阿尔茨海默病血液生物标志物检测前样本处理操作规范总结2026

阿尔茨海默病血液生物标志物检测前样本处理操作规范总结01CONTENTS020304规范制订背景规范制订过程血液采集流程血液处理流程规范制订背景阿尔茨海默病是危害老年健康的最常见痴呆类型，我国面临严峻发病形势。为应对挑战，国家卫健委等多部门于2024年联合印发《应对老年期痴呆国家行动计划（2024—2030）》，旨在全面推动防控工作并建立健全国家防控体系。AD确诊的病理标准是脑内Aβ老年斑和p-tau神经原纤维缠结，但脑病理诊断实施困难且分子影像技术可及性低，导致临床误诊率高。因此，国内外指南已将易于采集的血液生物标志物纳入诊断标准，成为早期筛查、诊断和监测的重要途径。血液Aβ和tau蛋白检测易受多种分析前因素影响，导致结果变异大、诊断界值难统一。为此，阿尔茨海默病协会发起全球标准化项目。我国也基于此背景，由专业质控工作组制订了《阿尔茨海默病血液标志物检测前样本处理操作规范（2026版）》，以推动检测标准化。AD疾病负担与我国防控政策病理诊断局限与血液标志物应用检测标准化需求与国际国内响应疾病与政策背景检测准确性面临多重技术挑战检测前流程标准化程度不足标准化与质量控制成为迫切需求阿尔茨海默病血液生物标志物如Aβ和tau蛋白易聚集、血液中浓度极低，且患者与正常人间水平差异小（仅8%~15%），导致检测易受环境、方法变异等因素干扰，严重影响结果准确性。从采血时间、空腹状态到样本处理、存储条件等环节均可能引入测量误差，不同实验室或时间点的检测结果变异大，使得诊断界值难以统一，限制了不同研究间的可比性。为提升诊断可靠性，国际组织已推动体液生物标志物质控项目，我国也需建立本土化操作规范，通过统一样本处理流程来降低分析前变异，保障临床诊断与科研结果的一致性。检测需求与挑战010203应对国内AD诊疗的迫切需求推动血液标志物检测的标准化指导国内新阶段临床应用我国AD发病形势严峻，2024年国家多部门联合发布行动计划，要求全面推动痴呆防控并建立体系。为响应国家号召，提升AD诊断准确性，亟需制定本土化的血液生物标志物检测操作规范。当前AD血液标志物检测易受多种分析前因素影响，导致结果变异大、诊断可靠性降低。为统一检测流程、提高结果可比性，必须建立标准化的样本处理规范，以实现有效的质量控制。随着AD血液标志物检测产品在国内进入临床应用新阶段，以及相关研究日益增多，制定此规范旨在为国内医疗机构和科研机构提供统一、可行的操作指导，兼顾临床与科研需求，并与国际接轨。规范制订目的规范制订过程规范制定牵头机构规范制定核心原则规范制定依据与方法本规范由国家神经系统疾病医疗质量控制中心神经内科质控工作组认知障碍疾病质控专病组牵头，联合陆军军医大学大坪医院、首都医科大学宣武医院、复旦大学华山医院及福建医科大学附属协和医院神经内科共同组建工作组，于2025年5月正式启动撰写工作。制定过程遵循三大原则：一是参照国际推荐意见以实现与国际接轨；二是结合中国医疗与科研机构的实际条件适应国情；三是兼顾临床诊断与科学研究双重需求，确保规范具备实践性与科学性。通过系统检索中英文文献数据库，结合国际标准化联盟建议与中国本土大型研究队列的实践经验，并广泛征求医疗机构、科研机构及企业意见，最终形成专家共识，奠定了规范的科学基础与适用性。工作组与启动参照国际推荐意见结合我国国情与实践兼顾临床与科研需求本规范的制订首要原则是参照阿尔茨海默病协会全球生物标志物标准化联盟等国际组织的建议，确保与国际标准接轨，提升我国血液生物标志物检测的全球可比性与认可度。规范充分考虑了我国医疗和科研机构的实际条件与常规操作流程，通过整合国内大型队列研究（如TBRAIN、CADS等）的实践经验，使标准更贴合本土化需求，增强可操作性。规范旨在同时满足临床诊断精准化和科学研究可靠性的双重目标，通过系统文献检索与专家共识，平衡实际应用与学术探索，为AD血液标志物的检测前处理提供全面指导。原则与依据本规范的制订首先参照了阿尔茨海默病协会全球生物标志物标准化联盟（GBSC）等国际推荐意见，确保与国际标准接轨。同时，结合我国医疗科研机构的实际条件与常规实践，使规范更具适用性和可操作性，兼顾了临床与科研需求。国际标准参照与国情结合原则工作组系统检索了PubMed、中国知网等中英文数据库，关键词涵盖阿尔茨海默病、血液生物标志物、检测前过程等。通过布尔逻辑运算符组合检索，整合国内外指南、共识及研究文献，为规范制订提供了全面的证据基础。系统性文献检索与证据整合规范充分吸收了我国TBRAIN、CADS、GHABS等多个大型队列研究的实践经验，并征求了医疗机构、科研机构及生物标志物检测企业的专业建议。通过专家共识形式，确保了内容的科学性和实用性。国内研究实践与多方意见征询共识形成方法血液采集流程采集前准备要点受检者需至少禁食8小时，以12-14小时为宜，但不超过16小时，糖尿病患者不超过12小时。空腹期间可少量饮水，采血前24小时内不宜饮酒。若服用B族维生素（如生物素），建议停用2-3天，以避免干扰生物标志物检测结果，确保标志物如p-tau181、Aβ42等的准确性。严格空腹与药物管理采血前24小时不宜剧烈运动，当天避免情绪激动，采血前静息至少5分钟。为减少时间偏差，同一研究中所有受检者应在同一时间段（如7:00-9:00）采血。部分标志物如Aβ42/Aβ40、p-tau217等水平相对稳定，但统一时间可提升结果可比性。控制运动情绪与固定采血时间输液可能影响标志物水平，宜在输液结束3小时后采血。输注脂肪乳剂等代谢缓慢液体时，应在下次输注前采血。紧急情况下需在输液时采血，应选择对侧肢体或同侧肢体远端静脉，并告知检验人员，以减少结果误差。避免输液干扰与特殊情况处理采集操作规范采血物品的规范化选择与准备静脉穿刺与血液采集的标准化操作血液采集后的初步处理与运送要求规范要求使用PET材质真空采血管及低吸附聚丙烯耗材，以减轻Aβ和tau蛋白的黏附。推荐统一采用EDTA钾盐抗凝管采集血浆，并全程使用相同品牌采血管，以减少检测变异。采血针宜选用22G直针，避免溶血影响标志物水平。操作时需首选肘前区静脉，止血带绑扎不超过1分钟。采血量需大于采血管容积50%，防止t-tau水平降低。含不同添加剂的采血管按序采集，采集后立即轻柔颠倒混匀，并记录采血时间，确保流程可追溯。采血后需在30分钟内室温运送至处理点，保持采血管直立避免颠簸。运送过程需使用专用送检箱，防止溶血。极端环境对标志物的影响尚不明确，有待进一步研究。血液采集后送检的时效与条件极端环境运输影响的待研究性运输过程对样本物理状态要求静脉血液标本采集后需在30分钟内室温（15-25℃）条件下运送至处理地点。运送时应使用专用送检箱，保持采血管直立并避免颠簸，以减少溶血风险，确保样本质量不受运输过程影响。目前关于极端环境（如过高或过低温度、湿度等）对阿尔茨海默病血液标志物样本运输的影响尚缺乏数据，有待进一步探索。因此规范暂未对此类情况作出具体指引，需后续研究补充。运输过程中必须保持采血管直立，避免剧烈晃动或颠倒，以防止样本溶血或成分混合。规范的包装和平稳运送是保证血液生物标志物检测前样本完整性的重要环节。保存运送要求血液处理流程血液采集至促凝管后，需立即轻柔颠倒混匀，随后在室温下直立静置30至60分钟，以确保血凝块充分形成。凝血时间过短可能导致纤维蛋白残留，过长则易引起细胞裂解污染血清，对于特殊疾病患者可适当延长静置时间。静置后需在室温下以1,500至2,000×g的离心力离心10至15分钟。离心参数的设置至关重要，力过大或时间过长可能导致溶血，而不足则会使血清分离不完全。使用含分离胶或促凝剂的采血管可缩短离心时间至10分钟。须使用预冷的蛋白低吸附移液器吸头和移液管，从液面上层轻柔吸取血清，避免搅动底层细胞。汇集后轻柔混匀，并立即使用低吸附冻存管在冰上进行分装，每管250μl至1ml，以减少冻融次数和管壁吸附，确保标志物稳定性。采血后静置等待血凝块形成规范离心操作以分离高质量血清低温吸附耗材血清吸样、混匀与分装血清收集步骤采血后静置与暂存规范离心参数与条件设置血浆分装与冻存管理采血完成后需立即轻柔颠倒混匀，并在室温下直立静置30分钟。延迟离心会导致血浆生物标志物水平下降，因此建议在2小时内完成离心。若无法及时处理，血液可在4℃暂存最长24小时，但需避免采血管与冰直接接触，以防止细胞裂解。推荐使用2,000×g的离心力，在室温条件下离心10分钟以分离血浆。若血液样本已在4℃暂存，则离心也应在4℃进行。离心力或时间不足可能导致分离不完全，而过长或过大则可能引起血细胞裂解，影响标志物检测的准确性。血浆分装应使用低吸附冻存管，建议每管分装330μl，并控制冻融次数不超过2次以保持标志物稳定。分装过程需在冰上操作，使用低吸附吸头，并避免更换吸头以减少蛋白吸附。分装后样本应立即冻存于-80℃或液氮中。血浆收集步骤010302样本低温存储规范样本信息记录与追溯系统存储过程人员与设备管理要求样本分装后应立即冻存于-80℃冰箱或液氮中，需长期存储时应使用带密封圈的样本管以防止液体蒸发，并选用低温专用耗材。样本