CN119462623A 基质金属蛋白酶（mmp）抑制剂及其应用方法 （逸达生物科技美国公司）

201980047375.42019.05.14本申请描述了用作基质金属蛋白酶(MMP)，特别是巨噬细胞弹性蛋白酶(MMP_12)抑制剂的使用所述化合物抑制MMP_12并治疗MMP_12介导的疾病的方法，例如哮喘、慢性阻塞性肺疾病性肠病(IBD)、急性肾损伤(AKI)、慢性肾2和S(O)qx为氢或烷基；2)pC(O)OR6和_(CH2)pOC(O)R6；(CH3)222_CH2OC(O)CH(NH2)CH(CH3)2、_C(O)32CH22414.权利要求13所述的药物组合物在制备用于抑制巨噬细胞弹性蛋白酶MMP_12的药物15.权利要求13所述的药物组合物在制备治疗由巨噬细胞弹性蛋白酶MMP_12介导的疾56中大多数细胞外基质蛋白的降解非常重要。MMP在结缔组织不受控制的分解中也被认为是MMP_12参与慢性哮喘的发生(Warner等.美国病理学杂志(AmJPathol.)2004；165(6):维化(Matute_Bello等.美国呼吸细胞与分子生物学杂志(AmJRespirCellMolBiol.)IPF患者中MMP_12产生的IV型胶原片段的BALF水平升高，MMP_12还可能通过裂解细胞外基质(ECM)蛋白来促进特发性肺纤维化(IPF)发病机理(Sand等.PLoSOne，2013年；8：e84934)，而人类MMP_12可以在体外裂解许多人ECM蛋白(Owen等.白细胞生物学杂志(J[0007]MMP_12是由吸烟者的肺泡巨噬细胞(Shapiro等.生物化学杂志(Journalof7[0010]其被公开作为具有MMP抑制剂活性，尤其是针对肿瘤坏其侧链之间的螺环链接。美国专利申请公开号2004/0067996和国际专利申请公开号WO2004/108086记载了类似的下述通式的[0012]国际专利申请公开WO02/074752记载了MMP抑制剂的合成，国际专利申请公开WO[0013]一些公开的化合物显[0017]本申请通过提供对MMP，特别是巨噬细胞弹性蛋白酶(MMP_12)具有高活性和特异8和S(O)qx为氢或烷基；和S(O)qx为氢或烷基；2)pC(O)OR6和_(CH2)pOC(O)R6；92为烷基2为CH3[0099]本申请的其他总体方面涉及在有需要的受试者中抑制巨噬细胞弹性蛋白酶(MMP_12)的方法，和在有需要的受试者中治疗由巨噬细胞弹性蛋白酶(MMP_12)介导的疾病的方[0106]当结合附图阅读时，将更好地理解前述发明内容以及以下对本发明的详细描[0108]图1A_1K描述了根据本申请实施方式的MMP_12抑制剂在博莱霉素诱导的斯普拉格_杜勒(SD)大鼠单侧肺纤维化模型中用于特发性肺纤维化(IPF)的治疗功效研究的结果气管和肺小动脉损伤及炎性细胞浸润进行评分的苏木精和伊红(H&E)染色切片；图1B显示了根据后文表3.4所述标准对肺纤维化进行评分的马松(Mas100mg/kg/天)；图1H以图形方式显示了根据Ashcraft评分对实验SD大鼠的左肺纤维化评根据Ashcraft评分对实验动物SD大鼠的左肺纤维化评分的比率。双向ANOVA：与模型组相比***p<0.001；图1J显示了通过H&E染色在x200的放大倍数下的实验SD大鼠的胶原蛋白沉MMP_12表达、TGF_β1表达和弹性蛋白表达的阳性染色评分[0109]图2A_2H描述了实施例4中描述的MMP_12抑制剂对单侧输尿管闭塞(UUO)的SD大鼠相比$$$p<0.001；图2E显示了200倍的放大倍数下马松三色(MassonTrichrome)染色中IHC染色确定的左肾皮质区域的胶原蛋白I有第二元素。第二个选项是指第二元素适用而没有第一元素。第三个选择是指第一和第二元素一起适用。这些选项中的任何一个应理解为落入该含义内，并因此满足本文所用的术CC110烷CC16杂芳基的每个环可含有一个或两个氧或硫原子和/或1_4个氮原子，条件是每个环中杂原子双环或三环杂芳基)必须包括至少一个完全芳香性环但另一个稠合环可以是芳香性的或非苯并吡喃基、噌啉基(cinnolinyl)、喹喔啉基、吲唑基、吡咯并吡啶基、呋喃吡啶基1_4烷基、)2。键表示或以其他指示在一个或多个原子周围具有特定构型(例如R或S)的方式表示的任何构体包括对映异构体和非对映异构体。对映异构体是互为不可重叠的镜像的立体异构体。映异构体)以及包括其外消旋体的混合物包括在本发明的范围内。当指定特定的立体异构体时，这意味着该立体异构体基本上不含其他异构体，即与小于50优选小于20更优异构体也可以由合适的立体化学纯的起始原料合成或通过使用立体和S(O)qx为氢或烷基；和S(O)qx为氢或烷基；2)pC(O)OR6和_(CH2)pOC(O)R6；3为氢。CH23或OH。[0201]根据本申请的实施方式，乙内酰脲部分的手性碳原子可以是未取代的(即，R1为22和O。2。22。或区域异构体，这意味着乙内酰脲部分和X连接基可以在呋喃基环上的任何可取代的碳原CH3上可接受的盐或溶剂合物，其中，n为1且R2为C1_4烷氧基(例如，_OCH3、_OCH2CH2CH3、_CH2CH32CH(CH3)222OCH3或OH。x2和S(O)q2且Y为O。[0259]在一个优选的实施方式中，提供了式(III)的化合物或其互变异构体、立体异构3)2CH2CH32CH(CH3)22223或OH。CH2CH32CH(CH3)22223或OH。[0301]本申请的示例性化合物包括但不限于下表1中列出的化合物及其任何互变异构[0313]本申请的化合物可以通过如下大致所述的以及通过本文后面的示例性实施例更X为卤素；环D为任选取代的芳基或任选取代的杂4)2CO3和氰化钾(KCN)在乙醇水溶液中反应过夜。蒸发反应混合2)2CO3[0326]可以通过常规化学方法由含有酸性或碱性部分的母体化合物合成本申请化合物[0329]本申请的组合物还可包含药学上可接受的载体。药学上可接受的载体是无毒的，加剂。[0330]可以将本发明的组合物配制成适合于向受试者给药以促进给药并提高功效的任通过根据常规药物混合技术将本申请的化合物与一种或多种药学上可接受的载体混合来[0334]本申请还提供了使用本申请的化合物和本申请的药物组合物抑制基质金属蛋白质素1(stromelysin1))、MMP_7(基质溶素(matrilysin))、MMP_8(中性粒细胞胶原酶)、[0336]在一个优选的实施方式中，本申请的化合物能够抑制小噬细胞弹性蛋白酶(MMP_种其他MMP(例如MMP_1或MMP_7)大至治疗由MMP_12介导的疾病的方法包括向受试者施用治疗有效量的本申请的化合物或和其轻与MMP_12介导的疾病有关的一种或多种症状的、预防其发展或发作或减少其持续时间。者中由MMP_12介导的疾病。和S(O)qx为氢或烷基；2)pC(O)OR6和_(CH2)pOC(O)R6；_CH22)3)2或_CH2CH(CH3)2。2OH或_C(O)NH2。[0446]实施方式36是在有需要的受试者中治疗由巨噬细胞弹性蛋白酶(MMP_12)介导的[0451]实施方式41为实施方式1_33中任一项的化合物或实施方式34的药物组合物在制[0452]实施方式42是实施方式1_33中任一项的化合物或实施方式34的药物组合物在制备用于治疗由巨噬细胞弹性蛋白酶(MMP_12)介导[0492]向化合物FI_4(80mg，0.24mmol，1.0eq)于MeOH(10mL)中的混合物中加入KCN[0503]使用与合成中间体3_5相同的步骤合成中间体3_6和3_7，除了将起始原料相应地)。燥，过滤并浓缩。将残余物通过硅胶上的柱色谱法(PE/EA,10:1)纯化，得到化合物FI_6的DCM(15mL)溶液中缓[0518]向化合物FI_7(0.3g，0.888mmol，1.0eq)于MeOH(5mL)中的混合物中加入KCN[0531]在0℃下，向化合物FI_pH＝6，过滤并将滤液浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化，得到化合物FI_7a(180mg，于室温搅拌16h。反应混合物的TLC分析显示完全转化为所需产物。然后将混合物用H2O[0550]向化合物FI_17b(850m在减压下浓缩。残余物通过制备型TLC(prep_TLC)纯化，得到白色固体状化合物FC_17[0553]向化合物FC_13(500mg，1.21mmol，1.0eq)于CHCl3(30mL)溶液中加入TMS_I两次。将合并的有机层用MgSO4干燥，并在高度真空下蒸发。残余物通过快速色谱EA/Hex[0557]向中间体3_12a(0.18g，1.1mmol)于DCM(20mL)中的溶液中加入PBr3(0.15mL，[0560]向1,4_苯二甲醇(0.14g，1mmol)的DCM(5mL)溶液中滴加HBr(33％的乙酸溶液，[0564]向FI_20(0.52g，1.41mmol)于EtOH/H2O(10mL/5mL)中的溶液中加入(NH4)2CO322.mmol)的ACN(10mL)溶液在室温搅拌过夜。向反应混合物中加入水和EA，并用EA萃次。将合并的有机层用MgSO4干燥，并在高度真空下蒸发。残余物通过快速色谱用EA/Hex[0572]向化合物FI_026b1)直接液再搅拌16小时。将反应混合物用MgSO4和硅胶过滤。残余物通过快速色谱用EA/Hex(EA/将合并的有机层用MgSO4干燥，并在高度真空下蒸发。残余物通过快速色谱用EA/Hex(EA/[0582]向FI_027(0.34g，1.0mmol)的EtOH/H2O(5mL/2.5mL)溶液中添加加入(NH4)2CO3的ACN机层用MgSO4干燥，并在高度真空下蒸[0592]向FI_29c(5.1g，20.53mmol，1.0eq)的乙醇/H2O(100/17mL)溶液中加入NaOH水洗涤，经无水Na2SO4干燥并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法纯化，得到FI_29d[0595]向FI_29f(470mg，2.75mmol，1.0eq)的DMF(20mL)溶液中加入FI_3(607mg，加入3MHCl以调节pH＝1～2，并在室温涤，经无水Na2SO4干燥并在减压下浓缩。残余物通过硅胶色谱纯化，得到FI_30c(0.3g，[0602]向FI_30c的甲醇溶液中添加Pd/C。将混合物在氢气气氛(20psi)下，于室温搅拌加入3MHCl以调节PH=l-2,并在室温下搅拌1h，然后加入饱和NaHCO3的水溶液以调节=6，过滤并将滤液浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，得到化合物FI_32a(750mg，回流12h。然后将混合物减压浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱纯化，得到FI_33a(加入3MHCl以调节并在室温下搅拌1h，然后加入饱和NaHCO3的水溶液以调节[[0623]在0℃下，向3_溴呋喃_2_甲醛(5.0g，28.57mmol并加入2NHCl以调节pH＝7，并用EA(3×50mL)萃取。合并的有机相用盐水洗涤，用无水)。FI_加入3MHCl以调节PH=1-2,并在室温下搅拌1h，然后加入饱和NaHCO3的水溶液以调节[0632]化合物对通过重组人MMP_12催化结构域(Enzo，BML_SE138)裂解荧光MMP底物次通过移液添加到96孔黑色不透明平板的每个孔中，最终反应包含4nM重组人MMP_12催化域，4μM荧光MMP底物和各种浓度(0.15nM至10,000nM)的测试化合物在HEPES缓冲液(pH钟在340nm/440nm的激发/发射波长下测量荧光强度至少1小时。通过使用在30分钟的时间MMP_13和MMP_14)进行MMP选择性测定。化合物对其他重组人MMP的IC50采用如上文实施例1[0640]实施例3：MMP_12抑制剂在博来霉素诱导的SD大鼠单侧肺纤维化模型中对特发性[0641]这项研究的目的是评估FC_4对博来霉素(BLM)诱导的斯普拉格_杜勒(SD)大鼠单出对肺纤维化明显的治疗作用。将FC_4的剂量增加到30mg/kg/天和100mg/kg/天也显示出明显的治疗作用，但是未观察到明显的剂量依赖性作用。纤维化Ashcraft评分数据显示，护理和使用委员会(IACUC)审查和批准。所有实验程序均按照凯斯艾生物科技的机构指南[0646]模型建立：严格按照SOP机构对实验动物的护理和使用的准则进行这项研究。以每组选择五只动物(从假手术组选择三只动物)用IHCCat#GR134273_29)。根据KCI的IHC标准规程处理IHC染色。然后将染色的载玻片通过滨松