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BB DB54/T0638— 发DBDB54/T0638— 前 附录A（资料性）假绦虫蚴包 附录B（资料性）绦虫蚴包 附录C（规范性）酶联免疫吸附试 附录D（规范性）PCR检 附录E（规范性）绦虫蚴病药物治疗及使用规 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定DBDB54/T0638—假绦虫蚴包囊形态学见附录A，绦虫蚴包囊见附录B。具体操作程序见附录C。诊断具体操作程序见附录5.15.2犬只按5mg～10mg/kg的剂量一次性口服吡喹酮，每4周～6周驱虫一次。投药前犬禁食1天，然后在2～820疫苗预处理：疫苗使用前需置于22～252h，使用时充分摇匀，保持匀质。疫苗启封后，24h内用完。接种方式：按瓶签注明头份，用灭菌生理盐水稀释疫苗，每只羊颈部皮下注射1mL。法见附录E。次氯酸钠浸泡30min。附录图A.1附录a棘球蚴（肺脏b棘球蚴（肝脏cd图B.1附录犬粪样品处理：新鲜采集的犬粪样品，于负807d，以灭活虫卵。室温解冻，取1g犬粪样品加入1mL工作浓度的稀释液，混匀形成悬浊液，3000rpm10min，取上清备用。制备的样品可在2℃～8℃保存7d，长期保存则应储存于-20℃。血液样品处理：将采血管室温放置2小时或4℃过夜，使血清析出。43000rpm离心10min，收集上清。建议将血清分装多份，负20℃或负80℃保存，避免反复冻融。孵育30min。一抗结合：100μL/孔加入工作浓度的单抗液，覆封板膜后，置37℃孵育30min。二抗结合：100μL/孔加入工作浓度的酶标抗体，覆封板膜后，置37℃孵育30min。显色：每孔加入100μL的TMB显色液，避光显色15min。终止：50μL/孔加入终止液。读数：酶标仪10min内测定450nm附录PCR电泳缓冲液、组织基因组DNA提取试剂盒、2×PCRMix、DL2000DNAMarker、Ts-GelRed、琼脂糖引物序列5´-产物大小扩增体系（50μL）：2×TaqPCRMasterMix25μL，上下游引物各2μL，模板4μL，ddH２O补齐为17μL，混匀后稍加离心。℃延伸琼脂糖凝胶和1×TAE缓冲液，取5μL的PCR扩增产物在电泳仪中电泳。附录连用3d～528连用5d～71

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