2026年病理检验技术试题(附答案)

2026年病理检验技术试题(附答案)一、单项选择题（每题2分，共40分）1.以下关于组织固定的描述，错误的是：A.10%中性福尔马林固定液的甲醛含量约为4%B.Bouin液固定的组织需流水冲洗去除苦味酸C.电镜标本固定首选2.5%戊二醛D.冷冻切片标本可直接用95%乙醇固定2.常规石蜡切片的理想厚度为：A.1-2μmB.3-5μmC.6-8μmD.9-10μm3.HE染色中，伊红Y染色过度时，正确的处理方法是：A.用稀氨水返蓝后重新染色B.用75%乙醇快速分化C.用饱和碳酸锂溶液中和D.用清水浸泡脱染4.免疫组化实验中，“空白对照”指的是：A.不加一抗，其余步骤相同B.用已知阳性组织替代待测组织C.用PBS替代一抗和二抗D.用同型无关抗体替代一抗5.液基细胞学制片中，“去黏液”步骤常用的试剂是：A.95%乙醇B.胃蛋白酶溶液C.苏木精染液D.中性树胶6.组织脱水时，若从70%乙醇直接进入纯乙醇，最可能导致的问题是：A.组织收缩变硬B.脱水不彻底C.透明剂渗透困难D.切片出现裂隙7.荧光原位杂交（FISH）实验中，“变性”步骤的主要目的是：A.破坏组织中的蛋白质B.使DNA双链解离为单链C.增强探针的穿透性D.去除样本中的RNA8.以下哪种情况不属于病理标本接收的“不合格标本”？A.标本袋外无患者姓名B.胃黏膜活检标本用10%福尔马林固定C.卵巢肿瘤标本体积5cm×4cm×3cm，固定液量100mlD.胸腹水标本送检时已放置超过4小时未处理9.常规石蜡包埋时，包埋机温度应设定为：A.40-45℃B.50-55℃C.60-65℃D.70-75℃10.免疫组化结果判读时，“假阴性”最常见的原因是：A.一抗浓度过高B.抗原修复不充分C.二抗孵育时间过长D.封片时气泡过多11.细胞学涂片瑞氏染色后，细胞胞质偏红、胞核偏淡，可能的原因是：A.染色时间过长B.缓冲液pH偏酸C.缓冲液pH偏碱D.涂片过厚12.组织透明时，若二甲苯浑浊，最可能的原因是：A.脱水不彻底，组织内残留水分B.透明时间过短C.二甲苯浓度过高D.组织本身含脂类物质13.分子病理检测中，qPCR实验的“熔解曲线”分析主要用于：A.验证引物特异性B.计算目标基因拷贝数C.检测样本DNA浓度D.判断PCR反应效率14.病理技术实验室生物安全柜使用时，正确的操作是：A.实验过程中频繁开关玻璃门B.物品摆放时避免遮挡回风口C.未戴手套直接处理新鲜组织D.实验结束后立即关闭紫外线灯15.冰冻切片出现“冰晶artifact”的主要原因是：A.组织未充分固定B.冷冻温度过低（<-30℃）C.组织含水量过高D.切片刀角度不当16.免疫组化中，“内源性生物素”干扰最常见于：A.肝脏、肾脏组织B.乳腺、甲状腺组织C.皮肤、淋巴结组织D.骨组织、软骨组织17.液基细胞学标本保存液的主要成分是：A.甲醇-乙醇混合液B.10%中性福尔马林C.生理盐水D.EDTA抗凝剂18.组织包埋时，“面朝上”原则指的是：A.组织病变区朝向包埋模底部B.组织病变区朝向包埋模顶部C.组织切面向下接触包埋模D.组织长轴与包埋模长轴垂直19.原位杂交（ISH）实验中，“预杂交”步骤的主要作用是：A.封闭非特异性结合位点B.促进探针与靶序列结合C.去除样本中的蛋白质D.增强显色反应信号20.病理技术质量控制中，“室内质控”不包括：A.每日记录切片机温度B.每月检测固定液pH值C.每季度评估染色一致性D.每年参加室间质评二、多项选择题（每题3分，共30分，至少2个正确选项）1.影响组织固定效果的因素包括：A.固定液与组织体积比（≥5:1）B.组织厚度（≤0.5cm）C.固定时间（18-24小时）D.固定液温度（4℃或室温）2.免疫组化常用的抗原修复方法有：A.高压热修复B.酶消化修复C.微波热修复D.冷冻-解冻修复3.分子病理检测前，组织DNA提取质量不佳的可能原因是：A.组织固定时间过长（>48小时）B.使用EDTA脱钙液处理骨组织C.提取过程中蛋白酶K活性降低D.标本保存于-80℃超低温冰箱4.细胞学涂片“背景模糊”的常见原因有：A.涂片后未及时固定B.固定液浓度不足（如75%乙醇）C.染色时缓冲液pH偏离6.4-6.8D.细胞量过多导致重叠5.石蜡切片“卷片”的可能原因是：A.切片刀有缺口B.组织包埋时方向错误C.展片水温过高（>50℃）D.切片机推进速度过快6.荧光免疫组化实验中，荧光信号弱的可能原因是：A.一抗浓度过低B.标本暴露于强光下时间过长C.封片剂含抗荧光淬灭剂D.荧光显微镜激发光强度不足7.病理标本接收时，需登记的信息包括：A.患者姓名、年龄、住院号B.标本类型（如活检、手术切除）C.临床诊断及送检目的D.标本接收时间、固定液种类8.组织脱水时，“梯度脱水”的意义在于：A.避免组织剧烈收缩B.确保水分彻底脱除C.减少脂类物质流失D.提高透明剂渗透效率9.液基细胞学与传统涂片相比，优势包括：A.减少黏液、血液干扰B.提高细胞收集率C.便于自动化分析D.无需固定步骤10.病理技术实验室的生物安全措施包括：A.锐器使用后放入专用回收盒B.福尔马林操作在通风橱内进行C.废弃标本高压灭菌后处理D.实验人员戴手套、口罩操作三、案例分析题（共30分）案例1（10分）：某医院病理科接收1例胃窦活检标本，标本为2枚小米粒大小组织，患者信息标注清晰，但固定液为生理盐水（非福尔马林），且标本已在常温下放置6小时。问题：（1）该标本是否合格？说明理由；（2）若必须处理，应如何补救？案例2（10分）：技术员制作的石蜡切片经HE染色后，镜下观察发现部分区域细胞结构模糊、胞核着色浅淡，周围可见空泡样改变。问题：（1）可能的原因有哪些？（2）如何验证并解决？案例3（10分）：免疫组化检测HER2蛋白时，阳性对照（已知HER2阳性乳腺癌组织）结果阴性，待测标本结果也为阴性。问题：（1）分析可能的实验环节错误；（2）提出排查步骤。答案一、单项选择题1.D（冷冻切片标本常用丙酮或95%乙醇固定，但需注意固定时间，直接固定需控制在10-15分钟，过长会导致细胞皱缩）2.B（常规石蜡切片厚度3-5μm，过薄易断裂，过厚影响细胞结构观察）3.B（伊红染色过度可用75%乙醇快速分化，稀氨水用于苏木精返蓝）4.C（空白对照指不加任何抗体，仅用PBS替代，用于排除非特异性背景）5.B（液基细胞学去黏液常用胃蛋白酶或胰酶消化，破坏黏液蛋白）6.A（梯度脱水可避免组织因渗透压骤变而收缩，直接进入纯乙醇会导致过度收缩）7.B（FISH变性使DNA双链解开，便于探针单链结合靶序列）8.B（胃黏膜活检用10%福尔马林固定符合要求，不合格标本包括标识不全、固定液不足或类型错误、送检超时等）9.B（包埋机温度50-55℃，与石蜡熔点（56-58℃）匹配，避免组织烫伤）10.B（抗原修复不充分是假阴性主因，其他如一抗失效、孵育时间不足也可能）11.B（瑞氏染色缓冲液偏酸时，伊红着色增强（胞质偏红），亚甲蓝着色减弱（胞核偏淡））12.A（脱水不彻底时，组织内水分进入二甲苯使其浑浊，需重新脱水）13.A（熔解曲线通过检测PCR产物解链温度，验证是否为目标产物，排除引物二聚体）14.B（生物安全柜操作时需避免遮挡回风口，保持气流稳定；玻璃门应保持低位，实验结束后紫外线灯需照射30分钟）15.C（组织含水量高时，冷冻过程中水分结冰形成冰晶，破坏细胞结构）16.A（肝脏、肾脏含丰富内源性生物素，需用生物素阻断剂预处理）17.A（液基保存液多为甲醇-乙醇混合液，可固定细胞并溶解黏液）18.B（包埋时病变区朝上，确保切片时优先切到病变部位）19.A（预杂交用无关DNA封闭非特异性结合位点，减少探针非特异性吸附）20.D（室间质评属于外部质控，室内质控包括日常操作记录、试剂检测等）二、多项选择题1.ABCD（固定效果与体积比、组织厚度、时间、温度均相关）2.ABC（常用热修复（高压、微波）和酶消化修复，冷冻-解冻非标准方法）3.ABC（固定时间过长导致DNA交联降解；EDTA脱钙不影响DNA，但强酸脱钙会破坏；蛋白酶K活性降低导致消化不充分）4.ABCD（未及时固定导致细胞自溶；固定液浓度不足无法稳定蛋白；缓冲液pH异常影响染色；细胞重叠导致背景模糊）5.ACD（切片刀缺口导致卷片；展片水温过高使组织皱缩；推进速度过快导致切片不平整）6.ABD（一抗浓度低、荧光淬灭（强光暴露）、激发光不足均会导致信号弱；抗荧光淬灭剂可增强信号）7.ABCD（标本登记需涵盖患者信息、标本类型、临床资料及接收细节）8.ABD（梯度脱水通过逐步增加乙醇浓度，避免组织剧烈收缩，同时确保脱水彻底，利于透明剂渗透）9.ABC（液基需固定步骤，优势为减少干扰、提高收集率、支持自动化）10.ABCD（生物安全涵盖锐器处理、化学试剂防护、医疗废物处理及个人防护）三、案例分析题案例1答案：（1）不合格。理由：胃黏膜活检标本需用10%中性福尔马林固定（生理盐水无固定作用，无法保存细胞结构），且常温放置6小时已超过最佳固定时间（≤2小时），可能导致组织自溶。（2）补救措施：立即将标本转移至10%中性福尔马林（体积比≥5:1）中固定4-6小时（因组织小，可缩短时间），随后按常规流程脱水、透明、包埋；切片后重点观察是否有自溶现象（如核固缩、胞质空泡），必要时建议重取标本。案例2答案：（1）可能原因：①组织固定不充分（自溶导致细胞结构模糊）；②脱水不彻底（组织内残留水分，石蜡渗透不良，形成空泡）；③包埋时石蜡温度过高（烫伤组织，细胞结构破坏）；④切片刀不锋利（挤压组织导致结构模糊）。（2）验证与解决：①检查固定记录（时间、固定液体积），确认固定是否达标；②观察透明步骤（二甲苯是否浑浊，判断脱水效果），若浑浊需重新脱水；③检查包埋温度（应≤60℃），调整至50-55℃；④更换切片刀，测试新刀切片效果；若为固定问题，后续标本需延长固定时间或增加固定液量。案例3答案：（1）可能环节错误：①一抗失效（保存不当或过