20262026年生物技术期末复习生物制药技术(生物技术)考试题库(含答案)

20262026年生物技术期末复习生物制药技术(生物技术)考试题库(含答案)一、单项选择题（本大题共20小题，每小题1.5分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的）1.2026年生物制药领域前沿技术中，利用CRISPR-Cas9系统进行基因组编辑时，Cas9蛋白的主要功能是（）。A.识别特定的DNA序列并进行修复B.作为向导RNA引导复合物定位C.造成双链断裂（DSB）D.合成新的DNA片段2.在重组蛋白药物的生产中，大肠杆菌表达系统最显著的局限性在于（）。A.生长周期长，培养基成本高B.不能表达真核生物的蛋白，且缺乏翻译后修饰（如糖基化）C.遗传背景不清楚，操作困难D.表达量通常低于酵母表达系统3.单克隆抗体制备过程中，杂交瘤细胞筛选的原理是利用了（）。A.肿瘤细胞的无限增殖能力和B淋巴细胞产生特异性抗体的能力B.B淋巴细胞的无限增殖能力和T淋巴细胞的杀伤能力C.两种不同B淋巴细胞的融合D.髓样细胞的分化能力4.下列关于动物细胞培养的描述中，错误的是（）。A.大多数哺乳动物细胞贴壁生长时需要接触抑制B.无血清培养虽然成本高，但有利于下游纯化并减少异源蛋白污染C.CO2培养箱中的CO2主要作用是提供细胞的碳源D.细胞冻存通常使用二甲亚砜（DMSO）作为冷冻保护剂5.在生物药物下游纯化过程中，亲和层析法具有极高的特异性。若要纯化带有Poly-His标签的重组蛋白，通常使用的层析介质填料是（）。A.蛋白A琼脂糖凝胶B.谷胱甘肽琼脂糖凝胶C.镍/钴螯合树脂D.阴离子交换树脂6.现代生物技术药物中，ADC（抗体偶联药物）的结构组成不包括（）。A.单克隆抗体（“弹头”）B.高效细胞毒小分子药物（“载荷”）C.连接子D.放射性同位素7.利用发酵工程生产抗生素时，发酵过程的控制参数中，摄氧率（OUR）和二氧化碳释放率（CER）主要用于反映（）。A.菌体的生长代谢状况B.发酵液的粘度变化C.染菌情况D.产物的合成速率8.下列疫苗类型中，不属于核酸疫苗的是（）。A.mRNA疫苗B.DNA疫苗C.病毒样颗粒（VLP）疫苗D.质粒DNA疫苗9.在基因治疗载体中，逆转录病毒载体的一个主要缺点是（）。A.载体容量太小B.只能感染分裂期细胞C.容易引起强烈的免疫反应D.插入突变风险低10.蛋白质药物进行液相色谱分析时，反相色谱（RP-HPLC）主要基于蛋白质分子的哪种性质进行分离？（）A.分子大小B.电荷差异C.疏水性差异D.生物特异性亲和力11.关于生物制药中的GMP（药品生产质量管理规范），下列说法不正确的是（）。A.GMP的核心是防止药品在生产过程中发生混淆、交叉污染和人为差错B.洁净区空气悬浮粒子的监测是GMP环境控制的重要部分C.生产设备的清洗验证只需要目测清洁即可D.批记录必须真实、完整、可追溯12.在重组人胰岛素的工业化生产中，为了解决胰岛素原的折叠问题，通常采用的策略是（）。A.直接在胞内表达有活性的双链胰岛素B.分别表达A链和B链，然后在体外通过化学法连接C.表达胰岛素原，再通过酶切转化成胰岛素D.在酵母分泌表达中直接切除信号肽即可获得成熟胰岛素13.流式细胞术在细胞工程药物分析中应用广泛，其主要原理是（）。A.利用显微镜直接观察细胞形态B.利用细胞在特定波长激光下的散射光和荧光信号进行定量分析C.利用细胞密度差异进行离心分离D.利用细胞膜电位变化进行记录14.在层析技术中，分辨率（Rs）与柱效（N）、分离因子（α）和保留因子（k）有关。为了提高两种蛋白的分离效果，下列操作无效的是（）。A.增加层析柱长度B.减小固定相粒径C.提高流动相流速至极大值D.优化流动相pH值以改变蛋白电荷15.CAR-T细胞疗法是目前治疗血液瘤的突破性技术，其中CAR的结构中负责识别肿瘤表面抗原的结构域是（）。A.胞内信号域（如CD3ζ）B.铰链区C.跨膜区D.胞外单链可变区16.进行蛋白质复性时，常用的复性添加剂精氨酸的作用是（）。A.提供氧化环境促进二硫键形成B.抑制蛋白质分子间的疏水聚集，提高正确折叠产率C.作为蛋白酶抑制剂防止降解D.提供能量促进折叠17.下列哪种生物技术药物主要用于治疗贫血？（）A.重组人干扰素αB.重组人促红细胞生成素（EPO）C.重组人粒细胞集落刺激因子（G-CSF）D.胰岛素18.在生物反应器设计中，对于高耗氧的微生物发酵（如酵母高密度培养），最关键的传质参数是（）。A.a（氧体积传递系数）B.搅拌桨叶尖速度C.反应器高径比D.冷却面积19.基因工程中，将目的基因导入受体细胞且使其整合到染色体上并表达的过程称为（）。A.转化B.转导C.转染D.转位20.关于生物类似药与原研药的对比研究，最关键的项目是（）。A.生产成本对比B.临床疗效对比C.药学质量对比和非临床相似性D.专利保护期对比二、多项选择题（本大题共10小题，每小题3分，共30分。在每小题给出的四个选项中，有二至四项是符合题目要求的。多选、少选、错选均不得分）21.下列属于第二代及第三代基因工程抗体的有（）。A.鼠源单克隆抗体B.嵌合抗体C.人源化抗体D.全人源抗体22.影响哺乳动物细胞大规模培养产量的主要因素包括（）。A.细胞凋亡B.营养物质耗竭（如葡萄糖、谷氨酰胺）C.代谢副产物积累（如乳酸、氨）D.溶氧浓度不足23.重组DNA技术中常用的工具酶包括（）。A.限制性核酸内切酶B.DNA连接酶C.TaqDNA聚合酶D.碱性磷酸酶24.下列关于微载体培养动物细胞的描述，正确的有（）。A.增大了细胞贴附生长的表面积B.适用于贴壁依赖性细胞的大规模培养C.通常需要特殊的搅拌装置以保持微载体悬浮且不损伤细胞D.无法在搅拌釜式生物反应器中使用25.蛋白质药物纯化中，盐析沉淀法的原理及特点包括（）。A.高浓度的中性盐破坏蛋白质的水化膜，降低溶解度B.不同蛋白质沉淀所需的盐浓度不同C.该方法分辨率高，可直接获得高纯度产品D.常用于粗分离，去除大量杂蛋白26.利用大肠杆菌表达重组蛋白时，形成包涵体的可能原因有（）。A.表达速率过快，导致折叠来不及进行B.缺乏真核细胞的分子伴侣C.培养温度过高D.蛋白质本身含有大量二硫键，胞内环境不利于其形成27.药物非临床研究质量管理规范（GLP）适用于（）。A.药品安全性评价研究B.药品药效学研究C.药品急性毒性试验D.药品临床试验28.生物技术药物的质量控制中，表征分析的重要指标包括（）。A.分子量分布B.等电点C.糖基化修饰图谱D.二硫键配对29.下列哪些技术属于干细胞治疗的研究范畴？（）A.诱导多能干细胞技术B.间充质干细胞移植C.嵌合抗原受体T细胞技术D.胚胎干细胞定向分化30.在生物发酵过程中，检测染菌的常用方法有（）。A.显微镜直接镜检B.平板划线培养C.发酵液pH异常变化监测D.耗氧速率异常下降监测三、填空题（本大题共20空，每空1.5分，共30分）31.PCR技术中，耐热的DNA聚合酶通常称为________酶，其最适延伸温度通常为________℃左右。32.在单克隆抗体制备中，常用的骨髓瘤细胞系通常缺乏________酶，以便在HAT培养基中筛选出杂交瘤细胞。33.蛋白质的一级结构是指氨基酸的________，而维持蛋白质三级结构的主要作用力是________键和疏水相互作用。34.生物反应器按操作方式可分为________、________和半连续（补料分批）培养。35.离子交换层析中，若目标蛋白在缓冲液pH条件下带正电荷，应选用________离子交换剂进行吸附。36.基因治疗中，为了实现长期表达，通常选用________病毒载体；若只需短暂表达，常选用________病毒载体。37.重组人胰岛素生产中，利用基因工程菌发酵后，下游处理通常包括细胞破碎、________、复性和________等步骤。38.单克隆抗体药物中，利用________技术可以去除抗体的Fc段糖基化，从而降低或消除ADCC效应。39.在疫苗研发中，通过反向遗传学技术构建的________疫苗，近年来在流感防控中显示了重要应用价值。40.生物药物的稳定性研究中，影响蛋白药物降解的主要化学途径包括脱酰胺、________和________。41.凝胶过滤层析（分子筛）分离蛋白质的原理是基于分子量的大小，大分子物质________流出，小分子物质________流出。42.中国药典规定，生物制品的原液制备过程中，应尽可能使用________成分明确的培养基，并严格控制________的使用。四、名词解释（本大题共10小题，每小题4分，共40分）43.生物制药44.诱导多能干细胞45.基因工程抗体46.发酵工程47.亲和层析48.生物类似药49.转化50.表位51.连续培养52.蛋白质工程五、简答题（本大题共6小题，每小题10分，共60分）53.简述原核表达系统（如大肠杆菌）与真核表达系统（如CHO细胞）在表达重组药物蛋白时的主要优缺点比较。54.请列举单克隆抗体在疾病治疗中的三种主要作用机制，并简要说明。55.简述重组蛋白药物下游纯化工艺设计的基本原则和一般步骤。56.在动物细胞大规模培养中，什么是“细胞凋亡”？为了提高细胞密度和产物表达量，通常采取哪些策略抑制细胞凋亡？57.简述mRNA疫苗的作用机制及其与传统灭活疫苗相比的主要优势。58.请解释生物反应器中a（氧体积传递系数）的物理意义，并列举两种在发酵过程中提高a的工程手段。六、论述题（本大题共2小题，每小题15分，共30分）59.结合2026年生物制药技术的发展趋势，论述CAR-T细胞疗法的基本原理、制备流程，并分析目前该疗法在实体瘤治疗中面临的主要挑战及可能的解决策略。60.假设你是一家生物制药公司的研发负责人，现需开发一种重组人源化单克隆抗体药物用于治疗自身免疫性疾病。请详细论述从靶点筛选到临床试验申报（IND）全过程中的关键质量控制节点（QC）和质量保证（QA）策略。七、计算题（本大题共1小题，共10分）61.在一个50L的生物反应器中进行大肠杆菌发酵生产重组蛋白。发酵过程中测得菌体生长符合莫诺方程。已知在分批培养阶段，初始菌体浓度=0.5g/(1)假设该阶段处于对数生长期，求比生长速率μ（单位）。(2)若发酵液总体积为50L，求该阶段菌体的总生成量（单位：g）。(3)已知该菌体的对产物得率系数=0.2（注：计算结果保留两位小数，自然对数e≈2.718，参考答案与解析一、单项选择题1.【答案】C【解析】CRISPR-Cas9系统中，向导RNA（gRNA）负责识别特异性DNA序列，引导Cas9蛋白定位。Cas9蛋白作为核酸内切酶，其核心功能是切断DNA双链，造成双链断裂（DSB），从而启动细胞的DNA修复机制（NHEJ或HDR）实现基因编辑。2.【答案】B【解析】大肠杆菌表达系统操作简单、繁殖快、成本低，但属于原核生物，缺乏内质网和高尔基体等细胞器，因此不能对真核蛋白进行复杂的翻译后修饰，如糖基化、磷酸化等，且容易形成包涵体。3.【答案】A【解析】杂交瘤细胞技术利用了骨髓瘤细胞在体外培养中无限增殖的特性，以及免疫B淋巴细胞合成并分泌特异性抗体的特性。两者融合后，既能无限增殖又能产生抗体。4.【答案】C【解析】CO2培养箱中的CO2主要用于与培养基中的碳酸氢钠缓冲系统共同作用，维持培养液pH值的稳定，而非作为碳源。细胞的碳源主要来自葡萄糖等有机物。5.【答案】C【解析】组氨酸标签含有咪唑基团，能与过渡金属离子（如Ni2+、Co2+）发生配位结合。因此，纯化带His标签的蛋白通常使用固定化金属亲和层析（IMAC），介质为镍或钴螯合树脂。蛋白A用于纯化抗体（Fc段），谷胱甘肽树脂用于GST标签。6.【答案】D【解析】ADC由抗体、连接子和细胞毒药物三部分组成。放射性同位素标记的是放射性药物，不属于ADC的常规结构组成。7.【答案】A【解析】摄氧率（OUR）反映菌体消耗氧气的速率，二氧化碳释放率（CER）反映菌体呼吸代谢产生CO2的速率。两者的变化直接反映了菌体的呼吸代谢强度和生长状况。8.【答案】C【解析】核酸疫苗包括DNA疫苗和mRNA疫苗，它们利用宿主细胞表达抗原蛋白。病毒样颗粒（VLP）疫苗属于蛋白亚单位疫苗的一种特殊形式，不含有核酸，不具备感染能力。9.【答案】B【解析】逆转录病毒载体进入宿主细胞后，其RNA逆转录成DNA并整合到宿主基因组的过程需要宿主细胞核膜破裂（即细胞分裂）才能进入细胞核。因此，它主要感染分裂期细胞，限制了其在非分裂细胞（如神经元、心肌细胞）中的应用。10.【答案】C【解析】反相色谱利用固定相（通常是非极性硅胶）和流动相（极性溶剂）之间的疏水相互作用分离。蛋白质表面的疏水基团与固定相结合，极性基团倾向于流动相。分离基于蛋白质表面疏水性的差异。11.【答案】C【解析】GMP要求生产设备必须进行严格的清洁验证。仅目测清洁是不够的，必须通过化学分析（如TOC、HPLC）证明残留物低于规定的限度，以确保防止交叉污染。12.【答案】C【解析】胰岛素由A、B两条链组成，中间有连接肽（C肽）。直接表达双链易错配，分别表达再连接效率低。工业上常采用表达胰岛素原（A-B-C或B-C-A顺序），利用蛋白二硫键异构酶促进正确折叠，再通过酶切去除C肽获得活性胰岛素。13.【答案】B【解析】流式细胞术（FCM）是将细胞悬液逐个通过激光束，检测其散射光（反映细胞大小、颗粒度）和荧光信号（反映标记抗原或核酸含量），从而对细胞进行定量分析和分选。14.【答案】C【解析】根据范特姆特方程，流速过快会导致涡流扩散和传质阻力增加，从而降低柱效（N），导致分离度下降。因此，盲目提高流速至极大值会降低分离效果。15.【答案】D【解析】CAR（嵌合抗原受体）的胞外结构域通常来源于单克隆抗体的scFv（单链可变区），负责特异性识别肿瘤细胞表面的抗原。16.【答案】B【解析】精氨酸是一种常用的复性添加剂。它是一种两性离子，能够抑制蛋白质分子间不正确的疏水相互作用，防止蛋白质在复性过程中发生聚集沉淀，从而提高正确折叠的产率。17.【答案】B【解析】重组人促红细胞生成素（EPO）刺激骨髓造血功能，主要用于治疗肾性贫血等贫血症状。干扰素用于抗病毒和抗肿瘤，G-CSF用于升白细胞，胰岛素用于糖尿病。18.【答案】A【解析】a是衡量气液传质效率的关键参数。对于高耗氧过程，氧的供给往往是限制因素，因此提高a是最关键的工程控制点。19.【答案】A【解析】转化是指将外源DNA（质粒）导入受体细胞（如细菌）的过程。转导通常指通过噬菌体介导，转染通常指针对真核细胞。20.【答案】C【解析】生物类似药研发的核心是证明其与原研药的高度相似性。因此，药学质量（理化性质、生物活性）和非临床相似性研究是基础和关键，随后才进行简化的临床对比研究。二、多项选择题21.【答案】BCD【解析】鼠源单抗为第一代，免疫原性强；嵌合抗体（鼠V区+人C区）为第二代；人源化抗体（仅保留鼠CDR）和全人源抗体（噬菌体展示或转基因小鼠技术）为第三代。22.【答案】ABCD【解析】细胞凋亡是程序性死亡，限制了培养密度；营养耗竭限制生长；代谢副产物（乳酸、氨）对细胞有毒性；溶氧不足影响能量代谢。这些都是限制产量的关键因素。23.【答案】ABCD【解析】限制酶切割DNA，连接酶连接DNA，聚合酶合成DNA，碱性磷酸酶去除5'端磷酸基团防自连。都是基因工程常用工具酶。24.【答案】ABC【解析】微载体提供巨大比表面积，适用于贴壁细胞，需温和搅拌悬浮。它正是为了在搅拌釜反应器中实现贴壁细胞的大规模培养而开发的。25.【答案】ABD【解析】盐析利用高盐破坏水化膜和电荷排斥，不同蛋白盐析点不同。它属于粗分级分离，分辨率低，不能直接获得高纯度产品，常作为第一步沉淀。26.【答案】ABCD【解析】包涵体形成原因复杂：表达过快折叠跟不上；缺乏伴侣蛋白帮助折叠；高温利于疏水聚集；胞内还原环境不利于二硫键形成，导致错误折叠聚集。27.【答案】ABC【解析】GLP主要针对药品的非临床安全性研究（毒理、药理等）。临床试验遵循GCP。28.【答案】ABCD【解析】重组蛋白结构复杂，需全面表征：分子量（完整性）、等电点（电荷异质性）、糖基化（功能、半衰期）、二硫键（正确折叠）等。29.【答案】ABD【解析】干细胞治疗涉及多能干细胞（iPSC,ESC）和成体干细胞（间充质干细胞）。CAR-T虽然涉及细胞工程，但属于免疫细胞治疗，通常不归类于干细胞治疗。30.【答案】ABCD【解析】染菌是发酵工业大忌。镜检和平板培养是直接证据；pH异常（如染菌后pH可能突然上升或下降）和耗氧异常（染菌后耗氧可能改变）是重要的间接监测参数。三、填空题31.【答案】Taq；7232.【答案】HGPRT（次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶）33.【答案】排列顺序；氢键34.【答案】分批培养（间歇培养）；连续培养35.【答案】阳36.【答案】慢（如逆转录病毒、慢病毒）；腺（如腺病毒）37.【答案】固液分离（或离心/过滤）；色谱纯化（或层析）38.【答案】糖工程（或定点突变）39.【答案】减毒活（或重组减毒）40.【答案】氧化；水解（或脱酰胺/异构化，注：主要化学途径为氧化、脱酰胺、水解等，填两个即可）41.【答案】先（或较早）；后（或较晚）42.【答案】无血清（或化学成分限定）；抗生素四、名词解释43.【答案】生物制药：利用生物体（生物体、组织、细胞或其组分，如酶、抗体、核酸等）作为生产工具，在特定的条件下，通过生物技术手段（如基因工程、细胞工程、发酵工程等）制造用于预防、治疗、诊断疾病的药物的技术过程。44.【答案】诱导多能干细胞：通过导入特定的转录因子（如Oct4,Sox2,Klf4,c-Myc等），将已分化的体细胞（如皮肤成纤维细胞）重编程为具有类似胚胎干细胞多向分化潜能的干细胞，称为iPSC。45.【答案】基因工程抗体：利用DNA重组技术和蛋白质工程技术，对抗体基因进行加工、修饰和重组，并在受体细胞中表达产生的抗体。包括嵌合抗体、人源化抗体、单链抗体等，旨在降低免疫原性并提高效能。46.【答案】发酵工程：利用微生物的特定性状，通过现代化工程技术手段（如生物反应器控制），在无菌条件下大规模培养微生物（或动植物细胞）以生产有用代谢产物或生物制品的技术体系。47.【答案】亲和层析：利用生物分子间专一性的亲和力（如抗原-抗体、酶-底物、受体-配体、激素-受体等）进行分离纯化的层析技术。将一对亲和反应的一方（配体）固定在载体上，另一方随流动相流过时被特异性吸附。48.【答案】生物类似药：在质量、安全性和有效性方面与已获批准的生物原研药（参照药）高度相似的生物制品。生物类似药不同于仿制药，由于生物大分子的复杂性，无法做到完全复制，需通过严格的对比研究证明相似性。49.【答案】转化：指将外源DNA分子（如质粒）导入受体细胞（通常是原核细胞），使其获得新的遗传性状的过程。50.【答案】表位：又称抗原决定簇，是指抗原分子表面决定抗原特异性的特殊化学基团。它是抗体特异性结合的部位。51.【答案】连续培养：在生物反应器中，一边连续不断地加入新鲜培养基，一边以相同的流速连续排出培养液，从而使反应器内的细胞生长和代谢环境处于恒定状态的操作方式。52.【答案】蛋白质工程：以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造出自然界中不存在的具有特定功能的新蛋白质的技术。五、简答题53.【答案】原核表达系统（大肠杆菌）：优点：繁殖快、周期短、培养基廉价、操作简单、遗传背景清晰、表达量高。缺点：缺乏翻译后修饰（如糖基化）、易形成包涵体（需复性）、内毒素难以去除、胞内表达可能表达毒性蛋白。真核表达系统（CHO细胞）：优点：具有真实的翻译后修饰（糖基化模式接近人类）、蛋白能正确折叠和分泌、产物活性高、安全性好（无内毒素）。缺点：生长缓慢、培养基成本高、操作繁琐、表达量相对较低、易受病毒污染。54.【答案】1.阻断靶点：抗体与肿瘤细胞或炎症细胞表面的受体结合，阻断信号传导，抑制细胞生长或活化（如抗EGFR抗体）。2.介导ADCC效应：抗体的Fc段与免疫细胞（如NK细胞）表面的Fc受体结合，介导免疫细胞直接杀伤靶细胞。3.介导CDC效应：抗体与靶细胞结合后，激活补体系统，形成膜攻击复合物（MAC），溶解靶细胞。（注：答出抗体偶联药物递送毒素或调节免疫微环境也可酌情给分）55.【答案】基本原则：在保证产品活性和纯度的前提下，尽可能提高收率和步骤效率，且工艺必须易于放大、符合GMP要求，能有效去除杂质（HCP、HCD、病毒等）。一般步骤：1.捕获：采用粗步技术（如沉淀、扩张柱吸附、离子交换）从大量培养液中浓缩目标蛋白并去除大部分杂质。2.中间纯化：去除性质相近的杂质（如异构体、降解产物、宿主蛋白），常用离子交换、疏水层析。3.精细纯化：去除微量杂质和聚合物，获得高纯度产品，常用凝胶过滤（去聚体）、亲和层析（去特异性杂质）。4.病毒灭活/去除：通常在低pH孵育和纳滤步骤进行。56.【答案】细胞凋亡：指细胞在基因调控下发生的程序性死亡，是细胞主动的“自杀”过程，表现为细胞收缩、DNA断裂、形成凋亡小体。抑制策略：1.基因工程改造：在细胞中过表达抗凋亡基因（如Bcl-2家族），抑制凋亡信号通路。2.培养基优化：添加抗凋亡因子（如胰岛素样生长因子、细胞因子）或营养成分（如氨基酸、抗氧化剂）。3.环境控制：控制温度（如低温培养）、pH和渗透压在适宜范围，减少环境应激。4.化学添加剂：使用Caspase酶抑制剂阻断凋亡级联反应。57.【答案】作用机制：1.将编码病毒S蛋白（抗原）的mRNA包裹在脂质纳米颗粒（LNP）中。2.注射入人体后，LNP进入细胞，释放mRNA。3.宿主细胞核糖体翻译mRNA合成抗原蛋白。4.抗原蛋白被免疫系统识别，激活体液免疫（产生中和抗体）和细胞免疫（T细胞应答）。优势：1.研发速度快：仅需知道基因序列即可设计，无需培养病毒。2.免疫效力强：能同时诱导体液和细胞免疫，且mRNA本身具有佐剂效应。3.生产周期短：体外转录合成，易于大规模标准化生产。4.安全性高：不含活病毒，无感染风险；mRNA在体内半衰期短，不整合入基因组。58.【答案】物理意义：a是氧体积传递系数，单位为或mi。它代表了在单位时间内，单位体积发酵液中氧的传递能力。它是气液界面传质系数（）和比表面积（a）的乘积，是衡量反应器供氧能力的关键参数。提高a的工程手段：1.增加搅拌转速：增强湍流，打碎气泡，增加气液接触面积和更新频率。2.增加通气量：增加气泡数量，增加比表面积。3.改善搅拌器设计：使用高效搅拌桨（如Rushton桨、Marine桨），优化气体分布器。4.改变发酵液性质：添加消泡剂降低表面张力，或通过补料控制降低粘度。六、论述题59.【答案】基本原理：CAR-T疗法通过基因工程技术，将能特异性识别肿瘤抗原的scFv（单链抗体）和胞内信号激活域（如CD3ζ及共刺激分子如4-1BB）的融合基因导入患者自身的T细胞。改造后的T细胞（CAR-T）能够非MHC限制性地识别肿瘤细胞，并被激活增殖，进而高效杀伤肿瘤细胞。制备流程：1.采血：从患者体内分离外周血单个核细胞（PBMC），分离出T细胞。2.激活：使用抗CD3/CD28磁珠激活T细胞。3.转导：通过病毒载体（慢病毒或逆转录病毒）或非病毒方法（转座子）将CAR基因转入T细胞。4.扩增：在体外培养体系中大量扩增CAR-T细胞至治疗剂量。5.回输：在患者进行淋巴细胞清除化疗后，将CAR-T细胞回输至患者体内。实体瘤治疗面临的挑战及解决策略：挑战：1.肿瘤微环境（TME）抑制