食品微生物检验教案第三章食品检验样品的采集和处理

第三章食品检验样品的采集和处理

一、样品的采集与处理

食品检验样品米集的原则：

1、所采样品应具有代表性

每批食品应随机抽取一定数量的样品，再生产过程中，再不同时间内各取少量样品予以混合。固体或半

固体的食品应从表层、中层和底层、中间和四周等不同部位取样。

2、采样必须符合无菌操作的要求，防止一切外来污染

一件用具只能用于一个样品，防止交叉污染.

3、再保存和运送过程中应保证样品中微生物的状态不发生变化

采集的非冷冻食品一般在0—5度冷藏，不能冷藏的食品立即检脸.一般在36h内进行检验。

4、采样标签应完整、清楚

每件样品的标签须标记清楚，尽可能提供详尽的资料.

在食品的检验中，所采集的样品必须具有代表性，即所取样品能够代表食物的所有部分。如果采集的样

品没有代表性，即使一系列检脸工作非常精密、准确，其结果也毫无价值，甚至会出现错误的结论。食品因

加工的批号、原料情况（来源、种类、地区、季节等）加工方法、保藏条件、运输、销售中的各环节及销售

人员的责任心和卫生认识水平等无不影响着食品的卫生质量，因此要根据一小份样品的检验结果去说明一大

批食品的质量或一起食物中毒的性质，就必须周密考虑，设计出一种科学的取样和样品制备方法。而采用什

么样的取样方案主要取决于检验的目的，目的不同，取样的方案也不同。检验的目的可以是判定一批食品合

格与否，也可以是查找食物中毒病原微生物，还可以是鉴定畜禽产品是否有人畜共患的病原体.目前国内外使

用的取样方案多种多样，如一批产品按百分比抽样，才若干个样后混合在一起检验；按食品的危害程度不同

抽样等.不管采取何种方案，对抽样代表性的要求是一致的。最好对整批产品的单位包装进行编号，实行随机

抽样.

（一）样品的种类

样品可分为大样、中样、小样三种。大样指一整批；中样是从样品各部分取的混合样，一般为200g；小

样又称为检样，一般以25g为准，用于检脸分析.

（二）样品的采集

采样必须在无菌操作下进行。

采样的工具，如探子、铲子、匙、采样器、试管、广口瓶、剪子和开罐器等，必须是无菌的.

根据样品种类，如袋、瓶和罐装者，应取完整的未开封的；如果样品很大，则需用无菌采样器取样；检样是

冷冻食品，应保持在冷冻状态（可放在冰内、冰箱的冰盒内或低温冰箱内保存），非冷冻食品需在0〜5℃中

保存。

1、液体食品的采样

将样品充分混匀，用无菌操作开启包装，用100mL无菌注射器抽取，注入无菌盛样容器。

2、半固体食品的采样

用无菌操作拆开样品包装，用无菌勺子从几个部位挖取样品，注入无菌盛样容器。

3、固体样品的采样

大块整体食品应用无菌刀具和银子从不同部位割取，割取时应兼顾表面与深度，注意样品的代表性；小

块大包装食品应从不同部位的小块上切取样品，注入无菌盛样容器。样品是固体粉末，应边取边混合。

4、冷冻食品的采样

大包装小块冷冻食品的采样按小块个体采取：大块冷冻食品可以用无菌刀从不同部位削取样品或用无菌

小手锯从冰块上锯取样品，也可以用无菌钻头钻取碎样品，注入无菌盛样容器.

固体样品和冷冻食品取样还应注意检脸目的，若需检脸食品污染情况，可取表层样品；若需检脸其品质情

况，应再取深部样品.

5、生产工序检测采样

①车间用水

自来水样从车间各水龙头上采取冷却水，汤料从车间容器不同部位用100mL无菌注射器抽取。

②车间台面、用具及加工人员手的卫生检测

用板孔Sen/的无菌采样板及5支无菌棉签擦拭25cm2面积。若所采表面干燥，则用无菌稀释液湿泗棉签

后擦拭，若表面有水，则用干棉签擦拭，擦拭立即将棉签头用无菌剪刀剪入盛样容器。

③车间空气采样（直接沉降法）

将5个直径90mm的普通营养琼脂平板分别置于车间的四角和中部，打开平皿盖5min,然后盖上平皿盖

送检。

6、食物中毒微生物检脸的取样

当怀疑发生食物中毒时，应及时收集可以中毒源食品或餐具等，同时收集病人的呕吐物、粪便或血液等。

7、人畜共患病原微生物检脸的取样

当怀疑某一动物产品可能带来人畜共患病病原体时，应结合畜禽传染病学的基础知识，采取病原体最集

中、最易检出的组织或体液送检脸室检脸。

（三）采样的标签

采样前后应立即贴上标签，每件样品必须标记清楚（如编号、样品名称、生产单位、生产日期、产品批

号、产品数量、存放条件、采样时间、采样人姓名、现场情况）。

（四）样品的送检要求

1、要快速运送，不要超过3小时。

2、若路途遥远，不需冷冻的样品可1〜5℃低温下运送；如需保持冷冻状态在泡沫塑料隔热箱内。

3、要注意防污染、防散漏、防变质。

（五）样品的处理方法

1、液体样品的处理

液体样品，指粘度不超过牛乳的非粘性食品，可直接由灭菌吸管准确吸取25mL蒸锵水或生理盐水及有关

检验的好菌液中，制成1：10稀释液.吸取前要将样品充分混合，在开瓶、开盖等打开样品容器时，一定要注

意表面消毒，无菌操作。用点燃的酒精棉球灼烧瓶口灭菌，用石炭酸或来苏尔消毒后的纱布盖好，再用灭菌

开瓶器将盖启开。含有二氧化碳的样品可倒入灭菌的小瓶内，覆盖灭菌纱布，轻轻摇荡，待气体全部逸出后，

再取样检验。

2、冏体或轴性液体样品的处理

此类样品无法用吸管吸取，可用灭菌容器称取检样25g,加至预温45℃的灭菌生理盐水或蒸馅水225mL

中，摇荡融化或使用振荡器振荡融化，尽快检验。从样品稀释到接种培养，一般不超过15min。

（1）固体食品的处理

固体食品的处理相对复杂，处理方法主要有以下几种：

①捣碎均质法：

将杵品（＞100g）剪碎或搅拌混句，从中取25g放入带225mL无菌稀释液的无菌均质杯中，以8000~

10000r/min均质1〜2min即可。

②剪碎振摇法：

将样品（2100g）剪碎或搅拌混匀，从中取25g检样进一步剪碎，放入带225mL无菌稀释液和直径5mm

左右玻璃珠的稀释瓶中，盖紧瓶盖，用力快速振摇50次，振幅不小于40cm。

③研磨法：

将样品（》100g）剪碎或搅抨混匀，从中取25g检样放入无菌乳钵中充分研磨后，再放入带有225mL无

菌稀释液的稀释瓶中，盖紧盖后，充分摇匀。

④整粒振摇法：

有完整自然保护膜的颗粒状样品（如蒜瓣、青豆等）可以直接称取25g整粒样品置于带有225mL无菌稀

释液和适量玻璃珠的无菌稀释瓶中，盖紧瓶盖，用力快速振摇50次，振幅要大于40cm以上。

（2）冷冻样品

冷冻样品在检验前要进行解冻.一般在0~4℃下解冻，时间不能超过18h；也可在45°C下解冻，时间不能

超过15min。样品解冻后，无菌操作称取检样25g,置于225mL无菌稀释液中，制备称均匀1：10稀释液.

（3）粉状或颗粒状样品的处理

用灭菌勺或其他适用工具将样品搅拌均匀后，无菌操作称取检样25g,置于225mL灭菌生理盐水中，充

分振摇混匀或使用振摇器混匀，制成1：10稀释液.

二、各类食品微生物检样样品的采集与制备实例

（一）肉与肉制品样品的采集与制备

检险致病菌，不必用规板，在可疑部位用棉拭楷抹即可.

(二)乳与乳制品样品的采集与制备

1、样品的采取和送检

(1)散装或大型包装的乳品

用灭菌刀，勺取样，在移采另一件样品前，刀，勺先清洗灭菌.采样时应注意部位等代表怛。每件样品数量

不少于200g,放入灭菌容器内及时送检。鲜乳一般不应超过3h,在气温较高或路途较远的情况下应进行冷藏,

不得使用任何防腐剂.

(2)小型包装的乳品

应采取整件包装，采样时应注意包装的完整。各种小型包装和乳与乳制品，每件样品量为：生奶1瓶或1

包；消毒奶1瓶或1包；奶粉1瓶或1包(大包装者200g);奶油1块⑴3g);酸奶1瓶或1罐；炼乳1瓶或

1罐；奶酪(干酪)1个.

(3)成批产品

对成批产品进行质量鉴定时，其采样数理每批以千分之一计算，不足千件者抽取1件.

2、检样的处理

(1)鲜奶，酸奶

以无菌操作去掉瓶口的纸罩纸盖，瓶口经火焰消毒后以无菌操作吸取25mL检样，放入装有225mL灭菌生

理盐水的三旃烧瓶内，振摇均勺(酸乳如有水分析出于表层，应先去除).

(2)炼乳

将瓶或罐先用温水洗净表面，再用点燃酒精棉球消毒瓶或罐的上表面，然后用灭菌的开罐器打开罐(瓶)，

以无菌操作称取25g(mL)检样，放入装有225mL灭菌生理盐水的三角烧瓶内，板摇均匀.

(3)奶油

以无菌操作打开包装，取适量检样置于灭菌三角烧瓶内，在450c水浴或温箱中加温，溶解后立即将烧

瓶取出，用灭菌吸管吸取25mL奶油放入另一含225mL灭菌生理盐水或灭菌奶油稀释液的烧瓶内(瓶装稀释液

应预置于450C水浴中保温，作10倍递增稀释时所用的稀释液亦同)，振摇均匀，从检样融化到接种完毕的时

间不应超过30min.

注：奶油柿释液：格林氏液(配法：氯化钠9g,氯化钾0.12g,氯化钙0.24g,碳酸氢钠0.2g,蒸馈水1000mL)

250mL,蒸偏水750mL，琼脂1g,加热溶解，分装每瓶225mL,1210C灭菌15min。

(4)奶粉

罐装奶粉的开罐取样法同炼乳处理，袋装奶粉应用蘸有75%酒精的棉球涂擦消毒袋口，以无菌操作开封

取样，称取检样25g,放入装有适量玻谪珠的灭菌三角烧瓶内，将225mL温热的灭菌生理盐水徐徐加入(先用少

量生理盐水将奶粉调成糊状，再全部加入，以免奶粉结块)，振接使充分溶解和混匀.

(5)奶酪

先用灭菌刀削去部分表面封蜡，用点燃的酒精棉球消毒表面，然后用灭菌刀切开奶酪，以无菌操作切取

表层和深层检样各少许，置于灭菌乳钵内切碎，加入少量生理盐水研成糊状.

(三)蛋与蛋制品样品的采集与制备

1、样品的采集

(1)鲜蛋

用流水冲洗鲜蛋外壳，再用75%酒精棉球涂擦消毒后放入灭菌袋内，加封做好标记后送检.

(2)全蛋粉，巴氏消毒全蛋粉，蛋黄粉，蛋白片

将包装铁箱上开口处用75%酒精棉球消毒，然后将盖开启，用灭菌的金属制双层旋转式套管采样器斜角

插入箱底，使套管旋转收取检样，再将采样器提出箱外，用灭菌小匙自上、中、下部收取检样，装入灭菌

广口瓶中，每个检样质量不少于100g,标记后送检。

(3)冰全蛋、巴氏消毒；；全蚤、冰蚤黄、冰蛋白

先将包装铁听开口处用75%酒精棉球消毒，然后将盖开启，用灭菌电钻由顶到底斜角钻入，徐徐钻取检样。

然后抽出电钻，从中取出检样200g装入灭菌广口瓶中，标明后送检。(4)对成批产品进行

质量鉴定时6勺采样数量

蛋粉、巴氏消毒全蛋粉、蛋黄粉、蛋白片等产品以一日或一班生产量为一批，检验沙门氏菌时，按每批

总量5%抽样，但每批最少不得少于3个检样.测定菌落总数和大肠菌群时，每批按装罐过程前、中、后取

样3次，每次取样50g,每批合为一个检样.

冰全蛋、巴氏消毒冰全蛋、冰蛋黄、冰蛋白等产品按每500kg取样一件。菌落总数测定和大肠菌群测

定时，在每批装罐过程前、中、后取样3次，每次取样50g合为一个检样。

2.检样的处理

(1)鲜蛋外壳

用灭菌生理盐水浸湿的棉拭充分擦拭蛋壳，然后棉拭直接放呻培养基内增菌培养，也可将整只鲜蛋放

入灭菌小烧杯或平皿中，按检样要求加入定量灭菌生理盐水或液体培养基，用灭菌桥i技将蛋壳表面充分擦

洗后，以擦洗液作为检样检验。

(2)鲜蛋蛋液

将鲜蛋在流水下洗净，待十后再用酒精棉球消毒蛋壳，然/口根据检验要求，打开蛋壳取出蛋白、蛋黄或

全蛋液，放人带有玻璃珠的灭菌瓶内，充分摇匀待检.

(3)全蛋粉、巴氏消毒全蛋粉、蛋白片、蛋黄粉

将检样放入带有玻嘀珠的灭菌瓶内，按比率加入灭菌生理盐水充分摇匀待检。

(4)冰全蛋、巴氏消毒冰全蛋、冰蛋白、；；蛋黄

将装有冰蛋检样的瓶子浸泡于流动冷水中，待检样融化后取出，放入带有玻璃珠的灭菌瓶中充分摇匀待

检。

(5)各种蛋制品沙门氏菌增菌培养

以无菌操作称取检样，接种于亚口西酸盐煌绿或煌绿肉汤等增菌培养基中(此培养基预先置于有适量玻璃

珠的灭菌瓶内)，盖紧瓶盖，充分摇匀，然后放入(36士1)°C恒温箱中培养(20±2)ho

(6)接种以上各种蛋与蛋制品的数量及培养基的数量和成分

凡用亚础酸盐煌绿增菌培养时，各种蛋与蛋制品的检样接种数量都为30g,培养基数量都为150mlo

(四)水产食品样品的采集与制备

1、样品的采集

赴现场采取水产食品样品时，应按检脸目的和水产品的种类确定采样量。除个别大型鱼类和海兽只能

割取其局部作为样品外，一般都采取完整的个体，待检验时再按要求在一定部位采取检样。在以判断质量

鲜度为目的时，鱼类和体形较大的贝甲类虽然应以个体为一件样品，单独采取，但当对一批水产品做质量判

断时，仍须采取多个个体做多件检验以反映全面质量。一般小型鱼类和对虾、小蟹，因个体过小在检验时只

能混合采取检样，在采样时须采数量更多的个体，一般可采500—1000g：鱼糜制品(如灌肠、鱼丸等)和

熟制品采取250g,放灭菌容器内。

水产食品含水较多，体内酶的活力也较旺盛，易于变质。因此在采好样品后应在8h内送检，在送检

过程中一般都应加冰保藏。

2、检样的处理

(1)鱼类

鱼类采取检样的部位为背肌。先用流水将鱼体体表冲净，去鳞，再用75%酒精的棉球擦净鱼背，待干后

用灭菌刃在鱼背部沿脊椎切开5g,再沿直于脊椎的方向切开两端，两块背肌分别向两侧翻开，然后用无菌

剪子剪取25g鱼肉，放入天菌乳钵内，用天菌剪子剪碎，加灭菌海砂或被埔砂研磨(有条件惘况下可用均

质器)，检样磨碎后加入225ml灭菌生理盐水，混匀成稀释液。

在剪取肉样时要仔细操作，勿触破及粘上鱼皮。如果是鱼康糜制品和熟制品则放乳钵内进一步捣碎后，

再加生理盐水，混匀成稀释液。

(2)虾类

虾类采取检样的部位为腹节内的肌肉。将虾体在流水下冲净，摘去头的节，用灭菌剪子剪除腹节与头

胞节连接处的肌肉，然后挤出腹节内的肌肉，取25g放入灭菌乳钵内。以后操作向鱼类检样处理。

(3)蟹类

蟹类采取检样的部位为胸部肌肉。将蟹体在流水下冲洗，剥去壳盖和腹脐，去除鲤条。再置流水下冲净。

用75%酒精棉球擦拭前后外壁。置灭菌搪瓷盘上待干。然后用灭菌剪子剪开，成左右两片，用双手将一片蟹

体的胸部肌肉挤出(用手指从足跟一端剪开的一端挤压)，称取25g,置灭菌乳钵内.以后操作同鱼类检样处理

处理

(4)贝壳类

贝壳类采样部位为贝壳内容物。先用流水刷洗贝壳，刷净后放在铺有灭菌毛巾的清洁的搪瓷盘或工作

台上，采样者将双手洗净并用75%酒精棉球擦拭消毒后，用灭菌小饨刀从贝壳的张口处缝隙中徐徐切入，

撬开壳盖，再用灭菌镶子取出整个内容物，称取25g置灭菌乳钵内，以下操作同鱼类检脸处理。

上述检验处理的方法和检验部位均以检验水产品肌肉内细菌含量从而判断其新鲜度为目的.如须检验

水产食品是否污染某种致病菌时，其检脸部位应为胃肠消化道和鲸等呼吸器官：鱼类检取肠管和鲸；虾类检

取头胸节内的内脏和腹节外沿处的肠管；蟹类检取胃和鲸条；贝类中的螺类检取腹足肌皮以下的部分，贝

类中的双壳类检取覆盖在斧是肌肉外层的内脏和瓣勰。

(五)软饮料、冷冻饮品样品的采集与制备

1、样品采集

(1)碳酸饮料、瓶(桶)装饮用水、果汁(浆)及果汁饮料、含乳饮料、果味水、果子露、酸梅汤、固

体饮料等采取样品时应采取原瓶(罐)、袋和盆装样品，散装者应用无菌操作采取500ml,放入灭菌磨口瓶

中.

(2)冰淇淋、冰棍采取样品时应采取原包装样品，散装者用无菌操作取样，放入灭菌磨口瓶中，再放入

冷藏或隔热容器中。

(3)食用冰块取样应取冷冻冰块放入灭菌容器中。

以上所有的样品采取后，应立即送检，最多不超过3h

2、样品的采取数量

(1)碳酸饮料、果汁：采样时以四杯为一件，大包装者，一瓶或一桶为一件。

(2)散装饮料：采取500ml.

(3)固体饮料：瓶装采取一瓶为一件，散装取500g。

(4)冰棍：如班产量为2万支以下者，一班为一批；班产量2万支以上者，以工作台为一批。一批取3

件，一件取3支。

(5)冰淇淋：以杯为1件，散装取200go

(6)食用冰块：以500g为1件.

3、样品的处理

(1)瓶(罐)装饮料

用点燃的酒精棉球灼烧瓶口灭菌，用石炭酸纱布盖好.塑料瓶口可用75%酒精棉球擦拭灭菌，用灭菌开瓶

器将盖启开，含有二氧化碳的饮料可倒入另一灭菌容器内，口勿盖紧，覆盖一灭菌纱布，轻轻摇荡.待气体全

部逸出后，进行检验.

⑵冰棍

用灭菌银子除去包装纸，将冰棍部分放入灭菌磨口瓶内，木棒留在瓶外，盖上瓶盖，用力抽出木棒，或

用灭菌剪子剪掉木棒，置45(水浴30min,溶化后立即进行检验。

(3)冰淇淋

放在灭菌容器内，待其溶化立即进行检脸.

(六)调味品样品的采集与制备

调味品包括酱油、酱类和醋等，是以豆类、谷类为原料发酵而成的食品，往往由于原料污染及加工制

作、运输中不注意卫生而污染上肠道细菌、球菌及需氧和厌氧芽子包杆菌。

1、样品的采取

1酱油和食醋

装瓶者采取原包装，散装样品可用灭菌吸管采取

2.酱类

用灭菌勺子采取，放入灭菌磨口瓶内送检。

2、检样的处理

(1)瓶装样品

用点燃的酒精棉球烧灼瓶口灭菌，用石炭酸纱布盖好，再用灭菌开瓶器启开后进行检脸。

(2)酱类

用无菌操作称取25g,放入灭菌容器内，加入灭菌蒸馅水225ml,制成混悬液。

(3)食醋

用200~300g/L灭菌碳酸纳溶液调pH到中性。

(七)冷食菜、豆制品样品的采集与制备

冷食菜多为蔬菜和熟肉制品不经加热而直接食用的凉拌菜.该类食品由于原料、半成品、炊事员及炊

事用具等消毒灭菌不彻底，造成细菌的污染.豆制品是以大豆为原料制成的含有大量蛋白质的食品，该类食

品大多由于加工后，通过盛器、运输及销售等环节不注意卫生，沾染了存在于空气、土壤中的细菌。这两

类食品如不加强卫生管理，极易造成食物中毒及肠道疾病的传播。

1、样品的采取

(1)冷食菜

采取时将样品混匀，采取后放入灭菌容器内.

(2)豆制品

采取接触盛器边缘、底部及上面不同部位样品，放入灭菌容器内.

2、样品采取数量

冷食菜及豆制品均采样200go

3、检样的处理

以无菌操作称取25g检样，放入225ml灭菌蒸储水，制成混悬液。

(八)糖果、糕点果脯样品的采集与制备

糖果、糕点果脯等此类食品大多是由糖、牛奶、鸡蛋、水果等为原料而制成的甜食。部分食品有包装纸,

污染机会较少，但由于包装纸、盒不清洁，或没有包装的食品放于不洁的容器内也可造成污染。带馅的糕点

往往因加热不彻底，存放时间长头温度高，可使细菌大量繁殖造成食品变质。因此对这类食品进行微生物学

检险还是很有必要的.

1、样品的采取

糕点、果脯可用灭菌镶子夹取不同部位样品，放入灭菌容器内；糖果采取原包装样品，采取后立即送检。

2、样品的处理

（1）糕点

如为原包装，用灭菌银子夹下包装纸，采取外部及中心部位；如为带馅糕点，取外皮及内馅25g;奶花糕

点，采取奶花及糕点部分各一半共25g,加入225ml灭菌生理盐水中，制成混悬液。

（2）果脯

果脯检样，采取不同部位称取25g检样，加入灭菌生理盐水225ml,制成混悬液。

（3）糖果

掳果检样，用灭菌银子夹取包装纸，称取数块共25g,加入预温至45度灭菌生理盐水225ml,待溶化

后检验0

（九）酒类样品的采集与制备

酒类一般不进行微生物学检验，进行检脸的主要是酒精度低的发酵酒。因酒精度低，不能抑制细菌生长.

污染主要来自原料或加工过程中不注意卫生操作而沾染水、土壤及空气中的细菌，尤其散装生啤酒，因不加

热往往生存大量细菌.

1、样品的采集

酒类样品，若是瓶装酒类应采取原包装样品2瓶，若是散装酒类应用灭菌容器采取500ml,放入灭菌磨口

瓶中送检。

2、样品的处理

（1）瓶装酒类

瓶装酒类用点燃的酒精棉球烧灼瓶口灭菌，用石炭酸纱布盖好，再用灭菌开瓶器将盖启开，含有二氧化

碳的酒类可倒入另一灭苗容器内，口勿盖紧，覆盖一灭面纱布，轻轻摇荡，待气体全部逸出后，进行检验。

2o散装酒类

散装酒类可直接吸取，进行检险。

（十）方便面（速食米粉）样品的采集与制备

随着生活水平的提高，生活节奏的加快，方便食品颇受人门的欢迎，销售量越来越