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疾控检验岗位笔试常见题目与答案一、单项选择题(每题1分,共30分。每题只有一个正确答案,请将正确选项字母填入括号内)1.在ELISA检测中,TMB显色后终止液常用的是()A.1mol/LHCl  B.0.5mol/LNaOH  C.1mol/LH₂SO₄  D.0.1mol/LPBS答案:C2.实时荧光PCR中,Ct值与起始模板量的关系是()A.Ct值越大模板量越多  B.Ct值与模板量无关  C.Ct值越小模板量越多  D.呈线性正比答案:C3.下列哪项不是细菌外毒素的特征()A.蛋白质  B.热不稳定  C.可制成类毒素  D.革兰阴性菌细胞壁成分答案:D4.麻疹病毒实验室确诊首选标本为()A.咽拭子  B.尿液  C.血清IgM  D.脑脊液答案:C5.用于流感病毒分离的鸡胚接种部位是()A.尿囊腔  B.羊膜腔  C.卵黄囊  D.绒毛尿囊膜答案:A6.我国《人间传染的病原微生物名录》中,布鲁氏菌危害程度分类为()A.第一类  B.第二类  C.第三类  D.第四类答案:B7.在WS/T442-2019中,检测水中菌落总数培养温度是()A.25℃  B.30℃  C.35℃  D.36℃±1℃答案:D8.下列哪种消毒剂对芽孢作用最强()A.乙醇  B.碘伏  C.戊二醛  D.氯己定答案:C9.用于检测霍乱弧菌O1群血清学试验是()A.肥达试验  B.外斐试验  C.凝集试验  D.沉淀试验答案:C10.在核酸提取中,酚/氯仿抽提主要去除()A.多糖  B.蛋白质  C.RNA  D.脂多糖答案:B11.下列哪项属于法定乙类传染病但按甲类管理()A.登革热  B.肺炭疽  C.艾滋病  D.狂犬病答案:B12.用于检测乙脑病毒IgM的捕获法ELISA包被抗体为()A.抗人IgG  B.抗人IgMμ链  C.抗人IgA  D.抗人IgE答案:B13.在WS285-2008中,结核分枝杆菌培养最适温度为()A.25℃  B.30℃  C.35℃  D.37℃答案:D14.下列哪项不是PCR污染来源()A.产物气溶胶  B.引物二聚体  C.阳性对照  D.试剂污染答案:B15.用于真菌药敏试验的参考方法是()A.K-B法  B.E-test  C.CLSIM27-A4  D.微量稀释法答案:C16.在WS293-2019中,HIV抗体确证试验采用()A.ELISA  B.化学发光  C.Westernblot  D.快速试纸条答案:C17.下列哪项属于核酸杂交探针标记物()A.地高辛  B.溴酚蓝  C.二甲苯青  D.甘油答案:A18.用于检测艰难梭菌毒素B的细胞系是()A.Vero  B.Hep-2  C.CHO  D.MRC-5答案:C19.在WS216-2018中,登革热NS1抗原检测窗口期为发病后()A.1d内  B.1–7d  C.7–14d  D.>14d答案:B20.下列哪项不是实验室生物安全二级要求()A.自动关闭门  B.定向气流  C.高压灭菌器  D.正压防护服答案:D21.实时荧光PCR中,FAM探针的淬灭基团常用()A.TAMRA  B.ROX  C.CY5  D.HEX答案:A22.用于检测炭疽芽孢的染色方法是()A.革兰染色  B.芽孢染色  C.抗酸染色  D.墨汁负染答案:B23.下列哪项属于核酸提取裂解液成分()A.Tris-HCl  B.EDTA  C.SDS  D.以上均是答案:D24.在WS288-2017中,痰涂片抗酸染色镜检报告“+++”表示每视野杆菌数()A.1–9条  B.10–99条  C.1–10条/视野  D.>10条/视野答案:D25.下列哪项不是实验室质量控制图警告线()A.±1s  B.±2s  C.±3s  D.±4s答案:D26.用于检测寨卡病毒RNA的靶基因通常是()A.E基因  B.NS1基因  C.NS5基因  D.prM基因答案:C27.下列哪项属于病毒中和试验细胞病变抑制法()A.空斑减少  B.血凝抑制  C.补体结合  D.胶体金答案:A28.在WS214-2018中,疟原虫镜检厚薄血膜染色常用()A.瑞氏  B.姬氏  C.巴氏  D.抗酸答案:B29.下列哪项不是PCR引物设计原则()A.GC含量40–60%  B.3’端避免A  C.避免二聚体  D.长度18–25bp答案:B30.用于检测O157:H7的显色培养基是()A.TCBS  B.SMAC  C.XLD  D.MAC答案:B二、多项选择题(每题2分,共20分。每题有两个或两个以上正确答案,多选、少选、错选均不得分)31.下列哪些属于核酸提取过程中抑制物()A.血红素  B.腐殖酸  C.肝素  D.乙醇答案:ABC32.关于实时荧光PCR的ROX染料作用,正确的是()A.被动参比  B.校正荧光信号  C.参与扩增  D.减少孔间差异答案:ABD33.下列哪些属于乙型肝炎病毒血清标志物“大三阳”()A.HBsAg+  B.HBsAb+  C.HBeAg+  D.HBcAb+答案:ACD34.下列哪些属于细菌耐药表型确证试验()A.ESBL双纸片协同  B.头孢西丁筛查MRSA  C.碳青霉烯酶改良霍奇  D.青霉素纸片答案:ABC35.下列哪些属于寨卡病毒传播途径()A.埃及伊蚊叮咬  B.性接触  C.母婴垂直  D.输血答案:ABCD36.下列哪些属于高致病性禽流感实验室检测必备条件()A.BSL-3  B.负压罩  C.核酸提取仪  D.Ⅲ级生物安全柜答案:ABD37.下列哪些属于PCR扩增体系组分()A.dNTPs  B.引物  C.模板  D.琼脂糖答案:ABC38.下列哪些属于真菌厚壁孢子形成试验阳性菌种()A.白念珠菌  B.热带念珠菌  C.近平滑念珠菌  D.克柔念珠菌答案:AB39.下列哪些属于实验室生物安全柜类型()A.Ⅰ级  B.ⅡA2级  C.Ⅲ级  D.Ⅳ级答案:ABC40.下列哪些属于登革热实验室确诊方法()A.RT-PCR  B.NS1抗原  C.IgM捕获ELISA  D.血培养答案:ABC三、填空题(每空1分,共20分)41.实时荧光PCR中,TaqMan探针5’端标记________,3’端标记________。答案:荧光基团;淬灭基团42.我国《病原微生物实验室生物安全管理条例》规定,运输高致病性病原微生物菌(毒)种须报________批准。答案:国家卫生健康委43.结核分枝杆菌培养常用固体培养基为________,液体培养基为________。答案:罗氏培养基;MGIT96044.病毒中和试验中,能抑制50%细胞病变的血清稀释度称为________。答案:中和抗体滴度45.在WS216-2018中,登革热NS1抗原检测标本应在采集后________小时内分离血清,若不能及时检测,血清应保存于________℃以下。答案:6;−2046.细菌K-B法药敏试验中,抑菌圈直径判读精确至________mm,质控菌株大肠杆菌ATCC编号为________。答案:1;2592247.实时荧光PCR扩增效率E的计算公式为E=________×100%。答案:10^(−1/斜率)−148.寨卡病毒RT-PCR检测中,逆转录反应常用温度为________℃,时间________min。答案:50;3049.真菌厚壁孢子形成试验培养基为________,培养温度________℃。答案:玉米吐温80培养基;2550.高压蒸汽灭菌常用条件为________℃,________kPa,维持________min。答案:121;103.4;15–30四、简答题(每题8分,共40分)51.简述实时荧光PCR中TaqMan探针法的工作原理。答案:TaqMan探针5’端标记荧光基团,3’端标记淬灭基团,完整探针时荧光被淬灭;PCR延伸阶段,Taq酶5’→3’外切酶活性切割探针,荧光基团与淬灭基团分离,荧光信号累积,其强度与扩增产物量成正比,实现实时定量。52.简述结核分枝杆菌固体培养基报阳标准及后续鉴定流程。答案:罗氏培养基35℃培养,每周观察,菌落呈乳白色干燥粗糙,报阳后取菌落行抗酸染色确认,阳性菌株进一步做PNB生长试验、硝酸盐还原、热稳定触酶试验鉴定结核复合群,再用HAIN或MGIT960做药敏。53.简述寨卡病毒RT-PCR检测中防污染措施。答案:分区操作:试剂准备、标本处理、扩增分析三区独立;单向流动;使用dUTP+UNG酶防产物污染;阴性对照、阳性对照、提取空白对照全程设置;定期紫外照射与10%次氯酸擦拭;人员固定、物品专用。54.简述HIV抗体筛查阳性标本送确证试验的流程及注意事项。答案:筛查阳性须重新采样,填写确证送检单,标本为血清或血浆,2–8℃冷藏72h内送达,若延迟需−20℃以下冷冻,避免反复冻融;送检单注明采样时间、既往史、抗病毒史;运输符合UN2814要求;实验室接收后核对信息,4℃保存,7d内完成Westernblot确证。55.简述多重PCR与单重PCR相比的优缺点。答案:优点:单管多靶标,节省标本、试剂、时间,适合暴发快速筛查;缺点:引物间易交叉二聚体,优化复杂,灵敏度可能下降,结果判读需多通道荧光或电泳,成本高,对仪器要求提升。五、应用题(含计算/分析/综合,共40分)56.(计算题,10分)某实时荧光PCR标准曲线方程y=−3.42x+38.2,y为Ct值,x为log₁₀拷贝数。求:(1)扩增效率E;(2)若待测标本Ct=28.4,求起始拷贝数。答案:(1)斜率=−3.42,E=10^(−1/−3.42)−1=10^0.292−1=1.96−1=0.96,即96%。(2)28.4=−3.42x+38.2⇒x=(38.2−28.4)/3.42=9.8/3.42=2.865,拷贝数=10^2.865=7.3×10²copies/μL。57.(分析题,10分)某市CDC收到一起学校聚集性腹泻标本20份,初步培养革兰阴性杆菌,氧化酶阴性,发酵乳糖,IMViC++−−。请给出:(1)最可能病原;(2)进一步生化确认试验;(3)若需检测产毒基因,写出PCR靶基因及引物序列设计原则;(4)暴发调查报告应包含的要素。答案:(1)大肠埃希氏菌。(2)需做EPEC、ETEC、EHEC、EIEC、EAEC分型;用PCR检测escV、lt、stx1/stx2、ipaH、aggR;血清型O157:H7用SMAC+山梨醇阴性菌落。(3)stx2基因引物:上游5’-GTTTTTCTTCGGTATCCTATTCC-3’,下游5’-ATGCATCTCTGGTCATTGTATTAC-3’,产物224bp;设计原则:长度18–24bp,GC40–60%,Tm58–62℃,避免二聚体与发夹,3’端避免单碱基。(4)报告要素:背景、调查目的、方法(病例定义、采样、实验)、结果(流行病学曲线、临床表现、实验室、危险因素)、讨论、控制措施、建议、附件(问卷、菌株表)。58.(综合题,20分)某口岸输入性黄热病疑似病例,男,35岁,非洲归国,发热黄疸3d,IgM阳性,RT-PCR检测Ct=22。请设计完整实验室检测与处置方案,包括:(1)标本采集种类、时间、量、保存运输;(2)实验室生物安全级别及个人防护;(3)检测流程图(含分子、血清、病毒分离);(4)阳性结果上报时限与格式;(5)后续环境消毒与废物处理。答案:(1)采集非抗凝血5mL分血清,EDTA抗凝血5mL分血浆,尿液50mL,发病5d内;血清/血浆分装3份,2–8℃冷藏≤24h,−70℃长期;运输用三层包装,UN2814标识,冷藏车。(2)实验活动涉及活病毒,须在BSL-3进行;人员穿正压防护服或Ⅲ级生物安全柜+N95、双层手套、防水围裙、护目镜。(3)流

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