菌体生长繁殖所需的能量,在水产养殖中具有重要作用。下表是分离硝化细菌的培养基配方,组分含量(NH4)2SO40.5gNaCl0.3gFeSO40.03gMgSO40.03gK2HPO40.75gNaH2PO40.25gNa2CO31g琼脂5%H2O定容至1000mL12345678下列说法错误的是(

)A.(NH4)2SO4可作为硝化细菌的氮源和能源B.培养基中的Na2CO3是硝化细菌的主要碳源C.K2HPO4和NaH2PO4能维持培养基的pHD.硝化细菌能清除水体中的铵态氮及亚硝态氮B解析

硝化细菌为自养型生物,能利用CO2合成糖类,故硝化细菌的主要碳源是CO2,B项错误。12345678考点二

微生物的选择培养和计数5.(2024·山东联考模拟)某生物兴趣小组进行了“探究不同浓度链霉素(一种抗生素)对细菌的作用”的实验。下列说法正确的是(

)A.实验开始前需用链霉素处理细菌,使其产生耐药性突变B.实验中所用培养皿和培养基均可采用干热灭菌法灭菌C.实验中抑菌圈直径越大,则说明细菌的耐药性越强D.细菌耐药性的增强,与细菌不断适应抗生素环境有关D12345678解析

细菌突变在使用链霉素之前,实验开始前用链霉素处理细菌,是为了筛选出耐药性的细菌,A项错误;实验中所用培养皿可用干热灭菌法灭菌,而培养基采用高压蒸汽灭菌(湿热灭菌),B项错误;实验中抑菌圈直径越小,则说明细菌的耐药性越强,C项错误;生物进化是生物与生物、生物与无机环境之间相互作用的结果,细菌耐药性的增强,与细菌不断适应抗生素环境有关,D项正确。123456786.发酵制氢技术是我国为早日实现“碳中和”开发的新能源技术之一。传统农业中,水稻、小麦的秸秆常被焚烧,既会产生浓烟污染环境,又增加了CO2的排放,研究团队将秸秆制成发酵液培养某种细菌,进行发酵制氢。下列说法错误的是(

)A.水稻、小麦的秸秆中富含纤维素,可为产氢细菌提供碳源和氮源B.鉴定该细菌是否为纤维素分解菌,可在培养基中加入刚果红试剂C.底物浓度、、pH等是影响发酵产氢量的重要因素D.与传统农业相比,发酵制氢技术既能减少CO2的排放量又能获得新能源A解析

纤维素的组成元素是C、H、O,可以为产氢细菌提供碳源,但不能提供氮源,A项错误。123456787.有机磷农药使用不当有时会造成瓜果蔬菜等食品农药残留超标,危害人类健康。某生物小组成员认为土壤中可能存在能高效降解有机磷农药的细菌,因此制备了培养基并进行纯化培养。下列说法正确的是(

)A.对土壤中的微生物进行分离和计数可以用平板划线法B.选择培养基中微生物降解能力越强,越晚停止生长C.培养基中一定含有适量的有机磷农药用于选择培养目的菌D.利用细菌计数板,在显微镜下可以准确计算一定体积样品中活菌的数量C12345678解析

平板划线法不能用来进行微生物计数,A项错误;微生物降解能力越强,消耗有机磷的速率越快,越早停止生长,B项错误;配制的该种选择培养基应该含有选择因子有机磷农药,以选择培养的目的菌,C项正确;用细菌计数板计算的数值是活菌数与死菌数的总和,数值会偏大,D项错误。123456788.(2023·辽宁模拟)如图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的过程示意图,下列有关叙述错误的是(

)A.在配制步骤②③的培养基时,使用高压蒸汽灭菌以防止杂菌污染B.步骤③采用稀释涂布平板法接种,其原理是将聚集的细菌分散,以获得单细胞菌落C.步骤③采用稀释涂布平板法接种,并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素D.步骤④挑取③中不同种的菌落分别进行相同条件接种,比较细菌分解尿素的能力C12345678解析

配制培养基时,应使用高压蒸汽灭菌,以防止杂菌污染,A项正确;步骤③纯化分解尿素细菌的原理是将聚集的细菌通过稀释涂布平板法分散,获得单细胞菌落,B项正确;步骤③筛选分解尿素的细菌,培养基中应以尿素作为唯一氮源,不能加入牛肉膏、蛋白胨,C项错误;步骤④鉴定细菌分解尿素的能力时,挑取③中不同种的菌落分别接种,比较细菌分解尿素的能力,D项正确。关键能力提升练123456781.利用微生物分解纤维素对废弃物污染的减轻和作物秸秆再利用具有重要意义。某兴趣小组从富含纤维素的土壤中取样,加入选择培养基中进行振荡培养,之后接种于鉴别培养基上进行培养,筛选出能够分解纤维素的微生物。下列叙述错误的是(

)A.选择培养的目的是促进纤维素分解菌生长,抑制其他微生物的生长B.振荡培养可以增加溶氧量,促进微生物对营养物质的充分接触和利用C.鉴别培养基上涂布接种时,将1mL菌液滴到培养基表面再用涂布器涂布均匀D.加入刚果红的培养基上所出现的有透明圈的菌落,可能是细菌或真菌繁殖而成C12345678解析

鉴别培养基上涂布接种时,将0.1

mL菌液滴到培养基表面再用涂布器涂布均匀,C项错误。123456782.(2023·湖北襄阳模拟)聚羟基脂肪酸酯(PHA)是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯,它具有类似于合成塑料的理化特性,且废弃后物降解,可用于制造无污染的“绿色塑料”。科学家从某咸水湖中获得生产PHA含量高的菌种流程如下:①取湖水→②接种在培养基上→③培养→④挑取单菌落,分别扩大培养→⑤检测菌体的数目和PHA的产量→⑥获得目标菌株。下列叙述正确的是(

)A.②可用稀释涂布平板法接种到含PHA较高的选择培养基上B.④挑取菌落时,应挑取多个菌落以便于筛选PHA产量高的嗜盐细菌C.扩大培养时,需要将接种后的培养基放入恒置培养,以防杂菌污染D.⑤中用显微镜直接计数法检测菌体的数目所得数值低于实际值B12345678解析

嗜盐细菌能生产PHA,从咸水湖中寻找生产PHA的菌种,步骤②可用稀释涂布平板法接种到含盐量较高的选择培养基上,而不是接种到含PHA较高的选择培养基上,A项错误;④挑取菌落时,应挑取多个菌落并分别测定嗜盐细菌的PHA含量,以便于筛选PHA产量高的嗜盐细菌,B项正确;扩大培养常采用液体培养基,不需要倒置培养,C项错误;显微镜直接计数法不能区分死菌和活菌,因此⑤中用显微镜直接计数法检测菌体的数目所得数值高于实际值,D项错误。123456783.一些真菌中的漆酶可以分解油漆中的机污染物,漆酶可以氧化愈创木酚,产生红棕色物质,因此根据真菌生长过程中培养基的颜色变化,可以挑选出具有潜在漆酶活性的土壤真菌。下列叙述不正确的是(

)A.含有愈创木酚的平板培养基属于选择培养基B.对培养基进行灭菌的方法是高压蒸汽灭菌法C.倒置平板培养可防止培养基被滴落的冷凝水污染D.制备培养基的步骤依次是溶化、灭菌、定容、倒平板D12345678解析

从功能上分析,含有愈创木酚的平板培养基可用于筛选具有潜在漆酶活性的土壤真菌,属于选择培养基,A项正确;对培养基进行灭菌时,应采用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法,B项正确;平板冷凝后皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面的湿度也比较高,若将平板倒置培养,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染,C项正确;制备培养基的步骤是计算、称量、溶化、定容、灭菌、倒平板,D项错误。123456784.某同学将5个手指尖在贴有“洗手前”标签的固体培养基上轻轻按一下,然后用肥皂将该手洗干净,再将5个手指尖在贴有“洗手后”标签的同种培养基上轻轻按一下。将这两个培养皿放入37℃恒箱中培养24h后,发现贴有“洗手后”标签的培养皿中菌落较少。下列相关叙述错误的是(

)A.这个实验中需要进行灭菌处理的材料用具有培养皿和培养基等B.“将手指尖在培养基上轻轻按一下”相当于微生物培养中的接种C.从实验结果来看,洗手后的操作不会污染培养基D.培养基中的氮元素是微生物合成蛋白质、核酸等物质所必需的C解析

从实验结果看,贴有“洗手后”标签的培养皿中菌落较少,说明洗手后的操作也会导致培养基污染,C项错误。123456785.(多选)(2023·山东日照质检)棉花是一种重要的经济作物,但是棉花全株含有对动物生长繁殖存在潜在危害的有毒物质——棉酚,限制了以棉花秸秆为原料来生产青贮饲料的应用。研究人员试图以棉花田的土壤为分离基质,利用以棉酚为唯一碳源的培养基,分离出高效分解棉酚的菌株。下列叙述正确的是(

)A.稀释涂布平板法或平板划线法均可用来分离纯化棉酚分解菌B.分离过程中所用的以棉酚为唯一碳源的培养基属于选择培养基C.分离过程中所用的接种工具、培养工具以及培养基都需要湿热灭菌D.对分离纯化得到的菌株进行计数时可采用稀释涂布平板法或显微镜直接计数法ABD12345678解析

稀释涂布平板法或平板划线法均可用于接种纯化,可用来分离纯化棉酚分解菌,A项正确;分离过程中所用的以棉酚为唯一碳源的培养基,只有能分解棉酚的微生物能生长,故该培养基属于选择培养基,B项正确;分离过程中所用的接种工具一般用灼烧灭菌法进行灭菌,C项错误;对分离纯化得到的菌株进行计数时可采用稀释涂布平板法(用于计数活菌)或显微镜直接计数法(用于计数活菌和死菌),D项正确。123456786.(多选)(2023·湖南联考)金黄色葡萄球菌是一种常见的病原菌,在血平板(完全培养基中添加适量血液)上生长时,可破坏菌落红细胞,使其褪色。某研究小组通过稀释涂布平板法测定了某处土壤中金黄色葡萄球菌数量,下列相关说法正确的是(

)A.从功能上分类,血平板属于选择培养基B.在制作血平板时需要在平板冷却后加入血液,防止高血细胞C.待涂布的菌液被培养基吸收后应倒置培养,防止水分过度蒸发D.实验统计的菌落数往往比活菌的实际数目高BC12345678解析

根据题干信息,金黄色葡萄球菌在血平板上生长时,可破坏菌落红细胞,使其褪色,因此这是鉴别培养基,A项错误;为防止高血细胞,在制作血平板时需要在平板冷却后加入血液,B项正确;涂布后的平板待菌液被培养基吸收后应倒置培养,防止水分过度蒸发,C项正确;用稀释涂布平板法进行计数时,当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落,因此统计的菌落数比活菌的实际数目低,D项错误。123456787.(2022·全国乙卷)化合物S被广泛应用于医药、食品和化工工业。用菌株C可生产S,S的产量与菌株C培养所利用的碳源关系密切。为此,某小组通过实验比较不同碳源对菌体生长和S产量的影响,结果见表。碳源细胞干重/(g·L-1)S产量/(g·L-1)葡萄糖3.120.15淀粉0.010.00制糖废液2.300.1812345678回答下列问题。(1)通常在实验室培养微生物时,需要对所用的玻璃器皿进行灭菌,灭菌的方法有

(答出2点即可)。

(2)由实验结果可知,菌株C生长的最适碳源是

;用菌株C生产S的最适碳源是

。菌株C的生长除需要碳源外,还需要

(答出2点即可)等营养物质。

(3)由实验结果可知,碳源为淀粉时菌株C不能生长,其原因是

。高压蒸汽灭菌、干热灭菌葡萄糖制糖废液氮源、无机盐、生长因子缺少淀粉酶

12345678(4)若以制糖废液作为碳源,为进一步确定生产S的最适碳源浓度,某同学进行了相关实验。请简要写出实验思路:

。

设计一系列浓度梯度的制糖废液分别培养菌株C,测定并比较不同浓度制糖废液中S的产量,寻找产量拐点,确定最适碳源浓度

(5)利用制糖废液生产S可以实现废物利用,其意义是

(答出1点即可)。

减少污某省市原料、降低生产成本12345678解析

(1)通常在实验室培养微生物时,对所需的玻璃器皿进行灭菌的方法有高压蒸汽灭菌、干热灭菌。(2)由实验结果可知,菌株C在以葡萄糖为碳源的培养基上细胞干重最大,所以菌株C生长的最适碳源是葡萄糖;在以制糖废液为碳源的培养基上,S产量最高,所以用菌株C生产S的最适碳源是制糖废液。菌株C的生长除需要碳源外,还需要氮源、无机盐、生长因子等营养物质。(3)由实验结果可知,碳源为淀粉时菌株C不能生长,其原因可能是缺少淀粉酶,不能利用淀粉。12345678(4)若以制糖废液作为碳源,为进一步确定生产S的最适碳源浓度,可设计一系列不同浓度的制糖废液分别培养菌株C,测定不同浓度制糖废液中S产量,寻找产量拐点(即峰值),确定最适碳源浓度。(5)利用制糖废液生产S可以实现废物利用,可减少污某省市原料、降低生产成本。123456788.(2022·广东卷)研究深海独特的生态环境对于开发海洋资源具有重要意义。近期在“科学号”考察船对中国南海科考中,中国科学家采集了某海域1146米深海冷泉附近沉积物样品,分离、鉴定得到新的微生物菌株并进一步研究了其生物学特性。12345678回答下列问题。(1)研究者先制备富集培养基,然后采用

法灭菌,冷却后再接入沉积物样品,28℃厌氧培养一段时间后,获得了含拟杆菌的混合培养物,为了进行纯种培养,除了稀释涂布平板法,还可采用

法。据题图分析,拟杆菌新