CN119410835A 一种呼吸系统真菌感染检测体系、试剂盒及其制备方法 （山东康华生物医疗科技股份有限公司）

司本发明提供一种呼吸系统真菌感染检测体组合物包括针对巴西副球孢子菌设计的上下游马尔尼菲篮状菌设计的上下游引物和荧光探针序列、针对核糖核酸酶P设计内参的上下游引物2核糖核酸酶P设计内参的下游引物以及针对核糖核酸酶P基因设计内参33.一种呼吸系统真菌感染检测试剂盒，其特征在4并在其中生长繁殖导致组织损害、器官功能障碍和炎症反应的病理改变及病理生理过程称菌（Blastomycesdermatitidis）、赛多孢菌（Scedosporium）、马尔尼菲篮状菌中国发明专利申请CN202410266869.4公开了一种用于检测侵袭性真菌的引物和[0005]中国发明专利申请CN202311005500.X公开了一种用于真菌联检的组合物及含其5马尔尼菲篮状菌6种真菌病原体，本试剂盒能够有效地对巴西副球孢子菌、荚膜组织胞浆根据NCBIGeneBank数据库获得巴西副球孢子菌（ParacoccidioidesSEQIDNO.7：针对粗球孢子菌设计的上游引物，该上游引物的序列为5’_SEQIDNO.8：针对粗球孢子菌设计的下游引物，该下游引物的序列为5’_SEQIDNO.9：针对粗球孢子菌设计的荧光探针，该荧光探针的序列为5’_SEQIDNO.10：针对皮炎芽生菌设计的上游引物，该上游引物的序列为5’_SEQIDNO.11：针对皮炎芽生菌设计的下游引物，该下游引物的序列为5’_SEQIDNO.12：针对皮炎芽生菌设计的荧光探针，该荧光探针的序列为5’_SEQIDNO.13：针对赛多孢菌设计的上游引物，该上游引物的序列为5’_6SEQIDNO.14：针对赛多孢菌设计的下游引物，该下游引物的序列为5’_SEQIDNO.15：针对赛多孢菌设计的荧光探针，该荧光探针的序列为5’_本发明以人类管家基因核糖核酸酶P作为内参和6种病原同时进行核酸提取，PCR[0010]所述质控试剂包括阳性质控和阴所述阳性质控为：将浓度均为7x106copies/mL的巴西副球孢子菌人工合成质粒、孢菌人工合成质粒、马尔尼菲篮状菌人工合成质粒以及核糖核酸酶P人工合成质粒按照体所述呼吸系统真菌感染检测体系包括A管PCR检测体系和B管PCR检测78根据NCBIGeneBank数据库获得巴西副球孢子菌（ParacoccidioidesSEQIDNO.7：针对粗球孢子菌设计的上游引物，该上游引物的序列为5’_SEQIDNO.8：针对粗球孢子菌设计的下游引物，该下游引物的序列为5’_SEQIDNO.9：针对粗球孢子菌设计的荧光探针，该荧光探针的序列为5’_SEQIDNO.10：针对皮炎芽生菌设计的上游引物，该上游引物的序列为5’_SEQIDNO.11：针对皮炎芽生菌设计的下游引物，该下游引物的序列为5’_9SEQIDNO.12：针对皮炎芽生菌设计的荧光探针，该荧光探针的序列为5’_SEQIDNO.13：针对赛多孢菌设计的上游引物，该上游引物的序列为5’_SEQIDNO.14：针对赛多孢菌设计的下游引物，该下游引物的序列为5’_SEQIDNO.15：针对赛多孢菌设计的荧光探针，该荧光探针的序列为5’_使用实施例1提供的引物组合物进行呼吸系统真菌感染检测体系配制，呼吸系统核糖核苷三磷酸dNTP购于北京索莱宝科质粒以及核糖核酸酶P人工合成质粒浓度均为1×106copies/成质粒以及核糖核酸酶P人工合成质粒均购于生工生物工程(上海试剂盒包括呼吸系统真菌感染检测体系和质控质粒分别定量至105copies/mL，10倍梯度分别稀释至104copies/mL、103copies/mL、赛多孢菌、马尔尼菲篮状菌）101copies/mL检出率在100100copies/mL未起峰，说明本与150μL样本处理溶液混合后，添加至青岛汉唐生物科技有限公司生产的核酸提取或纯用。将获得的核酸各取50μL添加至实施例2的呼吸系统真菌感染检测体系中进行反