2025年生物培养基配制专业考试试题及答案

2025年生物培养基配制专业考试试题及答案一、名词解释（每题3分，共15分）1.培养基答案人工配制的供微生物生长繁殖和积累代谢产物的营养基质。2.选择性培养基答案在基础培养基中加入某些化学物质或改变培养条件，抑制不需要的微生物生长，促进目标微生物生长的培养基。3.灭菌答案采用物理或化学方法杀死或除去培养基及器皿中所有微生物（包括芽孢和孢子）的过程。4.碳氮比（C/N）答案培养基中碳源所含碳元素质量与氮源所含氮元素质量之比，常用C/N表示。5.缓冲能力答案培养基抵抗pH变化的能力，通常由缓冲对（如磷酸盐、碳酸盐）或有机氮源提供。二、单项选择题（每题2分，共20分）1.LB培养基属于下列哪种类型的培养基？A.选择性培养基B.鉴别培养基C.基础培养基D.富集培养基答案C解析LB培养基营养较全面，不含选择性抑制剂，是常用的基础培养基。2.配制固体培养基时，通常加入的凝固剂是？A.明胶B.琼脂C.硅胶D.卡拉胶答案B解析琼脂是最常用的凝固剂，凝固点约32～40℃，熔化点约85～95℃，且不被大多数微生物分解。3.高压蒸汽灭菌法常用的温度和时间为？A.100℃，30minB.115℃，15minC.121℃，15～30minD.160℃，2h答案C解析高压蒸汽灭菌常用121℃（压强约0.1MPa）维持15～30min，可杀灭包括芽孢在内的所有微生物。4.培养基配制后调节pH时，通常使用下列哪种试剂？A.HCl和NaOHB.H2SO4和Ca(OH)2C.HNO3和KOHD.醋酸和氨水答案A解析常用1mol/LHCl或1mol/LNaOH调节pH，避免引入其他干扰离子。5.下列关于碳源的说法，错误的是？A.葡萄糖是速效碳源B.淀粉是多糖类碳源C.有机酸可作为碳源D.铵盐属于碳源答案D解析铵盐如NH4Cl是常用的无机氮源，不属于碳源。6.配制含葡萄糖的培养基时，灭菌条件应选择？A.121℃，30minB.115℃，15～20min或过滤除菌C.100℃，1hD.160℃干热灭菌答案B解析葡萄糖在高温下易焦化或与氮源发生美拉德反应，应降低灭菌温度或采用过滤除菌后加入。7.用于分离能分解尿素的细菌，应选用哪种培养基？A.含酚红和尿素的培养基B.含伊红美蓝的培养基C.含NaCl的高盐培养基D.含乳糖和中性红的培养基答案A解析尿素分解产生氨使pH升高，酚红指示剂变红，可筛选尿素分解菌。8.液体培养基分装试管时，装液量一般不超过试管容积的？A.1/2B.1/3C.2/3D.1/5答案B解析液体培养基分装量通常为试管容积的1/5～1/3，一般不超过1/3，以免灭菌时溢出。9.制备平板培养基时，每个90mm培养皿通常倒入多少mL培养基？A.5～10mLB.15～20mLC.30～40mLD.50mL以上答案B解析常规平板倾注量为15～20mL，过少易干裂，过多影响通气。10.下列哪种物质常用作培养基中的微量元素来源？A.FeSO4B.NaClC.K2HPO4D.蛋白胨答案A解析FeSO4提供铁元素，属于微量元素；NaCl提供无机盐，K2HPO4是磷源和缓冲剂，蛋白胨是有机氮源。三、填空题（每空1分，共20分）1.培养基按物理状态可分为____、____和半固体培养基。答案液体培养基；固体培养基2.高压蒸汽灭菌时，需先将灭菌器内冷空气____，否则压力达到但温度____。答案排尽；达不到要求3.酚红指示剂在酸性条件下呈____色，在碱性条件下呈____色。答案黄；红4.牛肉膏蛋白胨培养基中，牛肉膏主要提供____和____。答案碳源；生长因子（或维生素）5.琼脂在约____℃熔化，约____℃凝固。答案95；406.配制培养基时，一般先按配方称量各成分，加水溶解后调节____，再加水至所需体积，即____。答案pH；定容7.常用的物理灭菌方法有____和____（写出两种）。答案高压蒸汽灭菌；干热灭菌（或过滤除菌、紫外线等，任写两种）8.碳源的主要作用是提供微生物生命活动所需的____和____。答案碳素；能量9.氮源主要用于合成微生物细胞中的____和____等含氮物质。答案蛋白质；核酸10.培养厌氧菌时，可在培养基中加入____或____等还原剂以降低氧化还原电位。答案巯基乙酸钠；半胱氨酸（或抗坏血酸等）四、判断题（每题1分，共10分）1.培养基配制后必须立即灭菌，否则微生物会迅速繁殖。答案错误解析配制后应尽快灭菌，但如不能立即灭菌可暂时冷藏保存，“必须立即”过于绝对。2.琼脂是一种优良的凝固剂，因为它不被大多数微生物分解。答案正确3.高压蒸汽灭菌锅使用前必须排尽冷空气，否则达不到灭菌温度。答案正确4.培养基的pH值在灭菌后通常会略有下降。答案正确解析高温灭菌过程中部分成分分解产生酸性物质，pH可能略有下降。5.配制固体培养基时，琼脂应在调节pH之后加入。答案错误解析通常先将琼脂加入水中加热溶解，再调节pH，以保证琼脂均匀分散。6.含糖培养基与含氮培养基应分别灭菌后再混合，可减少美拉德反应。答案正确7.干热灭菌适用于培养基的灭菌。答案错误解析干热灭菌温度高（160～180℃），会使培养基脱水焦化，不适合培养基灭菌。8.选择性培养基可以通过添加抗生素来抑制非目标菌生长。答案正确9.配制半固体培养基时，琼脂的用量通常为0.2%～0.5%。答案错误解析半固体培养基琼脂用量一般为0.5%～0.8%，固体培养基为1.5%～2.0%。10.培养基的碳氮比过高时，微生物生长会受到氮源限制。答案正确解析C/N过高即氮源相对不足，影响蛋白质和核酸合成。五、简答题（每题5分，共15分）1.简述配制培养基的一般操作流程。答案称量→加水加热溶解→调节pH→定容至所需体积→分装→灭菌→冷却→无菌检查或倒平板/摆斜面。2.高压蒸汽灭菌时，为什么要排尽灭菌器内的冷空气？答案冷空气残留会使灭菌器内温度分布不均，压力虽达到但温度达不到灭菌要求，导致灭菌不彻底。排尽冷空气可保证蒸汽饱和，使温度与压力对应，达到121℃。3.简述选择性培养基的设计原则。答案根据目标微生物的营养需求或抗性特点，添加特定营养成分或抑制剂，抑制非目标微生物生长，同时有利于目标微生物生长；也可通过调节pH、渗透压等条件实现选择作用。六、计算题（每题10分，共20分）1.现需配制500mL的LB液体培养基，其配方为：胰蛋白胨10g/L，酵母提取物5g/L，NaCl10g/L。请计算各成分所需质量。若需配制成固体培养基，需加入琼脂至终浓度1.5%，应加入多少克琼脂？答案胰蛋白胨：10g/L×0.5L=5g酵母提取物：5g/L×0.5L=2.5gNaCl：10g/L×0.5L=5g琼脂：1.5%（w/v）即15g/L，0.5L需15g/L×0.5L=7.5g解析注意单位换算，1.5%表示每100mL含1.5g，即15g/L。计算时统一使用升和克。2.某培养基配方中葡萄糖浓度为20g/L，现需配制250mL培养基。若已有10%（w/v）葡萄糖母液，应量取多少mL母液？若采用过滤除菌，灭菌后补加，简述理由。答案所需葡萄糖质量：20g/L×0.25L=5g母液浓度