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34DB34/T4198—2022梨黑斑病菌的LAMP检测方法DetectionofAlternariaspeciesinvolvedinpearblackspotusingLAMP2022-06-29发布2022-07-29实施安徽省市场监督管理局发布I1A.yaliinficiensR.G.Roberts和A.ventricosa5.3恒温金属浴5.4光照培养箱：20℃~30℃2WA培养基(琼脂粉20g,加水1000mL),PDA培养基(去皮马铃薯200g,蔗糖(或葡萄糖)20g,琼脂粉20g,加水补足至1000mL)。6.3LAMP检测试剂水浴1h,期间每隔10min上下颠倒几次。常温条件下12000rpm离心10min;取上清，加入等体积酚/氯仿/异戊醇(25:24:1),颠倒混匀，常温条件下12000rpm离心5min;将上清转移至新的中，加入1倍于上清体积的异丙醇，-20℃条件沉名称3黄绿色，表明含有梨黑斑病菌；如果扩增产物为橙红色，表明不含有梨黑斑病菌（参见附录4(资料性)泳

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