阿尔茨海默病血液生物标志物检测前样本处理操作规范2026版全解析：采集离心储存运输质量控制与临床应用指南

临床检验·操作规范·质量控制阿尔茨海默病血液生物标志物检测前样本处理操作规范（2026版）国家神经系统疾病医疗质量控制中心·认知障碍疾病质控专病组采集·离心·分装·储存·运输·检测前处理·质量控制2026年7月发布·临床试行版目录02CONTENTS01规范概述与制订背景规范基本信息·制订背景·AD疾病概述·生物标志物·影响因素·国际进展02血液采集流程采集前准备·采血物品·操作规范·溶血预防·采集后运送03血液处理流程血清收集·血浆收集·离心参数·吸样混匀·分装·质控品·存储·记录04样本运输与检测前处理运输条件·冻存处理·样本稀释·检测顺序·桥接样本·测定顺序05质量控制与未来展望内部质控·不合格样本·外部比对·未来展望本规范共七章，涵盖AD血液生物标志物检测前全流程操作标准01规范概述与制订背景规范基本信息·制订背景·AD疾病概述·生物标志物·影响因素·国际进展第一章·规范概述与制订背景04本规范由国家神经系统疾病医疗质量控制中心牵头制订，2026年7月发布，为AD血液生物标志物检测提供质量控制依据规范基本信息规范名称阿尔茨海默病血液生物标志物检测前样本处理操作规范版本2026版（临床试行版）发布时间2026年7月制订单位国家神经系统疾病医疗质量控制中心牵头单位陆军军医大学大坪医院神经内科参与单位宣武医院·华山医院·协和医院适用范围各级医疗机构认知障碍诊疗工作规范性质操作规范·质量控制依据标准化实验室操作是检测质量的基础保障来源：阿尔茨海默病血液生物标志物检测前样本处理操作规范（2026版）第一章·规范概述与制订背景05AD疾病修饰治疗药物进入临床，早期诊断需求迫切，血液生物标志物检测前标准化成为关键质量瓶颈制订背景与核心意义01临床需求AD疾病修饰治疗药物进入临床应用，早期诊断和精准诊断愈发必要，血液生物标志物成为早期筛查重要途径02技术进展AD血液生物标志物诊断研究取得显著进展，Aβ42/40、p-tau181、p-tau217等指标已进入临床应用阶段03质量瓶颈Aβ和tau蛋白易聚集、血液中水平低、检测误差影响大，检测前因素显著影响结果可靠性和研究间可比性04标准缺失我国AD血液生物标志物研究、产品研发和临床应用兴起，亟需统一的检测前样本处理操作规范05国际接轨参照阿尔茨海默病协会全球生物标志物标准化联盟（GBSC）推荐意见，结合我国实践经验制订来源：规范前言及制订背景说明第一章·规范概述与制订背景06阿尔茨海默病是危害老年健康的重大疾病，病理改变早于临床症状15-20年，早期诊断是干预关键AD疾病分期与诊断窗口临床前ADAβ沉积开始，无临床症状诊断意义生物标志物可检测，干预黄金期MCI期轻度认知障碍，日常生活能力保留诊断意义p-tau升高，诊断关键窗口期痴呆期认知功能显著下降，影响日常生活诊断意义生物标志物明显异常，治疗效果有限血液生物标志物的临床价值早期筛查可在症状出现前检测病理改变，适用于大规模人群筛查辅助诊断结合临床评估，提高AD诊断准确性，减少有创检查病情监测动态监测生物标志物变化，评估疾病进展和治疗效果药物研发作为临床试验终点指标，加速疾病修饰治疗药物研发来源：AD诊断标准演变及血液生物标志物临床应用研究第一章·规范概述与制订背景07与脑脊液检测和PET成像相比，血液生物标志物具有采集简便、成本低、可重复、适用于大规模筛查的显著优势AD生物标志物检测方法对比检测方法标本类型创伤性成本适用场景血液生物标志物静脉血无创（穿刺）低大规模筛查、临床常规、动态监测脑脊液检测腰椎穿刺有创中鉴别诊断、科研、疑难病例Aβ-PET成像静脉注射示踪剂微创（注射）高病理确认、科研、临床试验Tau-PET成像静脉注射示踪剂微创（注射）高tau病理评估、科研、临床试验MRI结构成像无无创中高脑结构评估、排除其他病因血液生物标志物的核心优势采集简便静脉采血，临床常规操作，患者接受度高成本低廉检测费用远低于PET成像和脑脊液检测可重复性可多次采血动态监测，适用于纵向研究可标准化检测前流程可标准化，便于多中心研究和临床互认来源：AD生物标志物检测方法临床应用比较及卫生经济学评估第一章·规范概述与制订背景08AD核心血液生物标志物包括Aβ42/40比值、p-tau181、p-tau217、t-tau、NfL和GFAP，分别反映不同病理过程AD核心血液生物标志物一览Aβ42/Aβ40淀粉样蛋白比值反映脑内Aβ沉积，AD病理核心指标，对冻融和延迟处理最敏感p-tau217磷酸化tau217AD特异性最高的tau标志物，区分AD与其他痴呆，对溶血敏感p-tau181磷酸化tau181临床应用最广泛的p-tau指标，诊断效能好，检测平台多t-tau总tau蛋白反映神经元损伤，AD中升高，非特异性，受采血体积影响NfL神经丝轻链蛋白反映轴突损伤，神经退行性疾病通用标志物，稳定性较好GFAP胶质纤维酸性蛋白反映星形胶质细胞活化，AD早期升高，稳定性较好来源：AD血液生物标志物临床应用中国指南（2024版）及国际诊断标准第一章·规范概述与制订背景09检测前因素通过蛋白吸附、降解、溶血污染和浓度稀释等机制影响生物标志物检测结果，Aβ和tau最为敏感检测前因素影响机制与敏感标志物采血管材质聚苯乙烯材质导致Aβ和t-tau水平显著降低，PET/PP材质影响较小敏感标志物Aβ42、Aβ40、t-tau延迟离心全血延迟离心导致Aβ水平显著下降，4℃暂存可减轻影响敏感标志物Aβ42、Aβ40（最敏感）冻融次数Aβ40第2次冻融显著下降，Aβ42和t-tau第3次显著下降敏感标志物Aβ40、Aβ42、t-tau溶血溶血导致p-tau217/Aβ42比值受影响，中重度溶血需重新采集敏感标志物p-tau217/Aβ42空腹状态非空腹p-tau181更高，Aβ42/Aβ40、NfL、GFAP更低敏感标志物p-tau181、Aβ、NfL、GFAP采血体积采血管实际采血体积过少可能导致t-tau水平降低敏感标志物t-tau来源：规范文献综述及AD血液生物标志物检测前影响因素研究第一章·规范概述与制订背景10阿尔茨海默病协会通过全球生物标志物标准化联盟推动检测流程标准化，本规范参照国际推荐并结合中国实践国际标准化进展与本规范定位国际标准化进程2009年GBSC启动脑脊液生物标志物检测质控项目2019年质控扩展至血液生物标志物2024年AD协会发布血液生物标志物临床使用建议2025年NACC发布血液和CSF生物标志物检测前指南2025年GBSC发布基于证据的标准化样本处理共识2026年中国发布AD血液生物标志物检测前操作规范本规范制订原则国际接轨参照GBSC推荐意见和国际指南，与国际标准保持一致中国国情结合我国医疗机构常规实践和条件，确保可操作性兼顾需求同时满足临床诊断和科学研究的质量控制需求证据基础系统检索PubMed、知网、万方数据库，基于循证证据专家共识联合国内顶尖神经内科中心，征求医疗机构和企业建议动态完善根据研究进展和临床应用反馈持续优化修订来源：规范制订说明及国际AD生物标志物标准化进展02血液采集流程采集前准备·采血物品·操作规范·溶血预防·采集后运送第二章·血液采集流程12采血前饮食与药物准备：空腹8-14h为宜，采血前24h避免高脂高糖饮食和剧烈运动，停用影响标志物的药物须记录采血前饮食要求空腹时间至少8h，12-14h为宜，不超过16h；糖尿病患者不超过12h采血时间建议7:00-9:00，避免昼夜节律对标志物的影响饮食限制采血前24h避免高脂、高糖饮食，避免饮酒饮水限制可少量饮水，避免大量饮水导致血液稀释药物与补充剂影响抗凝药物华法林、肝素等可能影响凝血功能和血浆分离，须记录用药情况抗炎药物非甾体抗炎药可能影响炎症相关标志物，采血前应记录维生素补充维生素B12、叶酸等可能影响同型半胱氨酸等标志物中药保健品部分中药和保健品可能影响肝功能和血液成分，须详细记录来源：规范第二章血液采集流程-采血前准备第二章·血液采集流程13运动和情绪波动可能影响血液标志物水平，采血前24h避免剧烈运动，采血前静息至少5min，同一研究统一采血时段运动与情绪管理要求剧烈运动采血前24h不宜剧烈运动，运动可能导致肌肉损伤标志物升高情绪激动采血当天宜避免情绪激动，应激状态可能影响神经内分泌静息时间采血前宜静息至少5min，使生理状态稳定后再采血体位影响采血时保持坐位，避免站立或卧位差异导致的血液浓缩采血时间与昼夜节律标志物昼夜节律性·Aβ42、Aβ40、t-tau具有较弱的昼夜节律性变化·Aβ42/Aβ40、p-tau217、p-tau181、p-tau231水平相对稳定·为减少采集时间引起的潜在偏差，建议同一研究所有受检者在同一时间段采血·宜安排在7:00-9:00采血采血时间记录·采血完成后立即使用书面或电子记录方式记录采集时间·精确到分钟，便于后续质量控制和数据分析·采集时间是样本可追溯性的关键信息·延迟离心时间计算的基准来源：规范第二章血液采集流程-运动情绪与采血时间第二章·血液采集流程14输液患者采血须避开输液侧手臂，正在输液的患者应在输液结束后至少1h采血，特殊情况须记录输液部位和药物名称输液对血液样本的影响血液稀释输液侧手臂采血可能导致血液被输液液体稀释，标志物浓度偏低药物干扰输液药物可能直接干扰检测，或改变血液成分影响标志物稳定性电解质紊乱大量输液可能导致电解质浓度变化，影响相关检测结果pH值改变输液可能改变血液pH值，影响蛋白质标志物的稳定性和检测输液患者采血规范避开输液侧优先在非输液侧手臂采血，避免输液液体直接污染样本等待时间正在输液的患者，应在输液结束后至少1h再采血紧急情况如必须在输液期间采血，须在输液对侧手臂采血，并详细记录记录信息记录输液部位、输液药物名称、输液速度、采血与输液的时间关系结果标注检测报告中须注明样本采集时患者正在输液，供临床参考重新采集如怀疑样本被输液污染，应重新采集合格样本来源：规范第二章血液采集流程-输液影响与采血规范第二章·血液采集流程15采血管材质和类型显著影响标志物水平，推荐使用PET材质采血管，全过程使用低吸附PP材质耗材，统一品牌减少批次差异采血管材质对标志物水平的影响材质类型对标志物影响推荐程度适用场景PET（聚对苯二甲酸乙二醇酯）Aβ、t-tau、p-tau水平无明显差异强烈推荐样本采集首选材质PP（聚丙烯）Aβ、t-tau、p-tau水平无明显差异推荐样本处理、储存、检测低密度聚乙烯Aβ、t-tau、p-tau水平无明显差异可接受部分采血管使用聚苯乙烯Aβ和t-tau水平显著降低不推荐避免用于AD标志物检测采血管选择核心原则材质统一采集用PET材质，处理/储存/检测全过程用低吸附PP材质品牌统一整个研究始终使用相同品牌采血管，尽可能减少批次数低吸附耗材样本管和移液器吸头使用蛋白低吸附材质，减少标志物黏附添加剂注意采血管表面涂层、添加剂可能干扰检测，是分析前变异来源血浆优先AD生物标志物检测多采用血浆，部分p-tau产品仅适用于血浆EDTA抗凝收集血浆建议使用EDTA钾盐抗凝采血管，K2与K3-EDTA无差异来源：规范第二章血液采集流程-采血物品准备第二章·血液采集流程16EDTA钾盐抗凝管是血浆标志物检测首选，22G采血针可减少溶血，采血管和采血针使用前须检查有效期和包装完整性抗凝剂选择与比较抗凝剂适用标志物优点注意事项EDTA-K2/K3Aβ、tau、NfL抗凝效果好，标志物稳定首选抗凝剂肝素锂部分生化指标不影响电解质可能影响部分免疫检测柠檬酸钠凝血功能保护凝血因子稀释效应，需校正促凝剂/血清GFAP等血清样本稳定需等待凝血，耗时较长采血管使用要求使用前检查采血管有效期、包装完整性、有无破损EDTA管采血后立即轻轻颠倒混匀8-10次，避免剧烈振荡采血量应达到采血管标示量，避免抗凝剂比例不当不同抗凝剂采血管不可混用，按检测项目要求选择采血针选择与使用22G采血针推荐使用，管径适中，可减少溶血发生21G采血针适用于静脉条件好的受检者，血流速度快23G采血针适用于静脉细的受检者，但可能增加溶血风险蝶翼针适用于儿童、老年人或静脉条件差的受检者真空采血系统推荐使用，采血速度均匀，减少溶血和凝血一次性使用采血针必须一次性使用，用后按医疗废物处理检查包装使用前检查采血针包装完整性和有效期避免反复穿刺尽量一次穿刺成功，反复穿刺增加溶血风险来源：规范第二章血液采集流程-采血物品准备第二章·血液采集流程17规范采血操作包括身份确认、静脉选择、止血带绑扎、消毒、穿刺和采集，每一步都影响样本质量和检测结果静脉采血操作八步规范01身份确认核对姓名、性别、年龄、住院号等信息，使用双重非唯一信息交叉核对，确认准备情况（空腹、运动、药物）02信息标记推荐使用电子条形码标记采血管，减少人为错误，确保样本与受检者信息准确关联03静脉选择首选肘前区（正中、头、贵要静脉），无法时选手背浅表静脉，不同部位标志物差异尚不清楚04止血带绑扎时间不宜超过1min，宜在采集第一管血时松开，避免过紧或时间过长导致溶血05消毒待消毒剂自然干燥后进行穿刺，以尽可能避免样本溶血，不可未干即穿刺06穿刺保持针头斜面向上，采血针与手臂呈30°左右角度刺入静脉，动作轻柔避免穿透血管07采集按序采集不同添加剂管，实际采血体积大于管容积50%，采集后立即轻柔颠倒混匀08记录采血完成后立即书面或电子记录采集时间，精确到分钟，作为延迟处理时间计算基准来源：规范第二章血液采集流程-静脉血液标本采集操作第二章·血液采集流程18溶血是样本质量不合格的最常见原因，p-tau217/Aβ42对溶血敏感，中重度溶血须重新采集，规范操作可有效预防溶血的影响与判定溶血对检测的影响·p-tau217/Aβ42比值对溶血敏感·溶血改变待测物浓度、干扰化学反应·细胞内成分释放导致标志物假性升高·中重度溶血（肉眼红色或深红色）应重新采集·轻微溶血可检测但须在报告中注明溶血程度肉眼判定标准溶血程度样本外观处理方式正常澄清透明淡黄色/稻草黄色正常检测轻微溶血淡红色、橙红色可检测，报告注明中度溶血红色建议重新采集重度溶血深红色必须重新采集溶血预防八项注意消毒干燥消毒后穿刺部位自然干燥，不可未干即穿刺避血肿不可穿过血肿部位采血，血肿部位血液已溶血针头牢固如使用注射器采血，宜确保针头牢固安装以防出现泡沫避免用力使用注射器时避免过度用力抽拉针栓，负压过大导致红细胞破裂轻柔混匀轻柔颠倒混匀含添加剂的标本，不可剧烈震荡合适针头选用22G采血针，过细针头增加机械压力和溶血风险止血带绑扎时间不超过1min，避免过紧导致血液淤滞和溶血运输平稳运送过程保持采血管直立，避免颠簸，减少溶血发生来源：规范第二章溶血预防及WS/T225-2024临床化学检验血液标本采集与处理第二章·血液采集流程19采血后30min内室温运送至实验室，2h内完成离心，避免阳光直射和剧烈振荡，运送过程保持样本直立，记录运送时间和条件采集后即时处理要求立即混匀EDTA管采血后立即轻轻颠倒混匀8-10次，促凝管轻轻颠倒5次避免振荡避免剧烈振荡和摇晃，防止溶血发生直立放置样本应直立放置，避免倾斜或倒置，减少管壁接触避免阳光避免阳光直射和高温环境，防止标志物降解及时运送采血后30min内室温运送至实验室，最迟不超过1h及时离心采血后2h内完成离心分离，避免细胞代谢影响标志物运送过程管理温度控制室温（15-25℃）运送，避免过热或过冷环境防震措施使用专用样本运送箱，防止剧烈振动和碰撞防漏措施确保采血管盖紧，使用防漏袋包装，防止样本泄漏生物安全按生物安全要求包装和运送，防止交叉污染时间记录记录采血时间、开始运送时间、到达实验室时间状态检查实验室接收时检查样本状态，记录有无溶血、凝血等来源：规范第二章血液采集流程-采集后保存与运送03血液处理流程血清收集·血浆收集·离心参数·吸样混匀·分装·质控品·存储·记录第三章·血液处理流程21血清收集需静置30-60min待血凝块形成，1500-2000×g离心10-15min，2h内完成全过程，Aβ40第2次冻融即显著下降血清收集五步流程01静置促凝管采集后立即轻柔颠倒混匀，室温直立静置30-60min，金黄管30min，红管30-60min02离心1500-2000×g离心力，室温离心10-15min，含分离胶可缩短至10min，4℃暂存后须4℃离心03吸样用低吸附吸头从液面上层轻柔抽取血清，留下底部5mm以上上清，转移至低吸附锥形管04混匀血清汇集后轻柔翻转或移液器吹打8-10次混合，确保均匀性，避免产生气泡05分装等分成250μl至1ml到低吸附冻存管，锥形管和样本管置于冰上，减少冻融次数标准化处理流程确保血清样本质量关键提示：凝血时间过短导致纤维蛋白残留堵塞探针，过长导致细胞裂解污染；建议2h内完成全过程。来源：规范第三章血液处理流程-从促凝管中收集血清第三章·血液处理流程22EDTA血浆收集：采血后立即混匀，室温静置30min促凝，2000×g离心10min，吸取上清血浆分装，避免吸取白细胞层和红细胞EDTA血浆收集步骤01采血混匀EDTA管采血后立即轻轻颠倒混匀8-10次，确保抗凝剂充分混合02室温静置室温（15-25℃）静置，不需要等待凝血，EDTA抗凝不凝固03离心分离2000×g离心10min，室温离心，避免温度变化影响标志物04吸取血浆离心后立即吸取上层血浆，使用移液器缓慢吸取，避免搅动05避免污染不要吸取白细胞层（白膜层）和红细胞，避免细胞成分污染06分装保存将血浆分装至低吸附PP管，每管330μl左右，立即-80℃保存血浆与血清处理差异项目EDTA血浆血清抗凝剂EDTA-K2/K3无（促凝剂）静置时间不需要30-60min促凝离心参数2000×g10min1500-2000×g10-15min产量约330μl/管约250μl-1ml标志物适用Aβ、tau、NfLGFAP等注意事项离心后应在2h内完成血浆分离和分装分装时使用低吸附PP管，减少标志物黏附损失每管分装体积不宜过大，避免反复冻融分装后立即放入-80℃冰箱或液氮保存来源：规范第三章血液处理流程-血浆收集流程第三章·血液处理流程23离心参数直接影响标志物回收率：血清1500-2000×g离心10-15min，血浆2000×g离心10min，离心温度室温，避免温度波动离心参数对比参数血清（促凝管）EDTA血浆肝素血浆说明离心力1500-2000×g2000×g2000×g离心力影响分离效果离心时间10-15min10min10min时间过长可能导致溶血离心温度室温（15-25℃）室温室温避免4℃离心导致蛋白沉淀升降速中等中等中等过快升降速可能导致溶血离心后处理2h内分离2h内分离2h内分离及时分装保存离心操作注意事项平衡对称离心管必须对称放置，重量差不超过0.1g，避免离心机振动避免过载严格按照离心机最大载量放置，不可超载运行温度控制使用室温离心，避免低温离心导致蛋白质沉淀和标志物损失及时处理离心完成后立即取出样本，避免长时间放置导致细胞代谢设备校准离心机定期校准转速和时间，建立维护档案，记录校准结果异常处理离心过程中如出现异常振动或噪音，立即停止运行并检查来源：规范第三章血液处理流程-离心参数详解第三章·血液处理流程24吸样时移液器尖端置于液面下2mm，一次性完成吸样，避免反复吸打；混匀时轻轻吹打3次，避免产生气泡和泡沫，防止蛋白变性规范吸样操作选择吸头使用与移液器匹配的低吸附吸头，确保吸头安装紧密无漏气预润洗吸样前用样本预润洗吸头2-3次，减少吸头壁吸附导致的误差吸样深度吸头尖端置于液面下2mm以内，避免吸入空气或触碰管底沉淀吸样速度缓慢匀速吸样，避免过快产生气泡或吸入细胞沉淀一次性吸样一次性完成吸样，避免反复吸打导致蛋白变性或溶血排样操作排样时吸头紧贴管壁，缓慢排出，最后停留1-2秒确保排尽混匀操作规范吹打混匀加入稀释液后立即用移液器吹打3次，确保充分混匀避免气泡吹打时避免产生气泡和泡沫，泡沫可能导致蛋白变性避免振荡不要剧烈振荡或涡旋混匀，可能导致蛋白降解和溶血颠倒混匀采血管混匀采用轻轻颠倒方式，EDTA管颠倒8-10次混匀后离心混匀后如需要离心，应立即离心，避免放置时间过长交叉污染不同样本间更换吸头，避免交叉污染无菌操作全程保持无菌操作，防止样本被污染记录操作记录吸样体积、稀释比例、操作人、操作时间来源：规范第三章血液处理流程-吸样与混匀操作第三章·血液处理流程25样本分装使用低吸附PP管，血清每管250μl-1ml，血浆一般330μl/管，冻融次数不超过2次，分装后立即-80℃保存分装管选择与要求低吸附PP管推荐使用聚丙烯（PP）低吸附离心管，减少蛋白标志物黏附管盖密封选择螺旋盖或按压盖密封良好的管子，防止样本挥发和污染体积选择根据检测需要选择合适体积，一般0.5ml或1.5ml离心管无菌无酶使用无菌、无DNase/RNase、无热原的管子，确保样本质量提前标记分装前在管壁和管盖标记样本编号、日期、操作者等信息一次性使用分装管一次性使用，不可重复使用，避免交叉污染分装体积与冻融控制样本类型推荐分装体积最大冻融次数血清250μl-1ml不超过2次EDTA血浆约330μl/管不超过2次质控品按检测需要不超过2次冻融影响与控制血清Aβ40在第2次冻融后浓度显著下降血浆标志物冻融不超过2次，超过可能影响结果分装体积不宜过大，按需分装减少冻融次数分装后立即放入-80℃冰箱或液氮保存解冻时室温或4℃缓慢解冻，避免热水浴解冻后轻轻混匀，避免剧烈振荡来源：规范第三章血液处理流程-样本分装规范第三章·血液处理流程26质控品应来自相同人群和采集流程，覆盖低中高浓度范围，大样本量收集后混合分装，用于监测检测系统稳定性和批次效应质控品收集要求来源人群质控品应来自与研究样本相同的人群，确保基质效应一致采集流程按照与研究样本完全相同的采集、处理、分装流程制备质控品浓度范围质控品应覆盖标志物浓度的整体分布范围，包括低、中、高浓度样本量收集足够大的样本量，混合后分装，确保整个研究期间使用混合均匀多个样本混合时应充分混匀，确保每管质控品浓度一致分装保存按单次使用量分装，-80℃保存，冻融次数不超过2次质控品使用与监测每批检测每批检测至少插入1-2个质控品，监测检测系统稳定性质控图建立质控图，监测质控结果趋势，及时发现系统偏差失控处理质控结果失控时，应查找原因，必要时重新检测该批样本批次校正使用质控品数据进行批次间校正，减少批次效应影响长期监测整个研究期间使用相同质控品，监测检测系统长期稳定性记录保存记录质控品批号、使用日期、检测结果，保存质控记录更换质控品质控品用完前提前制备新批次，并进行新旧批次比对室间质评参加实验室间质量评估，与其他实验室比对检测结果来源：规范第三章血液处理流程-质控品收集与使用第三章·血液处理流程27样本长期存储推荐-80℃超低温冰箱或液氮，避免-20℃反复冻融，存储期间避免温度波动，定期监测冰箱温度不同存储温度适用范围室温15-25℃短期运输不超过3h部分标志物开始降解冷藏2-8℃短期保存不超过24h稳定性较好-20℃中期保存不超过1个月不推荐长期保存-80℃长期保存数年推荐长期保存方式液氮-196℃超长期保存数十年适用于珍贵样本存储管理要求每日记录冰箱温度，确保温度波动在正常范围，异常及时处理减少冰箱开门次数，避免温度波动影响样本稳定性按样本类型、采集时间分类存放，记录具体存储位置珍贵样本分两处存放，定期盘点数量和状态来源：规范第三章血液处理流程-样本存储条件与管理第三章·血液处理流程28建立完善的样本记录系统，采用纸质和电子记录相结合，记录从采集到最终处理的全过程信息，为每个样本赋予唯一识别编号，确保全程可追溯样本记录核心信息受检者信息姓名、性别、年龄、住院号/诊疗卡号、身份证号采集信息采集时间、采集人员、采集部位、采集量、样本外观运输信息运输时间、运输方式、运输条件、接收时间、接收人员处理信息预处理情况、离心条件（力/温度/时间）、吸样混匀操作存储信息储存温度、储存时间、冻存位置、冻融次数检测信息检测平台、检测试剂批号、检测时间、检测人员、质控结果样本追踪与管理唯一编号为每个样本赋予唯一识别编号，贯穿整个样本处理流程条码管理推荐使用电子条形码，减少人为错误，提高样本管理效率位置索引在样本储存区域建立样本存放位置索引，便于快速定位全程追溯确保样本从采集到检测的每个环节都可追溯，责任到人数据安全电子记录系统须符合数据安全要求，保护受检者隐私定期备份电子记录定期备份，防止数据丢失，纸质记录妥善保管审计追踪记录系统应具备审计追踪功能，记录所有操作和修改保存期限样本记录保存期限应符合相关法规和机构要求，至少保存研究结束后5年来源：规范第三章血液处理流程-记录与追踪04样本运输与检测前处理运输条件·冻存处理·样本稀释·检测顺序·桥接样本·测定顺序第四章·样本运输与检测前处理30血浆样本运输按时间选择温度：3h内室温、3-24h冷藏、24h以上冷冻，全血运输条件严苛易溶血，应尽可能使用血浆或血清运输血浆样本运输条件与时间要求运输时间运输温度标志物稳定性适用场景注意事项<3小时室温15-25℃4h内无明显变化院内/近距离运输保持采血管直立，避免颠簸3~24小时冷藏2-8℃24h对Aβ42/40、GFAP、NfL、p-tau181无显著影响中距离运输使用冷藏箱，冰袋不直接接触样本>24小时-20℃或-80℃-20℃延迟2周对Aβ、t-tau、p-tau无显著影响远距离/邮寄干冰运输，干冰用量维持到交付后24h全血运输严苛条件运输不当易溶血不推荐尽可能使用血浆或血清样本运输样本运输通用要求包装完好包装完好，防止渗漏和污染，使用生物安全运输盒妥善固定运输过程中妥善固定样本，避免剧烈晃动和碰撞可靠快递邮寄选择可靠快递公司，确保符合生物安全要求及运输条件干冰用量干冰运输用量应维持到预计交付时间后24h，确保全程低温温度记录有条件时使用温度记录仪，监测运输过程温度变化接收检查接收时检查样本状态，确认运输条件符合要求，异常样本记录并评估来源：规范第四章样本运输-血浆样本运输条件第四章·样本运输与检测前处理31血清转运参照血浆条件，干冰运输样本须-80℃放置至少24h再检测，避免温度波动和干冰解冻改变pH值影响检测结果血清样本运输条件参照血浆目前缺乏血清转运条件研究数据，建议参照血浆转运条件执行3h内室温（15-25℃）运输，避免阳光直射和高温环境3-24h冷藏（2-8℃）运输，使用冰袋或冷藏运输箱超过24h-20℃或-80℃冷冻运输，使用干冰或冷冻运输箱避免全血尽可能使用血浆或血清样本运输，避免全血运输直立放置运输过程中样本直立放置，避免倾斜或倒置干冰运输注意事项干冰用量维持到预计交付时间后24h，确保全程低温放置24h样本在-80℃放置至少24h再进行检测温度波动避免温度波动对蛋白质稳定性的影响pH值影响干冰解冻可能改变样本pH值，影响检测结果包装规范使用专用干冰运输箱，确保通风，防止压力升高标识清晰外包装标注"干冰"、"生物样本"、"易碎"等标识接收检查接收时检查干冰剩余量和样本状态异常处理干冰完全挥发或样本解冻的，须评估样本质量来源：规范第四章样本运输-血清样本运输与干冰运输第四章·样本运输与检测前处理32冻存样本建议-80℃至少存放24h稳定后检测，解冻时间和温度参考检测平台说明书，大部分平台要求解冻后离心，加样前记录溶血、脂血、絮状物等异常状态冻存样本检测前处理六步流程01稳定期冻存样本建议在-80℃冰箱中至少存放24h，稳定后再进行检测02解冻解冻时间和温度建议参考检测平台的说明书，不同平台要求可能不同03离心大部分检测平台要求冻存血浆样本在解冻后进行离心，具体参数参考平台要求04质量检查加样前记录冻存样本解冻后的异常状态，如是否有溶血、脂血、絮状物等05运输确认经过远程运输的样本，应确认样本运输条件符合要求，并对样本进行质量控制06及时检测解冻后应及时检测，避免室温放置时间过长导致标志物降解样本异常状态判定与处理溶血淡红色、橙红色、红色、深红色p-tau217/Aβ42敏感，中重度影响大中重度重新采集，轻微注明脂血乳白色浑浊干扰光学检测，影响光散射可高速离心去除脂质，或注明絮状物可见纤维蛋白或其他沉淀可能堵塞探针，影响检测准确性离心后取上清检测，或重新处理黄疸深黄色可能干扰比色检测一般影响较小，注明即可来源：规范第五章样本检测前处理-冻存样本处理第四章·样本运输与检测前处理33样本稀释须按试剂说明书进行，优先使用全自动液体处理平台，手动稀释须规范吸样、混匀、无菌操作，使用配套稀释液和低吸附吸头样本稀释七项规范稀释液选择使用检测试剂盒配套的样本稀释液，避免因试剂成分差异影响标志物稳定性和检测结果吸样操作移液器吸取样本时，吸头尖端需置于液面下2mm以内，一次性完成吸样，避免反复吸打打入方式向稀释管中打入样本时，吸头保持垂直、悬空状态，不可接触样本或管壁，一次性打入混匀要求一次性加入对应体积稀释液后，立即用移液器吹打3次，确保样本与稀释液充分混匀，避免局部浓度不均无菌防污染样本稀释过程保持无菌操作，防止样本或稀释液被污染，同时避免不同样本间的交叉污染稀释比例严格按照检测试剂说明书的稀释比例操作，稀释过度导致结果偏高，稀释不足导致结果偏低取样量在试剂盒要求范围内选择合适的取样体积，取样量越小，稀释造成的误差越大关键提示：尽可能选择全自动液体样品处理平台或全自动样品处理仪进行样本稀释，以减少手动稀释样本时由人为操作造成的误差；使用蛋白低吸附移液吸头，减少标志物的黏附损失。来源：规范第五章样本检测前处理-样本稀释规范第四章·样本运输与检测前处理34批次间变异和批内检测顺序效应可能带来偏倚，须对检测顺序随机化，小样本研究推荐区组随机化，检测者和数据分析者应对分组保持盲态检测顺序随机化方法随机化方法适用场景优缺点简单随机化大样本研究（n>=200）易于实现，但可能组间分布不均区组随机化小样本研究（n<200）确保样本均匀分配，推荐使用分层随机化多协变量研究控制协变量潜在不均匀分布协变量自适应复杂研究设计动态调整分配，统计方法复杂纵向样本检测策略·建议同时测量同一参与者所有时间点的样本·尽可能降低批次变异的影响·所有样本收集完毕后同时进行分析可减少变异·如需分批检测，须使用桥接样本校正批次效应盲法与偏倚控制检测者盲法检测者在测量结果最终确定之前应对分组保持盲态分析者盲法数据分析者在测量结果最终确定之前应对分组保持盲态排布者例外样本分析顺序排布者可以了解分组信息，用于随机化排布减少期望偏倚盲法可减少检测者和分析者的期望偏倚，提高结果客观性记录盲态记录盲态实施情况，包括破盲时间、破盲原因、破盲人员结果锁定测量结果最终确定后方可破盲，破盲后不得修改检测结果来源：规范第五章样本检测相关事项-检测顺序随机化与盲法第四章·样本运输与检测前处理35不同批次试剂或不同时间/实验室分析须使用桥接样本，桥接样本应来自相同队列并涵盖浓度整体分布，纵向研究须储备试剂和质控品并监测长期稳定性桥接样本使用规范使用场景必须使用不同批次试剂，或需要在不同时间或实验室进行分析时实现方式通过重复测量样本来实现桥接，校正批次间和实验室间差异样本来源理想情况下，桥接样本应来自相同的样本队列浓度范围桥接样本应涵盖研究样本测量值浓度的整体分布范围数量要求桥接样本数量应足够，一般不少于20例，覆盖低中高浓度统计校正使用桥接样本数据进行统计校正，将不同批次结果归一化纵向研究检测规划试剂储备整个研究期间储备试剂（包括质控样本和桥接样本）与耗材批次变化纵向研究随访期可能超过试剂保质