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文档简介

第4课时动物细胞培养与克隆动物

【课标要求】1.阐明动物细胞培养是从动物体获得相关组织,分散成单个细胞后,在适宜环境

卜.让细胞生长和增殖的过程。2.动物细胞培养是动物细胞工程的基础。3.阐明动物细胞核移植

一般是将体细胞核移入一个去核的卵母细胞中,并使其发育成动物个体的过程。

考点一动物细胞培养——动物细胞工程的基础

■梳理归纳夯实必备知识

1.动物细胞培养的原理和条件

(1)原理:细胞增殖。

⑵培养条件

①温度和pH:适宜温度为37±0.5C(哺乳动物),pH为7.2〜7.4,造成pH波动的主要物质

是小2,培养箱提供恒定5%CO2浓度,与培养液中的电旦翼之处于平衡状态。

②气体环境:95%空气(保证细胞呼吸对氧气的需要)加登8(维持培养液的pH)o

③无菌、无毒的条件:对培养液和所有培养用具进行无茵处理;培养基中添加抗生素;对血

清采用过滤除菌;定期更换培养液以清除代谢产生的有毒物质。

④营养:基本成分包括水、无机盐、氨基酸、维生素、糖类、生长因子等,合成培养基中添

加一定比例的血清或其他天然成分。

2.动物细胞培养的过程(以贴附细胞为例)

3.细胞系、细胞株和细胞克隆

(1)细胞系:原代培养物经首次传代成功后即成细胞系。能连续培养下去的细胞系称为连续细

胞系或无限细胞系,不能连续培养下去的细胞系称为有限细胞系。

(2)细胞株:从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞称为细胞株。可以连续多次

传代的细胞株称为连续细胞株,可传代次数有限的细胞株称为有限细胞株。

(3)细胞克隆:把一个里细胞从群体中分离出来单独培养,使之繁衍成一个新的细胞群体的技

术,必须肯定所建成的克隆来源于蚯细胞。

4.动物细胞培养的价值

(1)研究价值:可用于生理、病理、药理等方面的研究,例如有毒物质的检测等。

(2)应用价值:用于烧伤患者的皮肽醛械和损伤器官的修复;获得动物疫苗、干扰素、单克隆

抗体等生物制品。

-教材隐性知识----------------------------------------------------------------------

⑴进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞,说明细胞间的物质主要是什么?用胃蛋白

酶可以吗?为什么?

提示蛋白质;不可以。多数动物细胞生存的适宜pH为7.2〜7.4,胃蛋白酹(适宜pH为2

左右)在此环境中没有活性,而胰蛋白酹在此环境中活性较高,因此胰蛋白酹适用于细胞培养

时的处理。

(2)动物细胞培养时,为什么要将动物组织分散成单个细胞?

提示分散后的单个细胞能与培养液充分接触,更易进行物质交换。

■考向突破强化关键能力

考向动物细胞培养

1.下列有关动物细胞培养的叙述,错误的是()

A.恶性肿瘤细胞系具有不死性和失去接触抑制等特性

B.利用液体培养基和CO?培养箱,模拟动物体内的生长环境

C.动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础

D.细胞株没有差异性,在连续传代过程中遗传性状始终保持稳定

答案D

解析细胞株连续传代,部分细胞遗传物质也会改变。

2.如图为动物细胞培养的基本过程示意图。

动物组织块R

ABCD

请回答下列问题:

(1)容器A中放置的一般是幼龄动物的器官或组织,原因是其细胞,易于培养。

培养时先要剪碎,然后用分散细胞,制成B瓶中的细胞悬液。将细胞悬液转

入C瓶中进行的初次培养称为。

(2)细胞正常培养了一段时间后,发现细胞绝大部分死亡,只有极少数细胞存活,这是因为存

活的细胞发生了,可无限增殖。

(3)C、D瓶中的培养液为保证无菌、无毒的环境,需要添加一定量的。培养过

程中还需要提供0:和C0:等气体环境,C02的作用主要是

(4)动物细胞体外培养时,通常要在培养基中补充一定浓度的某些物质。如图是血清对正常细

胞和癌细胞培养影响的实验结果。据图可知,培养细胞一定要添加血清。

细胞数,幅细胞(有血清)

癌细胞(无血清)

//1_正常细胞(有血清)

/斤正常细胞(无血清)

°培养时间

答案(I)分裂能力强胰蛋白酶(或胶原蛋白醉)原代培养(2)基因突变(3)抗生素维

持培养液的pH(4)正常

解析(4)据图可知,培养癌细胞时有无血清影响不大,而培养正常细胞时,有血清时的细胞

数远大于无血清时的细胞教,故培养正常细胞必须要添加血清。

考点二动物体细胞核移植技术和克隆动物

■梳理归纳夯实必备知识

1.动物细胞核移植

(1)概念:将体细胞核移入一个去核的卵母细胞中,并使其发育成动物个体的过程。利用该技

术培育出的动物称为克隆动物。

(2)分类:包括胚胎细胞核移植(如囊胚期细胞核期I体细胞核移植(如肠上皮细胞核),其中胚胎

细胞核移植较易成功。

(3)原理:动物细胞核的全能性。

(4)过程(以绵羊“多莉”克隆过程为例)

苏格兰黑面母羊白色芬兰母羊

歌①卵细胞

“"OjO

细胞核移可

Q)重组细胞

M裂

早期胚胎

胚胎移植।

植入另一头苏格生黑面母羊子宫

!

产下羊羔(克隆羊“多莉”)

⑸结论

①面度会化的细胞经过一定技术处理,也可回复到类似受精卵时期的功能,表现出全能性。

②在胚胎和个体发育中,细胞质具有调控细胞核发育的作用。

2.动物细胞核移植的应用价值和存在问题

(1)应用价值

①研究胚胎细胞的分化。

②在药物生产、优良种畜的培育和繁殖、拯救濒危动物、治疗性克隆及星独动物间核移植的

可能性等方面。

(2)存在问题:成功率低、某些克隆动物早衰等问题。

■教材隐性知识----------------------------------------------------------------------

(1)克隆动物遗传物质来源:核基因全部来自提供细胞核的动物,细胞质基因:主要来自卯细

胞。

(2)动物体细胞核移植常选用去核卵(母)细胞,原因是什么?去核的原因是什么?

提示卵母细胞体积大、易操作,含有促使细胞核表达全能性的物质和营养条件。去核的原

因:保证克隆动物的核基因全部来自供体细胞。

■考向突破强化关键能力

考向细胞核移植技术和克降动物

1.我国首例克隆猫“大蒜”于2019年7月21日经代孕猫自然分娩顺利出生,它是从木体猫

“大蒜”的大腿部采集了一块皮下组织,提取体细胞与云核的卵细胞融合,构建重组组胞,

激活后使其分裂发育的早期胚胎再植入代孕猫的子宫内,直至分娩。下列相关叙述不正确的

是()

A.可用显微操作法去除卵细胞的细胞核

B,将皮卜组织细胞注射到去核卵细胞中,通过电脉冲刺激诱导两细胞融合

C.重组细胞需在无毒、尢菌的环境中培养,在使用的合成培养基中常添加一定比例的血清

或其他天然成分

D.克隆猫“大蒜”的培育说明动物细胞具有全能性,克隆猫与供体猫的性状完全相同

答案D

解析克隆猫“大蒜”的培育说明动物细胞的细胞核具有全能性,由于受体卵细胞细胞质中

有遗传物质,且性状表现也受环境影响,克隆猫与供体猗的性状不完全相同,D错误。

2.Bmal\基因影响生物节律,我国研究人员通过利用一只该基因敲除彻底、且生物节律紊乱

特征最为明显的狮猴的体细胞细胞核,成功获得5只克隆疾病猴。请【可答下列问题:

基因在舜猴的胚胎细胞和体细胞中均存在,原因是

与胚胎细胞核移植技术相比,成体细胞核移植技术的难度较(填“高”或“低”),

原因是____________________________________________________________________________

(2)经检测,5只克隆疾病猴的细胞核基因型与核供体细胞(填“相同”或“不

同”),而线粒体基因型则与卵供体细胞(填“相同”或“不同”),同时它们的所

有基因与生出它们的代孕堆猴无关。

(3)体细胞克隆猴常作为人类疾病研究的实验动物模型,与用多只普通猴做实验相比,使用遗

传背景相同的克隆猴做实验的优点是_____________________________________

答案(1)胚胎细胞和体细胞均来自受精卵的有丝分裂,用园”基因通过复制,平均分配到子

细胞中高体细胞分化程度高,表现其全能性更困难(2)相同相同(3)避免个体间差异

对实验的干扰,大大减少实验动物的使用数量

重温高考真题演练

1.(2021.浙江1月选考,18)下图为动物成纤维细胞的培养过程示意图。下列叙述正确的是

()

①切取②制备细③原代培养④传代培养

组织胞悬浮液

A.步骤①的操作不需要在无菌环境中进行

B.步骤②中用盐酸溶解细胞间物质使细胞分禽

C.步骤③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶处理

D.步骤④培养过程中不会发生细胞转化

答案c

解析步骤①的操作需要在无菌环境下进行,A错误;在制备动物细胞悬浮液中要经过胰蛋

白酶或胶原蛋白酶消化,使组织块分散成单个细胞,B错误、C正确;在传代培养过程中,

可能转化为连续细胞系,D错误。

2.(经典高考题)关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述,错误的是()

A.动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同

B.动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶

C.烟草叶片离体培养能产生新个体,小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖

D.动物细胞培养可用于检测有毒物质,茎尖培养可用于植物脱除病毒

答案B

解析动物细胞培养用液体培养基,而植物组织培养用团体培养基,A正确:在动物细胞培

养过程中要加入胰蛋白晦,植物组织培养过程中不用胰蛋白酶,B错误;植物细胞具有全能

性,所以烟草叶片离体培系能形成新个体,而动物细胞离体培养只能增殖,C正确;植物组

织培养中常用茎尖培养无病毒植物个体,而动物细胞培养的一个重要应用是检测有毒物质,

D正确。

3.(经典高考题)实验小鼠皮肤细胞培养(非克隆培养)的基本过程如图所示。下列叙述错误的

是()

实验小鼠工皮肤组织二皮肤细胞」乙细胞培养1」一细胞培养2

A.甲过程需要对实验小鼠进行消毒

B.乙过程对皮肤组织可川胰蛋白酶消化

C.丙过程得到的细胞大多具有异倍体核型

D.丁过程得到的细胞具有异质性

答案C

解析动物细胞培养需要无毒、无菌的环境,甲过程指从实脸小鼠身上取下皮肤组织,该过

程需要对小鼠进行消毒处理,A正确:乙过程表示将得到的皮肤组织分散成单个细胞制备成

细胞悬液,可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶进行处理,B正确;丙过程表示原代培养,此肺的细

胞仍能保持正常的二倍体核型,C错误;丁过程表示通迂选择或纯化从细胞系中获得具有特

殊性质的细胞株的过程,细胞质有异质性,D正确。

4.(2016•全国II,40)下图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动物(二倍体)的流程。

|供体的体细胞

求组早期②代孕

叵通用髓卵细胞―胚胎一个体

回答下列问题:

(1)图中A表示正常细胞核,染色体数为2〃,则其性染色体的组成可为

过程①表示去除细胞核,该过程一般要在卵细胞培养至适当时期再进行,去核时常采用

的方法。②代表的过程是O

(2)经过多次传代后,供体细胞中的稳定性会降低。因此,选材时必织关注

传代次数。

⑶若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同,从遗传物质的角度分析其原因是

(4)与克隆羊“多莉”培育成功一样,其他克隆动物的成功获得也证明了

答案(1)XX或XY显微操作胚胎移植(2)遗传物质(3)卵细胞的细胞质中的遗传物质

会对克隆动物的性状产生影响(4)已经分化的动物体细胞的细胞核具有全能性

5.(经典高考题)治疗性克隆对解决供体器官缺乏和器官移植后免疫排斥反应具有重要意义。

流程如下:

〔个体-②

卵(母)细胞一

(个体B-――*o囊胚

------本细胞细胞核

移植T组织器官卜(胚胎干细胞卜」

⑴过程①采用的是细胞工程中的技术,过程②采用的是胚胎工程中的

_______________技术。

(2)体细胞进行体外培养时,所需气体主要有02和C02,其中C02的作用是维持培养液(基)

的o

(3)如果克隆过程中需进行基因改造,在构建基因表达载沐(重组载体)时必须使用和

两种工具酶。基因表达载体上除目的基因外,还需有基因,以便选出

成功导入基因表达载体的细胞。

(4)胚胎干细胞可以来自于囊胚中的。在一定条件下,胚胎干细胞可以分化

形成不同的组织器官。若将图中获得的组织器官移植给个体(填“A”或"B”),则

不会发生免疫排斥反应。

答案(1)(体细胞)核移植(早期)胚胎培养(2)pH(3)限制性内切核酸酶DNA连接酶

标记(4)内细胞团B

解析(1)由流程图知,个体A提供去核卵母细胞,个体B提供体细胞核,二者通过①得到

重组细胞,重组细胞经②得到囊胚,故①是核移植,②是早期胚胎培养。(2)动物细胞培养时,

要通入含有5%CO2的空气,CO2的作用是维持培养液的pH。(3)构建基因表达载体时,要用

同种限制性内切核酸酶切割目的基因和载体,再用DNA连接酶连接。基因表达载体包括目

的基因、启动子、终止子、复制原点、标记基因等,标记基因的作用是便于目的基因的检测

和筛选。(4)胚胎干细胞是从早期胚胎或者原始性腺中分潟出来的一类细胞,具有发育的全能

性。囊胚中的内细胞团细胞为胚胎干细胞。图中获得的组织器官,其细胞的细胞核来自个体

B,将所得组织器官移植给个体B,不会发生免疫排斥反应。

课时精练

一、选择题

1.下列关于动物细胞培养条件的叙述,正确的是()

A.为了防止代谢产物积累对细胞自身造成危害,应在细胞培养液中添加适量抗生素

B.由于对细胞所需的营养物质没有完全搞清楚,应在合成培养基中添加激素等物质

C.常采用培养皿或松盖培养瓶进行细胞培养,再置于含95%。2加5%CCh的培养箱中

D.对培养液和所有培养用具都要进行无菌处理,保证细胞处于无菌、无毒环境

答案D

解析动物细胞培养的培春液中通常需添加一定量的抗生素,抑制杂菌污染:定期更换培维

液,防止代谢产物积累对细胞自身造成危害,A错误;由于人们对细胞所需的营养物质还没

有完全搞清楚,因此在使用合成培养基时,培养液中通常需加入血清等天然成分,B错误;

通常采用培养皿或松盖培茶瓶,将其置于含95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中进行

培养,C错误;动物细胞体外培养时,首先应保证被培养的细胞处于无菌、无毒的环境,即

对培养液和所有培养用具进行无菌处理,D正确。

2.治疗性克隆有望解决供体器官短缺和器官移植出现的排异反应,下图表示治疗性克隆的部

分过程。下列有关叙述正确的是()

患者正常「肝细胞-1

移植

一心肌细胞一给

一胰岛细胞一人

细胞A细胞一神经细胞一

A.过程①表示细胞核移植

B.细胞A常用受精卵

C.过程②表不脱分化过楞

D.胚胎干细胞只增殖不分化

答案A

解析据图分析,图中①过程表示细胞核移植,A正确;图中治疗性克隆的过程利用了核移

植,核移植过程中的受体细胞通常为去核的卵细胞,B错误;过程②表示胚胎干细胞的分裂

和分化过程,C错误;图示胚胎干细胞具有增殖和分化的能力,D错误。

3.一般来说,动物细胞体外培养需要满足以下条件()

①无毒、无菌的环境②适宜的渗透压③合成培养基需加血清等④温度与动物体温相近

⑤需要不需要C02

A.①②③@@B.®@®®

C.①③®®D.①②④⑤

答案B

4.动物细胞体外培养需要满足一定的条件,下列说法错误的是()

A.细胞培养液通常会添加一定量的抗生索•,以防止杂菌污染

B.Ch是细胞代谢所必需的,C02有利于维持培养液pH的稳定

C.使用合成培养基时,通常要加入一定比例的血清或其他天然成分

D.多数动物细胞生存的适宜pH为7.2〜7.4,适宜温度为25±0.5℃

答案D

解析细胞体外培养的适宜温度和动物体温相近,大多数情况下以37±0.5℃为宜。

5.下图为肾脏上皮细胞培养过程示意图,下列叙述不正确的是()

肾脏组织块R/

甲乙丙丁

A.甲一乙过程需要用胰蛋白晦或胶原蛋白的等消化处理

B,丙过程指细胞在添加血清的合成培养基中进行原代培养

C.丙和丁过程均会出现细胞贴附生长和接触抑制现象

D.丁过程是传代培养的细胞,该过程体现了动物细胞的全能性

答案D

解析丁过程为传代培养,属于细胞培养,没有发育成一个完整个体,不能体现全能性,D

错误。

6.实验动物细胞培养的基本过程如下图所示,下列叙述正确的是()

皮肤组织」一皮肤细胞‘。细胞培养1」二细胞培养2

A.应选择幼龄动物的皮朕组织进行动物细胞培养

B.甲过程需要用纤维素酸和果胶酶处理

C.丙过程是传代培养,细胞全部失去接触抑制

D.乙过程是原代培养,一般不会出现接触抑制现象

答案A

解析应选择幼龄动物的皮肤组织进行动物细胞培养,细胞分裂能力较强,A正确:甲过程

需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理,B错误;原代培养也会出现接触抑制现象,D错误。

7.下列关于动物细胞培养的叙述,正确的是()

A.培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞

B.细胞克隆的最基本要求是必须保证分离出来的细胞是多个

C.二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的

D.癌细胞在培养瓶中不会出现接触抑制的现象

答案D

解析保留接触抑制的动物细胞培养时只能形成单层细胞,A错误;二倍体细胞通常是有限

细胞系,C错误。

8.2015年2月3日,英国议会下院通过一项历史性法案,允许以医学手段培育“三亲婴儿”,

“三亲婴儿”的培育过程可选用如图技术路线。据图分析,下列相关叙述错误的是()

成熟

q去核;c

捐献舄细胞•产®罟卵细胞

⑦口厂,培养

母亲卵细胞o

三亲婴儿*

受精卵

A.该技术可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代

B.捐献者携带的红绿色盲基因不能遗传给三亲婴儿

C.三亲婴儿的染色体全部来自母亲提供的细胞核

D.三亲婴儿的培育还需要胚胎移植等技术

答案C

解析根据图示可知卵细胞的细胞质来自捐献者,可避免母亲的线粒体遗传基因传递给后代,

A正确;捐献者只是提供了卵细胞的细胞质,所以其细胞核中携带的红绿包盲基因不能遗传

给三亲婴儿,B正确;三亲婴儿的染色体来自母亲和父亲,C错误;三亲婴儿的培育需要核

移植、胚胎移植等技术,D正确。

9.2019年1月24日,我国科学家宣布世界首批疾病克隆猴一5只生物节律紊乱体组胞克

隆猴在中国诞生,开启了克隆猴模型应用于生命科学研究的“春天”。科学家采集了一只一

岁半的、睡眠紊乱最明显的(生物节律基因)敲除猴的体细胞,通过体细胞核移植技术,

获得了5只克隆猴——这是国际上首次成功构建的一批遗传背景•致的生物节律紊乱狒猴模

型。卜列相关叙述不正确的是()

A.体细胞核移植技术的原理是动物细胞核具有全能性

B.5只克隆舜猴细胞核基因型与核供体细胞完全一致

C.体细胞核移植需用取自新鲜卵巢的卵母细胞直接做受体细胞

D.该研究可弥补实验舜猴繁殖周期长、单胎数量少的不足

答案C

解析动物细胞核移植获得克隆动物所依据的原理是动物细胞核具有全能性,A正确:5只

克隆瘠猴是通过体细胞核移植技术获得的,其细胞核基因型与核供体细胞完全一致,B正确:

取自卵巢的卵母细胞需要培养成熟后去除细胞核,才可进行核移植,C错误;体细胞核移植

时供核的供体可不受年龄影响,且体细胞数量多,所以该研究可弥补实脸猿猴繁殖周期长、

单胎数量少的不足,D正确。

10.下列对动物细胞核移植技术的描述中,错误的是()

A.核移植包括胚胎细胞核移植和体细胞核移植

B.体细胞核移植的过程中可通过显微操作去除卵细胞中的细胞核

C.通过体细胞核移植方法生产的克隆动物是对供核动物进行了100%的复制

D.体细胞核移植过程中通常采用卵细胞作为受体细胞

答案C

解析通过体细胞核移植方法生产的克隆动物不是对供核动物的完全复制,因为克隆动物还

有一部分遗传物质来自受体的细胞质,C错误。

11.下图为克隆羊“多莉”的培育过程示意图。

甲羊的乳L

啰缈幽核移一画]适宜伊丽।植人丙羊」克隆羊]

①¥.上1"细胞素宿胚胎|发一、分啾'多莉1

核卵细胞

下列各项有关表述错误的是()

A.克隆羊“多莉”的性状主要与甲羊一致,因其细胞核基因来自甲羊

B.此过程说明高度分化的动物细胞具有全能性

C.乙羊的去核卵细胞为重组细胞基因表达提供了细胞内的环境条件

D.克隆羊“多莉”的培育过程中采用的生物技术有核移植和胚胎移植

答案B

解析据图可知,克隆羊“多莉”的细胞核基因来自甲兰,因此“多莉”的主要性状与甲羊

一致,A正确;此过程说明高度分化的动物细胞的细胞核具有全能性,B错误;克隆羊”多

莉”的培育过程中用到了核移植和胚胎移植等技术,D正确。

二、非选择题

12.某研究小组进行药物实验时,以动物肝细胞为材料,测定药物对体外培养细胞的毒性。

供培养的细胞有甲、乙两种,甲细胞为肝肿瘤细胞,乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关

动物细胞培养的问题:

⑴将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养,培养液及其他培养条件均相同。一

段时间后,观察到甲细胞数量比乙细胞数量__________O

(2)在动物细胞培养时,通常在合成培养基中加入适量血清,其原因是o

(3)在两种细胞生长过程中,当乙细胞铺满瓶壁时,细胞会出现现象。药物实验需

要大量细胞,两种细胞频繁传代,甲细胞比乙细胞可以传代的次数更。若用动物

的肝脏组织块制备肝细胞悬液,需用消化处理。

(4)已知癌细胞的X基因表达过量与肝肿瘤的发生密切相关。要探究•种抗肿瘤药物Y对甲

细胞生长的影响,可将甲细胞分为A、B两组,A组细胞培养液中加入适量的,

B组细胞培养液中加入等量的无菌生理盐水。经培养后,从A、B两组收集等量细胞,通过

分别检测X基因在A、B两组细胞中的或合成水平的差异,确定Y的

药效。

答案(1)多(2)血清中含有适合动物细胞生长和增殖的营养物质及各种生长因子(3)接触

抑制

多胰蛋白酶或胶原蛋白的等(4)药物YmRNA蛋白质

13.如图是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病的过程图解。请据图I可答下列问通:

去核卵母细胞健康胰岛B细胞基因田初

\®重组

M一早期一②尸细胞b

忠市一2期肥一W细胞a胚胎2

।移植正常合成>胰岛索的胰岛P细胞.定陇导

⑴图中②所示的结构名称是。

⑵图中③④所示的生物技术名称分别是、O

(3)过程③通常用去核的卵湘胞作为受体细胞的原因除了它体积大、易操作、营养物质丰富外,

还因为它____________________________________________________________________________

(4)过程④通常用②做受体细胞的原因是o

(5)图示方法与一般的异体移植相比最大的优点是。

答案(1)胚胎干细胞(2)核移植技术转基因技术(3)含有促进细胞核全能性表达的物质

(4)这些细胞分化程度极低,具有全能性,可以定向地诱导分化为各类细胞(5)没有免疫排斥

反应

14.利用体细胞核移植技术已经成功克隆了多种哺乳动物,但成功率很低。研究表明,一定

浓度的TSA(曲古抑菌素A)能提高克隆胚胎的囊胚发育率及克隆后代的存活率。为了优化

TSA的处理方案,科研人员研究了TSA浓度及处理时间对猪核移植胚胎体外发育的影响,

其基本操作过程如图所示,过程①中添加TSA。请据图问答问题:

收集、培养卵去核

细胞核移植一重组过程①■过程

一细胞一

分离、培养猪胎—

儿成纤维细胞早期胚胎A

分娩代孕

一母猪

克隆猪

⑴对收集、培养的卵细胞进行相关显微操作去核时,一般用微型吸管•并吸出细胞核和

(2)动物细胞培养的培养基中除加入糖、促生长因子、氨基酸、无机盐等营养物质外,通常还

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