无草育肥情况下对育肥牛瘤胃酸中毒的比较研究

选取体重差异很小的，同一养殖场10头肉牛。将其随机分为两组5头肉牛作为实验组饲喂无草育肥颗粒饲料XT881,5头肉牛作为对照组饲喂草+精饲料。在饲养第40天和第110天对肉牛进行颈静脉采血提取血清。完全饲喂无草育肥颗粒饲料(XT881)关键词：肉牛；瘤胃酸中毒；乳酸；二胺氧化酶；内毒素ABSTRACT:JilinProvinceisalargeprovinceofbeefcattleoutput,andbeefShulanCity,HuadianCity,Yartofthefarmersinordertofcompletelyfeedinggrass-freefattebetterenhancethegrowthandTenbeefcowsfromthesamefarmwithverylittledifferenceinbodyweighselected.Theywererandomlydividedintotwogroups:5beefcowswerefedgrass-freeconcentratefeedascontrolgroup.BloodwascollectedfromjugularveinofthebeefKEYWORDS:Beefcattle;Ruminalacidosis;Lacticacid;Diamineoxidase;Ⅲ 1 11.2吉林省在肉牛饲养方面的问题 11.3肉牛无草育肥颗粒饲料研究意义 21.4肉牛无草育肥颗粒饲料主要成分 21.5肉牛瘤胃酸中毒的主要原因和主要影响及其防治 31.6D-LA的含量对瘤胃的意义 41.7DAO的含量对瘤胃的意义 41.8LPS的含量对瘤胃的意义 4第二章研究过程 52.1材料与仪器设备 52.1.1实验设计 5 52.1.3实验材料与试剂 2.1.4实验使用主要仪器设备 2.2数据收集及血液样本采集 62.2.1肉牛血液样本的采集 62.3牛血清乳酸含量测定 62.3.1乳酸含量测定操作步骤 62.3.2乳酸含量的计算 72.4牛血清二胺氧化酶含量的测定 72.4.1二胺氧化酶测定的操作步骤 72.4.2二胺氧化酶含量的计算 2.5牛血清LPS的测定 82.5.1LPS测定的操作步骤 2.5.2LPS标准曲线的绘制 8 3.1完全饲喂颗粒饲料对肉牛血清乳酸含量的影响 3.3完全饲喂无草育肥颗粒饲料对肉牛血清二胺氧化酶含量的影响 3.4完全饲喂无草育肥颗粒饲料对肉牛LPS含量的影响 3.5结果分析 第四章结论与展望 1第一章前言2024年吉林省的肉牛存栏量达到了431.1万头，同比增长了0.9%,牛肉产量53.9万吨，同比增长了9.8%,增速明显高于全国的平均水平[I。尽管全国的实现了存栏量五年正增长，2024年饲养量超过八万头，屠宰量从2023年的全国第十一位升至第五位，全产业链产值突破2500亿元13。牛群体则是推动了乳肉兼用型的产业发展4,全省34个肉牛大县贡献了80%的产年外销牛肉同比增长156%,减少外调的活牛约16万头。上涨15%豆粕的价格波动幅度高达20%,导致精饲料成本占比超过60%。散户殖户精粗比竟高达8:2,远远超过了合理的范围7:3。而且，尽管全省的秸秆饲料化利用率已经高达65%,但是仍有1880万吨的秸秆还没有被有效的利用。一些地区的收储设施也存在着明显的不足，秸秆的霉变率超过10%7]。散户的技术水平也是参差不齐，全省90%的养殖户饲养量不超过20头肉牛，2殖，运营的成本也非常高昂。在山东阳信县5G智慧牧场“10人养4000头牛”的模式也曾在吉林复制尝试，但是设备投入非常高，推广的进度非常缓慢8。更重但是全省种公站年生产冻精500万例，仅仅能满足60%的需求，高端的种牛仍需进一步来说，疫病防控体系也存在着很大的压力，2023年吉林大学分离出了吉林省首例阿卡斑病毒，导致新生犊牛畸形率上升到了12%;2018年双辽市提高经济效益具有重要意义。如何控制瘤胃酸度是需2020年，MuhammadIMalik等在对日粮的物理形态(PF)(颗粒状与传统日粮)和麦秆(WS)的添加量(SL)(15%与25%)对育肥山羊的采食量、生长速度、饲喂颗粒TMR和WS可以改善DMI和生长性能，并且15%WS的表现优于25%3青杆在提高肉牛体重效率上更有优势。通常饲料比如米代替草作为主要饲料，实际上是用高淀粉代替了纤米和玉米秸秆，玉米秸秆中的高纤维弥补了玉米低纤研究发现豆粕可以作为蛋白质的主要来源，豆粕性。与此同时不同区域可通过不同的能量组合北地区可用玉米加甜菜粕；华南地区可用木小麦；中原地区用小麦加玉米DDGS。育肥牛，不需要肉牛全混合日粮(TMR)会引起代谢紊乱，会抑制肝脏功能，引发酮病或脂肪肝。还会导致渗透性腹泻。4查瘤胃液的pH。预防肉牛的瘤胃酸中毒，保障肉牛的健康与生产效益。LA主要是由瘤胃内的乳酸菌等微生物发酵产生的，在发酵过程中，纤维等一些碳水化合物会被微生物分解，其中一部分就会生成D-LA。瘤胃在发酵比较活跃牛血清的DAO含量可以反映出瘤胃黏膜的屏障功能的状态，当胃黏膜发生血清DAO的含量会升高，而二胺氧化酶的含量发正常的发酵平衡，会导致发酵强度减弱。DAO含量在反映瘤胃健康状况方有重要作用。在瘤胃酸中毒发生初期，DAO的含量就会发生变化，可5第二章研究过程想要比较草+精料补充料的饲喂方式和完全饲喂无草育肥颗粒饲料对肉牛2.1.1实验设计此次实验采用了单因素变量的方法，选取10只体重为300kg的肉牛，将其随机分为了两组，一组有五个重复。1组为实验组，完全饲喂无草育肥颗粒饲料XT881;2组为对照组，为正常饲喂草+精饲料组。实验周期为110天，一开始选用无差别的10头肉牛。1组每天早上六点、下午三点各饲喂一次饲料XT881,每次饲喂12kg。2组每天早上六点、下午三点各饲喂一顿饲料，精饲料每天15kg,草每天饲喂2.1.3实验材料与试剂二胺氧化酶(DAO)活性检测试剂盒(北京盒子生工科技有限公司，北京，中国)、D-乳酸(D-LA)含量检测试剂盒(北京盒子生工科技有限公司，北京，酶标仪(美国MolecularDevices公司，SpectraMax190)、电热恒温培养箱 (上海博迅实业有限公司医疗设备厂)、高精度单道移液器、低温高速冷冻离心机(东旺仪器TG20KR)、高精度多道移液枪、低速离心机。6实验开始后的第40天、第110天分别对两个组的肉牛在上午六点进行空腹的静脉采血，每只牛采血20mL,将采集好的血液分装到已标注组别、每只牛的编号、采样时间的10mL离心管内，使用低速离心机3500r/min,离心10分钟。2.3.1乳酸含量测定操作步骤根据说明书的指示，首先将1mL的提取液A加入到100μL的牛血清中后在低温高速离心机中将其离心(4℃14400r/min离心10分钟),取其上清液，并将其置于冰盒上待测。紧接着要打开酶标仪，并将其预热3min以上，将波长调节到450nm,并将蒸馏水调零。然后，避光条件下，在96孔板中按照顺序依次加入下列试剂(μL)(表1)。将其充分混匀，并在恒温箱中37℃避光充分反应30分钟。最后在酶标仪中测定其吸光值。测定45nm处的吸光值，记为A测定、A对照、A标准和A空白。表1乳酸含量测试试剂添加顺序试剂空白组--蒸馏水--试剂一试剂四7算乳酸含量(公式X-1)标仪进行提前预热，将波长调节至505nm,将蒸馏水调零，在1.5mL离心管中依次加入试剂(μL)(表2)做好标记。将其充分混匀之后，37℃准确反应1小时，然后对上清液进行吸光值测定，吸取200μL的上清液依次加入到96孔板中，测定505nm处的吸光值，分别记为A测定、A空白、A对照、A标准。试剂测定管标准管空白管----试剂一--蒸馏水2.4.2二胺氧化酶含量的计算8根据说明书操作，首先将试剂盒从4℃冰箱内取出，在室温下平衡20min左右，取出所需的96孔板，提前设置好标准品孔还有样本孔。此时，两组肉牛均为样本，在标准品孔内依次添加试剂盒提供的不同浓度的标准品50μL。在各个将反应孔封住，在恒温箱中恒温反应60分钟。中都加满洗涤液，静待1分钟，倒出洗涤液，在吸水纸上拍干，这样的操作总共恒温箱中继续充分反应15分钟。最后，在每孔中都加入终止液50μL。要在15分钟之内对其进行测定。在酶标仪中测定波长在455nm处各孔的吸光值。准品的线性回归曲线(图1),然后再依照着曲线方程计算出各种样本的浓度值。标准品浓度9所得出的所有实验数据经过Excel进行初步的整理之后，用IBMSPSSStatistics27进行单因素检验分析之后，P<0.05表示差异显著,P<0.01表示差异极显著,P>0.5表示差异不显著。最后再使用Numbers进行柱状图的绘制与统第三章研究结果与分析根据乳酸含量公式可以计算出乳酸含量(μg/mL)可以得到表5,并通过IBMSPSSStatistics27进行单因素检验分析之后(表6),无论是第40天还是第110天，两个组肉牛的乳酸含量并没有差异(P>0.05)。可以绘制出图3,根据图312345饲喂XT881组别显著性PS:NS表示的是差异不显著(P>0.05);*表示的是差异显著(P<0.05);**表示的是差异极40天D-LA含量110天D-LA含量草+精料组图3牛血清的乳酸含量结果3.3完全饲喂无草育肥颗粒饲料对肉牛血清二胺氧化酶含量的根据二胺氧化酶含量公式可以计算出二胺氧化酶含量(U/mL)可以得到表7,并通过IBMSPSSStatistics27进行单因素检验分析之后(表8),不管是第40天还是第110天，两组肉牛的二胺氧化酶含量均出现了明显的差异(P<0.05),接着可以根据绘制出的图4明显的看到不管是第40天还是第110天，饲喂XT881组的二胺氧化酶含量要略低于饲喂草+精饲料组的，但是两组肉牛的二胺氧化酶编号**40天DAO含量110天DAO含量饲喂草+精料组*表8肉牛二胺氧化酶含量差异表饲喂XT881组别显著性**根据LPS标准曲线，可以计算出肉牛LPS含量可以得出表9,并通过IBMSPSSStatistics27进行单因素检验分析之后(表10),可以发现无论是第40天还是第110天，两个组肉牛的LPS含量并没有差异(P>0.05)。可以绘制出图5,根据图5可以清晰的展示出，饲喂XT881和饲喂草+精饲料组的LPS含量没有编号第110天12345饲喂草+精饲料组图5牛血清LPS含量表10肉牛LPS含量差异表饲喂XT881组别显著性第110天PS:NS表示的是差异不显著(P>0.05);*表示的是差异显著(P<0.05);**表示的是差异极饲喂草+粗饲料的对瘤胃影响基本一样。乳酸差异不明显，瘤胃内pH稳定