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2026年大学(生物工程)发酵工程模块测试试题及答案一、单项选择题(每题1分,共20分。每题只有一个正确答案,请将正确选项字母填入括号内)1.在分批发酵过程中,微生物比生长速率μ与底物浓度S的关系常用下列哪一方程描述?A.μ=μ_{max}·S/(K_s+S) B.μ=μ_{max}·S/K_s C.μ=μ_{max}·(S+K_s)/S D.μ=μ_{max}·K_s/(S+K_s)答案:A2.下列哪种补料策略最适合解决高浓度底物抑制问题?A.恒速补料 B.指数补料 C.脉冲补料 D.一次性投料答案:B3.在气升式发酵罐中,影响循环时间的最主要结构参数是:A.罐高径比 B.分布器孔径 C.导流筒与罐体间隙 D.搅拌桨直径答案:C4.若某抗生素发酵单位以“效价单位/mL”表示,其测定原理属于:A.酶联免疫 B.生物效价浊度法 C.高效液相色谱外标法 D.紫外吸收系数法答案:B5.下列关于溶氧系数k_La的说法正确的是:A.与发酵液黏度成正比 B.与温度无关 C.随通气比提高而增大 D.与罐压呈负相关答案:C6.在酵母乙醇发酵中,若CO₂释放速率CER突然下降而OUR不变,最可能发生了:A.巴斯德效应 B.克拉布特里效应 C.溢出代谢 D.氧中毒答案:B7.采用“两阶段溶氧控制”策略生产重组蛋白时,第一阶段通常维持溶氧:A.5%饱和度 B.30%饱和度 C.70%饱和度 D.100%饱和度答案:C8.下列哪种传感器属于“原位灭菌型”并可耐受121℃反复灭菌?A.极谱型溶氧电极 B.光学pH电极 C.氧化还原电位电极 D.电导率电极答案:A9.在青霉素发酵放大中,若保持P/V(单位体积功率)不变,则下列哪一参数必然随罐体积增大而降低?A.搅拌转速 B.叶尖线速度 C.通气比 D.溶氧传质系数答案:A10.某连续发酵系统稀释率D=0.15h^{-1},若发生“洗出”现象,则临界稀释率D_{crit}与μ_{max}关系为:A.D_{crit}=μ_{max} B.D_{crit}>μ_{max} C.D_{crit}<μ_{max} D.无固定关系答案:A11.在好氧发酵中,若RQ(呼吸商)>1.2,可初步判断:A.碳源不足 B.氧限制 C.副产物有机酸积累 D.氮源缺乏答案:C12.下列关于“代谢热”估算式Q_{met}=0.12·OUR(kcal/L·h)中,系数0.12对应的单位是:A.kcal/mmolO₂ B.kcal/molO₂ C.kcal/gO₂ D.kcal/LO₂答案:B13.在发酵过程多参数相关分析中,用于判断“代谢途径迁移”的常用统计方法是:A.主成分分析PCA B.正交偏最小二乘OPLS C.聚类分析 D.响应面法答案:B14.若某菌株产物合成受磷酸盐抑制,则发酵罐中PO_4^{3-}浓度应控制在:A.<0.1mmol/L B.1–5mmol/L C.10mmol/L D.50mmol/L答案:A15.下列关于“高细胞密度发酵”定义,正确的是:A.干细胞重>50g/L B.干细胞重>150g/L C.OD_{600}>100 D.湿细胞重>200g/L答案:B16.在动物细胞灌流培养中,常用“细胞截留”设备是:A.陶瓷膜 B.中空纤维切向流 C.离心机 D.深层过滤器答案:B17.若采用“DO-stat”补料,控制变量是:A.pH B.溶氧 C.尾气CO₂ D.泡沫位答案:B18.在固态发酵中,下列哪一参数最能反映“水活度”?A.含水量 B.水分活度a_w C.相对湿度 D.平衡含水率答案:B19.下列哪种灭菌方式属于“连续瞬时高温”?A.HTST B.UHT C.巴氏消毒 D.间歇灭菌答案:B20.在发酵废气处理中,生物滴滤塔填料最主要功能是:A.提供缓冲pH B.固定化微生物并提供比表面积 C.吸附VOC D.降温答案:B二、多项选择题(每题2分,共20分。每题有两个或两个以上正确答案,多选、少选、错选均不得分)21.下列哪些因素会导致k_La测定结果偏低?A.发酵液中加入消泡剂 B.提高温度 C.增加罐压 D.提高搅拌转速答案:A、C22.关于“指数补料”策略,正确的有:A.比生长速率恒定 B.底物浓度趋于零 C.需预先知道Y_{X/S} D.可抑制乙酸积累答案:A、B、C23.下列属于“发酵过程软测量”技术的有:A.基于近红外光谱的葡萄糖预测 B.基于RQ的碳源消耗估算 C.基于电容法的活细胞浓度 D.基于尾气质谱的OUR计算答案:A、B、C、D24.在青霉素发酵中,下列哪些操作可延缓菌丝球“核心坏死”?A.降低搅拌强度 B.提高溶氧 C.添加剪切保护剂PEG D.降低培养温度答案:B、C、D25.下列关于“连续发酵多级串联”优点,正确的有:A.提高产物转化率 B.降低染菌风险 C.可分段控制环境 D.简化下游提取答案:A、C26.在动物细胞微载体培养中,影响“细胞贴附率”的因素有:A.微载体浓度 B.搅拌转速 C.血清浓度 D.微载体表面电荷密度答案:A、B、C、D27.下列哪些属于“发酵尾气在线分析”可获得的直接参数?A.OUR B.CER C.RQ D.甲醇浓度答案:A、B、C28.在“高细胞密度大肠杆菌发酵”中,为减少乙酸积累,可采取:A.降低比生长速率 B.采用甘油代替葡萄糖 C.基因敲除pta D.提高溶氧至100%答案:A、B、C29.下列关于“固态发酵”与“深层液态发酵”对比,正确的有:A.固态发酵水耗低 B.固态发酵产物浓度高 C.固态发酵传热传质差 D.固态发酵易实现纯培养答案:A、B、C30.在“发酵过程放大”中,若采用“恒叶尖速度”准则,则:A.小罐与大罐剪切环境相似 B.溶氧系数可能不足 C.搅拌功率密度降低 D.菌丝受损风险降低答案:A、B、C三、填空题(每空1分,共30分)31.Monod方程中,当S=10K_s时,μ与μ_{max}的比值为______。答案:0.90932.若发酵罐体积从100L放大到10m³,按“恒P/V”准则,搅拌转速n与罐径D的关系近似为n∝D^{______}。答案:-2/333.在好氧发酵中,氧传递速率OTR=k_La·(C^-C),若C^=7mg/L,C=1mg/L,k_La=120h^{-1},则OTR=______mg/(L·h)。33.在好氧发酵中,氧传递速率OTR=k_La·(C^-C),若C^=7mg/L,C=1mg/L,k_La=120h^{-1},则OTR=______mg/(L·h)。答案:72034.某酵母Y_{X/S}=0.5gDCW/g葡萄糖,若比生长速率μ=0.2h^{-1},则底物比消耗速率q_s=______g/(gDCW·h)。答案:0.435.若采用“指数补料”,设初始生物量X_0=1g/L,μ_set=0.3h^{-1},经3h后生物量X=______g/L。答案:2.4636.在青霉素发酵中,若菌球平均直径从0.5mm增大到1.0mm,氧扩散限制临界半径按R_c=√(6D_e·C_0/(q_{O_2}·X))计算,则R_c将______(增大/减小/不变)。答案:减小37.动物细胞灌流培养中,常用“细胞截留”切向流过滤,若中空纤维内径0.5mm、长度30cm,入口流速200mL/min,则平均剪切率γ≈______s^{-1}。(公式γ=4Q/(πr^3))答案:339038.在固态发酵中,若基质初始水分活度a_w=0.99,灭菌后降至0.95,则微生物比生长速率将______(升高/降低)。答案:降低39.若某发酵尾气中O₂=20.9%,CO₂=4.2%,N₂=74.9%,则RQ=______。答案:0.9740.在“高细胞密度发酵”中,若采用“葡萄糖-甲醇混合碳源”可减缓______效应。答案:克拉布特里41.若连续发酵系统D=0.2h^{-1},Y_{X/S}=0.4g/g,S_0=100g/L,K_s=0.5g/L,则稳态底物残留S=______g/L。答案:0.542.在“两阶段温度控制”策略中,若第一阶段37℃、第二阶段30℃,则第二阶段目的通常为______。答案:促进产物合成43.若发酵液黏度μ=0.05Pa·s,密度ρ=1050kg/m³,搅拌转速n=300rpm,则雷诺数Re=______。(Re=ρnD²/μ,D=0.1m)答案:525044.在“DO-stat”补料中,若溶氧反弹高于设定值5%,则控制系统将______补料速率。答案:提高45.若某抗生素发酵单位从20000U/mL提高到30000U/mL,提取收率80%,则提取工段产能提升______%。答案:5046.在“连续发酵多级串联”中,若级数N→∞,则系统行为趋近于______反应器。答案:平推流47.若采用“陶瓷膜”进行细胞回收,膜孔径0.2μm,则主要截留机制为______。答案:表面筛分48.在“发酵过程多参数相关分析”中,OPLS模型中Q²>______认为模型预测能力良好。答案:0.549.若某菌株μ_{max}=0.5h^{-1},在连续发酵中发生“洗出”,则实际D必须______0.5h^{-1}。答案:大于50.在“固态发酵”中,若料层厚度从2cm增至6cm,则最大温升ΔT将约增至______倍。(假设产热速率恒定)答案:3四、简答题(共40分)51.(封闭型,6分)写出“高细胞密度大肠杆菌发酵”中,通过“指数补料”实现μ=0.2h^{-1}的补料速率F(t)表达式,并说明所需已知参数。答案:F(t)=(μ/Y_{X/S}·X_0·V_0)·e^{μt},需已知μ、Y_{X/S}、初始生物量X_0、初始体积V_0。52.(开放型,8分)试述在“好氧发酵放大”中,如何综合平衡“溶氧供给”与“剪切损伤”矛盾,并给出至少三条可量化准则。答案:1.恒P/V准则:P/V≥1.5kW/m³,保证k_La≥100h^{-1};2.恒叶尖速度v_t≤5m/s,避免菌丝球破碎;3.恒混合时间t_m≤30s,确保底物均匀;4.采用多段搅拌或气升式替代机械搅拌,降低剪切;5.引入氧载体(如过氧化氢酶)或纯氧富集,提高C^,降低转速需求。答案:1.恒P/V准则:P/V≥1.5kW/m³,保证k_La≥100h^{-1};2.恒叶尖速度v_t≤5m/s,避免菌丝球破碎;3.恒混合时间t_m≤30s,确保底物均匀;4.采用多段搅拌或气升式替代机械搅拌,降低剪切;5.引入氧载体(如过氧化氢酶)或纯氧富集,提高C^,降低转速需求。53.(封闭型,6分)某连续发酵系统D=0.25h^{-1},μ_{max}=0.30h^{-1},K_s=0.3g/L,S_0=120g/L,求稳态生物量X,已知Y_{X/S}=0.45g/g。答案:S=K_s·D/(μ_{max}-D)=0.3·0.25/(0.30-0.25)=1.5g/L;X=Y_{X/S}(S_0-S)=0.45(120-1.5)=53.3gDCW/L。54.(开放型,10分)结合代谢工程原理,设计一种减少“乳酸积累”的CHO细胞灌流培养策略,要求写出基因改造、培养控制与在线监控三层面方案。答案:1.基因改造:敲除LDHA基因,过表达丙酮酸羧化酶PC,引入谷氨酰胺合成酶GS,减少乳酸脱氢酶通量;2.培养控制:采用低葡萄糖(2mmol/L)-谷氨酰胺(1mmol/L)灌流,维持RQ=0.9–1.0,溶氧40–60%,温度37℃→33℃两阶段;3.在线监控:采用拉曼光谱实时校准葡萄糖/乳酸,电容法测活细胞密度,反馈控制灌流速率,乳酸浓度<5mmol/L。55.(封闭型,5分)写出“氧传递双膜理论”的传质速率方程,并指出提高k_La的三种物理方法。答案:OTR=k_La(C^-C);方法:提高搅拌转速、增加通气比、提高罐压。答案:OTR=k_La(C^-C);方法:提高搅拌转速、增加通气比、提高罐压。56.(开放型,5分)说明“固态发酵”中“温度梯度”对产物合成的负面影响,并提出两项工程化解决措施。答案:温度梯度导致酶失活、菌体代谢不均、产物降解;措施:1.强制通气冷却+间歇翻料,控制料温<35℃;2.采用薄层转鼓反应器,增大比表面积,提高传热。五、综合应用题(共40分)57.(计算分析题,15分)某10m³发酵罐生产聚羟基脂肪酸(PHA),分批发酵数据如下:初始葡萄糖S_0=80g/L,Y_{X/S}=0.35g/g,Y_{P/X}=0.6gPHA/gDCW,μ_{max}=0.25h^{-1},K_s=1g/L,m_s=0.02g/(gDCW·h),维持代谢系数m_p=0.01g/(gDCW·h)。(1)建立产物合成动力学模型,写出dP/dt表达式;(2)求发酵终点PHA浓度,假设葡萄糖耗尽即终止;(3)若采用指数补料维持μ=0.15h^{-1},求补料开始时间t_1(设S降至10g/L时启动)及所需葡萄糖流加速率F(t)表达式。答案:(1)dP/dt=Y_{P/X}·μ·X+m_p·X;(2)X_{max}=Y_{X/S}·S_0=28gDCW/L,P_{max}=Y_{P/X}·X_{max}=16.8g/L;(3)由Monod方程积分得t_1=ln(S_0/S)/μ_{max}·(1+K_s/(S_0-S))≈8.9h;F(t)=μ/Y_{X/S}·X_0·V_0·e^{μ(t-t_1)},X_0=28g/L,V_0=10m³,μ=0.15h^{-1},故F(t)=120·e^{0.15(t-t_1)}kg/h。58.(综合设计题,25分)某企业需将50L实验室规模“红霉素发酵”放大至50m³生产罐,已知:实验室参数:P/V=2.0kW/m³,k_La=150h^{-1}
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